BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移的关系

目的分析BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌（PTC）中央区淋巴结（CLN）转移的关系,探讨CLN转移的危险因素。方法检测104例PTC病例BRAFV600E基因突变情况,分析该突变与PTC临床病理特征、超声特征的关系,单因素及多因素分析CLN转移的危险因素。结果BRAFV600E基因突变与肿瘤最大径、肿瘤钙化、被膜外侵犯及CLN转移相关（P < 0.01）,BRAFV600E基因突变和被膜外侵犯是CLN转移的独立因素（P < 0.01）。结论BRAFV600E基因突变可为PTC手术CLN清扫提供基因依据。     

中国期刊全文数据库节点文献BRAF^V600E基因突变及p27蛋白表达与甲状腺乳头状癌颈淋巴结转移的关系

目的：研究甲状腺乳头状癌（PTC）中BRAFV600E基因突变及p27蛋白表达并评估在PTC颈淋巴结转移危险因素中的意义。方法：采用PCR-SSCP、DNA序列分析、免疫组化等技术,检测83例PTC标本中BRAFV600E基因突变和p27蛋白染色状况。结果：单因素结果提示PTC颈淋巴结转移情况在年龄、临床分期、BRAFV600E基因突变和p27蛋白表达的差异上有统计学意义（P〈0.05）。而在性别、原发肿瘤直径和病灶单双叶的差异则无明显意义（P〉0.05）。多因素分析结果提示年龄（P=0.009）、BRAFV600E基因突变（P=0.031）和p27蛋白表达（P〈0.001）作为评估甲状腺乳头状癌颈淋巴结转移危险因素上的差异有显著性。结论：BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌的发生发展密切相关,BRAFV600E基因突变及p27蛋白低表达可以作为评估PTC颈淋巴结转移的危险因素。     

Ras与NIS在甲状腺乳头状癌癌旁组织中的表达

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)癌旁组织Ras及钠碘同向转运体(NIS)蛋白的表达及意义。方法收集2008年1月1日—2011年12月1日我院病理科PTC石蜡包埋切块62例,其中PTC癌旁组织为正常甲状腺组织者34例(G正常组),癌旁组织为结节性甲状腺肿组织者28例(G结甲组)。采用免疫组化方法检测两组癌旁组织中Ras及NIS蛋白表达,结果以免疫组化评分(IHS)表示。结果 Ras蛋白在G正常组和G结甲组IHS得分分别为(5.65±3.45)和(4.52±2.28)分,两组比较无统计学差异(t=0.192,P>0.05);NIS蛋白在G正常组和G结甲组IHS得分分别为(7.78±3.97)和(4.93±2.05)分,两组比较差异有显著性(t=2.128,P<0.05)。结论伴有不同周围组织背景的PTC在术后清甲治疗中对放射碘治疗敏感性可能有所不同,伴有结节性甲状腺肿的PTC病人清甲治疗效果相对较差。     

甲状腺乳头状癌并BRAFV600E突变及原癌基因重排蛋白表达与其侵袭性的关系

目的探讨BRAFV600E突变及原癌基因重排(RET)蛋白表达并存与甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭性的关系。方法收集50例PTC患者术后病理,分别用RT-PCR检测BRAFV600E突变,免疫组织化学SP法检测RET表达情况。分析BRAFV600E突变合并RET表达组(n=24)和BRAFV600E单突变或RET单表达组(n=19)的临床及病理特征。结果 BRAFV600E突变率、RET表达率分别为76%(38/50)、56%(28/50),存在BRAFV600E突变合并RET表达者占48%(24/50)。与BRAFV600E突变合并RET表达组比较,BRAFV600E单突变或RET单表达组肿瘤组织分化程度差,且甲状腺癌评分系统评分较高(P=0.011,P=0.022)。结论 BRAFV600E突变并存RET表达时提示PTC肿瘤组织分化差、更易出现实体亚型等侵袭性较高的病理亚型,有可能增加肿瘤相关死亡风险。     

甲状腺乳头状癌中促甲状腺激素受体与钠碘转运体mRNA的表达

目的钠碘转运体(Na+/I-symporter,NIS)是介导甲状腺细胞摄取碘的重要载体,其表达、定位与促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)关系密切。文中主要研究甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinomas,PTC)及癌旁组织中TSH受体(TSH receptor,TSHR)与NIS基因的表达。方法实时荧光定量PCR法测定36例PTC及癌旁组织,20例正常组织中TSHR mRNA及NIS mRNA的表达水平。结果 PTC及癌旁组织中TSHR mRNA表达水平明显低于正常组织,P<0.05;NIS mRNA表达水平在PTC组织中显著下降,P<0.05。结论 PTC组织中TSHR与NIS mRNA基因表达水平呈现同步下降趋势,可能与TSH-TSHR信号通路的调控有关。     

