脑益康对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆的影响

目的 :观察脑益康对阿尔茨海默病 (Alzhei mer’sdisease ,AD)模型小鼠学习记忆的影响 ,并探讨其改善学习记忆的机制。方法 :采用D 半乳糖 (D Gal)和亚硝酸钠 (NaNO2 )腹腔注射建立小鼠AD模型 ,通过迷宫刺激器和水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力 ;生化方法检测小鼠脑组织内超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量 ;透射电镜观察小鼠海马神经细胞的超微结构。结果 :模型对照组小鼠学习记忆能力下降 ,SOD活性降低 ,MDA含量升高 ;而与模型对照组比较 ,脑益康小、中、大剂量组(2 .4、7.2、2 4g·kg-1·d-1)均可显著改善模型小鼠的学习记忆能力 ,提高脑内SOD活性 ,降低脑内MDA含量 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,阻抑海马神经细胞的退行性变化。结论 :脑益康可改善D 半乳糖和亚硝酸钠所致AD模型小鼠的学习记忆能力。     

蛇床子素对机械性脑损伤小鼠的抗炎抗凋亡作用研究

目的研究蛇床子素(osthole,Ost)对小鼠机械性脑损伤后细胞凋亡及炎症细胞浸润的影响。方法建立针刺伤小鼠机械性脑损伤模型,随机分为假手术组、模型组、蛇床子素10、20、30 mg·kg-1治疗组。主要检测各组小鼠脑组织含水量;RT-PCR法检测皮层损伤灶凋亡因子Bax,Bcl-2,活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3(Caspase-3)mRNA的表达变化;免疫组织化学染色法检测损伤灶周围中性粒细胞(MPO)及小胶质细胞(Iba-1)浸润情况以及Caspase-3阳性细胞表达情况。结果蛇床子素20,30 mg·kg-1治疗组能够明显降低脑组织含水量;提高Bax/Bcl-2比值,降低凋亡因子Caspase-3 mRNA表达;蛇床子素30 mg·kg-1治疗组能够明显减少大脑皮层损伤灶周围中性粒细胞及小胶质细胞的浸润,并且明显减少凋亡细胞数量。结论蛇床子素对开放性脑损伤的小鼠具有一定的治疗作用,可能是通过减少炎症细胞浸润,并且减少细胞凋亡发挥治疗作用。     

Spy1在创伤性脑损伤中的表达及意义

目的探讨创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑组织周期依赖激酶(CDKs)Spy1的表达及细胞定位。方法 72只SD大鼠均分为九组:空白对照组、假手术组和7个TBI组(建立大鼠脑锐器切割伤模型后12h和1、3、5、7、14和28d共7个时间点组)。提取各组大鼠脑组织蛋白样品10μl,Westernblot和逆转录PCR的方法检测TBI后Spy1蛋白和Spy1mRNA表达。免疫荧光双标染色方法检测Spy1蛋白在脑组织中的细胞定位。结果 TBI后,Spy1蛋白及其mRNA的表达逐步升高,3d达高峰,此后逐渐降低恢复至接近正常水平。Spy1主要与星形胶质细胞和神经元之间存在共定位。结论大鼠TBI可以改变脑Spy1的表达,这种改变可能参与脑损伤后星形胶质细胞的活化和增殖过程。     

Expression and significance of Spy1 in rats brain tissues after traumatic brain injury

目的 探讨创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑组织周期依赖激酶(CDKs) Spy1的表达及细胞定位.方法 72只SD大鼠均分为九组:空白对照组、假手术组和7个TBI组(建立大鼠脑锐器切割伤模型后12h和1、3、5、7、14和28d共7个时间点组).提取各组大鼠脑组织蛋白样品10μl,Western blot和逆转录PCR的方法检测TBI后Spy1蛋白和Spy1mRNA表达.免疫荧光双标染色方法检测Spy1蛋白在脑组织中的细胞定位.结果 TBI后,Spy1蛋白及其mRNA的表达逐步升高,3d达高峰,此后逐渐降低恢复至接近正常水平.Spy1主要与星形胶质细胞和神经元之间存在共定位.结论 大鼠TBI可以改变脑Spy1的表达,这种改变可能参与脑损伤后星形胶质细胞的活化和增殖过程.     

