丙泊酚介导细胞自噬及Nrf2信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨丙泊酚介导细胞自噬及Nrf2信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法:将60只SPF级雄性SD大鼠分为假手术组、模型组和丙泊酚组,每组各20只.采用结扎左冠状动脉前降支法制备MI/RI损伤模型(缺血30 min,再灌注2 h);丙泊酚组心肌缺血前15 min给予静脉输注丙泊酚6 mg·kg-1·h-1至再灌注2 h,假手术组和模型组静脉输注生理盐水3 mL·kg-1·h-1,再灌注2 h.使用超声心动图观察大鼠心脏功能,ELISA法检测心肌损伤标志物和心肌组织氧化应激因子水平,HE染色观察各组大鼠心肌组织病理变化,Western blot检测心肌组织中自噬和核转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路相关蛋白水平.结果:LVEF、FS、LVWT、HR和LVSP水平等心功能指标在模型组、假手术组和丙泊酚组的差异均有统计学意义(P<0.05).模型组CK-Mb、Mb和cTnI水平高于假手术组(P<0.05),丙泊酚组低于模型组(P<0.05);模型组SOD活性低于假手术组(P<0.05),丙泊酚组高于模型组(P<0.05);模型组MDA和LDH水平高于假手术组(P<0.05),丙泊酚组低于模型组(P<0.05).模型组P62、Nrf2、HO-1蛋白水平低于假手术组(P<0.05),丙泊酚组高于模型组(P<0.05);模型组LC3-II/LC3-I蛋白和Beclin1蛋白水平高于假手术组(P<0.05),丙泊酚组低于模型组(P<0.05).结论:丙泊酚可以改善大鼠MI/RI损伤和心肌组织过度自噬,降低心肌组织氧化应激反应,且可能与调节Nrf2信号通路有关.     

心肌缺血/再灌注损伤中的自噬

自噬是真核生物体内普遍存在的一种利用溶酶体清除受损、变性或衰老的长寿命蛋白和细胞器的现象。根据细胞内物质运送到溶酶体的途径不同,可将自噬分为巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬。自噬可以通过多种途径被激活,但其具体机制仍不十分清楚。在心肌缺血/再灌注过程中,自噬被明显激活,而其起到的作用究竟是保护性的还是损伤性的目前并无统一结论。但可以肯定的是急性和慢性心肌缺血均可诱导自噬,并且再灌注阶段自噬得到进一步加强。如今自噬已成为治疗心脏缺血性疾病的新一潜在靶点,且为预防缺血/再灌注损伤提供了新的治疗策略。     

电针预处理通过抑制AMPK-Beclin1/Vps34通路介导的细胞自噬减轻脑缺血再灌注损伤

目的:探讨电针预处理治疗对大鼠脑缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的影响及其相关机制。方法 :将健康成年雄性SD大鼠75只随机分为Sham组,脑缺血再灌注组(I/R组),电针预处理并缺血再灌注组(EA+I/R组),脑纹状体感染AAV-VC(空载体病毒)后再给予电针预处理并缺血再灌注组(AAV-VC+EA+I/R组)和脑纹状体感染AAV-Beclin1(过表达Beclin1病毒)后再给予电针预处理并缺血再灌注组(AAV-Beclin1+EA+I/R组),每组15只大鼠。对各组大鼠脑中动脉梗死(middle cerebral artery occlusion,MCAO)术后1、2、3 d进行神经功能评分;在MCAO术后7 d处死大鼠,TTC染色以测定脑梗死体积;TUNEL染色法检测脑细胞凋亡状况;免疫印迹法检测自噬相关分子LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、AMPK和Beclin1的蛋白表达水平;免疫共沉淀检测Beclin1与Vps34的相互作用。结果:与Sham组相比,I/R组脑梗死体积与神经行为学评分明显增加(均P<0.05)。机制研究显示缺血再灌注后LC3-...     

