渥曼青霉素通过调节AKT/NF-κB通路抑制人黑色素瘤细胞的迁移和侵袭

目的 探讨渥曼青霉素对人黑色素瘤C8161细胞迁移和侵袭的影响及对PI3K/AKT/NF-κB通路的调节作用。方法 将体外培养C8161细胞分别用不同浓度(2.5、5.0、10.0、15.0、20.0μmol/L)的渥曼青霉素或阳性药物(200μmol/L的5-氟尿嘧啶)处理,对照组细胞不做处理。然后使用倒置显微镜观察C8161细胞形态,活细胞计数(CCK-8)法测定细胞活力,EdU法测定细胞增殖率,划痕法测定细胞迁移情况,Transwell小室检测细胞侵袭情况,RT-qPCR测定EMT相关因子[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)]mRNA表达,蛋白免疫印迹法(WB)测定PI3K/AKT/NF-κB通路相关蛋白(AKT、p-AKT、NF-κB p65和p-NF-κB p65)和EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)表达情况。结果 与对照组比较,不同浓度渥曼青霉素和阳性药物处理抑制细胞的生长、增殖率、迁移率、侵袭细胞数、N-cadherin、Vimentin、p-AKT/AKT和...     

Activation of NF-κB and its regulation on IL-6 expression during LPS-induced liver injury

Objective： To explore the kinetics of the activation of nuclear factor-kappa B （NF-κB） and its regulation of interleukin-6 （IL-6） expression during LPS induced liver injury. Methods： Kunming mice were randomly divided into 4 groups in order to observe the does effect relationship at 3h： normal saline solution （control） group, low （1 mg/kg）, middle （5 mg/kg）, and high （10 mg/kg） LPS-induced groups; 6 groups in order to observe the time-effect relationship of 5 mg/kg LPS injection： normal saline solution （control） group, 0.5, 1, 3, 5 and 8 h groups ; pyrrolidine dithiocarbamate （PDTC） intervened groups （3 h）： normal saline solution （control） group, 5 mg/kg LPS, 200 mg/kg PDTC, and 200 mg/kg PDTC＋5 mg/kg LPS groups. NF-κB activities of Kupffer cells were determined with electrophoretic mobility shift assay （EMSA） and expression levels of IL-6 were measured with enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. Results： Does-effect of NF-κB activities in Kupffer cells after LPS injection 3 h： NF-κB activation could be detected in 1 mg/kg LPS group, reached the highest level in 5 mg/kg LPS group, and persisted in 10 mg/kg LPS group; time-course after 5 mg/kg LPS injection： the DNA-binding activity was observable at 0.5 h after LPS injection, increased significantly at 3 h, and persisted for at least 8 h; in addition, antioxidant PDTC could inhibit the activation of NF-κB significantly. The kinetics of IL-6 level in liver tissues during LPS-induced liver injury were that IL-6 level after 3 h of injection increased first and then reduced; the same trend was observed in the time-course on IL-6 level after LPS injection; PDTC could significantly inhibit the release of IL-6. Correlation analyses revealed that IL-6 level was significantly and positively correlated with the activation of NF-κB. Conclusion ： NF-κB in Kupffer cells can be activitied during LPS-induced liver injury to some extent, and NF-κB may have some regulation on the expression of IL-6.     

NF-κB/IκB信号通路与皮肤病

核因子-κB (nuclear factor kappa binding,NF-)是广泛存在于细胞中的具有多向调节作用的蛋白质分子,可调节100多种靶基因的表达,其中的大多数均参与了宿主的免疫和炎症反应.NF-κB抑制蛋白 (inhibitor of NF-κB,IκB) 是NF-κB的抑制因子.本文主要就NF-κB/IκB信号通路的概况及其在某些皮肤病发病机制中的作用进行综述.     