阿魏酸对痴呆小鼠脑内胶质细胞活化与炎性细胞因子表达的影响

目的:探究阿魏酸(FA)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑内炎症与胶质细胞活化及细胞因子表达的影响,揭示阿魏酸对小鼠大脑的保护作用及其机制。方法:将50只昆明种小鼠随机分为假手术组、AD模型组、FA低、中和高3个剂量组。采用脑定位向小鼠右侧海马CA1区注射1μL Aβ1-40建立AD模型,造模成功后第3天开始给药,阿魏酸低、中、高剂量组分别按20.0、40.0、80.0mg·kg-1剂量灌胃,假手术与模型组灌胃等体积生理盐水,用药时间为30 d。实验结束后,处死动物,剖取各组小鼠大脑,采用免疫荧光方法观察大脑皮层区GFAP的表达,用ELISA法测定脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量。结果:与假手术组相比,AD模型组小鼠大脑皮层区GFAP阳性细胞表达明显增多(P<0.01),且大脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量显著升高(P<0.01、P<0.01、P<0.01);与模型组相比,阿魏酸3个剂量组小鼠皮层区域GFAP阳性细胞表达均明显减少(P<0.01),且大脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量也相应地减少(P<0.01、P<0.01、P<0.01)。结论:阿魏酸可能是通过抑制Aβ1-40对神经细胞的毒性和诱导小胶质细胞活化,使得胶质细胞合成的炎性细胞因子含量减少,进而减轻痴呆大脑组织中炎症的形成,从而达到治疗或改善AD患者的临床症状的目的。     

新型天麻素衍生物对阿尔茨海默病模型小鼠的保护作用

目的 采用双侧侧脑室注射β淀粉样蛋白的寡聚体（amyloid-β oligomers,AβOs）建立阿尔茨海默病（Alzheimer''s disease,AD）小鼠模型,并研究阿魏酸、天麻素以及天麻素衍生物3种不同化合物对其保护作用。方法 C57BL/6小鼠随机分为5组,假手术组、模型组、阿魏酸组、天麻素组和天麻素衍生物组。双侧侧脑室注射AβOs建立AD模型小鼠后,连续灌胃给药14 d。采用Y迷宫试验和跳台试验检测小鼠的记忆能力;免疫荧光法检测小鼠脑内炎症细胞星形胶质细胞和小胶质细胞的表达;qRT-PCR法检测小鼠脑内肿瘤坏死因子-α、白介素-1β、线粒体超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的mRNA水平。结果 与模型组相比,阿魏酸组、天麻素组和天麻素衍生物组能显著提高小鼠记忆能力,降低小鼠脑内炎症反应和氧化损伤,与阿魏酸组、天麻素组相比,天麻素衍生物组也有显著性差异。结论 与阿魏酸组、天麻素组相比,天麻素衍生物更能有效地对抗AβOs所致的记忆损伤、炎症反应和氧化损伤,是一种潜在的治疗AD的药物。     

火麻仁油对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的保护作用研究

目的:研究火麻仁油对D-半乳糖(D-gal)致衰老小鼠学习记忆能力的保护作用,并探讨其作用机制.方法:采用D-半乳糖诱导小鼠衰老模型,用跳台法、水迷宫法和Morris水迷宫法测定衰老小鼠学习记忆能力,检测小鼠脑组织丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及大脑皮层和海马组织中乙酰胆碱(Ach)含量和乙酰胆碱酯酶(AchE)、胆碱乙酰化转移酶(ChAT)活性,观察脑组织组织形态学变化.结果:火麻仁油(3、6和12 mL/kg)能明显延长跳台实验的跳台潜伏期,缩短错误次数;缩短水迷宫实验达到时间和减少错误次数;缩短Morris水迷宫实验逃避潜伏期和第1次到达原平台时间,增加穿越原平台次数和逗留时间;能显著增加脑组织中T-AOC、SOD、GSH-Px活性和降低MDA含量,增加大脑皮层和海马组织中Ach含量和AchE、ChAT活性,减轻脑组织损伤.结论:火麻仁油可显著改善D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力,其机制可能与其提高脑组织抗氧化和清除自由基能力,增强中枢胆碱能神经系统功能有关.     

