血清外泌体来源的microRNA-221-3p在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者血清外泌体来源microRNA(miRNA)-221-3p的表达水平及分析其临床意义。方法选取2010年2月-2014年12月南京大学医学院附属南京鼓楼医院经手术治疗后诊断为HCC的66例患者作为HCC组,选取25例同期在本院接受健康检查的体检者作为对照组。通过外泌体提取试剂盒分离HCC组和对照组血清中的外泌体,采用蛋白免疫印迹检测外泌体标记蛋白分子,透射电镜鉴定血清外泌体形态;实时荧光定量PCR方法检测两组血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平。计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U检验,计数资料两组间比较采用χ~2检验。采用Kaplan-Meier方法及logrank检验分析血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达与预后关系,采用Cox比例风险回归模型分析预后影响因素。结果血清来源的外泌体是直径为40～100 nm囊泡体,表达HSP70、Alix及CD63。HCC组血清来源外泌体中miRNA-221-3p较对照组表达水平升高,差异具有统计学意义(U=354.00,P0.001)。HCC患者血清外泌体miRNA-221-3p高表达与肿瘤大小(χ~2=6.016,P=0.014)、包膜侵犯(χ~2=7.580,P=0.006)和TNM分期(χ~2=6.340,P=0.012)有关。此外,血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平较高的HCC患者总体生存率较低,差异具有统计学意义(χ~2=17.105,P0.001)。多因素分析结果表明血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平(风险比=2.434,95%可信区间:1.178～5.027,P=0.016)及肿瘤分期(风险比=2.653,95%可信区间:1.222～5.760,P=0.014)是影响HCC患者预后的独立危险因素。结论 HCC患者血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平明显升高,对HCC诊断及预后判断具有参考价值。     

结直肠癌患者血清外泌体lnc-KIAA1586-2的表达及其临床意义

目的 探讨血清外泌体来源lnc-KIAA1586-2在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)患者中的表达水平及其临床意义。方法收集2019年1月至2020年12月临床明确诊断的110例CRC患者及同期100名健康体检者血清标本,同时收集所有患者的临床资料。qRT-PCR法检测血清外泌体中lnc-KIAA1586-2的表达水平,电化学发光法检测血清CEA与CA19-9的表达水平。采用ROC曲线评价不同指标的诊断效能,并分析其与患者临床病理特征的关系。采用Cox比例风险模型进行多变量回归分析。结果 CRC患者血清外泌体中lnc-KIAA1586-2的相对表达水平(2.96±0.13)显著高于健康对照组(1.56±0.11)(t=9.53,P<0.001),患者术后血清外泌体lnc-KIAA1586-2相对表达水平显著下降。ROC曲线分析结果表明,血清外泌体lnc-KIAA1586-2诊断CRC的AUC为0.832,显著优于传统肿瘤标志物CEA、CA19-9的诊断效能。单因素分析发现血清外泌体lnc-KIAA1586-2相对表达量与肿瘤长径(χ²...     

胃癌患者癌组织及血清中lncRNA EXOC7的表达及其临床意义

目的探讨胃癌患者癌组织及血清中lncRNA EXOC7的表达及其临床意义。方法选取郑州大学第五附属医院2016年1月至2018年6月收治的134例胃癌患者为研究对象,收集胃癌患者的癌组织、对应癌旁组织(距癌组织边缘≥1 cm)及血清样本,另将同期在我院体检的80名体检正常者作为对照组,采集血清样本,应用qRT-PCR技术检测组织及血清中lncRNA EXOC7的表达,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果 qRT-PCR结果显示,胃癌组织中lncRNA EXOC7的相对表达量(8.24±1.86)明显高于癌旁组织(2.37±0.81),且差异有统计学意义(t=33.494,P=0.000);胃癌患者血清中lncRNA EXOC7的相对表达量(4.29±0.47)明显高于对照组(0.92±0.23),且差异有统计学意义(t=74.553,P=0.000);不同性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤位置的患者胃癌组织及血清中lncRNA EXOC7表达水平比较,差异均无显著统计学意义(P0.05),但胃癌患者血清及癌组织中lncRNA EXOC7在不同临床分期、浸润深度、分化程度及有无脉管癌栓、淋巴结转移中的表达比较,差异有显著统计学意义(P0.05),即TNM分期越高、分化程度越低、浸润深度越深、有淋巴结转移、有脉管癌栓的患者,其胃癌组织及血清中lncRNA EXOC7表达水平越高。结论 lncRNA EXOC7在胃癌患者血清及癌组织中均呈高表达,其与胃癌恶性程度相关,可能成为胃癌早期诊断及病情判断的潜在指标。     