CK34βE12、Galectin-3在PTC中的诊断作用及与BRAF~(V600E)关系的研究

目的研究CK34βE12、Galectin-3在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达以及与BRAF~(V600E)基因突变的关系,评价其在甲状腺乳头状癌中的临床诊断价值。方法收集2017年6月～2018年6月在我院接受治疗的230例甲状腺乳头状癌患者的甲状腺乳头癌组织及其癌旁组织,采用免疫组织化学法检测CK34βE12、Galectin-3的表达情况,AMERS法检测BRAF~(V600E),采用χ~2检验方法分析CK34βE12、Galectin-3蛋白阳性率与BRAF~(V600E)基因突变率关系。结果在PTC组织中,CK34βE12、Galectin-3呈强阳性表达(P0.01),与患者年龄、性别、是否淋巴结转移等均无关联(P0.05);BRAF~(V600E)基因在PTC中有84.3%突变;BRAF~(V600E)基因突变率与患者年龄、性别、是否淋巴结转移等无关联(P0.05),与CK34βE12、Galectin-3蛋白表达无关联(P0.05)。结论 PTC组织中,CK34βE12、Galectin-3对鉴别甲状腺良恶性具有重要临床意义,但CK34βE12、Galectin-3表达升高与BRAF~(V600E)基因突变的相互关系,还需要进一步研究。     

SOX3、SOX9在口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)和癌旁组织中SOX3、SOX9蛋白表达情况及临床意义。 方法 采用免疫组织化学染色法检测60例OSCC组织及相应癌旁正常组织中SOX3、SOX9蛋白表达情况,分析SOX3、SOX9在OSCC中的表达及其与临床病理因素的相关性。 结果 SOX3、SOX9在OSCC组织中阳性表达率均明显高于相应癌旁组织(P < 0.01)。单因素分析显示,不同TNM分期和淋巴结转移情况的病人其SOX3、SOX9蛋白表达水平差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01),而不同性别、年龄、肿瘤分化程度病人的SOX3、SOX9表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。Logistic多因素回归分析显示,TNM分期、淋巴结转移均为SOX3、SOX9表达的独立影响因素(P < 0.01)。相关分析显示,OSCC组织中SOX3与SOX9蛋白表达呈明显正相关关系(r=0.398,P < 0.01)。 结论 SOX3、SOX9可能参与OSCC的发生、发展过程,对肿瘤的侵袭和转移起促进作用。     

甲状腺乳头状癌中TSHR、NIS基因甲基化和蛋白表达及其与BRAF突变的关系

目的 探讨甲状腺乳头状癌(PTC)中促甲状腺激素受体(TSHR)和钠/碘协同转运体(NIS)蛋白表达与相应基因的甲基化及T1799A BRAF基因突变的关系.方法 应用直接测序法检测60例PTC和20例癌旁正常甲状腺组织中T1799A BRAF突变;甲基化特异性PCR(MSP)检测上述标本中的TSHR和NIS的基因甲基化;免疫组化法检测蛋白表达.结果 60例PTC标本中,BRAF突变率为65%(n = 39),TSHR和NIS基因甲基化的发生率分别为43%(n = 26)和27%(n = 16),突变和甲基化与临床病理特征未见显著关联.TSHR蛋白表达阳性评分在TSHR甲基化阳性组和阴性组中分别为1.3±0.5和1.7±0.7(P = 0.009),NIS蛋白表达阳性评分在NIS甲基化阳性组和阴性组中分别为1.1±0.5和1.5±0.6(P = 0.019).BRAF突变的PTC病例中,TSHR和NIS蛋白表达阳性评分显著低于野生组(TSHR,1.4±0.5 vs 1.8±0.8,P = 0.031;NIS,1.3±0.6 vs 1.7±0.6,P = 0.009),TSHR和NIS基因甲基化发生率显著高于野生组(TSHR,54% vs 36%,P = 0.049;NIS,24% vs 10%,P = 0.034).结论 PTC中相应基因的甲基化和BRAF突变可能是TSHR和NIS蛋白表达减弱并分布异常的原因.     

