日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂干预脂多糖诱导的小鼠脓毒症

目的探讨日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂（SjCystatin）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠脓毒症的干预效果。方法54 只 BALB/c小鼠适应性饲养1 周后,随机分为正常对照组(PBS 组,A组)、脓毒症造模组（PBS+LPS组,B组）、蛋白干预组（PBS+ LPS+SjCystatin组,C组）。A组腹腔注射PBS（100 μL）,B组、C组腹腔注射含LPS（10 mg/kg）的PBS（100 μL）,其中C组小鼠于 注射LPS后30 min腹腔注射含25 μg SjCystatin蛋白的PBS（100 μL）。每组随机抽取10只,造模后24 h取小鼠血清及肝、肺、肾 组织,酶联免疫吸附试验（ELISA）验检血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）水平,全自 动生化分析仪检测ALT、AST、BUN和Cr水平;肝、肺和肾组织HE染色观察其病理损伤;每组余8只小鼠,造模后记录小鼠72 h 生存率的差别且观察小鼠状态的改变。结果3组小鼠的72 h生存率具有统计学差异（P<0.05）,与A组（100%）相比,B组（0%） 72 h生存率降低（P<0.05）,经过SjCystatin蛋白治疗后,C组生存率较B组增高（36%）。与A组相比,B组肝、肺、肾组织切片病理 损伤加重,血清中ALT、AST、BUN、Cr、IL-6、TNF-α水平明显升高（P<0.05）;与B组相比,C组调节因子IL-10水平明显升高,肝、 肾、肺组织损伤明显减轻,且血清中上述肝肾功能检测指标及促炎因子水平明显降低（P<0.05）。结论SjCystatin对LPS诱导的 脓毒症有显著的治疗作用。     

益赛普对脓毒症大鼠心肌损伤与炎症因子表达的影响

目的研究早期应用益赛普对脓毒症大鼠心肌损伤及炎症因子表达的影响,并就其对心肌损伤机制的影响进行初步探讨。方法108只雌性清洁级SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组与治疗组,假手术组行盲肠探查术,脓毒症组和治疗组两组行盲肠结扎穿孔术制作脓毒症模型,治疗组加用益赛普以干预,均在3、9、24、36、48、72 h时相点留取标本,每时相点6只大鼠。 ELISA法检测大鼠血清心肌肌钙蛋白(cTnI)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)浓度,Western blot法检测心肌核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的表达,数据结果采用析因设计方差分析。结果①脓毒症组与治疗组血清cTnI、TNF-α、IL-1、NF-κB p65水平均高于假手术组(P<0．05),两组浓度均于3 h达峰值,而后逐渐下降。治疗组每个时相点均低于脓毒症组;②血清 TNF-α、
　　IL-1浓度均与血清CTnI表达呈显著正相关性。结论脓毒症大鼠心肌早期发生损伤,应用益赛普能够降低血清TNF-α、IL-1的释放及心肌组织NF-κB p65的表达,减少机体炎症反应,起到保护心脏的作用。     

B7-H4对Con A诱导小鼠肝损伤保护作用的实验研究

目的 探讨B7-H4对免疫性损伤肝脏的保护作用及其机制。方法 将KM小鼠分为4组(每组15只):生理盐水组（A组）、pcDNA3.1-mB7-H4-Fc组(B组）、pcDNA3.1组（C组）和刀豆球蛋白A(Con A)组（D组）。B组、C组和D组动物均通过尾静脉注射Con A 25 mg/kg制备肝损伤模型。在Con A注射前1 d,分别给予B组每只小鼠注射pcDNA3.1-mB7-H4-Fc 100 μg和C组每只小鼠注射pcDNA3.1 100 μg。并于注射Con A后12 h、24 h和48 h,各组取5只小鼠,摘眼球取血,分离血清行白介素-4（IL-4）、γ-干扰素（IFN-γ）、谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）浓度的测定;引颈处死小鼠后取肝脏,用于组织病理学检测。结果 小鼠血清IL-4、IFN-γ、ALT和AST水平在注射Con A后各时点,B、C和D三组较A组均有升高（ P<0.05),但B组较C组和D组减低, B组与C组间差异有统计学意义（ P<0.01）。小鼠肝组织切片经HE染色,光学显微镜下可见,B组小鼠肝脏损伤均比C组和D组有不同程度的减轻。结论 初步证实了B7-H4对Con A诱导的肝脏免疫性损伤具有保护作用。B7-H4可能是通过抑制IL-4和IFN-γ的产生和/或分泌而发挥对肝脏保护的作用。     

