非小细胞肺癌移植瘤侵袭组织中血清蛋白的分布

目的：局部侵袭是肺癌患者死亡的主要原因之一,本研究探讨肺癌侵袭组织中血清蛋白的分布及其与血管内皮生长因子（VEGF）和表皮生长因子受体（EGFR）蛋白的关系。方法：建立非小细胞肺癌（NSCLC） A549细胞注射裸鼠背部皮下的异种移植模型,利用活体冷冻技术（IVCT）制备标本,免疫组化分析Albumin、IgG、IgM、VEGF、EGFR蛋白分布。结果：观察到NSCLC侵袭组织周围结缔组织、血管、间质及细胞外基质有Albumin和IgG1、IgM主要在侵袭组织周围结缔组织和血管内,癌细胞外基质未观察到IgM。肺癌细胞浆内VEGF蛋白呈细颗粒状,但是癌细胞浆和膜未观察到EGFR蛋白分布。结论：利用IVCT技术能清晰观察到侵袭组织周围结缔组织、血管和细胞外基质中不同分子量血清蛋白分布,NSCLC侵袭组织细胞外基质Albumin、IgG1和IgM免疫组织化学染色分布主要依据其分子量,与VEGF和EGFR蛋白分布无关。     

YC-1对人肝细胞癌裸鼠移植瘤的影响及其机制

目的探讨缺氧诱导因子抑制剂（YC-1）对人肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤的影响及其相关机制。方法用人肝癌细胞株SMMC-7721建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,待肿瘤生长至约（100~150）mm3时,将荷瘤裸鼠随机分为两组：实验组和对照组,分别给予YC-1和二甲基亚砜,观察两组裸鼠肿瘤生长情况;应用RT-PCR、Western blot及免疫组织化学方法检测移植瘤组织HIF-1α和VEGF表达。结果YC-1治疗组各时点肿瘤体积显著低于对照组(P<0. 05 );与对照组比较,实验组移植瘤组织HIF-1α mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),而HIF-1α蛋白的表达显著降低 (P<0. 05 );移植瘤组织VEGFmRNA及蛋白表达均显著低于对照组 (P<0. 05 )。结论YC-1可能通过下调HIF-1α和VEGF的表达来抑制肝癌的生长。     

缺氧诱导因子-1α、VEGF在进展期胃癌中的表达及意义

目的揭示进展期胃癌中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达规律,分析其与胃癌临床病理特征的关系,以探讨HIF-1α蛋白在胃癌血管形成中的作用.方法应用免疫组化方法检测50例胃癌组织HIF-1α、VEGF蛋白及微血管密度(MVD)的表达.结果胃癌组织HIF-1α蛋白与VEGF阳性表达率分别为68%(34/50)和62%(31/50),MVD平均计数为23.14±11.58;HIF-1α表达与淋巴结转移有关(P＜0.05);VEGF、MVD表达与肿瘤浸润深度(P＜0.05)、淋巴结转移(P＜0.05)和PTNM临床分期(P＜0.05)密切相关;HIF-1α与VEGF表达密切相关(x2=4.96,P＜0.05);HI-1α或VEGF表达阳性的MVD值显著高于阴性组(P＜0.05).结论HIF-1α、VEGF是反映胃癌浸润转移等生物学行为的重要指标,HIF-1α诱导VEGF表达从而促进肿瘤血管生成可能参与胃癌的进展.     

