基质金属蛋白酶2高表达与骨肉瘤预后关系的Meta分析

目的 评价基质金属蛋白酶2（MMP-2）高表达与骨肉瘤预后的关系。方法 利用计算机检索PubMed、EMbase、Cochrane、中国知网、万方数据知识服务平台,收集建库至2015年11月公开发表的骨肉瘤相关临床研究,语种限定为中英文。按照文献纳入和排除标准选择研究文献,评价文献质量,并提取数据。采用STATA 12.0软件进行Meta分析,计算MMP-2高表达与骨肉瘤预后关系的OR（95%CI）,并进行发表偏倚检验和敏感性分析。结果 最终纳入20篇临床研究、1 180例受试者,其中包括MMP-2阳性骨肉瘤658例和MMP-2阴性骨肉瘤284例,MMP-2阳性良性骨肿瘤和肿瘤旁组织45例,MMP-2阴性良性骨肿瘤和肿瘤旁组织193例。Meta分析结果显示,MMP-2在骨肉瘤组织中表达明显高于良性骨肿瘤,合并OR值为27.07〔95%CI（8.12,90.31）,P=0.001〕;MMP-2高表达与骨肉瘤高外科Ennecking分期、肺转移、软组织浸润相关,合并OR值分别为7.54〔95%CI（4.38,13.00）,P＜0.001〕、4.78〔95%CI（2.02,11.34）,P＜0.001〕、5.74〔95%CI（2.58,12.80）,P＜0.001〕;MMP-2表达水平与骨肉瘤患者年龄、性别、病理类型、发病部位无明显相关性,合并OR值分别为1.06〔95%CI（0.90,1.24）,P=0.955〕、1.54〔95%CI（0.97,2.43）,P=0.915〕、1.30〔95%CI（0.86,1.95）,P=0.955〕、1.22〔95%CI（0.56,2.65）,P=0.885〕。敏感性分析提示各项统计结果可信。结论 MMP-2高表达与骨肉瘤高外科Ennecking分期、肺转移和软组织浸润有关,是骨肉瘤预后重要不利因素。进一步大型临床试验有助于证实本研究结论。     

FJX1在胃癌组织中高表达并与不良预后相关

目的 探讨四连接同源激酶1(FJX1)在胃癌（GC）中的表达以及与预后生存的关系,研究FJX1在胃癌进展中的作用及机制。方法 采用TCGA和GEO数据库胃癌队列分析FJX1在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达情况,并分析FJX1表达与预后生存的相关性。通过免疫组化检测FJX1在胃癌组织中的蛋白表达水平,并分析FJX1蛋白表达与临床病理参数及预后的相关性。通过生物信息学探讨FJX1在胃癌中的潜在作用途径。采用慢病毒载体构建FJX1过表达和FJX1沉默的胃癌细胞株。采用免疫印记方法检测FJX1差异表达对增殖相关蛋白表达的影响,并采用CCK-8法检测FJX1对细胞增殖的影响。采用免疫印记方法检测FJX1差异表达细胞中PI3K和AKT的蛋白表达及磷酸化蛋白表达。采用裸鼠成瘤实验检测FJX1对肿瘤增殖的影响。结果 生物信息学分析及免疫组化结果显示,与正常胃黏膜组织相比,胃癌组织中的FJX1的mRNA和蛋白表达均显著增高（P<0.05）。此外,FJX1的m RNA和蛋白水平高表达与胃癌患者不良预后相关（P<0.05）,并且FJX1高表达是胃癌不良预后的独立危险因素（P<0.05）。...     