外源性EPO对内毒素诱导心肌损伤的保护及其机制研究

目的观察促红细胞生成素（EPO）对内毒素诱导心肌损伤的保护作用及可能的机制。方法成功复制内毒素心肌损伤模型后采用随机数字表法将30只大鼠分为假手术组、脓毒症组和EPO干预组,每组随机分配10只大鼠。假手术组开腹后找到盲肠后缝合腹壁切口,不穿刺盲肠;脓毒症组行盲肠结扎穿孔术;EPO干预组于模型复制后给予EPO腹腔注射1000 U/kg。采用酶联免疫吸附分析（ELISA）法测定心肌损伤标志物（cTnI、CK、CKMB）含量和肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平。结果脓毒症组大鼠血清心肌损伤标志物（cTnI、CK、CK-MB）水平显著高于假手术组,相比较有显著性差异（t=4.961、4.798、3.038,P〈0.05）;经EPO干预后,EPO干预组大鼠血清心肌损伤标志物（cTnI、CK、CK-MB）水平显著降低,与脓毒症组比较有显著性差异（t=6.631、5.785、3.931,P〈0.05）。脓毒症组大鼠血清TNF-α、IL-6水平显著高于假手术组,相比较有显著性差异（t=6.744、7.883,P〈0.05）;经EPO干预后,EPO干预组大鼠血清TNF-α、IL-6水平显著降低,与脓毒症组比较有显著性差异（t=4.276、7.180,P〈0.05）。结论 EPO可能通过抑制TNF-α、IL-6的分泌和对心肌细胞的保护效应来达到减轻大鼠内毒素诱导的心肌损伤,从而起到保护作用。     

硫化氢对脓毒症大鼠心肌损伤的作用及其机制探讨

目的 研究硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）对脓毒症大鼠心肌损伤的作用,并探讨其作用的可能机制。 方法 采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症（cecal ligation and puncture,CLP）模型,将SD大鼠随机分为6组:假手术组、假手术+外源性H₂S供体硫氢化钠（NaHS）组、假手术+H₂S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase,CSE）抑制剂炔丙基甘氨酸（propargylglycine,PAG）组、CLP组、CLP+NaHS组、CLP+PAG组,每组各24只大鼠。分别于术后6 h、12 h、24 h处死各组大鼠（即各组分6 h、12 h、24 h亚组）取血和心肌标本,检测血清肌钙蛋白I（cTnI）水平,大鼠心肌组织HE染色观察病理变化,测定心肌组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）含量,采用RT-PCR方法检测心肌组织CSE mRNA表达,Western blot检测大鼠心肌组织核转录因子NF-κB表达。 结果 假手术各组及不同时点各指标差异均无统计学意义。与假手术12 h及24 h组相比,CLP 12 h及24 h组血清cTnI质量浓度以及心肌组织病理评分、心肌组织CSE mRNA、NF-κB表达、TNF-α及IL-10含量均升高（P均<0.05）;与CLP 12 h及24 h组相比,CLP+NaHS 12 h及24 h组血清cTnI质量浓度以及心肌组织病理评分、NF-κB表达和TNF-α含量降低（P均<0.05）,CSE mRNA表达和IL-10含量升高（P均<0.05）;而CLP+PAG 12 h及24 h组血清cTnI质量浓度及心肌组织病理评分、NF-κB表达和TNF-α含量升高（P均<0.05）,CSE mRNA表达和IL-10含量降低（P均<0.05）。 结论 H₂S在脓毒症所致的心肌损伤中起保护作用,这种保护作用的机制可能是通过抑制心肌组织中NF-κB表达、降低心肌组织TNF-α含量和提高心肌组织CSE mRNA表达、IL-10含量而保护心肌组织。     

