赖氨酰氧化酶基因在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:研究赖氨酰氧化酶(LOX)在乳腺癌组织、正常乳腺组织及乳腺良性病变组织中的表达,并与乳腺癌常规预后指标(患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移与否、临床分期)进行比较,探讨其与乳腺癌侵袭或转移的关系.方法:应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法检测56例乳腺癌组织、56例正常乳腺组织及20例乳腺良性病变组织中LOX mRNA的表达情况,并应用相关统计学方法进行分析.结果:LOX mRNA在乳腺癌组织、正常乳腺组织及乳腺良性病变组织中的表达率分别为57.14%、32.14%、25.00%,乳腺癌组织中LOX mRNA的表达率明显高于正常乳腺组织及乳腺良性病变组织(P=0.008,P=0.014).LOX mRNA在不同临床分期(P=0.001)及淋巴结转移(P=0.013)中的表达率存在显著差异,但在不同年龄及肿瘤大小患者的癌组织中LOX mRNA的表达率无差异(P=0.076).结论:LOX mRNA在乳腺癌中的表达率明显高于正常乳腺组织及乳腺良性病变组织.LOX mRNA与乳腺癌临床分期密切相关,临床分期越晚,其肿瘤组织中LOX mRNA的表达率越高.伴淋巴结转移乳腺癌LOX mRNA表达率高于无淋巴结转移者.LOX mRNA表达率与肿瘤大小、患者年龄无关.     

赖氨酰氧化酶在子宫内膜癌中的表达及意义

目的：探讨赖氨酰氧化酶（ LOX）在子宫内膜癌组织、子宫内膜良性增生组织中的表达规律及其与子宫内膜癌预后指标的相关性。方法应用免疫组化法检测53例子宫内膜癌、90例子宫内膜单纯性增生及复杂性增生组织中 LOX 蛋白的表达,比较 LOX 蛋白在良、恶性子宫内膜病变组织中表达的差异,分析 LOX 蛋白的表达与子宫内膜癌的临床分期、是否存在淋巴结转移及细胞分化程度等预后指标的相关性。结果LOX 蛋白在子宫内膜癌组织中的阳性表达率为52．8％,在子宫内膜复杂性增生组织中的表达率为32．5％,子宫内膜单纯性增生组织中的表达率为24．0％。子宫内膜癌、子宫内复杂性增生及子宫内膜单纯性增生组织中 LOX 蛋白表达率差异有统计学意义（P ＝0．008）。子宫内膜癌组织中 LOX 蛋白的表达与临床分期、细胞分化及淋巴结转移有相关性。Ⅰ～Ⅳ期子宫内膜癌阳性表达率分别为31．6％、50．0％、78．6％和75．0％,组间差异有统计学意义（P ＝0．006）。在高、中、低分化组的阳性表达率分别为32．0％、60．0％、84．6％,组间差异有统计学意义（P ＝0．007）;有淋巴结转移及无淋巴结转移组的阳性率为78．6％及43．7％,差异有统计学意义（P ＝0．025）。结论子宫内膜癌组织中LOX 表达明显高于子宫内膜复杂性增生及子宫内膜单纯性增生,LOX 参与子宫内膜癌的侵袭及转移的病理过程。     

赖氨酰氧化酶样基因3在人皮肤成纤维细胞株中的表达

目的研究体外培养的人皮肤成纤维细胞株中赖氨酰氧化酶样基因3（lysyloxidase-likegene3,LOXL3）的表达模式。方法提取不同生长阶段的人皮肤成纤维细胞株的不同组分,用NorthernBlot和WesternBlot分别从mRNA和蛋白水平分析LOXL3表达,并以免疫荧光方法观察LOXL3的分布部位。结果 LOXL3mR-NA和蛋白含量在细胞汇合前低于细胞汇合期,汇合后最高,且LOXL3分布在整个细胞浆和细胞核。结论 LOXL3的表达量在细胞生长的不同阶段有所不同,可能与其功能有关。     