MYBL2在前列腺癌患者组织中高表达并与不良预后相关

目的 探索骨髓母细胞增生症病毒癌基因同源物样2(MYBL2)基因对前列腺癌（PCa）患者临床预后和生物学行为的影响。方法 采用qRT-PCR检测MYBL2在45例PCa与癌旁前列腺组织的表达水平,根据MYBL2表达中位数,分为高（23例）低（22例）表达,采用非参数检验、Kaplan-Meier、单因素和多因素Cox法,并分析MYBL2高低表达与PCa的临床病理特征及预后相关性,利用癌症基因组图谱（TCGA）基因芯片数据库PCa数据集进行验证。基因集富集分析（GSEA）MYBL2高低表达可能参与调控的分子通路,CIBERSORT算法研究MYBL2与肿瘤免疫微环境的相关性。最后,体内实验中,通过建立阴性对照组（shCtrl）、敲减MYBL2组（sh-MYBL2）用细胞增殖毒性检测试剂盒（CCK8）和Transwell法检测各组细胞增殖和侵袭能力。qRT-PCR和Western blotting检测肿瘤细胞中MYBL2基因和蛋白的表达。在体内实验中,检测2组荷瘤小鼠瘤重和免疫组织化学方法观察荷瘤组织Ki-67的表达水平。结果 两组数据均显示：MYBL2在PCa组织中高表达,与Gleason...     

PCID2在胃癌组织中高表达并通过调控细胞周期进程和增殖影响患者预后

目的 探讨扩增基因PCI结构域2(PCID2)在胃癌中的表达情况及其对细胞周期进程和增殖的影响,并分析其可能的分子机制。方法 纳入2012年1月～2016年12月在我院接受胃癌根治术的患者100例,检测胃癌和癌旁组织中PCID2的表达差异;统计学分析PCID2表达水平对胃癌进展及术后5年生存率的影响;采用GO富集分析预测PCID2参与胃癌恶性进展的可能作用途径;体外采用慢病毒转染特异性敲低和过表达胃癌细胞系（MGC-803）中PCID2表达,并分析其对细胞增殖及周期的影响;进一步通过裸鼠移植瘤模型进行在体验证;最后通过组织样本分析结合体内外研究,分析PCID2影响胃癌细胞的分子机制。结果 相较于癌旁组织,PCID2在胃癌组织中高表达（P<0.01）;胃癌组织中PCID2表达水平与外周血中CA19-9及CEA水平呈正相关（P<0.001）;以胃癌组织中PCID2相对表达水平（IOD值）的中位数（3.085）为界,将纳入研究的患者分为PCID2高表达组（n=50）和PCID2低表达组（n=50）,PCID2高表达组患者术后5年生存率显著低于PCID2低表达组（P<0.00...     

骨肉瘤P-糖蛋白表达及其与预后的研究

人体多种肿瘤均有Ｐ ｇｐ的高表达 ,Ｐ ｇｐ介导的多药耐药性(即经典多药耐药性 ) [1,2 ] 可能是肿瘤化疗不敏感的重要原因 ,也是影响预后的重要因素。因此我们用ＳＰ法检测 80例骨肉瘤中Ｐ ｇｐ的表达 ,以期探讨其与骨肉瘤临床病理及预后的关系。1　材料与方法1.1　临床资料　　选取我院 196 8～ 1993年间长骨中央型骨肉瘤 80例 ,其中男性 5 2例 ,女性 2 8例 ,男女比约为 2∶1,年龄 11～ 6 8岁 ,平均 2 3岁 ;肿瘤大小 5～ 2 5ｃｍ ,平均 10ｃｍ ,其中手术切除标本 75例 ,活检标本 5例 ,均为术前未化疗标本。组织学分级参照Ｐｒｉｃｅ三级法…     

Skp2在骨肉瘤中的表达及与预后的关系

目的:探讨Skp2在骨肉瘤中表达及其与P27,临床病理及预后的关系.方法:收集采用肿瘤根治术治疗骨肉瘤患者标本52例,采用免疫组织化学SP染色法检测这组标本的Skp2及P27的表达情况;并对骨肉瘤患者预后进行随访,44例患者获得平均31.2(4～84)月随访,失访8例.20例存活5年以上,24例死亡.结果:Skp2在骨肉瘤中呈高度表达(均值为1.74);骨肉瘤Ⅲ期的Skp2蛋白的表达强度与Ⅱ a期和Ⅱ b期有显著性差异(P<0.05),与患者的性别、年龄及病理组织学分型未见明显相关性(P>0.05).Skp2蛋白表达与骨肉瘤的复发转移、5年生存率具有相关性(P<0.05),并且与P27蛋白表达在骨肉瘤中呈负相关,(r=-0.907,P<0.05).结论:Skp2通过介导P27的降解,在骨肉瘤的发生、发展中发挥重要作用.Skp2与骨肉瘤的侵袭、转移相关,可作为骨肉瘤的预后指标.     