阿托伐他汀联合美托洛尔治疗脓毒症相关性心肌损伤临床疗效观察

目的：观察阿托伐他汀联合美托洛尔治疗脓毒症相关性心肌损伤的临床疗效。方法选择2014年2月至2015年12月钟祥市人民医院急诊科、呼吸科及重症医学科收治的200例严重脓毒症合并急性心肌损伤患者,按随机数字表法分为A、B、C、D四组,每组各50例。A组接受常规治疗及对症处理;B组在A组治疗基础上加用阿托伐他汀;C组在A组治疗基础上加用美托洛尔;D组在A组治疗基础上加用阿托伐他汀和美托洛尔。检测四组患者治疗前及治疗5 d后的心肌肌钙蛋白I (cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、钠尿肽(BNP)以及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)浓度。结果治疗前,各组患者cTnI、CK-MB、BNP、hs-CRP、TNF-α、IL-6水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,各组患者cTnI、CK-MB、BNP、hs-CRP、TNF-α、IL-6水平较治疗前均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与A组比较,B、C、D组患者cTnI [(1.60±0.42)、(1.54±0.41)、(1.04±0.42) vs (2.49±0.51)]、CK-MB [(39.38±5.74)、(37.91±5.62)、(28.91±5.62) vs (62.52±5.28)]、BNP [(855.58±69.13)、(804.91±69.62)、(658.26±57.62) vs (1203.26±56.92)]、hs-CRP [(4.48±0.73)、(5.76±0.56)、(3.76±0.76) vs (6.65±0.71)]、TNF-α[(41.28±11.27)、(49.76±11.16)、(38.76±10.16) vs (63.28±10.26)]、IL-6[(31.27±4.59)、(36.76±4.16)、（21.76±5.16）vs [46.48±4.83)]水平均降低,而D组各项指标降低更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,D组患者心功能改善更明显(P<0.05)。结论脓毒症早期联合使用阿托伐他汀和美托洛尔可以明显减少脓毒症患者心肌损伤程度,改善心脏功能。     

老年脓毒症合并心肌损伤患者心肌损伤 标志物、炎症因子与预后的相关性分析

目的 探讨老年脓毒症合并心肌损伤患者心肌损伤标志物、炎症因子变化及其与急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ（acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ）、序贯器官衰竭评估（sequential organ faiure assessment,SOFA）评分的相关性。方法 选取浙江省立同德医院2018年2月至2021年2月收治的66例老年脓毒症患者纳入研究,将合并心肌损伤者纳入观察组（n=33）,无心肌损伤者纳入对照组（n=33）。比较两组患者的心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,cTnI）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzymes,CK-MB）、肌红蛋白（myoglobin,Mb）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、APACHEⅡ评分、SOFA评分情况,采用Pearson相关分析法分析血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分的相关性。结果 观察组患者的血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平、APACHEⅡ评分、SOFA评分均明显高于对照组（P<0.05）。Pearson相关分析结果显示,血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分均呈正相关（P<0.05）。结论 老年脓毒症合并心肌损伤患者的血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平升高,可直接反映患者的病情和预后。     