甲状腺乳头状癌中BRAF~(V600E)点突变的研究

目的:探讨BRAFV600E点突变与甲状腺乳头状癌(PTC)及其临床病理学特征之间的关系。方法:采用突变等位基因特异性扩增法(MASA-PCR)检测108例甲状腺石蜡包埋组织中BRAFV600E点突变(包括83例甲状腺癌,11例甲状腺腺瘤,13例结节性甲状腺肿和1例癌旁正常组织)。结果:仅在PTC和1例甲状腺未分化癌中检测到BRAFV600E突变,PTC中突变率为66.7%(48/72),主要见于经典型PTC和微小癌,其突变率分别为72.6%(45/62)和66.7%(2/3),在其它类型的甲状腺良恶性病变中均未检测到BRAFV600E突变。40岁以上患者的BRAFV600E突变率显著高于40岁以下者,而与性别、淋巴结转移、慢性淋巴细胞浸润无显著关系。结论:BRAFV600E突变仅发生于PTC和部分未分化癌,是PTC中较常见的遗传学事件,为PTC的发生机制提供新思路。BRAFV600E突变主要见于经典型PTC和微小癌,可能是甲状腺乳头状癌表型的重要决定因素之一。     

甲状腺乳头状癌组织中Foxp3的表达

目的:研究甲状腺乳头状癌(PTC)组织中Foxp3的表达,探讨其在PTC发生发展中的作用.方法:采用qRT-PCR及免疫组化染色检测147例PTC组织和69例癌旁正常甲状腺组织中Foxp3 mRNA和蛋白的表达,147例PTC组织同时行BRAF V600E基因突变检测.结果:PTC组织中Foxp3 mRNA的表达(2....     

BRAFV600E突变对甲状腺乳头状癌HMGB1表达的影响

目的 近年来甲状腺乳头状癌(PTC)的发病率逐渐升高,发生复发和转移的患者也在增多。本文意在探索在PTC中BRAFV600E突变对高迁移率族蛋白(HMGB1)表达的影响,寻求BRAF基因影响PTC发展及预后的机制,指导临床进行精准治疗。 方法 收集2015年9—12月青岛大学附属医院收治的44例PTC患者的术前血清及术后新鲜病理组织,组织提取DNA进行基因测序。根据有无BRAFV600E突变将患者分为BRAF突变阳性组和BRAF突变阴性组,运用免疫组化和Western blot检测组织中HMGB1蛋白的分布和含量;荧光定量PCR检测组织中HMGB1 mRNA的水平;应用ELISA法检测血清中HMGB1蛋白的水平。Western blot数据应用Image J软件计算灰度值,采用相对定量法计算荧光定量PCR数据,用2-△Ct进行分析,应用ELISA Calc回归/拟合计算程序计算血清中的HMGB1蛋白浓度。所得数据均采用SPSS 20.0进行统计分析。Western blot、荧光定量PCR和ELISA数据分别用χ2检验、Mann-Whitney-Wilcoxon test和独立样本t检验的方法进行统计学处理。淋巴结转移和腺体外浸润与BRAFV600E突变发生的关系采用χ2检验进行统计分析。 结果 在PTC组织中,HMGB1蛋白主要定位于胞浆,BRAFV600E突变阳性组HMGB1的转录水平及蛋白水平均低于BRAFV600E突变阴性组(Z=2.117,P<0.01;χ2=19.989,P<0.05),而这种变化在外周血中并未呈现(t=1.135,P>0.05)。BRAFV600E突变增加淋巴结转移和腺体外浸润的风险(χ2=6.117,P<0.05;χ2=5.587,P<0.05)。发生淋巴结转移PTC中的HMGB1 mRNA和蛋白的表达量均低于无淋巴结转移PTC (Z=-2.216,P<0.05;t=-2.217,P<0.05),发生腺体外浸润的PTC也呈现此种趋势(Z=-2.267,P<0.05;t=-3.885,P<0.01)。 结论 在PTC中,BRAFV600E突变可能通过下调HMGB1的表达加速肿瘤的恶性发展。      