sirt1调控自噬在心肌缺血/再灌注损伤中的研究进展

心肌再灌注治疗是急性心肌梗死(AMI)的治疗方法之一,能够显著改善预后,降低死亡率,但早期往往会增加心肌细胞损害,引起心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤。自噬在真核细胞中广泛存在,适度的自噬对机体的生长发育起到保护作用,自噬不足或者过度自噬对机体有损害作用。然而,在心肌I/R中,缺血阶段的自噬起到保护作用,在再灌注阶段起到损害作用。沉默信息调节因子1(sirt1)作为一种去乙酰化酶,可通过调控相关蛋白的去乙酰化而在氧化应激、细胞代谢、炎症反应、细胞凋亡等多种过程中发挥重要作用。近年来,sirt1参与自噬的发生机制逐渐受到关注,探索sirt1调控自噬在心肌I/R损伤中的作用,有助于对心肌I/R损伤的发病机制展开研究。     

自噬在心肌缺血/再灌注损伤中的作用及药物干预研究进展

自噬现象为真核细胞所特有,是细胞内的物质成分利用溶酶体被降解过程的统称,在正常生理情况下它能清除无用的、多余的、受损的或癌变的细胞器,维持机体内环境稳态.此外,其在疾病防治、延缓衰老等方面有不可忽视的作用.在心肌缺血/再灌注（I/R）过程中,多种因素诱导细胞的自噬活动对心肌细胞的存活具有重要意义,药物对心肌I/R过程中自噬的调控作用目前较少报道.     

HMGB1介导线粒体自噬参与糖尿病小鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)参与糖尿病(db/db)小鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的作用机制.方法:将40只db/db小鼠随机分为假手术—中和抗体(Sham-A)组、假手术—空载抗体(Sham-G)组、I/R—中和抗体(I/R-A)组及I/R—空载抗体(I/R-G)组,每组10只.另取3只db/db小鼠...     

橙皮苷对大鼠心肌缺血/再灌注损伤诱导自噬的影响机制研究

目的探讨橙皮苷对大鼠心肌缺血/再灌注损伤诱导的心肌细胞自噬的影响及其可能机制。方法 24只雄性SD大鼠随机均分为假手术组、缺血/再灌注(I/R)组及橙皮苷组,每组8只。假手术组予0.5%羧基纤维素钠灌胃3 d后,开胸暴露冠状动脉左前降支(LAD),并不结扎,I/R组及橙皮苷组予以阻断LAD血流30 min后再灌注4 h,建立大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型。术后,检测大鼠血清中肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH),心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)和Beclin1的水平。结果与假手术组相比,I/R组大鼠血清中CK及LDH水平均显著升高,心肌组织SOD活性显著降低,MDA含量显著升高(P均<0.05);与I/R组比较,橙皮苷组大鼠血清中CK及LDH水平明显降低,心肌组织SOD活性显著升高,MDA含量明显降低(P均<0.05)。与假手术组比较,I/R组大鼠心肌组织LC3Ⅱ及Beclin1表达水平显著增高,与I/R组比较,橙皮苷组上述2项指标表达水平明显降低(P<0.05)。结论橙皮苷可抑制心肌缺血/再灌注损伤诱导的心肌细胞自噬,其机制与橙皮苷减轻氧化应激相关。     

地奥司明对大鼠心肌缺血/再灌注损伤诱导自噬作用的影响

目的观察地奥司明对大鼠心肌缺血再灌注损伤诱导自噬作用的影响。方法实验于2016年10月—2017年5月在武汉大学心血管病研究所完成。24只大鼠按随机数字表法分为假手术组(SO组,n=8)、模型组(I/R组,n=8)、地奥司明组(D+IR组,n=8)。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支法(缺血30 min,再灌注4 h),建立心肌缺血再灌注损伤模型,假手术组穿线后不结扎。再灌注4 h后,以HE染色法观察心肌组织病理学变化,以分光光度法检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)水平,以ELISA法检测心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,以Western blot法检测心肌组织自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)和Beclin1表达。结果与SO组比较,I/R组大鼠血清中LDH和CK含量均显著升高(t=-13.401、-16.988,P均<0.01),心肌组织SOD水平显著降低、MDA水平显著升高(t=6.314、-11.821,P均<0.01),心肌组织自噬蛋白LC3Ⅱ及Beclin1表达显著增强(t=-12.385、-19.386,P均<0.01);与I/R组比较,地奥司明组血清中CK及LDH含量明显降低(t=9.624、8.695,P均<0.01),心肌组织SOD水平增加、MDA水平下降(t=-5.816、7.632,P均<0.05),LC3Ⅱ及Beclin1表达明显减少(t=6.917、9.282,P均<0.01)。结论地奥司明可通过减轻氧化应激,抑制心肌缺血再灌注损伤诱导的细胞过度自噬,从而减轻心肌缺血再灌注损伤。     