HIF-1α对乳腺癌细胞增殖及血管生成影响的探讨

目的:通过检测乳腺组织缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor,HIF-1α)、Ki-67和血管内皮生长因子(vas-cular endothelial growth factor,VEGF)的表达情况,探讨HIF-1α对乳腺癌细胞增殖及血管生成的作用机制。方法:采用免疫组化法检测70例乳腺癌组织及其癌旁组织和10例正常乳腺组织中HIF-1α、Ki-67和VEGF的表达情况。结果:HIF-1α在乳腺癌组织中阳性表达率为78.6%(55/70),在癌旁组织中为45.7%(32/70);Ki-67在乳腺癌组织中阳性表达率为88.6%(62/70),在癌旁组织中为11.4%(8/70);VEGF在乳腺癌组织中阳性表达率为65.7%(46/70),在癌旁组织中为34.3%(24/70)。HIF-1α、Ki-67和VEGF在乳腺正常组织中均未见表达,结果表明,三者在癌组织中的表达显著高于癌旁及正常组织,差异均有统计学意义,P值均<0.01;且与临床分期和淋巴结转移情况密切相关,P<0.05。HIF-1α与Ki-67、VEGF在乳腺癌组织中的表达呈中高度相关,关联系数分别为0.65和0.48;且随着HIF-1α表达增强,Ki-67和VEGF的表达也有增强趋势,P<0.01。结论:乳腺癌组织中HIF-1α、Ki-67和VEGF高表达,与组织恶性程度相关,提示HIF-1α、Ki-67和VEGF可能成为预测乳腺癌发生发展、侵袭转移和预后的重要指标;缺氧可能通过某些机制影响乳腺癌细胞增殖及血管生成,HIF-1α可望成为乳腺癌治疗的一个新靶点,值得进一步研究。     

CAIX在NSCLC中的表达及其与VEGF和Ki67表达的相关性

背景与目的已有的研究表明CAIX与肿瘤的乏氧代谢密切相关,细胞核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen,Ki67)被认为是能较可靠、全面地反映细胞群体增殖活性的客观指标;血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与肿瘤血管生成呈正相关,本研究通过分析其与肺癌患者临床特点及与VEGF、Ki67表达的相关性,了解CAIX在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中表达的意义.方法应用免疫组化SP方法检测76例NSCLC组织(33例鳞癌、43例腺癌)中CALX、VEGF和Ki67表达及10例肺炎性假瘤中CAIX表达.结果 76例NSCLC组织中CAIX、VEGF和Ki67表达阳性率分别为46.1%、72.4%和39.5%;肺癌组织中CAIX表达明显高于炎性假瘤组(P<0.001);CAIX蛋白阳性表达率在鳞癌组和腺癌组表达分别为69.7%和27.9%(P=0.001);在接受放疗的34例患者中,CAIX阳性组和阴性组放疗客观反应率分别为27.8%和62.5%(P=0.042);CAIX蛋白表达与VEGF表达呈正相关(r=0.231,P=0.043),但与Ki67表达无相关性(r=0.064,P=0.583).结论 CAIX在NSCLC组织中表达较良性组织水平明显上升,并与VEGF表达相关;CAIX蛋白表达与放疗客观反应率相关,为乏氧增加NSCLC的放疗抗拒提供了新的证据.     

非小细胞肺癌99Tcm-HL91 SPECT乏氧显像中HL91摄取程度与乏氧诱导因子1α和血管内皮生长因子表达的关系

目的 探讨99Tcm-4,9-二氮-3,3,10,10-四甲基十二烷-2,11-二酮肟(99Tcm-HL91)单光子发射计算机断层显像(SPECT)乏氧显像T/N比值与非小细胞肺癌(NSCLC)组织中乏氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的关系,以及HIF-1α的表达与肿瘤生物学行为的相关性.方法 20例NSCLC患者于根治性手术治疗前1～2 d行99Tcm-HL91单光子发射计算机断层显像(SPECT)检查,采集注射740 MBq99Tcm-HL91后2、4和6 h的前后位及侧位图像,利用感兴趣区(ROI)技术分别勾画显像阳性患者各时相肿瘤(T)和对侧相应部位(N)ROI,计算T/N比值.术后取肿瘤组织,采用免疫组化法检测HIF-1α和VEGF的表达.结果 20例NSCLC患者中,1例类癌患者99Tcm-HL91 SPECT乏氧显像阴性,其余患者显像均为阳性.免疫组化检测结果 显示,HIF-1α阳性表达13例,VEGF阳性表达15例.99Tcm-HL91显像T/N比值与NSCLC组织中HIF-1α的表达有关(P=0.046),而与VEGF的表达无关(P=0.961),HIF-1α表达与VEGF表达呈正相关(rs=0.494,P=0.027).NSCLC组织中HIF-1α的表达强度与NSCLC有无淋巴结转移有关(P=0.02),而VEGF表达与NSCLC有无淋巴结转移无关(P=0.10);在不同组织病理类型间,VEGF和HIF-1α的表达差异无统计学意义(P=0.67,P=0.81);HIF-1α和VEGF的表达强度随临床分期增高而增强(P=0.03,P=0.01).结论 99Tcm-HL91摄取程度与NSCLC组织中HIF-1α的表达有关,HIF-1α表达率与VEGF表达呈正相关.NSCLC组织中,HIF-1α的表达随临床分期增高而增强.     