食管鳞状细胞癌患者血浆α-2-HS-糖蛋白和S100A9蛋白水平及意义

目的评估食管鳞状细胞癌(ESCC)血浆外泌体中表达上调的α-2-HS-糖蛋白(AHSG)和S100A9蛋白是否有潜力作为ESCC早期诊断的血浆外泌体肿瘤标志物。方法通过对46例ESCC血浆标本及46例健康对照组血浆标本差异蛋白进行Western印迹验证,如果结果与蛋白质组学结果一致,接着再利用酶联免疫吸附(ELISA)实验进行大样本的蛋白定量验证。结果 Western印迹实验结果表明,AHSG和S100A9在ESCC患者血浆外泌体中表达量与对照组相比明显升高。ELISA验证结果表明,ESCC组和对照组血浆外泌体中AGSH和S100A9浓度存在显著差异。结论两种蛋白可以作为ESCC早期诊断的血浆外泌体肿瘤标志物,但尚需进行更大批次临床样本的实验验证,同时还需要对这两种蛋白的特异性进行分析。     

巨噬细胞来源外泌体促进肝星状细胞活化及对血小板衍生生长因子表达的影响

目的探究巨噬细胞来源的外泌体对肝星状细胞活化的作用及其可能的机制。方法采用差异超速离心法提取巨噬细胞外泌体, 将外泌体与小鼠肝星状细胞株JS1细胞共培养, 设立磷酸盐缓冲液(PBS)对照组。细胞免疫荧光观察F-actin表达情况, 细胞活力检测(CCK8)法检测两组JS1细胞的存活率, western blot和RT-PCR法检测两组JS1细胞的活化指标[Ⅰ胶型原蛋白(ColⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]及其关键信号通路激活指标[转化生长因子(TGF)-β1/Smads、血小板衍生生长因子(PDGF)]的表达水平。两组间数据比较采用独立样本t检验。结果透射电镜观察外泌体膜结构清晰, 外泌体标志蛋白CD63、CD81表达阳性, 提示外泌体提取成功。外泌体与JS1细胞共培养, 与PBS对照组比较, 外泌体组JS1细胞的增殖率差异无统计学意义(P>0.05);外泌体组细胞F-actin表达明显增多;外泌体组JS1细胞α-SMA和ColⅠ的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P值均<0.05), PBS组和外泌体组α-SMA的mRNA相对表达量分别为0.25±0.07、1.4...     