NF-κB及IL-6与子痫前期的相关性分析

目的 观察子痫前期患者胎盘组织中NF-κB的表达与血清IL-6、NF-κB含量的变化,探讨两者在子痫前期发病中的作用及相关性。方法 收集2022年2月～2022年10月于寿光市人民医院规律产检及住院分娩的孕妇60例,分为实验组40例,其中子痫前期组20例(A组)和重度子痫前期组20例(B组),对照组(C组)即正常健康且无基础病孕妇20例。对每组孕妇血清中IL-6、NF-κB的表达水平进行酶联免疫吸附法(ELISA)检测,对分娩后胎盘NF-κB的表达水平进行免疫组化检测。分析术前白介素-6表达、术后核因子活化有无关联性及两者与子痫前期疾病的关系。结果 (1)3组血清IL-6表达与胎盘中NF-κB活化强度呈显著正相关(r=0.838)。(2)3组孕妇胎盘中NF-κB活化表达,B组明显高于A组、C组。(3)3组孕妇外周血NF-κB表达量各为：A组(2.61±0.25)μg/L、B组(3.19±0.25)μg/L及C组(2.17±0.28)μg/L,A组、B组均高于C组(P<0.05)。(4)3组孕妇外周血IL-6表达量各为：A组(25.96±3.31)μg/L、B组(35.11±3.1...     

姜黄素通过影响NF-κB信号通路促进肺癌细胞的放射敏感性

目的 探讨姜黄素联合放射治疗对肺癌NCl-H460细胞的活性及肺癌小鼠放射敏感性的影响.方法 把肺癌NCI-H460细胞分为4组:空白对照组、姜黄素组、γ射线组及γ射线照射与姜黄素的联合组;然后对各组分别应用噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Annexin-V/PI染色法检测细胞周期分布及凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达,RT-PCR检测核因子κB(NF-κB)基因表达情况.另外,建立小鼠肺癌模型同样分为对应的4组,姜黄素按照1 mg/kg经尾静脉注射于小鼠,肿瘤局部进行剂量为5 Gy射线照射,处理28 d后,比较不同处理组小鼠瘤体体积.结果 与空白对照组、姜黄素组和γ射线组比较,联合组NCI-H460增殖率明显降低(P＜0.05),凋亡率明显增加(P＜0.05),抑凋亡蛋白Bcl-2表达明显降低(P＜0.05),促凋亡蛋白Bax表达明显增高(P＜0.05),NF-κB mRNA表达明显降低(P＜0.05),并且肿瘤的体积有明显减少(P＜0.05).结论姜黄素可通过抑制γ射线处理条件下NF-κB的表达并促进细胞的G2/M期阻滞来增强肺癌NCI-H460细胞对γ射线的敏感性.     

miR-181a通过NF-κB通路调控胃癌细胞系SGC-7901的凋亡及迁移

目的：检测miR-181a和NF-κB信号通路相关蛋白在胃癌组织及胃癌细胞系中的差异性表达,探讨miR-181a通过NF-κB信号通路影响胃癌细胞凋亡、迁移的机制,以期为胃癌的临床治疗提供新依据。方法：检测90例胃癌患者样本中miR-181a及NF-κB信号通路相关蛋白的表达水平,根据临床病例标本数据分析miR-181a及NF-κB信号通路与胃癌的相关性。采用细胞转染的方法调节细胞系SGC-7901中miR-181a表达,之后利用RT-qPCR检测其对NF-κB信号通路的影响,TUNEL法检测细胞凋亡及划痕实验检测细胞迁移的影响。结果：TUNEL法结果显示与miR-181a-up组比较,miR-181a-down组凋亡率更高。Western印迹结果显示与miR-181a-up组比较,miR-181a-down组Caspase3和Caspase9的表达量更高。结论：miR-181a抑制SGC7901癌细胞凋亡并促进癌细胞迁移,激活NF-κB信号通路。     