Gab2、IRX2表达量与骨肉瘤组织中细胞生长、迁移行为的相关性

目的:研究骨肉瘤组织中Gab2、IRX2表达量与细胞生长、迁移行为的相关性。方法:选择在我院手术切除的29例骨肉瘤组织和22例骨样骨瘤组织作为检测标本,抽提RNA并测定Gab2、IRX2及细胞生长、迁移相关基因的mRNA表达量,抽提蛋白并测定Gab2、IRX2及细胞生长、迁移相关基因的蛋白表达量。结果:骨肉瘤组织中Gab2、IRX2的mRNA含量和蛋白含量均显著高于骨样骨瘤组织;骨肉瘤组织中TAp73、Beclin1、Caspase-1的mRNA含量和蛋白含量均显著低于骨样骨瘤组织且与Gab2、IRX2的mRNA含量和蛋白含量呈负相关,STMN1、Survivin的mRNA含量和蛋白含量均显著高于骨样骨瘤组织且与Gab2、IRX2、CEACAM6、CD44v6、MMP-9的mRNA含量和蛋白含量呈正相关。结论:骨肉瘤组织中高表达的Gab2和IRX2能够抑制原癌基因的表达、增加促增殖和迁移基因的表达,进而促进骨肉瘤组织中细胞的生长、迁移。     

青少年骨肉瘤治疗及预后相关因素分析

目的 探讨儿童和青少年骨肉瘤患者预后影响因素.方法 回顾性分析1990年1月至2006年1月云南省第二人民医院肿瘤科收治的初发骨肉瘤患儿32例,采用COSS 96方案治疗.分析5 a生存率(overall survival.OS)和5 a无病生存率event-free survival,EFS)与诊断时是否转移、接受手术类型、肿瘤位置、性别、组织学类型、对术前化疗组织反应以及患病年龄之间的关系.结果 所有患者5 a OS为59.4%(19/32),EFS为46.9%(15/32).无转移患者5 a OS显著高于有转移的患者(P<0.05),晚期转移患者5 a OS显著高于早期转移患者(P<0.05).保肢术或截肢术的术后复发率无显著性差异(P>0.05),5 a OS及5 a EFS之间无显著性差异(P>0.05).肿瘤原发部位在肢体近端或远端及不同组织学类型之间5 a OS、EFS无显著差异(P>0.05),新辅化疗敏感的患者5 a OS及5 a EFS均高于新辅化疗不敏感的患者(P<0.05).男、女性骨肉瘤患者5 a OS和EFS之间无显著性差异(P>0.05),年龄≤14岁患者5 a OS 75%(12/16)、EFS 68.8%(11/16),高于年龄>14岁的患者OS 43.8%(7/16)、EFS26.7%(4/16),P<0.05.结论 多数患者可通过强化化疗和外科手术取得较好治疗效果.保肢手术不显著增加不良预后,但却能提供较好的的生存质量;伴有远处转移和局部复发的患者预后较差.对化疗组织反应好、年龄<14岁的患者预后较好.     