赖氨酰氧化酶基因原核表达克隆的构建

目的 克隆编码人赖氨酰氧化酶(hLOX)的基因片段,并构建含有该基因的重组原核表达质粒,为制备基因工程化的重组hLOX奠定基础.方法 从人皮肤成纤维细胞中抽提RNA,通过RT-PCR扩增LOX编码序列(750bp),所得目的 基因插入原核表达载体质粒pET28a,转化大肠杆菌DH5a.重组质粒pET28a-hLOX经双酶切和核苷酸序列分析鉴定.结果 载体质粒pET28a中插入的基因片段与hLOX基因序列完全相同.结论 成功构建含有人LOX基因的重组表达质粒.     

赖氨酰氧化酶在乳腺癌中的表达及临床意义

目的研究赖氨酰氧化酶(LOX)在乳腺癌组织、正常乳腺组织及乳腺良性病变组织中的表达,并与乳腺癌常规预后指标比较,探讨其与乳腺癌侵袭/转移的关系。方法逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测56例乳腺癌组织、56例正常乳腺组织及20例乳腺良性病变组织中LOX mRNA与低氧诱导因子1(HIF-1α)mRNA的表达;应用免疫组织化学技术检测相应组织中LOX蛋白及HIF-1α的表达,并行统计学分析。结果 LOX mRNA在乳腺癌组织、正常乳腺组织及乳腺良性病变组织中的表达率分别为57.14%、32.14%、25.00%,乳腺癌组织中LOXmRNA的表达率明显高于正常乳腺组织及乳腺良性病变组织(P<0.01);LOX蛋白在乳腺癌组织、正常乳腺组织及乳腺良性病变组织中的表达率分别为48.21%、26.78%、20.00%,乳腺癌组织中LOX蛋白的表达率明显高于正常乳腺组织及乳腺良性病变组织(P<0.05);LOX mRNA及LOX蛋白在不同临床分期及淋巴结转移中的表达率差异有统计学意义(P<0.05),其中Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌LOX mRNA及LOX蛋白的表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P均<0.01),但在不同年龄及肿瘤大小患者的癌组织中LOX mRNA及LOX蛋白的表达率差异无统计学意义(P>0.05);LOX蛋白的表达与HIF-1α呈正相关(r=0.368)。结论 LOX蛋白及LOX mRNA在乳腺癌组织中的表达率高于正常乳腺组织及乳腺良性病变组织,LOX与乳腺癌的发生可能有关;LOX高表达的乳腺癌其恶性程度更高,更易发生远处转移;HIF-1α与LOX在乳腺癌的侵袭/转移过程中具有协同作用。     

赖氨酰氧化酶样基因-3在体外培养的人主动脉平滑肌细胞的表达

目的 研究赖氨酰氧化酶样基因-3（Lysyl Oxidase-Like Gene 3, LOXL3）在体外培养的人主动脉平滑肌细胞（Human Aortic Smooth Muscle Cell, HAoSMC） 的表达模式.方法 提取不同生长阶段的人主动脉平滑肌细胞的不同组分,用Northern Blot、Western Blot从mRNA和蛋白水平分析LOXL3表达,并与赖氨酰氧化酶样基因-2（Lysyl Oxidase-Like Gene 2, LOXL2）比较.结果 LOXL3 mRNA和蛋白含量在细胞汇合前高于细胞汇合期和汇合后,且LOXL3蛋白在细胞外基质和细胞的不可溶组分中含量较高,而LOXL2则在细胞培养液中表达较高.结论 LOXL3的表达量在细胞生长的不同阶段有所不同,人主动脉平滑肌细胞的LOXL3和LOXL2分布不同,可能与其功能有关.     