肝癌细胞来源外泌体对肿瘤相关M2型巨噬细胞极化的影响

目的 探讨来源于肝癌细胞的外泌体对肿瘤相关巨噬细胞极化的影响，揭示肝癌形成新机制。方法 通过超速离心法分离肝癌细胞来源外泌体，透射电子显微镜、动态光散射粒度分析仪、蛋白免疫印迹法对外泌体表征进行鉴定；诱导巨噬细胞极化模型，实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法验证其极化状态。符合正态分布的计量资料两组间比较采用t检验；多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 透谢电子显微镜显示肝癌细胞来源外泌体为圆形或椭圆形囊泡结构，外泌体粒径大小为(172.65±2.34)nm,蛋白免疫印迹分析显示肝癌细胞来源的外泌体中标志蛋白TSG101和CD63呈高阳性表达。佛波酯15 ng诱导人源单核细胞巨噬细胞24 h贴壁后CD68表达显著增加(6.67±0.98 vs 1.00±0.25,t=11.20,P<0.001)。蛋白免疫印迹分析显示，相比对照组(L02来源外泌体组),HCC细胞来源外泌体(低、中、高3种剂量)诱导巨噬细胞表达M2型巨噬细胞标志物Arg-1、CD163均明显增加(P值均<0.05)。结论 肝癌细胞来源外泌体可促进巨噬细胞M2型极化。     

非小细胞肺癌患者外周血外泌体中差异表达的微小RNAs研究

背景目前,临床上尚缺乏早期、有效诊断非小细胞肺癌(NSCLC)的指标,来源于癌组织的外泌体及其内部物质因可反映亲本细胞性质而有望成为早期诊断肿瘤的生物学标志物。目的通过高通量测序技术筛选NSCLC患者外周血外泌体中差异表达的微小RNAs (miRNAs)。方法收集2018年1月—2019年1月于深圳市人民医院就诊的4例NSCLC患者的外周血样品,其中肺腺癌(LUAD) 2例、肺鳞状细胞癌(LUSC) 2例;另收集同期4例健康志愿者的外周血样品作为对照。采用HiSeq 2500高通量测序仪进行miRNAs测序,采用DESeq2软件筛选差异表达的miRNAs;在癌症基因组图谱(TCCGA)中选取并比较39对LUAD组织及其配对癌旁正常组织、45对LUSC组织及其配对癌旁正常组织miRNA-9-3p测序结果。结果 (1)高通量测序结果显示,4例NSCLC患者外周血外泌体中平均检测到776种miRNAs,4例健康志愿者外周血外泌体中平均检测到238种miRNAs。(2) LUAD与LUSC患者外周血外泌体中差异表达最显著的10种miRNAs中有6种是重合的,分别为miRNA-1228-5p、miRNA-129-5p、miRNA-760、miRNA-885-3p、miRNA-9-3p、miRNA-95-3p。(3) LUSC-1、LUSC-2、LUAD-1及LUAD-2外周血外泌体中miRNA-9-3p表达量分别为71.51、15.61、13.99、16.11转录本数,4例健康志愿者外周血外泌体中miRNA-9-3p表达量均为0。TCCGA中LUAD组织和LUSC组织miRNA-9-3p表达量均高于其配对癌旁正常组织(P0.01)。结论通过高通量测序技术发现miRNA-1228-5p、miRNA-129-5p、miRNA-760、miRNA-885-3p、miRNA-9-3p、miRNA-95-3p可能是NSCLC患者潜在的特异性miRNAs,其中miRNA-9-3p主要来源于NSCLC患者癌组织,这为后续通过外周血外泌体miRNAs测序而实现NSCLC的早期、无创诊断奠定了研究基础。     