骨肉瘤预后相关的血管生成因子研究进展

骨肉瘤是实体性的肿瘤且血运丰富,其生长和转移都有依赖于肿瘤中血管的生成。已发现多种骨肉瘤血管生成相关的因子,其中一些血管生成因子和患者的预后及病程转归密切相关。文中就近年发现和骨肉瘤预后相关的血管生成因子：血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）、血小板衍生生长因子（platelet-derived growth factor,PDGF）、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）、色素上皮衍生因子（pigment epithelium-derived factor,PEDF）、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）做一综述。     

骨肉瘤中肥大细胞计数与预后的关系

我们在骨肉瘤的病理研究过程中发现,许多骨肉瘤标本中有肥大细胞浸润。而肥大细胞浸润与骨肉瘤患者预后间有何关系尚不清楚,本研究对此进行了初步探讨。1 材料与方法 取自我校第一、二附属医院及重庆市肿瘤医院病理科有完整随访资料的１９７８－１９９４年的骨肉瘤存档蜡块共96例。 染色试剂配置：甲苯胺蓝 ０．５ ｇ,５０％酒精 １００ ｄ。 染色方法：切片厚０．5μｍ,常规脱蜡至蒸馏水;用０．５％甲苯胺蓝酒精溶液染色３－５ｍｉｎ;蒸馏水速洗;经０.０１％伊红水溶液 ｌｍｉｎ;以９５％酒精分色,两次各 ｌ－２ｍｉｎ;入１００…     

帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响

目的：研究帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法： Western 印迹检测骨肉瘤细胞株(MG-63,Saos-2和U2OS)及正常人成骨细胞株hFOB1.19中DJ-1和第10号染色体上缺失的 磷酸酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted from chromosome 10,PTEN)基因的表达。DJ-1 siRNA处 理人骨肉瘤细胞后,采用Western印迹检测DJ-1的蛋白表达水平;细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细 胞存活率;膜联蛋白V(annexin V)-异硫氰酸荧光素(fl uorescein isothiocyanate,FITC)/碘化吡啶(propidium iodide,PI)双染 检测细胞凋亡;Transwell侵袭和迁移实验检测细胞侵袭和迁移水平。结果：与hFOB1.19细胞比较,骨肉瘤细胞DJ-1蛋 白表达水平显著升高(均P<0.05),其中U2OS细胞升高最为显著(P<0.01)。DJ-1 siRNA可显著降低U2OS细胞中DJ-1蛋白 表达水平、降低细胞存活率、促进细胞凋亡、抑制细胞侵袭和迁移水平,以及增加PTEN蛋白表达水平(均P<0.05)。 另外,与hFOB1.19细胞比较,PTEN在骨肉瘤细胞中的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论：DJ-1可抑制人骨肉瘤 细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞侵袭和迁移水平,其机制可能与增加PTEN蛋白的表达水平有关。     

PFN2在胃癌组织中高表达并促进胃癌细胞的增殖和迁移

目的 研究PFN2作为胃癌新的预后评价指标及作为胃癌治疗全新靶点的潜力。方法 组织层面上,应用免疫组织化学检测100例胃癌组织及其癌旁组织中PFN2蛋白表达水平;根据PFN2表达量,将研究对象分为癌组织中PNF2高表达组（46例）、低表达（48例）组,以及癌旁组织中PFN2高表达组（26例）、低表达（49例）组;采用χ2检验、Spearman相关性以及Kaplan-Meier 生存分析法,分析PFN2蛋白表达水平与患者的临床参数之间关系;细胞功能上,敲低MKN-45细胞中PFN2,将其分为controlsiRNA组与PFN2-siRNA组;过表达MKN-45细胞中PFN2,将其分为control-vector组与PFN2-vector组,选取Transwell实验、CCK-8实验检测PFN2对胃癌MKN-45细胞增殖及迁移影响。结果 在胃癌组织中PFN2蛋白表达高于癌旁组织（P<0.01）;PFN2蛋白的表达水平和胃癌病人的M分期显著正相关（P<0.05）;在胃癌组织中,PFN2表达和VEGFR表达呈正相关关系（P<0.01）;PFN2蛋白高表达的胃癌患者预后更差（P<0.01）,并且是胃癌预后的独立预测因子（P<0.05）;MKN-45细胞中高表达PFN2组较低表达组增殖、迁移能力更强（P<0.001）。结论 PFN2蛋白在胃癌组织中高表达,并促进人胃癌MKN-45细胞的增殖、迁移。     