甲基苯丙胺对大鼠海马5-HT、IL-6及NF-κB表达的影响

目的 研究甲基苯丙胺 (methamphetamine, METH) 对大鼠海马5-羟色胺 (5-Hydroxytryptophan、5-HT) 、白介素-6 (interleukin-6, IL-6) 及核因子-κB (nuclear factor kappa B, NF-κB) 的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为正常对照组、METH 1 d组、METH 3 d组、METH 5 d组、METH 7 d组、每组6只.分别在每天9:00和21:00腹腔注射METH[15 mg/ (kg·次) ];每次腹腔注射METH后, 结合刻板行为观察, 对各组进行评分;建立1 d、3 d、5 d、7 d组METH急性中毒大鼠模型.于末次给药24 h后分离海马组织, 应用酶联免疫吸附试验 (enzyme linked immunoorbent assay, ELISA) 检测实验大鼠海马5-HT、IL-6的含量;Western blot检测大鼠海马NF-κBp65的含量.结果 与正常对照组比较, METH 1 d、3 d、5 d、7 d组大鼠海马5-HT含量均逐渐减少, 其中5 d组 (P<0.05) 和7 d组 (P<0.01) 差异具有统计学意义.与正常组对照组比较, METH 1 d、3 d、5d、7 d组大鼠海马IL-6的表达含量逐渐升高, 且5 d组 (P<0.01) 、7 d组 (P<0.01) 差异有统计学意义.NF-κB表达含量亦逐渐升高, 与正常组比较, 7 d组差异具有统计学意义 (P<0.01) .结论 METH可使大鼠海马5-HT含量下降、IL-6和NF-κB蛋白表达明显增加.     

NF-κB及IL-1ra在胃癌中的表达及其意义

【目的】 探讨NF-κB及IL-1ra在胃癌中的表达及其意义&#65377; 【方法】 通过组织芯片,采用免疫组织化学方法(LSAB法)检测核因子-κB(NF-κB)和抗炎因子白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)在359例胃癌组织中的表达情况&#65377;【结果】 NF-κB在伴发淋巴结转移&#65380;处于TNM Ⅲ + Ⅳ期&#65380;组织学分化较低的胃癌患者中的表达水平分别为80.2%&#65380;80.0%&#65380;79.2%;IL-1ra在原发灶癌直径 ≤ 3 cm&#65380;早期癌&#65380;无淋巴结转移和处于TNMⅠ + Ⅱ期的胃癌患者中表达水平分别为61.7%&#65380;75.0%&#65380;66.4%&#65380;61.9%;NF-κB表达阴性的胃癌患者5年生存率高于阳性患者(P = 0.036);伴IL-1ra阳性表达的NF-κB阴性表达患者生存率高于其它组别患者(P = 0.021)&#65377; 【结论】 NF-κB的表达水平可以作为胃癌预后不良的指标;IL-1ra可能是延缓胃癌恶性发展的保护因素,但尚需进一步的研究证实&#65377;     

NF-κB信号通路与胰岛素抵抗

NF-κB的信号通路与胰岛素抵抗发生发展的机制NF-κB的信号通路密切相关。NF-κB及其相关基因的异常表达在机体的不同部位会通过不同途径间接或直接的影响胰岛素信号的传导从而引发胰岛素抵抗的产生。本文通过阐述NF-κB信号通路分别在肝脏、骨骼肌及脂肪中对胰岛素抵抗的影响,进一步说明NF-κB信号通路与胰岛素抵抗之间的关系。     