HIF-1α对人肝癌 HepG2 细胞生长的影响

目的研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对人肝癌细胞株HepG2体内生长的影响,并探讨其可能机制.方法将HIF-1α转入人肝癌细胞HepG2中,建立人肝癌裸鼠模型,观察其生长.切除瘤灶、称瘤重.标本用免疫组化和western-blot检测HIF-1α和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达.结果HepG2细胞对HIF-1α敏感,细胞生长速度加快.结论 HIF-1α体内可促进肝癌HepG2的生长,其机制可能与其促血管生成有关.     

重组人血管内皮抑制素对小鼠移植瘤及正常组织中血管相关因子影响的比较

  目的  观察重组人血管内皮抑制素(rh-endostatin, 商品名: 恩度, endostar)的抗肿瘤及抗血管生成效应, 比较其对移植瘤、心肌及肾脏组织中神经型一氧化氮合成酶(neuron NOS, nNOS)、内皮型一氧化氮合成酶(endothelial NOS, eNOS)mRNA、血管生成因子表达和微血管密度及结构的影响, 探讨其对心血管系统不良反应的原因。   方法  将36只小鼠随机分为空白对照组(不接种瘤块, 注射生理盐水)、药物对照组(不接种瘤块, 注射恩度)、模型组(接种瘤块, 注射生理盐水)和实验组(接种瘤块, 注射恩度), 每日1次, 处理28天。实验前、后称量小鼠体重, 测量移植瘤体积; Real-time PCR法检测各组小鼠移植瘤、心脏及肾脏组织中nNOS、eNOSmRNA的表达量, 免疫组化法检测小鼠移植瘤及肾脏组织中基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9、缺氧诱导因子HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况, CD34标记血管内皮细胞计数微血管密度(MVD); 以CD34与Masson双色染色法观察微血管结构的变化。   结果  1) 实验组移植瘤体积增长(75.60 mm3)小于模型组(131.89mm3), 差异有统计学意义(P=0.030);各组小鼠体重变化无显著性差异(P=0.609)。2)药物对照组及实验组小鼠肾脏组织中nNOS及eNOSmRNA表达量均下调(P < 0.05), 心肌组织中nNOSmRNA表达下调(P < 0.05)、eNOSmRNA却未见明显变化; 各组小鼠移植瘤组织中nNOS及eNOSmRNA表达的差异均无统计学意义。3)移植瘤组织中MMP-9和VEGF蛋白的表达显著降低, MMP-2、HIF-1α及各组小鼠肾脏组织MMP-2、MMP-9、HIF-1α、VEGF表达无明显变化; 移植瘤组织的MVD显著降低, 胶原覆盖血管的比例升高, 而肾脏组织中MVD和结构几乎无变化。   结论  重组人血管内皮抑制素可下调移植瘤组织中MMP-9和VEGF蛋白的表达、降低MVD, 抑制移植瘤的生长, 并可使移植瘤血管趋向成熟, 但不能降低肾脏组织中血管生成相关因子的表达、亦不能改变肾脏组织的MVD及微血管结构; 其可下调心脏及肾脏组织NOSmRNA的表达, 可能为应用中导致血压变化的原因之一。      