原花青素对前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究原花青素对人雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCaP细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外培养的LNCaP细胞株与100、200、300 μg/ml的原花青素共孵育,分别在24、48和72 h时观察细胞形态学变化,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞术分析细胞凋亡情况.结果 原花青素可引起LNCaP细胞形态较明显改变.不同浓度(100、200、300 μg/ml)原花青素对LNCaP细胞作用的细胞增殖抑制率分别为27.1%、72.1%和86.4%.流式细胞术检测表明原花青素可诱导LNCaP细胞凋亡,300μg/ml原花青素处理72 h引起36.5%的凋亡率.这3种作用均随原花青素浓度和作用时间的延长而增强.结论 原花青素可在体外抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖,并促进其凋亡.     

人参皂苷Rh2通过调控GSK-3β/Wnt双信号通路影响骨肉瘤细胞增殖和凋亡

目的：探讨人参皂苷Rh2（Rh2）对骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并进一步研究Rh2在骨肉瘤中抗肿瘤作用的机制。方法：分别以不同浓度的Rh2 处理骨肉瘤细胞,用MTT法检测骨肉瘤细胞活性的变化;用基质凝胶（Matrigel）侵袭和孔膜法（Transwell）迁移实验检测骨肉瘤细胞的侵袭和迁移能力的变化;用Annexin V-FITC/PI调亡检测试剂盒及流式细胞仪检测骨肉瘤细胞的调亡变化;用Western blot法检测细胞侵袭、凋亡相关蛋白的表达情况。结果：骨肉瘤细胞经过不同浓度的Rh2处理后,MTT实验结果表明Rh2在一定浓度范围内可以显著抑制骨肉瘤细胞的生长（P ＜0.05）。Matrigel侵袭和Transwell迁移实验结果表明Rh2可以有效抑制骨肉瘤细胞的侵袭与迁移（P ＜0.05）。Annexinv-FITC/PI凋亡检测试剂盒及流式细胞仪检测结果表明,Rh2可以促进骨肉瘤细胞的凋亡反应（P ＜0.05）。Western blot实验结果则显示Rh2 可以上调Bax、E-cadherin蛋白的表达,并抑制Bcl-2、PARP、MMP2、MMP9 蛋白的表达。Rh2 还可以通过激活GSK-3β并抑制β-catenin、Cyclin D1和C-myc相关蛋白来达到调控骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭反应的作用。结论：Rh2可以抑制骨肉瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,这种作用可能是通过激活GSK-3β并抑制Wnt/β-catenin信号通路来实现的。     

CircPCSK5在胃癌中高表达并促进胃癌细胞的增殖、侵袭和上皮间质转化

目的 探讨circPCSK5在胃癌中的表达情况和对胃癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的影响。方法 通过高通量测序构建胃癌组织和癌旁正常胃粘膜组织的circRNA差异表达谱。选取在皖南医学院第一附属医院行胃癌根治术的患者共62例作为研究对象,利用RT-qPCR检测circPCSK5在胃癌组织和细胞系中的表达情况。采用χ2检验分析circPCSK5表达水平与胃癌临床病理资料相关性,利用Kaplan-Meier法绘制患者的总生存和无病生存曲线,Cox比例风险回归模型分析影响胃癌患者预后的独立危险因素。通过RNase R和actinomycin D实验检测circPCSK5的稳定性。利用荧光原位杂交和细胞核质分离实验检测circPCSK5的亚细胞定位。通过CCK-8和EdU实验检测circPCSK5对胃癌细胞增殖能力的影响,通过transwell实验检测circPCSK5对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。利用Western blot和RT-qPCR检测敲低或过表达circPCSK5后胃癌细胞上皮-间质转化标记物的表达变化。结果 在胃癌组织和细胞中,circPCSK5的表达明显升高（P<0.0...     