microRNA-1290通过 NDRG1/NF-κB/IL-6信号通路促进结肠癌细胞迁移和侵袭

目的: 探讨微小RNA-1290（microRNA-1290,miR-1290）通过N myc下游调节基因 1（N-Myc downstream-regulated gene 1,NDRG1）调控NF κB/IL 6活化分子机制及其对结肠癌细胞侵袭和迁移的影响。方法: 选择48例结肠癌患者肿瘤及癌旁组织,用免疫组织化学染色检测IL 6表达;qRT-PCR法检测20例肿瘤组织,结肠癌细胞与正常结肠上皮HCoEpiC细胞中IL-6 mRNA及miR-1290表达;结合miR-1290类似物及抑制剂处理,蛋白质印迹和ELISA法分别检测结肠癌细胞中p-NF-κB、NF-κB、NDRG1、上皮钙黏素、波形蛋白表达以及IL-6外泌量;小干扰RNA及中和性抗体靶向下调IL-6表达,miR-1290类似物处理,划痕实验以及Transwell实验检测结肠癌细胞迁移、侵袭能力。结果： 结肠癌中IL-6免疫组织化学染色评分明显高于癌旁组织（P<0.01）;结肠癌瘤体内miR-1290与IL-6 mRNA表达呈正相关（r=0.845 4,P<0.01）;与HCoEpiC细胞相比,结肠癌细胞中miR-1290表达明显增高（P均<0.01）;上调miR-1290表达可抑制NDRG1表达从而促进NF-κB信号通路及上皮间充质转化活化（P<0.01）,而下调miR-1290表达可促进NDRG1、上皮钙黏素表达并抑制p-NF-κB和波形蛋白形成（P<0.01）;划痕实验显示上调miR-1290表达可增强结肠癌细胞迁移能力,而敲低IL-6后细胞愈合率则明显抑制（P<0.01）;miR-1290类似物处理促进结肠癌细胞侵袭,而抗体中和IL-6可显著降低侵袭细胞数（P<0.01）。结论： 结肠癌细胞中miR-1290可通过抑制NDRG1形成促进NF-κB/IL-6调控轴诱导的细胞迁移和侵袭发生。     

柴芩承气汤对急性胰腺炎患者血浆hs-CRP、NF-κB、IL-6水平的影响

目的:分析柴芩承气汤对急性胰腺炎患者血浆hs-CRP、NF-κB和IL-6水平变化的影响。方法:研究组行柴岑承气汤治疗,对照组为健康者,对两组hs-CRP、NF-κB、IL-6水平进行比较,并分析柴芩承气汤的治疗效果。结果:研究组患者的治疗有效率达98.39%,仅1例临床治疗无效;研究组患者治疗前的hs-CRP、NF-κB、IL-6水平均显著高于对照组健康人(P<0.01);经过治疗后,研究组患者三种指标的水平显著降低(P<0.01),且与对照组接近(P>0.05)。结论:柴芩承气汤治疗急性胰腺炎具有显著疗效,且对hs-CRP、NF-κB、IL-6表达有显著的影响,终止炎症介质的生成,促进患者康复。     

TRAF6截短体的构建及其对NF-κB信号通路的影响

目的 构建肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)截短体,鉴定TRAF6截短体及对核因子-κB (NF-κB)信号通路的影响区域.方法 采用PCR技术扩增TRAF6 4个截短体(N1、N2、N3、C1)编码基因,分别将其构建在pFlag-CMV2重组载体,用荧光素酶报告基因方法对TRAF6 4个截短体功能活性进行验证....     

IL-6对食管癌细胞侵袭迁移及上皮间质转化的影响

目的 研究白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对食管癌Eca-109细胞增殖、侵袭迁移及上皮间质转化的影响,探讨其作用机制.方法 用不同浓度(0、25、50和100 ng/mL)的IL-6处理Eca-109细胞,采用MTT法检测细胞增殖,细胞划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭能力,荧光定量PCR检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Twist1mRNA的表达,Western blot检测Stat3、p-Stat3、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Twist1蛋白表达.结果 与对照组(0 ng/mL)比较,IL-6处理组(25、50、100 ng/mL)在IL-6作用后第1～5天Eca-109细胞增殖增加,呈量效-时效关系(P＜0.05,P＜0.01).IL-6各浓度(0、25、50 ng/mL)组24 h细胞迁移距离分别为(18.20 ±0.89)、(23.77 ±0.40)和(25.27±0.93) mm,与对照组(0 ng/mL)比较,IL-6处理组(25、50 ng/mL) Eca-109细胞体外迁移距离明显增加(P ＜0.05,P＜0.05).IL-6各浓度(0、25、50 ng/mL)组穿过Matrigel胶的细胞分别为(70.33±2.36)、(103.00±3.51)、(118.00±4.00)个/视野,与对照组(0 ng/mL)比较,IL-6处理组(25、50 ng/mL) Eca-109细胞体外穿过Matrigel胶的细胞数量明显增加(P ＜0.05,P＜0.05).荧光定量PCR结果显示,与对照组(0 ng/mL)相比,IL-6处理(25、50 ng/mL)组N-cadherin、Vimentin和Twist1 mRNA达增加(P＜0.05,P＜0.05),E-cadherin mRNA表达降低(P＜0.05).Western blot结果显示,与对照组(0 ng/mL)相比,IL-6各处理(25、50 ng/mL)组p-Stat3、N-cadherin、Vimentin和Twist1蛋白表达增加,E-cadherin蛋白表达降低,Stat3蛋白表达没有明显改变.结论 IL-6可提高食管癌Eca-109细胞体外增殖、侵袭、迁移能力,促进上皮间质转化过程,其机制可能通过活化Stat3蛋白,上调Twist1的表达,进一步调控EMT蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)的表达.     