特发性膜性肾病尿液外泌体表达及临床意义

目的探讨特发性膜性肾病(IMN)患者尿液外泌体的表达及临床意义。方法对2016年9月至2018年1月盛京医院肾病科住院的49例IMN患者(IMN组)及同期21例健康志愿者(对照组)通过差速离心方法提取尿液外泌体,通过Westernblot检测外泌体标记蛋白(Alix,CD63和TSG101)的表达,将其与24h尿蛋白定量,估计肾小球滤过率和肾组织病变等临床病理指标做统计分析。结果 IMN患者尿液外泌体较对照组显著增加[Alix(t=12.74,P 0.0001),CD63(t=13.98,P 0.0001),TSG101(t=15.68,P0.0001)],外泌体标记蛋白与蛋白尿呈正相关[Alix(r=0.451,P=0.002),CD6(r=0.408,P=0.002),TSG101(r=0.417,P0.001)];尿液外泌体蛋白浓度与蛋白尿呈正相关(r=0.635,P0.001)。肾组织补体C3和PLA2R荧光染色增强组较染色较弱组尿液外泌体表达均显著增加[分别为Alix(t=3.071,P=0.004; t=2.07,P=0.046),CD63(t=2.69,P=0.01; t=3.43,P=0.002),TSG101(t=3.493,P=0.001; t=2.202,P=0.036)];尿外泌体标记蛋白(Alix,CD63和TSG101)诊断IMN的ROC曲线下面积分别是0.922[95%CI(0.843～1.002),P0.001],0.936[95%CI(0.868～1.003),P0.001]和0.944[95%CI(0.893～0.996),P0.001]。随访研究表明尿外泌体在保守治疗无效组以及免疫制剂有效或无效组中表达均增加。结论尿液外泌体可反映IMN活动性肾组织病理改变,有希望成为IMN疾病诊断、病情评估和预后判断的非侵入性生物标志物。     

血清外泌体miR-338在老年食管癌中表达及诊断价值

目的探讨血清外泌体miR-338在老年食管癌中的表达水平及诊断价值。方法选取老年食管癌患者32例作为观察组,另选取同期治疗的老年食管良性病变患者35例为对照组。提取并鉴定血清外泌体,进一步提取血清外泌体中miR-338并采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)进行测定,比较两组miR-338水平。分析血清外泌体miR-338表达水平与临床病理参数关系的关系。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-338对老年食管癌的诊断价值。结果所提取样品具备外泌体特征。观察组血清外泌体miR-338表达水平显著低于对照组(P<0.05)。血清外泌体miR-338低表达组中年龄≥68岁患者比例、有淋巴结转移及临床Ⅲ～Ⅳ分期患者比例明显高于高表达组(P<0.05)。血清外泌体miR-338对老年食管癌诊断的曲线下面积(AUC)为0.918,灵敏度和特异度分别为84.5%、86.3%。结论老年食管癌患者血清外泌体miR-338低表达,有望成为临床诊断老年食管癌新型生物标志物。     

SMAD2和SGK3在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨细胞信号传导分子SMAD2和血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3(Serum and glucocorticoid-inducible protein kinase 3,SGK3)在非小细胞肺癌(Non small cell lungcancer,NSCLC)中的表达及临床意义。方法选取郑州市第六人民医院和安阳市肿瘤医院2010年6月至2013年6月收治的98例NSCLC患者作为研究对象,采用系统回顾性分析法分析所有患者的临床资料,根据其资料结果收集98例NSCLC患者其98份癌组织标本(研究组)及98份癌旁组织标本(对照组)作为研究对象,所有组织标本均行SMAD2与SGK3蛋白的检测,并分析二者的表达与NSCLC患者临床病理特征的关系。结果①NSCLC组织中SMAD2与SGK3蛋白阳性表达率分别为77. 55%和74. 49%,明显高于癌旁组织中SMAD2与SGK3蛋白阳性表达(17. 35%与15. 31%)(P 0. 05);②SMAD2蛋白表达与NSCLC患者性别、年龄、病理类型、肿瘤大小均无明显关系(P 0. 05); SMAD2蛋白表达与NSCLC患者肿瘤分化程度、淋巴结转移存在显著相关性(P 0. 05);③SGK3蛋白表达与NSCLC患者性别、年龄、病理类型、肿瘤大小均无明显关系(P 0. 05); SGK3蛋白表达与NSCLC患者肿瘤分化程度、淋巴结转移存在显著相关性(P 0. 05);④经单因素分析得出:低分化、淋巴结转移、SMAD2蛋白阳性表达、SGK3蛋白阳性表达患者生存时间均显著缩短(P 0. 05);⑤经多因素Cox分析得出:低分化、有淋巴结转移、SMAD2蛋白阳性、SGK3蛋白阳性均为影响NSCLC患者预后的独立危险因素(P 0. 05)。结论 SMAD2与SGK3蛋白在NSCLC组织中表达显著高于癌旁组织,其表达水平与NSCLC患者分化程度、淋巴结转移均有显著相关,可能参与了NSCLC的发生、发展。     