TIM-3 基因在上皮性卵巢癌中高表达并促进癌细胞的增殖和迁移

目的 通过挖掘GEPIA数据库中的基因信息,分析T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3（TIM-3）基因在上皮性卵巢癌（EOC）中的表达及作用机制。方法 采用GEPIA数据库在线分析TIM-3基因在EOC组织和正常卵巢组织中的表达水平。收集2018年6月~2019年12月在我院实施卵巢手术治疗的82例EOC癌变组织标本和18例正常卵巢组织标本,免疫组织化学法检测标本组织中TIM-3的表达水平,分析TIM-3表达与EOC临床病理参数的相关性;采用Kaplan-Meier Plotter分析TIM-3表达水平与EOC患者生存之间的关系。qRT-PCR法检测卵巢癌组织和正常组织标本TIM-3和Wnt1 mRNA表达水平及相关性。采用pMAGic 4.0质粒转染构建TIM-3沉默卵巢癌SKOV3细胞系,将细胞分为SKOV3组（未转染的SKOV3细胞系）、沉默阴性对照组（SKOV3+NC siRNA组：转染pMAGic 4.0 NC siRNA质粒的SKOV3细胞系）和沉默TIM-3组（SKOV3+TIM-3 siRNA组：转染pMAGic 4.0 TIM-3 siRNA质粒的SKOV3细胞系）;采用pcDNA3.1质粒转染构建TIM-3过表达卵巢癌SKOV3细胞系,将细胞分为SKOV3组、过表达阴性对照组（pcDNA NC组：转染pcDNA3.1质粒的SKOV3细胞系）和过表达TIM-3组（pcDNA TIM-3组：转染pcDNA3.1 TIM-3质粒的SKOV3细胞系）。MTT法检测细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡能力,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,TOPflash/FOPflash双荧光素酶报告基因实验检测Wnt/β-catenin通路活性,qPCR检测Wnt/β-catenin信号通路中转录因子TCF-7、TCFL-2及靶基因CD44的mRNA水平,Western blot检测SKOV3细胞中MMP-9,CD44、Wnt1、β-catenin及E-cad蛋白表达。结果 TIM-3在正常卵巢组织中呈阴性表达,在EOC组织中呈阳性表达,EOC组织中TIM-3阳性表达率（84.14%）显著高于正常卵巢组织（16.67%,P<0.05）。TIM-3表达与FIGO分期、组织分化程度及淋巴结是否转移有关（P<0.05）,与年龄、病理类型无关（P>0.05）。且TIM-3与Wnt1水平呈正相关（P<0.05）。沉默TIM-3基因后,Wnt/β-catenin通路活性受到抑制,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低（P<0.05）,凋亡能力显著升高（P<0.05）,转录因子TCF-7、TCFL-2及靶基因CD44的mRNA水平显著下调,细胞MMP-9,CD44、Wnt1、β-catenin蛋白水平均显著下调,EMT相关蛋白E-cad水平显著上调（P<0.05）。过表达TIM-3基因后,Wnt/β-catenin通路活性被激活,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力显著升高（P<0.05）,凋亡能力显著降低（P<0.05）,转录因子TCF-7、TCFL-2及靶基因CD44的mRNA水平显著上调,细胞MMP-9,CD44、Wnt1、β-catenin蛋白水平均显著上调,EMT相关蛋白E-cad水平显著下调（P<0.05）。结论 TIM-3在EOC组织中高表达,可促进卵巢癌细胞的恶性生物学行为,其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。     

氯化锂对人骨肉瘤细胞U2-OS增殖、凋亡及Fas、Caspase-3 mRNA表达的影响

目的:研究氯化锂(LiCl)对人骨肉瘤细胞U2-OS增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法:以40、80、150mmol/L的LiCl作用于U2-OS细胞24、48和72h后,采用MTT法检测细胞增殖抑制率;作用48h后,流式细胞术法检测细胞凋亡率,并分析细胞周期;RT-PCR法检测凋亡相关基因Fas、Caspase-3mRNA的表达。结果:随LiCl作用剂量的增加,U2-OS细胞增殖抑制率增加,细胞凋亡率和Fas、Caspase-3mRNA表达量亦增加(F=61157.480,70.828和418.072,P<0.001);细胞周期分析显示细胞被阻滞于S期(P<0.001)。结论:LiCl可能通过促进凋亡基因Fas、Caspase-3的表达,抑制U2-OS细胞增殖并诱导凋亡。     