赖氨酰氧化酶在纤维化疾病中的研究进展

<正>机体器官由实质和间质两部分构成。纤维化是指过量的结缔组织形成,实质细胞部分减少,可发生于全身多种组织器官当中,在肺、肝脏和肾脏最为常见,可致脏器结构的破坏及功能减退,严重时甚至可威胁生命。细胞外基质(extracellular matrix, ECM)主要由胶原蛋白、非胶原蛋白、弹性蛋白、蛋白聚糖与氨基聚糖几种成分组成,内含大量的信号分子,参与控制细胞的生长与代谢等活动。胶原蛋白交联是纤维化基质稳定的必要过程,可促进纤维化发展[1]。     

结直肠癌组织中赖氨酰氧化酶的表达与肿瘤进展及预后的关系

目的分析结直肠癌组织中赖氨酰氧化酶（LOX）的表达与患者临床病理特征及预后的关系,并探讨LOX在结直肠癌进展中的作用。方法收集2009年1月至2010年5月在我院确诊并行肿瘤切除的82例结直肠癌患者的癌组织、癌旁组织石蜡标本及临床资料、随访信息。免疫组化染色检测结直肠癌及癌旁组织中LOX、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-7蛋白的表达情况。分析LOX与患者临床病理参数及预后的关系,进一步探讨LOX与HIF-1α、MMP-2、MMP-7之间的关系。结果结直肠癌组织中LOX表达率较癌旁组织高（P<0.05）。LOX表达阳性的患者肿瘤临床分期更晚、浸润深度更深、淋巴结转移更多（P均<0.05）;预后分析显示LOX表达阳性患者的预后较差,COX模型显示LOX表达和TNM分期Ⅲ~Ⅳ期是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素（P<0.05）。结直肠癌组织HIF-1α、MMP-2、MMP-7阳性表达率高于癌旁组织（均P>0.05）。相关分析显示LOX表达与HIF-1α、MMP-2蛋白之间存在正相关（P<0.05）。结论LOX蛋白在结直肠癌组织中表达增强,与结直肠癌的进展有关,且可作为预后预测因子。LOX可能与HIF-1α、MMP-2共同作用促进结直肠癌进展。     

赖氨酰氧化酶与压力性尿失禁的研究

女性压力性尿失禁(SUI)的发病机制尚不明确,当今研究表明,胶原蛋白作为盆底支持组织细胞外基质的主要成分,在维持盆底支持组织的弹性和韧性中起重要作用,其含量减少、结构不稳定会引起组织弹性降低,易于断裂,对尿道的支撑作用减弱,出现漏尿。赖氨酰氧化酶(LOX)是铜依赖性的单胺氧化酶,是胶原纤维发育成熟和保持内环境稳态的关键酶,能够影响局部组织中胶原蛋白的生成、结构及其功能,故推测其在女性SUI的发生、发展中可能起一定作用。     

小鼠赖氨酰氧化酶样2基因的组织特异性表达

[目的 ]研究小鼠赖氨酰氧化酶样 2基因 (mLOXL2 )的组织特异性表达 .[方法 ]应用Blast检查程序、聚合酶链反应、Northern印迹法和免疫组织化学染色法 .[结果 ]mLOXL 2cDNA推断的氨基酸序列呈现赖氨酰氧化酶 (LOX)家族的特征性区域 ,即铜结合部位和催化区域 .进化距离指出小鼠赖氨酰氧化酶 (mLOX)家族有 2个独特的组 ,第 1组只包含LOX基因 ,第 2系统发育组包含所有其它赖氨酰氧化酶样基因 (LOXL) .mLOXL 2在肺及甲状腺中有高表达 ,表皮、毛发滤泡周围和骨骼肌内有LOXL 2的强染色 ,软骨细胞内有LOXL 2的胞质染色 .[结论 ]鼠类的氨基酸序列显示和人类mLOXL2cDNA一致的高水平的同族关系 ,在几乎所有组织中mLOXL 2基因被表达为 4kbmRNA ,并在肺和胸腺中有高度稳定状态mRNA水平 .人类和鼠类组织中 ,LOXL 2将在控制分子和细胞相互作用上起重要的作用 .     