NF-κB、IL-6和TNF-α在抗IL-6受体单抗干预早期急性肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的 观察NF-kB、IL-6、TNF-α在抗IL-6R单抗干预急性肺损伤(ALI)早期大鼠肺组织中的表达,探讨抗IL-6受体单抗(抗IL-6R单抗)保护肺组织的作用机制.方法 40只大鼠随机分成5组:ALI组,抗IL-6R单抗干预组,兔IgG干预组,地塞米松干预组,生理盐水对照组,每组8只.先给予脂多糖(LPS)总剂量(8mg/kg)的1/10腹腔注射,12h后再给予余量,制备大鼠ALI模型.抗IL-6R单抗、兔IgG、地塞米松的剂量分别为200μg/kg、200μg/kg和2mg/kg.采用免疫组化技术观察各组动物肺组织中NF-kB、IL-6和TNF-α在干预因素作用下的早期ALI大鼠肺组织中的表达.结果 与对照组比较,抗IL-6R单抗均能抑制AU肺组织中NF-kB、IL-6的表达,而TNF-α的表达未见下调.结论 抗IL-6R单抗使ALI大鼠肺组织中NF-kB的表达下降,可能为抗IL-6R单抗对ALI有保护作用的机制之一.     

甲基强的松龙对急性期川崎病外周血单个核细胞NF-κB活化和IL-6、IL-17表达的干预

目的观察甲基强的松龙（MP）对急性期川崎病（KD）患儿外周血单个核细胞（PBMCs）核转录因子-κB（NF-xB）活化和IL-6、IL-17表达的影响。方法急性期KD患儿20例（KD组）,健康对照组20例。实验设为4组：自然培养组、乙酸肉豆蔻佛波酯培养组（PMA组）、PMA＋DEX培养组（DEX组）和PMA＋MP培养组（MP组）。各抽取其静脉血3mL,采用Ficoll密度梯度离心法提纯其PBMCs,并培养48h,免疫细胞化学方法观察48h培养后PBMCs内NF-κB的活化率,酶联免疫吸附实验（ELISA）双抗体夹心法检测外周血PBMCs活化培养后上清液IL-6和IL-17的分泌量。结果①在自然培养情况及仅用乙酸肉豆蔻佛波酯（PMA）刺激后,KD组中NF-κB的活化率、IL-6和IL-17的分泌量显著高于健康对照组（P〈0．01）;②KD患儿MP组和DEX组NF-κB的活化和IL-6、IL-17的分泌量较PMA组均显著下降（P〈0．01）,而KD患儿MP组和DEX组比较均无明显差异（P〉0．05）;③PMA刺激后,KD患儿NF-κB的活化率、IL-6和IL-17的分泌变化相一致,两者之间呈正相关（r=0．587、P〈0．01,r=0．453、P〈0．05）;④PMA刺激后,KD患儿IL-6和IL-17的分泌变化相一致,两者之间呈正相关（r=0．738、P〈0．01）。结论KD患儿急性期炎性细胞因子IL-6、IL-17的分泌和NF-κB的活化在介导KD免疫性血管损伤中起重要作用;MP在KD急性期的抗炎作用机制是抑制IL-17的表达和NF-κB的活化,并阻滞其炎性细胞因子IL-6等的分泌。     