非小细胞肺癌患者血清可溶性细胞间粘附分子-1的水平及临床意义

目的　研究非小细胞肺癌 (NSCLC)患者血清可溶性细胞间粘附分子 - 1(sICAM - 1)水平的临床意义。方法　收集 5 1例不同TNM分期的NSCLC患者血清 ,双夹心ELISA法检测sICAM - 1水平。结果　NSCLC组血清sICAM - 1水平显著高于健康对照组 ,并与肺癌的临床分期有关。结论　sICAM - 1对肺癌的发展、转移有重要意义 ,可作为肺癌的一项预后指标     

肝细胞癌患者血清胸腺素β4水平

目的检测肝细胞癌（HCC）患者血清胸腺素β4（Tβ4）水平及其影响因素。方法采用ELISA方法检测80例HCC患者血清Tβ4水平,并与40例健康人及30例肝硬化患者比较。同时比较不同肿瘤情况及肝功能对HCC组患者血清Tβ4浓度的影响。结果 HCC患者及肝硬化患者血清Tβ4水平均低于健康人,差异有统计学意义（χ2=81.228,P〈0.001）。按照BCLC分期或CLIP分期将HCC患者分别分为4个或6个亚组,血清Tβ4浓度差异均有统计学意义（χ2=8.669～13.675,P〈0.034）。HCC患者中有肝内转移组血清Tβ4浓度高于无肝内转移组,差异有统计学意义（Z=2.264,P=0.024）;有门脉瘤栓组血清Tβ4浓度高于无门脉瘤栓组,差异有统计学意义（Z=2.574,P=0.010）。无肝内转移而且无远处转移的HCC患者按照肝功能Child-Pugh评分分为A、B、C级3组,血清Tβ4浓度差异有统计学意义（χ2=6.467,P=0.039）。结论肝细胞癌患者血清Tβ4浓度低于健康人,且肝功能越差,血清Tβ4浓度越低。而发生肝内转移或门脉瘤栓的患者血清Tβ4浓度高于未发生者。     

凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌患者血清中的表达

目的 通过检测凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌患者、肺炎患者及健康者血清中的含量,探讨Livin对于诊断非小细胞肺癌的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验对85例非小细胞肺癌患者、20例肺炎患者、20名正常健康人血清Livin水平进行检测.结果 非小细胞肺癌组血清Livin水平表达最高,肺炎组次之,健康对照组最低.三组间具有显著差异(P＜0.001).血清Livin浓度随着肿瘤分期的升高而升高.Ⅲ～Ⅳ期非小细胞肺癌患者血清Livin水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P＜0.05).结论 Livin作为一种凋亡抑制蛋白对非小细胞肺癌的诊断及判断患者预后具有一定的临床价值.     

人源Dickkopf-1原核表达产物在非小细胞肺癌患者血清中的应用研究

目的 探讨非小细胞肺癌患者血清中Dickkopf-1(DKK-1)自身抗体潜在的临床应用价值.方法 应用RT-PCR方法获得DKK-1 cDNA,构建原核表达载体pET30a(+)/DKK-1,亲和层析方法纯化蛋白,SDS PAGE电泳及Western blot鉴定,应用间接ELISA方法对38名键康志愿者和97例非小...     