Urocortin抑制心肌缺血再灌注诱导的自噬

目的 研究uroeortin (UCN)对缺血再灌注诱导的心肌细胞自噬的影响,探讨UCN的心肌保护机制.方法 构建大鼠在体心脏缺血再灌注损伤和离体新生大鼠心肌细胞的缺氧复氧模型,进行缺血/缺氧1h再灌注/复氧2h的损伤,在缺血/缺氧前1h给予UCN预处理;在再灌注/复氧2h后观察UCN对缺血再灌注/缺氧复氧诱导的心肌损伤、细胞自噬和自噬相关基因表达的影响.结果 UCN预处理可以显著降低缺血再灌注损伤导致的心肌损害,使梗死面积降低,血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)降低;增加缺氧复氧离体心肌细胞活力、减少培养上清的LDH水平.与上述心肌保护作用相伴随的是UCN预处理还能抑制缺氧复氧导致的心肌细胞自噬,使LC3BⅡ/LC3BI的比值显著降低,并且抑制自噬相关基因Beclin1、Bni p3的mRNA表达.结论 UCN可以抑制缺血再灌注诱导的心肌细胞自噬,可能在抗缺血再灌注损伤中起重要作用.     

富血小板血浆可减轻大鼠急性心肌缺血-再灌注损伤

目的 探讨富血小板血浆（PRP）对急性缺血-再灌注损伤心肌的保护作用及其机制。方法 制备PRP并测量PDGF-BB和TGF-β1的浓度;SD大鼠乳鼠心肌细胞缺氧3 h后,在复氧条件下分别用1%、5%、10%、20%体积的PRP共培养细胞12 h,检测细胞活力,同时对心肌细胞进行免疫荧光染色,提取蛋白检测AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）及其磷酸化水平;检测PRP对大鼠主动脉内皮细胞增殖及迁移的影响;以SD大鼠建立心肌缺血-再灌注损伤模型,在恢复灌注后立刻在结扎部位周围四个部位注射100 μL的PRP（PRP组,n=20）或生理盐水（Control组,n=20）,1 d后各组随机选6只大鼠取材心脏行TTC染色并测量肌钙蛋白I的浓度,其余动物1周后通过超声心动图检测心功能,并取材心脏进行HE染色;体外对RAW264.7细胞缺氧3 h,分别给予PRP或生理盐水作用24 h后行流式细胞仪检测M1和M2型巨噬细胞的极化情况。结果 PRP中PDGF-BB和TGF-β1的浓度显著高于全血,1%体积PRP可以显著减少缺氧-复氧所导致的心肌细胞死亡,其保护作用与AMPK的激活密切相关;PRP促进内皮细胞的增殖与迁移;动物实验中PRP组梗死面积和肌钙蛋白I浓度均小于生理盐水组（P<0.001）,超声显示PRP组心功能明显改善,HE染色示缺血区域炎症反应较生理盐水组明显减轻;RAW264.7细胞经PRP处理M1型巨噬细胞减少,M2型巨噬细胞增 多。结论 PRP通过促进AMPK磷酸化及巨噬细胞免疫调节作用来改善大鼠心肌急性缺血-再灌注损伤区域的炎症微环境,从而起到心肌保护的作用。     