姜黄素通过抑制NF-κB的活化增加胃癌细胞的放疗敏感性

目的检测姜黄素对胃癌细胞的放疗增敏作用,并探讨其具体分子机制。方法MTr法检测姜黄素对胃癌细胞系增殖的影响。克隆形成实验检测姜黄素对放疗敏感性的影响。胃癌细胞系BGC-823经射线照射并利用姜黄素干预后,利用Westernblot技术检测细胞内p65、pSO、AKT和p-AKT的表达情况。结果姜黄素能够抑制胃癌细胞的增殖及细胞照射后的克隆形成能力。姜黄素能够抑制照射后胃癌细胞中的NF-κB亚基p65和p50的核内表达水平,降低细胞中AKT的磷酸化水平（P〈0．05）。结论NF-κB的活性增高和AKT信号通路的活化可能是导致胃癌细胞放疗敏感性降低的重要途径之一。而姜黄素能够通过抑制NF-κB的表达及AKT信号通路的活化增加胃癌细胞的放疗敏感性。     

IL-17调控IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路影响喉癌细胞的侵袭和转移

目的 研究白介素(IL)-17通过IL-6/1L-6R/JAK1/STAT3信号通路调控人源性高分化喉癌细胞(Hep-2)侵袭、转移.方法 以Hep-2细胞为研究对象,设IL-17刺激剂0、1、50、100 ng/ml浓度组,Westem blot法检测不同分组在IL-17的刺激下,Hep-2细胞中IL-6、IL-6R、JAK1、p-JAK1、STAT3、p-STAT3的表达变化.迁移、侵袭实验观察IL-17的刺激对Hep-2细胞侵袭、迁移的影响.结果 Western blot实验中,在IL-17刺激下,1、50、100 ng/ml浓度组较0 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6、IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(p＜0.01),50、100 ng/ml浓度组较1 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6、1L-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P＜0.01),100 ng/ml浓度组较50 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P＜0.01);各组间JAK1、STAT3的表达无明显变化.侵袭与迁移实验显示IL-17可以促进Hep-2细胞的侵袭和迁移.结论 IL-17可能通过IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路促进Hep-2细胞的侵袭和转移.     

通过调节NF-κB通路中的IκBα抑制乳腺癌的研究进展

NF-κB与乳腺癌之间存在着密切的关联,可在药物和基因方面来调节IκBα在NF-κB通路中的含量和状态对该通路产生预期影响,进而了解其在乳腺癌治疗研究方面的进展.抑制IκBα磷酸化,从而抑制NF-κB活化;上调IκBα含量,降低NF-κB活化;增加p-IκBα含量,促进NF-κB活化入核.观察其对乳腺癌的影响.IκBα...     

IL-17和NF-κB通路与类风湿性关节炎的相关性研究

类风湿关节炎发病机制与多种细胞因子有着密切的关系,随着分子生物学和免疫学的进展,类风湿性关节炎动物模型的建立,发现IL-17及NF-κB信号通路在风湿性关节炎中有着重要意义.Th17细胞的发现打破了以往Th1/Th2在风湿性关节炎中的主导作用,Th17细胞可以分泌多种炎症因子,其中大量分泌IL-17,与风湿性关节炎有密切关系.核因子-κB(即NF-kappa B),参与基因转录,并且在炎症和免疫反应中发挥重要作用.同时IL-17与NF-κB信号通路的相互关系可能为风湿性关节炎的治疗提供一种新的思路.     

TRAF6在NF-κB信号通路中的修饰与降解

目的：研究肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在调节NF-κB通路中的作用机制。方法：利用转导了并稳定表达。TRAF6基因的293RZC细胞株，用荧光素酶报告基因系统测定CoA1对293RZC细胞NF-κB通路的激活，Westem Blot分析在NF-κB通路激活过程中TRAF6和IκBα的降解。结果：CoA1可诱导293RZC细胞NF-κB通路的激活，在这一过程中，TRAF6被修饰并降解，IκBα也发生降解，二者的降解被蛋白酶抑制剂MG132抑制。结论：TRAF6介导NF-κB通路的激活需要蛋白酶复合体的作用。