灵芝酸A对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的探讨灵芝酸A对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法体外培养人骨肉瘤HOS和mg-63细胞与0.1、0.25 和
0.5 mmol/L的灵芝酸A孵育,采用CCK8检测HOS和MG-63细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞的迁移
和侵袭。Western blot 检测细胞中p-STAT3、STAT3、p-p38、p38和NF-ΚB1蛋白的表达变化。结果灵芝酸A能够显著抑制人类
骨肉瘤HOS和MG-63细胞的增殖,促进细胞凋亡以及抑制细胞迁移,并且这种效应存在剂量依赖性。与0.5 mmol/L 灵芝酸A
孵育能够显著降低HOS和MG-63细胞中STAT3的磷酸化水平,增加p38磷酸化水平,同时增加NF-κB1的表达水平。结论灵
芝酸A能够杀死人类骨肉瘤HOS和MG-63细胞,可以作为抗骨肉瘤的药物进行开发。
     

MicroRNA-203抑制骨肉瘤细胞增殖和迁移的机制研究

摘要：目的  探讨microRNA-203（miR-203）对骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响及机制。方法  通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定miR-203在正常成骨细胞hFOB及骨肉瘤细胞系中的表达,将MG-63细胞系分成miR-203组、Scramble组、RAB22A组、NC组,Lipofectamine 2000分别转染miR-203 mimics、Scrambles、pcDNA3.1-RAB22A、空白对照质粒;通过噻唑蓝（MTT）实验测定增殖能力,细胞划痕实验测定迁移能力;通过Target Scan和双荧光素酶实验预测及验证miR-203与RAB22A基因的靶向调节关系;RT-PCR测定RAB22A mRNA表达水平;Western blot测定E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。结果  miR-203在骨肉瘤细胞系SAOS-2、SOSP-9607、U2OS及MG-63中较hFOB细胞系表达降低。MTT显示,在培养48和72 h后,miR-203组相对细胞数少于Scramble组（P <0.05）;培养24 h后,Scramble组细胞相对划痕面积小于miR-203组（P <0.05）;双荧光素酶实验示,miR-203与RAB22A基因存在靶向调节关系。RAB22A组相对划痕面积小于NC组（P <0.05）;MTT显示,在培养24、48和72 h后,RAB22A组相对细胞数多于NC组（P <0.05）;RAB22A组与NC组比较,E-cadherin下调表达,N-cadherin上调表达,Vimentin上调表达。结论  miR-203通过下调RAB22A基因表达,抑制上皮间质转化,进而抑制骨肉瘤细胞增殖与迁移。

     

髓锌指基因1对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的研究葡萄糖-6- 磷酸脱氢酶（G6PD）和髓锌指基因1（MZF -1）在骨肉瘤中的作用及其可能的作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测MZF -1 和G6PD在骨肉瘤细胞中的表达;MTT 法检测过表达MZF -1 对骨肉瘤细胞增殖的影响;流式细胞仪检测过表达MZF -1 对骨肉瘤细胞凋亡及细胞周期的影响;荧光素酶报告基因分析法验证MZF-1 与G6PD启动子区的相互作用关系。结果在骨肉瘤细胞中, MZF -1 的表达下降,G6PD表达上升。过表达MZF -1可抑制骨肉瘤细胞增殖,促进细胞凋亡,并且将细胞周期阻滞于G0/G1期。荧光素酶报告基因分析结果表明, MZF -1可靶向结合到G6PD 的启动子区域并负向调控G6PD 的表达。结论MZF -1 可通过负向调节G6PD的表达,在骨肉瘤的发生、发展过程中发挥抑癌的作用,为骨肉瘤治疗提供新的思路。