DJ-1通过Nrf2信号通路减轻大鼠脑缺血-再灌注引起的氧化应激损伤

目的 探讨DJ-1（Park7）在脑缺血再灌注损伤中的抗氧化作用及相关机制。方法 构建SD大鼠大脑缺血再灌注损伤模型,将SD大鼠随机分为假手术组、MCAO 组、Scramble组和 DJ-1 siRNA组、NC组和 Overexpression组。通过DJ-1 siRNA干扰片段干扰DJ-1的表达,以及DJ-1过表达腺相关病毒载体过表达DJ-1的表达。通过测定MCAO/R后各组神经功能学评分和脑含水量,同时应用HE和Nissl 染色法评估脑组织的形态学变化和皮层梗死区神经元的损伤情况,评价 DJ-1 对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。用超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）分析脑组织氧化应激状态。免疫印迹法检测脑组织中 DJ-1,Nrf2,HO-1以及NQO1的表达水平,以及免疫荧光染色法观察Nrf2的表达及核转位情况,探讨DJ-1减轻大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤的可能机制。结果 与 MCAO 组相比,DJ-1 siRNA 组的神经功能学评分（P?0.001）、脑含水量（P?0.001）均明显增加;HE 和Nissl 染色显示脑缺血区神经元损伤进一步加重;SOD 含量进一步降低,MDA 含量进一步增加（P?0.001）;干扰DJ-1后,其蛋白水平明显降低（P=0.003）,同时Nrf2及其下游的HO-1和NQO1也明显降低（P?0.001）。而过表达DJ-1以后,其DJ-1 （P=0.006）、Nrf2（P=0.006）及其下游的HO-1（P=0.004）和NQO1明显增加（P=0.014）。结论 DJ-1作为体内重要的神经保护因子,可以减少大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤,并可能是通过激活Nrf2信号通路来实现的。     

舒芬太尼后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤时 Nrf2-ARE 信号通路的影响

目的 探讨舒芬太尼后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤时Nrf2-ARE 信号通路的影响。方法 30 只健康雄性SD 大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组及舒芬太尼后处理组,复制大鼠心肌缺血再灌注损伤 模型,舒芬太尼后处理组于再灌注前5 min,按1μg/kg 的剂量将舒芬太尼经股静脉注入,假手术组和缺血再 灌注组则注入等量的生理盐水,检测3 组大鼠心肌梗死面积以及病理学改变,检测3 组大鼠心肌细胞凋亡情况, 利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western blot 分别检测3 组大鼠心肌组织中Nrf2、HO-1、NQO1、 SOD1 及GSTM2 基因和蛋白表达。结果 与假手术组比较,缺血再灌注组和舒芬太尼后处理组大鼠心肌细胞凋 亡指数和梗死面积均增加,与缺血再灌注组比较,舒芬太尼后处理组大鼠心肌细胞凋亡指数和梗死面积均降 低（P <0.05）;与假手术组比较,缺血再灌注组和舒芬太尼后处理组大鼠心肌组织中Nrf2、HO-1、NQO1、 SOD1 及GSTM2 基因和蛋白相对表达量均降低（P <0.05）;与缺血再灌注组比较,舒芬太尼后处理组大鼠心肌 组织中Nrf2、HO-1、NQO1、SOD1 及GSTM2 基因和蛋白相对表达量均升高（P <0.05）。结论 舒芬太尼 后处理可有效减轻缺血再灌注损伤大鼠心肌梗死面积以及细胞凋亡,其机制可能通过激活Nrf2/ARE 信号通路 促使其下游Ⅱ相解毒酶及抗氧化酶的表达,从而有效对抗氧化应激损伤。     