赖氨酰氧化酶基因在动脉粥样硬化血管壁中的表达

[目的]观察赖氨酰氧化酶基因(LOX)在动脉粥样硬化血管壁中的表达情况.[方法]选取动脉粥样硬化(ATS)尸检标本,采用LOX抗体免疫组织化学染色方法观察LOX在ATS血管壁平滑肌细胞、胶原和弹性纤维等有形成分中的表达、分布及生物学行为与ATS的关系.[结果]LOX在动脉粥样硬化组织内呈阳性表达,其阳性例数为24例(68.6%),阴性为11例(31.4%).[结论]LOX在保持细胞外基质(ECM)的完整性中起重要作用,在ATS病变血管壁中有一定程度的表达,LOX活性的异常可导致ECM重建,从而可能促进ATS的形成.     

赖氨酰氧化酶样蛋白1在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的动态表达

目的 观察赖氨酰氧化酶(LOX)家族中的赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)及相关胶原蛋白在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的动态表达,探讨其在日本血吸虫肝纤维化形成中的作用。方法 采用日本血吸虫感染的小鼠肝纤维化模型,于感染后第6、9、12周剖杀小鼠,收集其血清和肝脏标本;以HE和天狼星红两种染色方法分别观察并评价小鼠肝脏纤维化的进展程度;同时检测小鼠血清转氨酶水平。以免疫印迹(Western blot)和荧光定量PCR(qPCR)方法分别检测肝组织LOXL1、Ⅰ型胶原蛋白(Col1)及α-肌动蛋白(α-SMA)的表达并分析其含量的变化;并对血清中的可溶性和不可溶性胶原进行测定,以判断胶原交联情况。结果 HE和天狼星红染色结果显示,随感染时间延长,小鼠肝纤维化也随之进展,在感染第9周肝纤维化程度最为严重,随后进入慢性肝纤维化期,纤维化程度减轻。Western blot和qPCR结果显示,LOXL1和其他纤维化指标表达情况类似,均在感染第9周时表达量明显上调;可溶性胶原含量在感染第9周时达峰值后下降,而不可溶性胶原含量则持续上升。结论 LOXL1与血吸虫肝脏纤维化过程中纤维交联存在相关关系,可能...     

博来霉素致大鼠肺纤维化模型中赖氨酰氧化酶蛋白表达与活性的动态变化

[摘要] 目的 研究博来霉素（BLM）致大鼠肺纤维化模型中赖氨酰氧化酶（LOX）蛋白表达的变化,以及该变化与其活性的关系和对胶原沉积的影响。方法 将200～250 g雄性SD大鼠随机分组,通过气管注入BLM（5 mg/kg）建立肺纤维化模型,分别于第9、14、28、35 天处死动物取材。左肺切片作HE和MASSON染色,右肺匀浆用于检测羟脯氨酸（HYP）含量,LOX活性,Western Blot测定LOX的蛋白水平。结果 HE和MASSON染色结果显示,BLM处理后,大鼠肺组织发生炎症细胞浸润,成纤维细胞增生,胶原纤维增多; BLM处理后9 ～35 d,HYP含量与对照组比明显上调（P<0.01）,并呈时间依赖性增加;LOX的46 kD、50 kD分子在第9、14 天表达显著增强,尤其是50 kD分子,在第14 天达到峰值,28 d后回落到基线水平;LOX活性的变化与50 kD分子相仿,第14 天达到对照组的4.7倍（P<0.01）,28 d后回落到第9 天水平。结论 BLM通过增加LOX蛋白表达而上调其活性;并时间依赖性增加胶原蛋白沉积;两者趋势的一致,揭示LOX积极参与了BLM导致的大鼠肺纤维化。     