AGEs-RAGE/NF-κB途径对慢性间歇低氧小鼠脏器的影响及大株红景天对其脏器的保护作用

目的 通过建立慢性间歇低氧小鼠模型探讨晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs) -糖基化终末产物受体(advanced glycosylation end product-specific receptor,RAGE) /核因子-κB（NF-κB）途径与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（obstructive sleep apnea syndrome,OSAS）脏器损伤的关系以及大株红景天注射液对其脏器的保护作用。方法采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测10只健康对照组小鼠（对照组）、11只单纯慢性间歇低氧小鼠（A组）、11只慢性间歇低氧后再复氧小鼠（B组）、11只慢性间歇低氧后使用大株红景天注射液腹腔注射的小鼠（C组）血清中AGEs、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达水平,用Western Blotting方法检测小鼠大脑及心脏中RAGE及NF-κB蛋白的表达情况,并观察经HE染色后组织形态学改变情况。结果ELISA结果：与对照组相比,A组小鼠血清中ACEs、IL-6、TNF-α水平显著升高（P＜0.05）;与A组对比,B组及C组小鼠血清AGEs水平有下降趋势（P＞0.05）;与A组相比,C组血清IL-6水平有所降低（P＜0.05）。而B组及C组之间差异无统计学意义(P>0.05);而在血清TNF-α水平方面,B组及C组均较A组下降（P＜0.05);而B组及C组两组间差异无统计学意义（P>0.05）。RAGE免疫组化结果: 心脏组织：对照组小鼠RAGE及NF-κB的表达最弱;A组小鼠的NF-κB的表达在各组中表达最强,其RAGE蛋白表达比对照组及B组强,而与C组相仿;C组小鼠RAGE及NF-κB较对照组及B组表达增多。大脑组织：A组的RAGE及NF-κB蛋白在各组小鼠的大脑组织中表达最强;对照组小鼠RAGE表达较少,NF-κB蛋白在各组中表达最弱;与A组相比,C组的RAGE表达稍有减少,而NF-κB的表达则较其有更为明显的下降。HE染色结果：对照组小鼠心肌组织结构清晰完整、界限清楚、排列紧密;而A组小鼠心肌组织排列紊乱,结构、纹理不清,部分肌细胞核固缩深染。B组小鼠心肌结构较A组小鼠清晰,核固缩深染现象亦较其减少,而C组小鼠心肌结构较清楚,排列亦较紧密。结论OSAS可引起多器官、组织如心脏、大脑组织的损害。OSAS可激活AGEs-RAGE/NF-κB通路,调节炎症细胞释放IL-6、TNF-α等炎症因子,或是OSAS易合并多脏器损害的原因之一。大株红景天注射液有一定程度的抗炎作用,可用于防治OSAS多脏器的损害,但其作用机制与AGEs-RAGE/NF-κB信号通路的激活无明显关系。     

基于维生素D免疫调节作用研究加味凉膈散在脓毒症急性肺损/急性呼吸窘迫综合征中的干预机制

目的：基于维生素D免疫调节作用探讨加味凉膈散（LGS）对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的脓毒症急性肺损伤（ALI）/急性呼吸窘迫综合征（ARDS）小鼠的干预机制。方法：将72只8周龄雄性C57小鼠随机分为假手术组、模型组、LGS组。连续给药5 d,末次给药1 h后,采用CLP建立脓毒症ALI/ARDS模型。每组各取12只,观察小鼠的7 d生存率;剩余小鼠于术后24 h处死,收集血清,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及25-羟基维生素D3[25(OH)D3]水平。结果：(1)与假手术组相比,模型组小鼠7 d生存率显著降低（P<0.05）,血清中炎症因子IL-6、TNF-α水平显著升高,而25(OH)D3水平显著降低（P<0.05）;(2)与模型组比较,LGS组小鼠7 d生存率显著提高（P<0.05）,血清中炎症因子IL-6、TNF-α水平显著降低（P<0.05）,25(OH)D3水平明显升高（P<0.05）。结论：LGS可能基于维生素D免疫调节作用干预脓毒症ALI/ARDS。     