人源Dickkopf-1原核表达产物在非小细胞肺癌患者血清中的应用研究

目的 探讨非小细胞肺癌患者血清中Dickkopf-1(DKK-1)自身抗体潜在的临床应用价值.方法 应用RT-PCR方法获得DKK-1 cDNA,构建原核表达载体pET30a(+)/DKK-1,亲和层析方法纯化蛋白,SDS PAGE电泳及Western blot鉴定,应用间接ELISA方法对38名键康志愿者和97例非小细胞肺癌患者血清中 DKK-1自身抗体进行检测.结果 DKK-1自身抗体在非小细胞肺癌患者血清中的阳性率为34.0%,特异性为84.2%;DKK-1自身抗体与非小细胞肺癌患者有无远处转移存在相关性(P＝0.006);DKK-1自身抗体和肿瘤标志物痛胚抗原联合检测的阳性率明显高于癌胚抗原与胃泌素释放肽前体、细胞角蛋白、神经元特异性烯醇化酶、鳞状细胞癌抗原进行联合检测的阳性率.结论 该研究成功构建原核表达载体pET30a(+)/DKK 1.并建立检测DKK-1自身抗体的ELISA方法.DKK-1自身抗体可能成为非小细胞肺癌诊断、治疗中一种有用的肿瘤标志物.     

非小细胞肺癌患者呼出气冷凝液中p53蛋白检测的临床意义

目的 研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者呼出气冷凝液(EBC)中p53蛋白检测的临床意义.方法 收集98例NSCLC患者的EBC和血浆,应用双抗体夹心ABC-ELISA法检测EBC和血浆中p53蛋白表达水平,并与98名健康对照者测定值比较.用免疫组化法检测98例NSCLC患者手术切除标本癌组织中p53蛋白表达.比较肺癌组中不同分型、分期、病理类型、肿瘤大小以及有无淋巴结转移、吸烟史者EBC和血浆中p53蛋白水平和癌组织p53蛋白阳性表达率.应用 ROC曲线分析肺癌组血浆及EBC的p53蛋白诊断肺癌的特异性及敏感性.结果 ①肺癌组EBC中p53蛋白测定值高于健康对照组[(233.99±7.91)ng/L vs(130.26±4.73)ng/L,P＜0.01];肺癌组血浆p53蛋白测定值高于健康对照组[(292.58±8.79)ng/L vs(141.66±3.33)ng/L,P＜0.01].②肺癌组中央型患者EBC中p53蛋白测定值高于周围型患者[(248.22±8.58)ng/L vs(215.78±6.61)ng/L,P＜0.05].③免疫组化阳性组EBC中p53蛋白测定值高于阴性组「(249.77±8.07)ng/L vs(216.86±7.44)ng/L,P＜0.05].④肺癌组中吸烟者血浆p53蛋白测定值高于无吸烟者[(310.18±9.04)ng/L vs(254.55±6.91)ng/L,P＜0.01].⑤癌组织p53蛋白阳性表达率为47.96%(47/98).⑥血浆p53蛋白对于肺癌的诊断的敏感性为95.90%.特异性为90.04%;EBC p53蛋白埘于肺癌的诊断的敏感性为92.90%,特异性为79.59%;肺癌患者p53蛋白诊断最佳参考临界值血浆为175.68 ng/L,EBC为166.26 ng/L.结论 NSCLC患者中EBC p53蛋白的检测有助于肺癌的诊断.