褪黑素通过激活Nrf2信号和抑制炎症反应减轻小鼠心脏缺血再灌注损伤

目的 探讨褪黑素（Mel）激活Nrf2信号抑制炎症反应改善小鼠心脏缺血再灌注（IR）损伤的作用。方法 采用小鼠冠状动脉左前降支结扎,缺血30 min,再灌注2 h或24 h模拟缺血再灌注模型,采用随机数字表法将C57/bl6小鼠随机分为4组：假手术组（Sham）、缺血再灌注组（IR）、褪黑素处理缺血再灌注组（Mel+IR）和褪黑素联合Nrf2抑制剂ML-385处理缺血再灌注组（Mel+ML-385+IR）。伊文氏蓝/TTC染色检测心肌梗死面积,ELISA检测血清中LDH含量,超声评价心脏功能,Western blot检测Bax、Bcl2、Nrf2及其底物NQO-1和HO-1以及炎症分子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,TUNEL染色观察细胞凋亡率。结果 和Sham组相比,IR组心肌梗死面积和血清中LDH含量明显增加,心脏功能降低,Bax表达增加而Bcl2表达减少,细胞凋亡率增加,TNF-α、IL-1β、IL-6的表达显著增加（P<0.01）,同时,Nrf2、NQO-1、HO-1的表达明显降低（P<0.01）;而给予Mel处理后,可显著减小心肌梗死面积,降低血清中LDH含量,改善心脏功能,减少Bax表达并增加Bcl2表达,减小细胞凋亡率,降低TNF-α、IL-1β、IL-6表达（P<0.01）,上调Nrf2、NQO-1和HO-1的表达（P<0.01）;然而,ML-385可明显阻断Mel对心肌缺血再灌注的保护作用和对Nrf2信号的调控。结论 Mel改善小鼠心脏缺血再灌注损伤,其机制与激活Nrf2信号,降低炎症反应有关。     

刺五加叶皂苷对大鼠心肌缺血-再灌注损伤细胞凋亡及p-ERK1/2表达的影响

目的：研究刺五加叶皂苷（acanthopanax senticosus,ASS）对大鼠心肌缺血-再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury,MI/RI）的影响。方法选用60只SD雄性大鼠分为假手术组（C组）、缺血再灌注（ischemia reperfusion,IR）组（IR组）、刺五加叶皂苷加阻滞剂组（ASS＋Z组）及刺五加叶皂苷组（ASS组）,采用结扎大鼠冠状动脉左前降支建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。采用NBT染色法检测心肌梗死面积及血清肌钙蛋白T（cardiac troponin T,cTnT）,用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数（apoptotic index,AI）,用Western blot法检测细胞外调解蛋白激酶（extracelluar regulated protein kinases,ERK）1/2及磷酸化ERK 1/2（p-ERK1/2）表达情况。结果 ASS组的cTnT、心肌梗死面积及AI明显低于IR组及ASS＋Z组（P＜0.05）;ASS组p-ERK1/2表达明显高于C组、IR组及ASS＋Z组（P＜0.05）。结论刺五加叶皂苷对大鼠MI/RI有保护作用,能够减少心肌细胞凋亡,其机制与ERK 1/2激酶途径激活有关。     

Maresin1通过Sirt1抑制Caspase11/GSDMD通路减轻小肠缺血再灌注损伤的研究

目的：探讨巨噬素1(Maresin1,Mar1)在小鼠肠缺血再灌注（ischemia-reperfution,IR）中的作用及其可能机制。方法：通过夹闭肠系膜上动脉（superior mesenteric artery,SMA）建立小肠IR模型。第一部分(1)组12只小鼠随机分为Control组、IR组和IR+Mar1组。第二部分(2)组20只小鼠随机分为Control组、IR组、IR+Mar1组、IR+EX527组、IR+Mar1+EX527组。Mar1于术前30 min采用5μg/kg腹腔注射。EX527于术前1 d 10 mg/kg经腹腔注射。Control组仅分离SMA而不夹闭。其余模型组均用无损伤血管夹夹闭SMA根部,45 min后松开血管夹形成小肠IR模型。各组小鼠均于再灌注后4 h采集静脉血和回肠标本。检测(1)组小鼠肠组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量;检测血清4 kd荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖（FITC-Dextran 4000,FD-4...     

p38MAPK信号通路在甘草酸二铵减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的观察p38MAPK信号通路在甘草酸二铵对兔心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法30只新西兰大白兔随机分为3组,每组10只;假手术组(Ⅰ组)。缺血再灌注组(Ⅱ组)、甘草酸二铵处理组(Ⅲ组)。Ⅰ组行冠脉套线不阻断,Ⅱ、Ⅲ组均行后冠状动脉前降支阻断40min,再灌注120min。其中Ⅲ组在阻断前用甘草酸二铵2.5mg/kg静脉泵注。三组在阻断冠脉前20min(T0),阻断后20min(T1)、40min(T2)、再灌注后1h(T3)、2h(T4)取颈内动脉血测定血浆TNF-2、IL-6,IL-8细胞因子含量,再灌注结束后免疫印记法测心肌p38MAPK水平,再灌注结束后观察心肌细胞超微结构,同时用伊文思蓝和TIC染色法测心肌梗死面积。结果与Ⅱ组比较Ⅲ组p38MAPK表达降低(P<0.05),细胞炎性因子含量减少(P<0.05)。心肌细胞超微损伤减轻(P<0.05),心肌梗死面积减少(P<0.05)。结论甘草酸二铵通用下调心肌P38MAPK表达,减少炎性因子生成,抑制过度的炎性反应,改善心肌细胞超微结构,从而减轻心肌缺血再灌注损伤。     