卡托普利对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用及机制研究

目的:研究卡托普利对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法:按随机数字表法将48只雄性C57BL/6J小鼠（6～8周龄）分为4组:对照组（Control组）、卡托普利组（Captopril组）、脂多糖组（LPS组）、卡托普利+脂多糖组（Captopril+LPS组）,每组12只。实验前30 min,Captopril组和Captopril+LPS组预先经腹腔给予卡托普利（50 mg/kg）处理,Control组和LPS组给予等量生理盐水对照。采用腹腔注射脂多糖（LPS,15 mg/kg）的方法制备脓毒症模型（LPS组和Captopril+LPS组）,Control组和Captopril组给予等量生理盐水。各组于制模后12 h采集标本,采用无创尾套测压法测量小鼠平均动脉压（MAP）,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清炎性因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,HE染色观察心肌组织病理形态改变,高分辨小动物超声成像系统检测心功能,Western印迹检测心肌组织磷酸化核因子-κB p65（p-NF-κB p65）蛋白表达。结果:造模后12 h,Captopril组各项指标与Control组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。与Control组相比,LPS组MAP下降（q=4.377,P＜0.05）;血清IL-6 、TNF-α水平明显升高（q=4.966、10.440,均P＜0.05）; 左室射血分数（LVEF%）、左室短轴缩短率（LVFS%）水平明显降低（q=6.104、6.390,均P＜0.01）;心肌纤维断裂,间质水肿,炎性细胞浸润加重;心肌组织p-NF-κB p65蛋白表达水平明显升高（q=12.430,P＜0.001）。和LPS组比较,Captopril+LPS组MAP差异无统计学意义（q=2.617,P＞0.05）;血清IL-6、TNF-α水平下降（q=4.085、5.721,均P＜0.05）; LVEF%、LVFS%水平升高（q=4.366、4.297,均P＜0.05）;心肌损伤病理改变减轻;心肌组织p-NF-κB p65蛋白表达水平下降（q=5.124,P＜0.01）。结论:卡托普利可能通过抑制核因子-κB的活化,减少炎性细胞因子（IL-6和TNF-α）产生,抑制脓毒症引起的心肌炎症,从而减轻脓毒症心肌损伤。     

抑制铁死亡可减轻脓毒症小鼠的心肌损伤：脂钙蛋白-2的作用

目的 观察铁死亡在盲肠结扎与穿孔（CLP）法诱导的脓毒症小鼠心肌损伤中的作用,并探讨脂钙蛋白-2（Lcn2）在铁死亡中的可能作用。方法 选取8周龄雄性C57BL/6小鼠,采用CLP法诱导脓毒症心肌损伤模型。小鼠随机分为3组（10只/组）：假手术组、脓毒症组（CLP,小鼠接受CLP手术）、脓毒症+铁死亡抑制剂Ferrostain-1组（CLP+Fer-1,小鼠腹腔注射浓度为5 mg/mL的Fer-1 5 mg/kg,1 h后接受CLP手术）。各组小鼠术后24 h通过超声心动图检测小鼠心功能。H&E染色观察心肌损伤,透射电镜观察心肌纤维细微结构和线粒体的变化;ELISA法测定血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;组织铁试剂盒测定心肌组织铁含量的变化;Western blot法检测心肌组织中Lcn2蛋白和铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）和铁死亡抑制蛋白1（FSP1）的表达变化。结果 与假手术组相比,CLP术后24 h,脓毒症小鼠心脏收缩与舒张功能减弱,左心室射血分数（LVEF%）、左心室缩短分数（LVFS%）和左心室舒张末期内径（LVIDd）降低（P<0.05）;左心室收缩期末期内径（LVIDs）升高（P<0.05）。与CLP组相比,CLP+铁死亡抑制剂Fer-1组LVEF%、LVFS%和LVIDd升高（P<0.05）;LVIDs降低（P<0.05）。光镜下观察到CLP小鼠心肌纤维排列不整齐,部分变性,有炎症细胞浸润,间质水肿,横纹模糊,红细胞渗出。透射电镜观察到部分线粒体嵴减少,外膜破裂,部分线粒体变小,膜密度增高。CLP+Fer-1组小鼠心肌形态学有改善,线粒体损伤减轻。与假手术组相比,CLP组血清TNF-α水平、心肌组织铁含量、Lcn2蛋白表达升高（P<0.01）,GPX4、FSP1蛋白表达降低（P<0.01）。与CLP组相比,CLP+Fer-1组血清TNF-α水平、心肌组织铁含量、和Lcn2蛋白表达降低（P<0.05）;GPX4、FSP1蛋白表达升高（P<0.05）。结论 来源于GPX4、FSP1不同途径的铁死亡参与CLP引起的脓毒症性心肌损伤的发生,抑制铁死亡可减轻脓毒症心肌损伤,Lcn2可能参与其中。     