Abstract：

Objective To study the clinical significance of the detection of p53 protein in exhaled breath condensate (EBC) of patients with non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods EBC and plasma of 98 patients with NSCLC were collected,p53 protein expression in EBC and plasma was detected by enzyme-linked immunosorbent assay,and the data were compared with those of 98 healthy controls. p53 protein expression in cancer tissue of 98 patients with NSCLC was detected by immunohistochemistry. p53 protein expression in EBC and plasma and positive expression rate of p53 protein in cancer tissue were compared among patients with different lung cancer type,stage,histologic type,tumor size,and lymph node metastasis,smoking history. The specificity and sensitivity of diagnosis of p53 protein in patients with NSCLC were analyzed by ROC curve. Results ① The level of p53 protein in EBC of patients with NSCLC was significantly higher than that in healthy control group [(233.99±7.91) ng/L vs ( 130. 26 ± 4. 73) ng/L,P ＜0. 01]. The level of p53 protein in serum of patients with NSCI.C was significantly higher than that in healthy control group [(292. 58 ± 8. 79) ng/L vs (141. 66±3. 33) ng/L,P ＜0. 01]. ② The level of p53 protein in EBC of patients with central lung cancer was higher than that in patients with peripheral lung cancer [(248. 22 ± 8. 58) ng/L vs (215. 78 ± 6.61) ng/L,P＜0. 01]. ③The level of p53 protein in EBC of patients with positive immunostaining group was higher than that in negative group [(249.77 ± 8.07) ng/L vs (216.86 ± 7.44) ng/L,P ＜ 0. 05]. ④The level of p53 protein in serum of smokers was significantly higher than that in non-smokers [(310.18 ± 9.04) ng/L vs (254. 55 ± 6. 91) ng/L,P ＜0. 01]. ⑤The positive expression rate of p53 protein in cancer tissue was 47. 96% (47/98). ⑥The sensitivity and specificity of diagnosis of p53 protein were 95. 90% and 90. 04% in plasma,and those were 92. 90% and 79. 59% in EBC. The cut off values of p53 protein were respectively 175. 68 ng/L and 166. 26 ng/L in EBC and serum. Conclusions The detection of p53 protein in EBC of patients with NSCLC is helpful for the diagnosis of lung cancer.     

miR-1290 is a potential prognostic biomarker in non-small cell lung cancer

Background

miR-1290 is a newly discovered microRNA (miRNA), and its role in non-small cell lung cancer (NSCLC) remains unknown. This study aimed to evaluate the expression levels of miR-1290 in NSCLC tissues and serum, and explore its associations with clinicopathological characteristics and prognosis of NSCLC patients.

Methods

A total of 33 pairs of tissues and 73 serum samples were obtained from NSCLC patients and expression levels of miR-1290 were detected by specific TaqMan qRT-PCR. The relationship between miR-1290 expression levels in NSCLC tissues and serum and clinicopathological characteristics was estimated respectively. The correlation between serum miR-1290 expression levels and overall survival of NSCLC patients was performed by Kaplan-Meier analysis and Cox proportional hazards model.

Results

We determined that miR-1290 expression levels were increased significantly in NSCLC tissues compared with non-tumor adjacent normal tissues, and higher miR-1290 expression levels were positively correlated with high tumor stage (P=0.004) and positive lymph node metastasis (P=0.013). Compared with benign lung disease and healthy controls, serum levels of NSCLC patients exhibited higher expression of miR-1290. Furthermore, the up-regulation of serum miR-1290 more frequently occurred in NSCLC patients with high TNM stage, positive lymph node metastasis (P=0.022 and P=0.024, respectively). Kaplan-Meier analysis demonstrated that high serum miR-1290 expression levels predicted poor survival (P=0.022). Cox proportional hazards risk analysis indicated that miR-1290 was an independent prognostic factor for NSCLC.

Conclusions

Our study suggests that miR-1290 is overexpressed in NSCLC, and serum miR-1290 may be used as a potential prognostic biomarker for NSCLC.     