HIF-1 α、VEGF及Ki-67在脑星形胶质瘤的表达

[目的]研究HIF-1α、VEGF及Ki-67在星形胶质瘤中表达情况以及它们与某些临床因素的关系。[方法]应用免疫组化法检测71例星形胶质瘤中HIF-1α、VEGF及Ki-67蛋白表达情况。[结果]HIF-1α、VEGF在星形胶质瘤中的阳性表达率分别57.7%和64.8%,在不同恶性级别组中差异均具有显著性,与肿瘤的恶性程度相关。Ki-67在胶质瘤中的阳性表达率为100%,Ki-67LI为0.4%～89%。HIF-1α和VEGF、Ki-67正相关。Ki-67与VEGF呈正相关性。[结论]HIF-1α通过对VEGF、Ki-67作用促进胶质瘤血管生成和肿瘤细胞增殖,三者在肿瘤的恶性进展过程中起作用。     

姜黄素对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤放射增敏的作用

背景与目的:姜黄素(curcumin)能有效增强放射线对肿瘤的作用,但其作用机制尚不清楚。该研究旨在探讨姜黄素是否对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤有放射增敏效应,并探讨其协同抑制效应的机制。方法:人乳腺癌裸鼠移植瘤模型建立成功后,将裸鼠随机分为4组:对照组、药物组、放射组和联合组(姜黄素+放射),每组6只;检测裸鼠移植瘤的体积及体质量,计算抑瘤率,并绘制移植瘤的生长曲线;免疫组织化学法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)及缺氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)的蛋白表达。结果:联合组的抑瘤率[(71.62±6.11)%]显著高于放射组[(41.76±5.84)%](P<0.05)。免疫组化结果显示,单纯放射不能使VEGF表达下调(P>0.05),姜黄素联合放射能明显抑制VEGF的表达(P<0.01)。Western blot结果显示,姜黄素与放射均可抑制MMP-9的表达,两者联用较单纯放射效果更加显著(P<0.05);单纯放射不能抑制HIF-1α的表达(P>0.05),姜黄素联合放射HIF-1α蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:姜黄素可以增强乳腺癌裸鼠移植瘤的放射敏感性,其机制可能是通过下调VEGF、MMP-9和HIF-1α的蛋白表达而发挥作用。     

Lewis y抗原促进卵巢癌细胞RMG-I血管内皮生长因子受体的表达

目的:探讨α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosyltransferase,α1,2-FT)基因转染对卵巢癌细胞系RMG-I血管内皮生长因子受体(VEGFR)的影响.方法:利用已经建立的α1,2-岩藻糖转移酶及Lewis y稳定高表达的RMG-I-H细胞系、裸鼠移植瘤模型,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定基因转染前后细胞中VEGFR mRNA的变化,采用免疫组织化学法测定基因转染前后细胞及裸鼠移植瘤组织中VEGFR蛋白的变化.结果:基因转染后细胞中KDR mRNA表达明显增高(P<0.01),细胞、裸鼠移植瘤组织中KDR蛋白表达也明显增高,差异有统计学意义(P<0.01).结论:Lewis y抗原可能通过VEGF的自分泌和旁分泌途径引起KDR受体数目增多,从而促进肿瘤血管生成,介导卵巢癌的生长、侵袭、转移和耐药等生物学行为.     