PD-L1、BRAFV600E、CD68蛋白表达及肿瘤浸润淋巴细胞在恶性黑色素瘤诊断中的意义

  目的   分析PD-L1、BRAFV600E、CD68蛋白和肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）在恶性黑色素瘤诊断中的意义。  方法   应用高通量组织芯片技术及免疫组化方法,检测60例原发性恶性黑色素瘤组织中PD-L1、BRAFV600E、CD68蛋白表达;分析PD-L1、BRAFV600E、CD68蛋白以及TIL与患者的临床病理特征及预后关系。  结果   （1）恶性黑色素瘤组织中CD68蛋白表达与肿瘤T分期之间,差异有统计学意义（P = 0.018）,而与肿瘤大小、肿瘤浸润深度、淋巴结转移和溃疡形成之间,差异均无统计学意义（P > 0.05）;（2）PD-L1、BRAFV600E和TIL与肿瘤T分期、肿瘤大小、肿瘤浸润深度、淋巴结转移和溃疡形成之间,差异均无统计学意义（P > 0.05）;（3）皮肤黑色素瘤BRAFV600E突变率约36.67%（22/60）,其中,肢端型黑色素瘤BRAFV600E突变率约68.18%（15/22）;黏膜黑色素瘤BRAFV600E突变率约23.33%（14/60）;（4）Cox回归生存分析结果显示肿瘤淋巴结转移是影响恶性黑色素瘤患者预后的因素。   结论   （1）CD68蛋白表达在判定患者预后方面可能有一定作用;（2）皮肤部位的黑色素瘤建议行BRAFV600E免疫组化检测;（3）患者存在淋巴结转移可作为恶性黑色素瘤预后判断的参考指标。     

甲状腺乳头状癌特异性肿瘤标志物的临床应用

目的：探讨CK19、Galectin– 3、BRAFV600E基因、P53、TopoII、Ki-67、CyclinD1和HBME-1 在甲状腺乳头状癌（PTC）病理诊断中的临床应用价值方法：采用PCR和免疫组化EnVision法检测上述8种标志物在100例PTC和40例甲状腺良性病变中的表达情况结果：PTC组织中CK19、BRAFV600E基因、Galectin– 3、和HBME-1阳性表达率（97%、75%、98%、66%）显著高于甲状腺良性组织（45%、13%、25%、25%）,差异具有统计学意义（P<0.05）,8种标志物单独用于PTC的诊断时CK19、Galectin– 3的灵敏度最高（分别为97%、98%）,Galectin– 3的准确度最高（92.2%）,P53特异性最高（95%）,多种标志物联合应用时,CK19、Galectin– 3、HBME-1三项标志物联合应用作为PTC的诊断标准时准确度最高,高达到97%。结论：CK19、BRAFV600E基因、Galectin– 3、和HBME-1是诊断PTC的重要标志物,这些标志物联合应用有助于对形态不典型PTC与甲状腺良性病变进行鉴别诊断。     

钠/碘转运体在甲状腺乳头状癌的表达和分布

目的:研究钠/碘转运体(NIS)在甲状腺乳头状癌内表达情况,探求NIS与甲状腺乳头状癌的关系.方法:取甲状腺乳头状癌组织22例,正常甲状腺组织12例,淋巴结转移组织7例及结节性甲状腺肿组织12例,运用蛋白免疫印迹技术(Westemblot)检测各实验组NIS的表达情况.结果:乳头状癌组和淋巴结转移组中NIS的阳性率为77.3%和85.7%,高于正常甲状腺组和结节性甲状腺肿组的25%和41.7%,且各实验组之间阳性表达率存在显著性差异(P<0.05),在17例NIS表达阳性的乳头状癌组标本中,有16例阳性表达集中于细胞浆内,仅2例在细胞膜上检测有表达,阳性率分别为94.1%和11.8%.两者差异有统计学意义(P<0.05).结论:在甲状腺乳头状癌组织内,NIS可正常,甚至过度表达,而且分布主要集中于细胞浆内.并非功能靶位细胞膜上,与肿瘤导致的基因翻译和修饰的改变有关.     

NIS、TSHR在桥本甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌中的表达及其意义

目的：研究钠碘转运体（NIS）和促甲状腺激素受体（TSHR）在桥本甲状腺炎（HT）合并甲状腺乳头状癌（PTC）中的表达,探讨HT与PTC的关系。方法：选取PTC、HT各25例,HT合并PTC以及正常甲状腺各18例,通过免疫组化法,测定标本中NIS和TSHR的表达情况。结果：NIS与TSHR在这4组中的表达有显著差异（P〈0．01）,而二者在PTC和PTC合并HT2组中的表达无显著差异,在PTC组与PTC合并HT组中的表达均高于正常组,在HT组的表达高于正常组（P〈0．01）。结论：TSHR、NIS表达水平与PTC密切相关,HT是一种具有恶性潜能的病变,应引起高度重视。