红景天苷对血管性痴呆小鼠学习记忆行为的影响

目的探讨红景天苷对血管性痴呆小鼠学习记忆能力的影响。方法反复夹闭及再通小鼠双侧颈总动脉复制血管性痴呆模型。实验分为3组:假手术组、模型组、红景天苷治疗组。跳台实验和水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,测定脑组织中一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)的含量,并运用苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠海马组织结构的改变。结果与模型组相比,红景天苷给药组小鼠跳台错误反应次数明显减少(P<0.01),跳台潜伏期明显延长(P<0.05),水迷宫潜伏期明显缩短(P<0.01),脑组织NOS及NO含量明显降低(P<0.01)。HE染色结果显示,红景天苷能够减轻反复脑缺血再灌注所致的神经细胞层次不清,突触减少,核固缩等病理改变。结论红景天苷可以改善血管性痴呆小鼠学习记忆能力,其机制可能与增强抗氧化能力有关。     

吡格列酮对脂多糖所致大鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制

目的研究吡格列酮(Pioglitazone,Pio)对脂多糖引起的大鼠学习记忆障碍和海马CA1区锥体神经元损伤的保护作用。方法大鼠灌胃给予Pio(408、0 mg/kg)3周,脑室内注射LPS(5、30μg),2 d后进行Mor-ris水迷宫定位航行实验,连续训练5 d,第6天进行空间探索实验。行为学实验后,取脑组织,制成石蜡切片,进行尼氏(Nissl)染色和胶质纤维酸蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫组织化学染色,研究海马CA1区锥体神经元形态学改变和星型胶质细胞的活化浸润情况。结果脑内注射LPS可以引起大鼠学习和记忆障碍,表现为大鼠逃避潜伏期较对照组明显延长,大鼠在平台所在象限游泳距离百分比明显较对照组低,这些行为学改变伴随海马CA1区星型胶质细胞和锥体神经元的损伤。治疗组LPS所致的学习记忆损伤减轻,Pio能明显减轻海马CA1区锥体神经元的损伤和星型胶质细胞的浸润。结论吡格列酮能对抗LPS引起的锥体神经元的损伤和星型胶质细胞的活化浸润,从而改善大鼠的学习记忆能力。     

柚皮素对APP/PS1转基因小鼠淀粉样斑块沉积和胶质细胞活化的抑制作用

目的探讨柚皮素(NAR)对APP/PS1转基因小鼠淀粉样蛋白沉积和胶质细胞活化的抑制作用。方法利用APP/PS1转基因小鼠观察NAR对AD小鼠在水迷宫实验中记忆损伤的改善作用;硫磺素-S染色法检测淀粉样斑块沉积;免疫荧光法检测SYN-1水平;蛋白免疫印迹法测定小鼠大脑SYN-1、PSD-95和GAP-43含量;免疫荧光法检测GFAP和Iba-1水平。结果水迷宫实验结果显示NAR可明显降低转基因小鼠逃避潜伏期并增加穿越平台所在象限次数。硫磺素-S染色结果显示,NAR可明显降低小鼠皮层及海马淀粉样斑块沉积。蛋白免疫印迹实验显示,NAR可增加SYN-1、PSD-95和GAP-43表达水平。免疫荧光实验显示,NAR可明显降低APP/PS1转基因小鼠皮层和海马GFAP和Iba-1荧光强度。结论 NAR可通过减少皮层和海马中淀粉样斑块沉积并抑制胶质细胞活化改善APP/PS1转基因小鼠记忆功能受损。     

Phillyrin protects mice from traumatic brain injury by inhibiting the inflammation of microglia via PPARγ signaling pathway

The neuroinflammatory response induced by microglia plays a vital role in causing secondary brain damage after traumatic brain injury (TBI). Previous studies have found that the improved regulation of activated microglia could reduce neurological damage post-TBI. Phillyrin (Phi) is one of the main active ingredients extracted from the fruits of the medicinal plant Forsythia suspensa (Thunb.) with anti-inflammatory effects. Our study attempted to investigate the effects of phillyrin on microglial activation and neuron damage after TBI. The TBI model was applied to induce brain injury in mice, and neurological scores, brain water content, hematoxylin and eosin staining and Nissl staining were employed to determine the neuroprotective effects of phillyrin. Immunofluorescent staining and western blot analysis were used to detect nuclear factor-kappa B (NF-κB) and peroxisome proliferator–activated receptor gamma (PPARγ) expression and nuclear translocation, and the inflammation-related proteins and mRNAs were assessed by western blot analysis and quantitative real-time PCR. The results revealed that phillyrin not only inhibited the proinflammatory response induced by activated microglia but also attenuated neurological impairment and brain edema in vivo in a mouse TBI model. Additionally, phillyrin suppressed the phosphorylation of NF-κB in microglia after TBI insult. These effects of phillyrin were mostly abolished by the antagonist of PPARγ. Our results reveal that phillyrin could prominently inhibit the inflammation of microglia via the PPARγ signaling pathway, thus leading to potential neuroprotective treatment after traumatic brain injury.     