JAK2/STAT3信号通路对A549细胞株中HIF-1α、VEGF蛋白表达的影响

目的:研究人肺腺癌细胞A549细胞中JAK2/STAT3信号通路对HIF-1α、VEGF蛋白表达的影响.方法:AG490处理在氧含量正常及缺氧条件下(CoCl2 200μmol/L)48h后Western blot法测定A549细胞中HIF-1α、VEGF蛋白表达变化(分组为对照组、AG490 50μmol/L、AG490 100μmol/L、CoCl2、CoCl2+AG49050μmol/L和CoCl2+AG490 100μmol/L组).IL-6 (3.85nmol/L)处理A549细胞24h后,检测细胞中STAT3、p-STAT3、HIF-1α、VEGF蛋白表达变化(分组为对照组,IL-6组).结果:JAK2特异性抑制剂AG490作用48h后,相对于对照组AG490能够下调HIF-1α、VEGF的蛋白表达,且呈浓度依赖性;随浓度的升高,抑制作用更明显.缺氧条件下(CoCl2200μmol/L)能够上调HIF-1α、VEGF的蛋白表达.AG490也能够下调CoCl2诱导的HIF-1α、VEGF的蛋白表达,且呈浓度依赖性,随浓度的升高,抑制作用更显著.IL-6能够上调HIF-1α、VEGF的蛋白表达.结论:在人肺腺癌细胞A549细胞中,缺氧可上调HIF-1α和VEGF蛋白表达.JAK2/STAT3信号通路对HIF-1α和VEGF蛋白的表达具有调节作用.     

CTX小剂量化疗在抗肺癌血管生成中的作用

目的：研究小剂量环磷酰胺（CTX）对肺癌血管生成的影响及其机制。方法：培养人肺腺癌A549细胞，建立裸鼠移植瘤模型，随机分为小剂量CTX组、大剂量CTX组和对照组进行化疗，观察裸鼠体重变化和抑瘤效果，免疫组化检测肿瘤微血管密度（MVD）、缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor 1 alpha，HIF-1α）和VEGF的表达。结果：小剂量组肿瘤生长缓慢，体重减轻等副作用明显小于大剂量组和对照组（P〈0．01或P〈0．05）；与大剂量组、对照组比较，小剂量组MVD、HIF-1α和VEGF表达均明显减少（P〈0．01），且小剂量组移植瘤中HIF-1α和VEGF、HIF-1α和MVD、VEGF和MVD之间均有相关性。结论：与大剂量组和对照组相比，小剂量CTX化疗组能更显著地抑制肺癌血管生成，抑瘤效果更明显，其机制可能与下调HIF-1α蛋白表达有关。     

雷帕霉素抑制人宫颈癌裸鼠移植瘤生长的作用及其机制北大核心CSCD

目的探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对人宫颈癌HeLa裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其可能的机制。方法裸鼠皮下接种HeLa细胞,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为对照组、RAPA低剂量组(1.5 mg/kg)、RAPA高剂量组(4.5 mg/kg)。RAPA治疗过程中,检测肿瘤的体积、质量,免疫组织化学法及RT-PCR法检测低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)mRNA、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA的表达及肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)。结果 RAPA低剂量组、高剂量组肿瘤生长曲线均减缓;RAPA低剂量组及高剂量组裸鼠皮下移植瘤平均体积、重量与对照组比较显著减小(P<0.01);低剂量组与高剂量组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。RAPA低剂量组及高剂量组VEGF蛋白、VEGF及HIF-1α含量、MVD与对照组比较显著减少(P均<0.01),低剂量与高剂量组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RAPA对裸鼠皮下移植瘤生长(体积、重量)具有明显的抑制作用,其可能机制是通过抑制HIF-1α的表达抑制VEGF的合成,进而抑制肿瘤组织的血管形成。     

缺氧对骨肉瘤SaOS-2细胞系HIF-1α和VEGF表达的影响

目的：观察缺氧条件下骨肉瘤SaOS-2细胞系缺氧诱导因子HIF-1α和血管生长因子VEGF表达的变化。方法：建立骨肉瘤细胞体外缺氧培养模型，观察缺氧培养不同时相(8、16、24h)HIF-1α和VEGF的表达。半定量RT—PCR方法检测HIF-1α和VEGF mRNA的转录水平，免疫组化(SP法)和免疫印迹(Western blot)检测HIF-1α蛋白表达情况，免疫组化和ELISA法检测细胞和培养上清液中VEGF蛋白表达。结果：缺氧处理后，HIF-1α mRNA转录水平没有明显改变，蛋白表达随缺氧时间延长而升高。VEGF mRNA以及蛋白的表达在缺氧条件下均显著增强。结论：骨肉瘤细胞系SaOS-2在缺氧条件下．缺氧诱导因子HIF-1α和血管牛长因子VEGF蛋白表达上调。     