右美托咪定预处理通过抑制NLRP3炎性小体激活减轻大鼠肠缺血再灌注诱导的急性肺损伤

目的 探讨右美托咪定（Dex）对大鼠肠缺血再灌注（II/R）所致急性肺损伤（ALI）的保护作用以及核苷酸结合域样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体活性的影响。方法 将32只健康雄性SD大鼠,随机分为4组（8只/组）。假手术组（Sham组）仅暴露肠系膜上动脉（SMA）,肠缺血再灌注组（II/R组）阻断SMA 1 h后再灌注2 h,II/R+右美托咪定处理组（Dex+II/R组）右美托咪定干预后行再灌注,Dex假手术组（Dex组）右美托咪定预处理假手术组。Sham组和II/R组腹腔注射等量生理盐水。采取夹闭SMA 1 h再灌注2 h的方法建立肠缺血再灌注损伤模型。测定各组大鼠肺部组织湿/干质量比值（W/D）、髓过氧化物酶（MPO）活性,HE染色评估肺组织病理学变化以及行肺损伤评分;ELISA检测肺部组织中炎性因子TNF-α、IL-18、IL-1β水平;Western blot检测肺部组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、Caspase-1及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）蛋白的表达水平。结果 相较于Sham组,II/R组肺组织病理损伤明显,W/D值、MPO活性及肺组织中的TNF-α、IL-18、IL-1β表达显著升高（P<0.05）,肺组织中NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达增加（P<0.05）,p-AMPK蛋白表达减少（P<0.05）;相较于II/R组,Dex+II/R组肺组织病理损伤轻微,W/D值、MPO活性及肺组织中的TNF-α、IL-18、IL-1β表达明显下降（P<0.05）,肺组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达明显下降（P<0.05）,p-AMPK蛋白表达明显增加（P<0.05）。结论 右托美咪定通过对NLRP3炎性小体激活的抑制,减轻炎性反应,进而改善大鼠II/R所致的ALI。     

阿利吉仑通过抑制炎症和凋亡反应改善小鼠心肌缺血再灌注损伤

目的通过建立小鼠心肌缺血再灌注损伤模型,探讨阿利吉仑对于改善心肌缺血再灌注损伤的药物效果及可能的作用机制。方法将C57小鼠分为假手术组、模型组、低剂量组、高剂量组。假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃,低剂量组和高剂量组分别给予25、50 μg/g阿利吉仑灌胃。超声心动图检测各组小鼠心脏功能,ELISA检测各组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平。实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹实验检测凋亡通路相关因子的表达水平。结果本实验成功建立小鼠心肌缺血再灌注损伤模型。与假手术组比较,其他3组小鼠的每搏输出量、心输出量、收缩期末左心室前壁厚度、收缩期末左心室后壁厚度、舒张期末左心室后壁厚度均显著降低(P＜0.05)。与模型组比较,低、高剂量组小鼠的左心室射血分数和左心室短轴缩短率明显升高(P＜0.05),且随着阿利吉仑剂量的增加而呈浓度依赖性升高(P＜0.05),但TNF-α和IL-6水平明显降低(P＜0.05)。与假手术组比较,模型组的B淋巴细胞2蛋白(Bcl-2)的mRNA和蛋白表达量均显著降低(P＜0.05),而Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达量明显增加(P＜0.05)。阿利吉仑能增加Bcl-2的表达量(P＜0.05),而使Bax的表达量明显下降(P＜0.05)。结论阿利吉仑可以通过抑制炎症反应、调控凋亡相关通路,改善小鼠心肌缺血再灌注损伤,促进其心功能的恢复。