右美托咪定对脑外伤所致认知功能和脑组织损伤的保护作用

目的： 研究右美托咪定对脑外伤（traumatic brain injury,TBI）后小鼠认知功能和脑组织损伤的影响,揭示右美托咪定（Dex）治疗脑外伤的可能作用机制。方法： 将60只小鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（TBI组）和右美托咪定治疗组（Dex+TBI组）。采用神经损伤严重程度评分（NSS）和旋转实验（Rotarod test）评价各组小鼠在TBI后24 d的神经功能;采用行为学实验评估TBI后小鼠运动依赖的学习记忆能力损害;HE染色观察脑组织体积损伤,TUNEL染色分析神经元细胞死亡,蛋白印迹实验分析突触相关蛋白pre-BDNF、BDNF、GAP43、Synaptophysin和Synapsin表达。结果： 与TBI组相比,TBI+Dex组小鼠神经损伤恢复水平和认知能力均提高,差异有统计学意义（P<0.01）;脑组织体积损伤减小（P<0.01）,TUNNEL阳性细胞数量显著增加（P<0.01）;突触相关蛋白表达显著增加（P<0.01）。结论： 右美托咪定对脑外伤后小鼠认知功能和脑组织损伤具有保护作用,其机制可能是增加了突触相关蛋白的表达。     

阿托伐他汀对颅脑外伤后小胶质细胞激活的影响

摘要： 目的 观察阿托伐他汀对颅脑损伤 （TBI） 后小胶质细胞激活的影响。方法 将 60 只 C57/BL6 小鼠随机分为假手术组、 生理盐水组和阿托伐他汀组, 各 20 只。生理盐水组和阿托伐他汀组采用液压打击法制作 TBI 模型。假手术组不进行液压打击。阿托伐他汀组打击后 1 h 给予阿托伐他汀 （每天 1 mg/kg） 灌胃, 连续 7 d。生理盐水组给予等量生理盐水灌胃。采用免疫组化法检测造模后第 1、 3、 7 天创伤灶周围小胶质细胞特异性标志物 （Iba-1） 的数量及第 3 天基质金属蛋白酶 （MMP） -9 水平; Western blot 检测炎症因子肿瘤坏死因子 （TNF） -α水平。结果 造模后第 1、 3、 7 天, 阿托伐他汀组小鼠创伤灶周围 Iba-1 阳性表达量较生理盐水组均显著降低 （80.00±7.44 vs. 118.40± 6.65, 85.60±10.87 vs. 189.00±7.51, 69.40±5.54 vs. 102.40±10.89, P＜0.05）。TBI 后第 3 天, 阿托伐他汀组 MMP-9 阳性表达量与生理盐水组相比也显著下降 （86.80±8.40 vs. 133.80±8.46, P＜0.05）; Western blot 检测发现阿托伐他汀组与生理盐水组相比 TNF-α表达下降 （0.64±0.01 vs. 0.97±0.02, P＜0.05）。结论 阿托伐他汀能减少小鼠 TBI 后小胶质细胞的激活, 减少炎症因子的表达, 起到抗炎作用。     

Inhibition of miR-429 improves neurological recovery of traumatic brain injury mice and attenuates microglial neuroinflammation

BackgroundNeuroinflammation is a common therapeutic target for traumatic brain injury (TBI) due to its contribution to delayed secondary cell death and has the potential to occur for years after the initial insult. Previous studies demonstrate that miR-429 is up-regulated in the brain lesions of TBI mice, while its role in regulating neuroinflammation and brain injury remains largely unknown.MethodThe expression of miR-429 in LPS-activated microglia and microglia in TBI model was detected by RT-PCR. The effects of miR-429 inhibitors on LPS-activated microglia in vitro as well as neurological recovery and post-traumatic neuroinflammatory response in TBI model mice were detected in vivo.ResultsLPS and TBI significantly induce the up-expression of miR-429, inflammatory cytokines, MAPK-p38 and phosphorylated NF-κB in microglia, which were all inhibited by miR-429 inhibitors. Meanwhile, miR-429 inhibitors also attenuated the neurological impairment in TBI mice. Bioinformatics analysis showed that miR-429 could target and inhibit the expression of dual specificity protein phosphatase 1 (DUSP1), thus inhibiting the expression of MAPK-p38 and phosphorylated NF-κB.ConclusionmiR-429 plays a pro-inflammatory role in activated microglia by targeting DUSP1 signaling pathway. Inhibiting miR-429 can attenuate the inflammatory response of microglia and TBI-mediated brain damage.     