过表达缺氧诱导因子-1α的结直肠癌裸鼠可视化模型的建立

目的:建立一种荧光可视化显像且稳定过表达缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的裸鼠结直肠癌移植瘤模型。方法:对不同的人结直癌细胞系(SW480、SW620、LOVO及HCT116细胞)用缺氧诱导剂Co Cl2处理,根据HIF-1α被诱导表达的情况选择合适的靶细胞;将HIF-1α的c DNA序列克隆至慢病毒表达质粒p LV-TRC-EGFP,构建p LVHIF1α-EGFP慢病毒表达质粒,并包装过表达HIF-1α的慢病毒颗粒Lenti-HIF1α-EGFP。将Lenti-HIF1α-EGFP感染SW480细胞,嘌呤霉素筛选稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,Western blotting检测SW480HIF-1α细胞内HIF-1α及其下游蛋白VEGF、M1型丙酮酸激酶(pyruvate kinase expression M1,PKM1)的表达情况,Transwell实验检测其迁移能力。裸鼠腹腔注射SW480HIF-1α建立结直肠癌移植瘤模型,倒置荧光显微镜观察裸鼠腹腔移植瘤结节。结果:常氧条件下4种结直肠癌细胞均不表达HIF-1α,经Co Cl2诱导后,除SW480细胞系以外的细胞均可被诱导表达HIF-1α,故选择SW480细胞作为研究靶细胞。成功构建稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,SW480HIF-1α细胞内HIF-1α、VEGF和PKM1的表达水平均高于野生型SW480细胞,其迁移能力较野生型SW480细胞显著增强[观察视野内迁移细胞数:(250±11)vs(50±5)个,P<0.01]。SW480HIF-1α组裸鼠肠壁形成肿瘤结节数量显著多于SW480组[(15±4)vs(4±1)个,P<0.05]。结论:成功建立了高表达HIF-1α的荧光可视化裸鼠移植瘤模型,为进一步的相关功能学研究以及药物筛选提供条件。     

缺氧诱导因子1α在食管鳞癌组织中的表达及其与VEGF、MVD的关系

目的 探讨食管鳞癌组织中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、VEGF的表达及其与微血管密度(MVD)、肿瘤临床病理特征之间的关系.方法 采用免疫组化方法检测56例食管鳞癌及20例癌旁正常黏膜中HIF-1α、VEGF的表达,用Endoglin(CD105)单克隆抗体标记血管内皮细胞并计数MVD,分析其间的相关性及其与肿瘤临床病理特征之间的相关性.结果 食管鳞癌组织中HIF-1α和VEGF的阳性表达率显著高于正常组织(P＜0.01);HIF-1α和VEGF的表达均与淋巴结转移和TNM分期呈正相关(P＜0.05);VEGF的表达还与肿瘤浸润深度正相关(P＜0.05);HIF-1α的表达与VEGF的表达和MVD值呈正相关(P＜0.01).结论 HIF-1α及其靶基因VEGF在食管癌组织中明显上调,与肿瘤新生血管密切相关,HIF-1α可能通过诱导VEGF的表达参与食管鳞癌的血管生成,在食管癌的发生、发展及浸润过程中起了重要作用;联合检测HIF-1α和VEGF可能成为判断食管鳞癌生物学行为及预后的重要指标.     