结直肠癌患者赖氨酰氧化酶检测的临床意义

目的 探讨赖氨酰氧化酶(LOX)在结直肠癌(CRC)患者组织及外周血中的表达情况,并分析其关系和临床意义.方法 选取2014年1～12月于河北省人民医院行CRC切除术的96例患者作为CRC组,其中行根治性手术者74例(根治组),非根治性手术者22例(非根治组);同时选取体检健康者60例作为对照组.取CRC患者肿瘤及癌旁正常黏膜组织,采用免疫组织化学染色检测LOX表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组外周血LOX、癌胚抗原(CEA)、糖链抗原19-9 (CA19-9)表达水平.结果 CRC组织中LOX阳性率(75.00％)高于癌旁正常黏膜(26.04％),且非根治组肿瘤组织LOX阳性率(95.45％)高于根治组(68.92％),差异均有统计学意义(P＜0.05).CRC患者外周血LOX、CEA及CA19-9水平均高于对照组,非根治组患者外周血LOX水平高于根治组,差异均有统计学意义(P＜0.05).CRC患者肿瘤组织LOX表达水平与外周血LOX水平呈正相关(r=0.75,P＜0.05).CRC患者外周血LOX与CEA水平呈正相关(r=0.42,P＜0.05);CRC患者外周血LOX与CA19-9水平无明显相关性(r=0.12,P＞0.05).结论 CRC患者外周血及肿瘤组织中LOX表达水平增高,且与肿瘤转移有关,检测外周血LOX水平对预测CRC转移有意义.     

类赖氨酰氧化酶2与肿瘤关系研究进展

类赖氨酰氧化酶2(lysyl oxidase-like 2,LOXL2)于1997年被发现,是赖氨酰氧化酶(LOX)家族成员之一。近年来,国内外有文献报道在多种恶性肿瘤细胞株中LOXL2表达升高,基因水平上调,被认为在肿瘤的发生及发展过程中扮演了重要的角色。是否可     

DMBT1基因在胃癌组织的表达及其临床意义

目的探讨DMBT1基因表达与胃癌的关系.方法应用RT-PCR方法检测胃癌及癌旁组织DMBT1基因的表达.结果胃癌组织及癌旁组织DMBT1基因的表达率分别为22.9%(11/48)和89.6%(43/48);伴周围淋巴结转移的癌组织的DMBT1表达率9.7%(3/31)均低于不伴周围淋巴结转移的癌组织的表达率76.5%(13/17)(P<0.01),该基因的表达与肿瘤组织学分型、浸润方式及肿瘤大小等无关(P均>0.05).结论 DMBT1基因表达率降低与胃癌转移有关,提示该基因在抑制肿瘤发生及肿瘤转移中起一定作用.     

赖氨酰氧化酶样蛋白4在肾间质纤维化中的表达及意义

目的 赖氨酰氧化酶样蛋白4（lysyl oxidase-like protein 4, LOXL4）是赖氨酰氧化酶（lysyloxidase, LOX）家族的最新成员,本研究旨在观察LOXL4在肾脏纤维化形成中的表达及意义。方法 收集慢性肾脏病患者的肾活检标本,单侧输尿管结扎（unilateral ureteral ligation, UUO）大鼠;TGF-β1刺激大鼠肾成纤维细胞（NRK-49F）。通过q-PCR,Western印迹法和/或免疫组化等方法检测LOXL4的表达及作用。结果 患者肾脏纤维化组织中LOXL4沉积显著高于正常肾组织(P<0.01);与Sham组相比,UUO组大鼠肾脏LOXL4、Col1(collgen 1)表达水平明显升高（P<0.01）;TGF-β1显著促进LOXL4、Col1的表达（P<0.01）;转染LOXL4过表达质粒后,NRK-49F胶原表达水平明显增多（P<0.01）;下调LOXL4后,胶原表达水平明显下降（P<0.01）。结论 在肾间质纤维化中LOXL4表达明显增加,其通过调控胶原纤维的表达而参与肾脏纤维化。     