阿魏酸对血管性痴呆大鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制研究

血管性痴呆(vascular dementia,VD)是一种严重威胁老年人生命健康的神经退行性疾病,随着人口的老龄化,VD发病率逐年上升,寻找安全有效的抗VD药物已成为药物研究的热点[1,2]。近年来,中医药以活血化瘀法治疗VD取得了较大进展[3?5]。川芎是一种典型的活血化瘀中药,始载于《神农本草经》,具有活血行气、祛风止痛的功效,广泛用于VD     

创伤性脑损伤相关神经炎症的研究进展 #br#

创伤性脑损伤（TBI）发生时,外力立即造成神经系统损害。这种原发性损伤触发了体内生化级联以及新 陈代谢和细胞变化在内的继发性神经损害,称为继发性脑损伤。TBI后的神经炎症是持续的神经元损伤的关键因 素。神经炎症涉及损伤后细胞和分子调控机制,包括神经胶质（小胶质细胞和星形胶质细胞）的激活,引起脑内的炎 症介质的释放,导致周围免疫细胞的募集。了解 TBI炎症病理生理学的最新进展对于制定更有效的治疗策略至关 重要。     

抗坏血酸对减轻继发性脑损伤作用机制的研究

目的 探讨抗坏血酸减轻颅脑创伤后继发性脑损伤加重的机制。方法 将实验大鼠随机分为假手术+生理盐水组、假手术+抗坏血酸组、打击+生理盐水组及打击+抗坏血酸组,每组 12 只。建立中度颅脑损伤模型,颅脑创伤后24 h进行神经功能损伤评分;采用酶联免疫吸附剂测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用Western blot法测定颅脑创伤后24 h的损伤侧脑组织中细胞色素P450(CYP2E1),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和血脑屏障紧密连结蛋白Occludin的表达情况。结果 打击+抗坏血酸组的损伤程度与打击+生理盐水组相比明显减轻,SOD活力增高,CYP2E1表达减少,MMP-9的含量降低,Occludin的含量增高。结论 抗坏血酸可以通过降低血脑屏障的破坏程度,减轻继发性颅脑损伤的进一步加重,其作用可能是依靠抑制CYP2E1的表达而发挥的。     

姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力及大脑中Aβ_(42)表达的影响

目的观察姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力和大脑β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)42表达的影响,探讨姜黄素在阿尔采末病(Alzheimer’sdisease,AD)防治中的作用。方法将20只6月龄APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠随机分为对照组和姜黄素饲喂组,每组10只。姜黄素饲喂组每天饲喂姜黄素(500 mg·L-1),6个月后采用Morris水迷宫实验方法及恐惧实验方法检测小鼠的学习记忆能力,采用免疫组化法检测小鼠大脑Aβ42表达的变化。结果与对照组相比,姜黄素饲喂组小鼠空间学习和记忆能力有明显改善(P<0.01),大脑中Aβ42表达明显减少。结论姜黄素能降低APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠大脑中Aβ42的表达,进而改善小鼠的学习记忆能力。     

怡心健脑颗粒对D-半乳糖合β-AP25-35诱导AD小鼠的药效研究

目的观察怡心健脑颗粒对老年痴呆症（AD）小鼠学习记忆及抗氧化能力的影响。方法运用D-半乳糖合β-AP25-35诱导小鼠AD模型,水迷宫法观察怡心健脑颗粒对AD小鼠学习记忆成绩的影响,并测定小鼠血清、肝脏与脑组织中丙二醛（MDA）、超氧化歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、谷胱甘肽（GSH）的含量。结果与对照组比较,模型组AD小鼠的学习记忆成绩明显下降,其血清、肝脏及脑组织中MDA含量明显升高,SOD、GSH、GSH-Px含量明显下降;与模型组比较给药组AD小鼠的学习记忆成绩明显提高,血清、肝脏及脑组织中SOD、GSH、GSH-Px含量明显升高,MDA含量降低。结论怡心健脑颗粒对D-半乳糖合β-AP25-35诱导的AD小鼠具有健脑益智药理作用,并能提高其抗氧化能力。