旋毛虫及其虫源性蛋白对盲肠结扎穿孔诱导的小鼠脓毒症的影响

目的观察旋毛虫及其虫源性蛋白对盲肠结扎穿孔（CLP）诱导的小鼠脓毒症的影响。方法80只雄性BALB/c小鼠随机 分为假手术组、CLP组、旋毛虫肌幼虫（ML）预感染组、旋毛虫肌幼虫虫体可溶性蛋白（SMP）处理组和排泄分泌蛋白（MES）处理 组。ML预感染组于术前28 d经口感染300条旋毛虫肌幼虫,其余各组分别于术后30 min腹腔注射PBS或SMP（25 μg/只）或 MES（25 μg/只）。观察小鼠术后状态和72 h生存率,检测术后12 h小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移 酶（AST）、尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）水平及TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、TGF-β水平,观察小鼠肝和肾组织病变。结果与假手术 组相比,CLP组72 h生存率降低,血清中ALT、AST、BUN和Cr水平及细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10和TGF-β水平均明显 升高（P<0.05）。肝中肝索排列紊乱,肝细胞水肿,肾中部分血管球皱缩,肾小管细胞水肿。与CLP组相比,ML预感染组血清中 ALT、AST、Cr、TNF-α和IL-1β水平降低,IL-10和TGF-β水平升高（P<0.05）;SMP处理组血清中ALT、AST、Cr、TNF-α和IL-1β水 平降低,TGF-β水平升高（P<0.05）;MES处理组72 h生存率明显升高,血清中ALT、AST、BUN、Cr、TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显 降低,IL-10和TGF-β水平明显升高（P<0.05）,肝和肾组织结构损伤明显减轻。结论旋毛虫及其虫源性蛋白可减少CLP诱导的 脓毒症小鼠血清中促炎因子的释放,促进免疫调节因子的释放,其中MES效果更为显著,并能减轻肝和肾结构和功能的损伤。     