乳腺癌缺氧诱导因子-1α、Ki-67表达与超声声像特征的关系

目的探讨乳腺癌患者乳腺癌组织中的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Ki-67蛋白的表达与超声声像特征的关系。方法对110例乳腺癌患者进行超声检查,观察患者的毛刺征、肿块形态、钙化灶形态和血流显像分级等。取110例乳腺癌患者的乳腺癌组织,免疫组化法检测HIF-1α、Ki-67蛋白的阳性表达率。分析不同超声声像特征乳腺癌患者乳腺癌组织中HIF-1α、Ki-67蛋白的表达情况。结果110例乳腺癌患者中,43例既存在Ki-67蛋白阳性表达又存在HIF-1α蛋白阳性表达,35例仅存在Ki-67蛋白阳性表达,13例仅存在HIF-1α蛋白阳性表达,Ki-67、HIF-1α蛋白阴性表达患者共19例。乳腺癌患者乳腺癌组织中Ki-67蛋白的阳性表达率为70.91%(78/110),HIF-1α蛋白的阳性表达率为50.91%(56/110)。不同肿块形态、钙化灶形态、血流显像分级乳腺癌患者乳腺癌组织中Ki-67蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同血流显像分级乳腺癌患者乳腺癌组织中HIF-1α蛋白阳性表达率比较,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论乳腺癌患者乳腺癌组织中HIF-1α的表达可能与血流显像分级有关,Ki-67的表达可能与肿块形态、钙化灶形态及血流显像分级有关。     

缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及相关性

目的 本研究旨在探讨乳腺癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达;它们的内在相关性及其与乳腺癌生物学行为之间的关系.方法 采用免疫组织化学S-P方法检测119例乳腺癌和10例乳腺良性肿瘤组织中HIF-1α和VEGF的表达.结果 119例乳腺癌组织中HIF-1α和VEGF阳性表达率均为50.42%(60/119),显著高于乳腺良性肿瘤组织0/10;HIF-1α和VEGF的阳性表达率与乳腺癌患者临床分期、淋巴结转移情况和5年生存率密切相关(P＜0.01);HIF-1α表达与VEGF呈正相关(P＜0.01).结论 在缺氧状态下,乳腺癌组织中HIF-1α基因被激活,过渡表达HIF-1α蛋白,并通过VEGF的上调而刺激肿瘤新生血管的生成,使肿瘤耐受缺氧,促进乳腺癌的转移.HIF-1α和VEGF的表达与乳腺癌的生物学行为有关,可能成为预测乳腺癌侵袭、转移和预后的重要指标.     

RNA干扰HIF-1α降低宫颈癌细胞基质金属蛋白酶-2的表达

背景与目的:缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1alpha,HIF-1α)是普遍存在于实体瘤组织中的缺氧应答调控因子,在维持细胞能量代谢、肿瘤血管生成及转移、细胞增殖与凋亡等诸多方面起着重要作用。本研究探讨RNA干扰HIF-1α对基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在宫颈癌HeLa细胞中表达的影响,初步探讨其机理。方法:①将15只裸鼠随机分为3组,分别用HeLa细胞、pGenesil-1-HeLa细胞和HIF-1α-HeLa细胞接种。②用免疫组化法检测各组移植瘤组织中HIF-1α、上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、钙紧张素(β-catenin)和MMP-2的表达。③将HeLa细胞、pGenesil-1-HeLa细胞,HIF-1α-HeLa细胞分别在乏氧(1%O2)及常氧条件下培养48h,用Western blot检测各组细胞中HIF-1α、E-cadherin、β-catenin和MMP-2的表达。结果:①免疫组化法检测结果显示,接种HeLa细胞、pGenesil-1-HeLa细胞和HIF-1α-HeLa细胞的裸鼠移植瘤组织中HIF-1α的表达分别为(69.0±12.1)%、(62.8±12.3)%、(17.4±8.8)%,E-cadherin的表达分别为1.00±0.07、1.00±0.10、3.21±0.25,β-catenin的表达分别为4.21±0.92、4.31±0.87、1.29±0.72,MMP-2的表达分别为4.84±0.67、4.50±0.71、1.00±0.83。②HIF-1α和MMP-2的表达呈正相关(r=0.521,P=0.035)。③Western blot分析结果显示,在抑制HIF-1α表达的HIF-1α-HeLa细胞中,乏氧与常氧条件下HIF-1α、β-catenin和MMP-2蛋白低表达,E-cadherin蛋白高表达;而在HeLa细胞和pGenesil-1-HeLa细胞中得到相反的结果。结论:在人宫颈癌HeLa细胞中干扰HIF-1α后MMP-2的表达下降。