miR-618在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨微小RNA-618(miR-618)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平及临床意义。方法收集2012年1月-2014年1月我院NSCLC患者手术标本85例,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-618在85例NSCLC组织和其配对的癌旁组织中的表达水平,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Log Rank检验分析高低表达水平组的生存率差异。分析miRNA-618的表达水平与NSCLC临床病理参数的关系;多因素Logistic回归分析miRNA-618表达水平的影响因素。结果miRNA-618在NSCLC组织中的表达为(0.78±0.48),显著低于癌旁组织中的表达水平(0.99±0.57)(P<0.05)。miR-618低表达的NSCLC患者的术后5年总生存率为15.22%(7/46),显著低于miR-618高表达的NSCLC患者的33.33%(13/39)。miR-618低表达组中位OS(<28个月),低于miR-618高表达组中位OS(>36个月)(P<0.05)。miR-618在NSCLC组织中的表达水平与患者的年龄、性别、组织类型无关(P>0.05),与肿瘤大小、分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。Logistic回归显示:肿瘤大小、分化程度、TNM分期和淋巴结转移是miR-618表达的显著影响因素(P<0.05)。结论miRNA-618在NSCLC中表达下调,其表达与NSCLC发生发展、预后有关,miR-618可作为NSCLC诊断和预后预测新的靶点。     

Long non-coding RNA highly up-regulated in liver cancer promotes exosome secretion

BACKGROUND Highly upregulated in liver cancer(HULC) is a long non-coding RNA(lnc RNA)which has recently been identified as a key regulator in hepatocellular carcinoma(HCC) progression. However, its role in the secretion of exosomes from HCC cells remains unknown.AIM To explore the mechanism by which HULC promotes the secretion of exosomes from HCC cells.METHODS Serum and liver tissue samples were collected from 30 patients with HCC who had not received chemotherapy, radiotherapy, or immunotherapy before surgery.HULC expression in serum exosomes and liver cancer tissues of patients was measured, and compared with the data obtained from healthy controls and tumor adjacent tissues. The effect of HULC upregulation in HCC cell lines and the relationship between HULC and other RNAs were studied using q PCR and dualluciferase reporter assays. Nanoparticle tracking analysis was performed to detect the quantity of exosomes.RESULTS HULC expression in serum exosomes of patients with HCC was higher than that in serum exosomes of healthy controls, and HULC levels were higher in liver cancer tissues than in tumor adjacent tissues. The expression of HULC in serum exosomes and liver cancer tissues correlated with the tumor-node-metastasis(TNM) classification, and HULC expression in tissues correlated with that in serum exosomes. Upregulation of HULC promoted HCC cell growth and invasion and repressed apoptosis. Notably, it also facilitated the secretion of exosomes from HCC cells. Moreover, q PCR assays showed that HULC repressed micro RNA-372-3 p(mi R-372-3 p) expression. We also identified Rab11 a as a downstream target of mi R-372-3 p. Dual-luciferase reporter assays suggested that mi R-372-3 p could directly bind both HULC and Rab11 a.CONCLUSION Our findings illustrate the importance of the HULC/mi R-372-3 p/Rab11 a axis in HCC and provide new insights into the molecular mechanism regulating the secretion of exosomes from HCC cells.     

肺癌患者血清多效蛋白表达水平及其临床意义

目的探讨血清多效蛋白(PTN)在肺癌患者中的表达及其临床意义。方法采用ELISA检测57例非小细胞肺癌(NSCLC)患者、20例小细胞肺癌(SCLC)患者和12例正常对照组血清PIN水平,分析其对肺癌的诊断价值及与NSCLC病理分期和手术的关系。结果正常对照组PTN水平明显低于SCLC组(P0.001)和NSCLC组(P=0.003),并且SCLC组PTN水平显著高于NSCLC组(P=0.010)。ROC曲线分析PTN对肺癌诊断的AUC为0.821(95%CI 0.730~0.913)(P0.001);对NSCLC诊断的AUC为0.794(95%CI 0.684~0.904)(P=0.001);对SCLC诊断的AUC为0.900(95%CI 0.783~1.000)(P0.001)。NSCLC患者PTN水平与病理分期(P0.001)和肿瘤远处转移(P=0.019)密切相关,与病理类型和淋巴结转移无关(P0.05)。NSCLC患者手术后PTN水平较手术前明显降低(P0.001)。结论血清PTN可作为诊断肺癌的指标,PTN还可用于NSCLC病情监测和疗效判断。