赖氨酰氧化酶在盆底功能障碍性疾病患者阴道前壁组织中的表达

目的通过对阴道前壁组织中赖氨酰氧化酶（LOX）表达水平的检测,探讨其与压力性尿失禁（SUI）、盆底器官脱垂（POP）发生的关系。方法应用Western Blotting方法检测绝经前后SUI组、POP组、SUI＋POP组、对照组共计120例患者阴道前壁组织中LOX蛋白含量。结果 SUI组、POP组、SUI＋POP组阴道前壁组织中LOX蛋白含量比对照组均明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。不同程度SUI组、POP组、患者阴道前壁组织中LOX蛋白表达均有统计学意义（P〈0.05）。结论 LOX蛋白含量减少可能是SUI、POP发生的一个原因,提高LOX蛋白含量可能预防或延缓PFD的发生。     

沉默赖氨酰氧化酶改善食管癌术后吻合口狭窄

目的:研究赖氨酰氧化酶(LOX)对食管成纤维细胞参与瘢痕形成的影响。方法:选取食管癌术后患者吻合口狭窄处的活检组织,利用原代细胞培养技术制备原代食管成纤维细胞,并用细胞免疫化学鉴定。针对人LOX基因序列设计并合成siRNA,转染原代食管成纤维细胞;采用实时荧光定量PCR法和Western Blot法验证siRNA-LOX对LOX沉默效果,及其对基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和纤维粘连蛋白(FN)的影响;细胞划痕实验评价沉默LOX表达对食管成纤维细胞迁移能力的影响。结果:原代食管成纤维细胞培养成功,且细胞抗波形蛋白免疫荧光阳性。siRNA-LOX转染成纤维细胞后48 h后,LOX mRNA和LOX蛋白表达水平显著下调(P<0.05),且在mRNA和蛋白水平明显抑制了MMP2、MMP9和FN的表达(P<0.05),并抑制了食管成纤维细胞的迁移能力(P<0.05)。结论:沉默LOX表达有潜力抑制食管成纤维细胞所致的瘢痕形成。     

赖氨酰氧化酶与乳腺癌侵袭转移相关因子的研究

目的探讨赖氨酰氧化酶(LOX)与乳腺癌侵袭转移相关因子基质金属蛋白酶(MMPs)及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的相关性以及LOX在乳腺癌侵袭转移中的可能机制。方法构建LOX基因的特异性慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV),稳定转染至乳腺癌细胞MDA-MB-231,实验设空白组、干扰组和阴性对照组,实时定量荧光PCR检测3组细胞中LOX、MMP-2、MMP-9和HIF-1α的表达,Western blot检测各组LOX蛋白的表达;构建乳腺癌细胞MDA-MB-231,MCF-7和LOX基因干扰的MDA-MB-231裸鼠移植瘤模型,6周后测定移植肿瘤的生长及转移情况,SP免疫组织化学技术检测移植瘤中LOX、MMP-2、MMP-9及HIF-1α蛋白的表达情况。结果转染LOX-RNAi-LV后乳腺癌细胞MDA-MB-231中的LOX mRNA和蛋白被明显抑制,抑制率为89.20%和82.97%,差异有统计学意义(P<0.05);干扰组的MMP-2、MMP-9及HIF-1α表达与阴性对照组及空白组比较差异有统计学意义(P<0.05);6周后裸鼠的MDA-MB-231组LOX、MMP-2、MMP-9及HIF-1α蛋白表达水平明显高于LOX基因干扰组及MCF-7组,相关分析显示,LOX蛋白与MMP-2(r=0.696,P=0.000)、MMP-9(r=0.735,P=0.000)、HIF-1α(r=0.737,P=0.000)蛋白呈显著正相关。结论 LOX-RNAi-LV可有效下调乳腺癌细胞MDA-MB-231中LOX mRNA和蛋白表达水平;LOX促进乳腺癌侵袭转移的机制可能与MMP-2、MMP-9及HIF-1α的异常表达相关。