自噬在大蒜素减轻脓毒症小鼠急性肺损伤中的作用

目的：探讨自噬在大蒜素减轻脓毒症小鼠急性肺损伤中的作用及机制。方法：将152只20~25 g的8周龄雄 性Balb/c小鼠随机分为4组：假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)、大蒜素治疗组(Allicin组)及自噬抑制组(3-MA组)。脓 毒症模型采用盲肠结扎穿孔法;Allicin组于术后6和12 h用大蒜素(30 mg/kg,腹膜内注射)干预;3-MA组在大蒜素干预 之后0.5 h加用3-MA(15 mg/kg,腹膜内注射);S组和CLP组于同时间点给予等量生理盐水。每组随机取20只小鼠,观 察术后7 d生存率。每组各取12只小鼠,于术后24 h时收集肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fl uid,BALF)(n=6)及肺组织 (n=6),采用ELISA法测定BALF中TNF-α和IL-6水平;HE染色观察肺部病理变化,免疫组织化学法测定肺组织自噬蛋 白微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3B)和Beclin-1的表达;采用比色法检测肺组织 MDA含量及SOD活性。结果：与S组比较,CLP组7 d生存率降低(P<0.05),BALF中TNF-α及IL-6水平升高(P<0.05),肺 损伤评分增加(P<0.05),肺组织MDA含量增加、SOD活性下降(P<0.05),肺组织LC3B及Beclin-1表达升高(P<0.05);与 CLP组比较,Allicin组7 d生存率升高(P<0.05),BALF中TNF-α和IL-6水平降低(P<0.05),肺损伤评分下降(P<0.05),肺组 织MDA含量下降,SOD活性增加(P<0.05),肺组织LC3B和Beclin-1表达升高(P<0.05);与Allicin组比较,3-MA组小鼠7 d 生存率降低(P<0.05),BALF中TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05),肺损伤评分增加(P<0.05),肺组织MDA含量增加、SOD 活性下降(P<0.05),肺组织LC3B和Beclin-1表达降低(P<0.05)。结论：大蒜素可能通过增强自噬水平减轻脓毒症小鼠急 性肺损伤。     

褪黑素通过激活Nrf2信号和抑制炎症反应减轻小鼠心脏缺血再灌注损伤

目的 探讨褪黑素（Mel）激活Nrf2信号抑制炎症反应改善小鼠心脏缺血再灌注（IR）损伤的作用。方法 采用小鼠冠状动脉左前降支结扎,缺血30 min,再灌注2 h或24 h模拟缺血再灌注模型,采用随机数字表法将C57/bl6小鼠随机分为4组：假手术组（Sham）、缺血再灌注组（IR）、褪黑素处理缺血再灌注组（Mel+IR）和褪黑素联合Nrf2抑制剂ML-385处理缺血再灌注组（Mel+ML-385+IR）。伊文氏蓝/TTC染色检测心肌梗死面积,ELISA检测血清中LDH含量,超声评价心脏功能,Western blot检测Bax、Bcl2、Nrf2及其底物NQO-1和HO-1以及炎症分子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,TUNEL染色观察细胞凋亡率。结果 和Sham组相比,IR组心肌梗死面积和血清中LDH含量明显增加,心脏功能降低,Bax表达增加而Bcl2表达减少,细胞凋亡率增加,TNF-α、IL-1β、IL-6的表达显著增加（P<0.01）,同时,Nrf2、NQO-1、HO-1的表达明显降低（P<0.01）;而给予Mel处理后,可显著减小心肌梗死面积,降低血清中LDH含量,改善心脏功能,减少Bax表达并增加Bcl2表达,减小细胞凋亡率,降低TNF-α、IL-1β、IL-6表达（P<0.01）,上调Nrf2、NQO-1和HO-1的表达（P<0.01）;然而,ML-385可明显阻断Mel对心肌缺血再灌注的保护作用和对Nrf2信号的调控。结论 Mel改善小鼠心脏缺血再灌注损伤,其机制与激活Nrf2信号,降低炎症反应有关。     

PI3K/Akt通路在内吗啡肽-1后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨内吗啡肽-1对心肌缺血再灌注损伤中PI3K/Akt信号通路的作用以及对细胞凋亡的影响。方法 将50只SD雄性大鼠随机分为5组：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）、内吗啡肽-1后处理组（EM50组）、内吗啡肽-1+渥曼青霉素后处理组（EM50+Wort组）和PI3K/Akt信号通路抑制剂渥曼青霉素后处理组（Wort组）。采用结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min复制心肌缺血再灌注模型,实验期间动态监测大鼠心率、平均动脉压;再灌注结束后检测大鼠血浆乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌钙蛋白I、白介素-6、肿瘤坏死因子-α、氧化应激指标超氧化物歧化酶和丙二醛等生化指标,RT-PCR检测Bax和Bcl-2基因的表达情况,Western blot检测心肌组织中凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、磷酸化Akt蛋白和总Akt蛋白的表达。结果 与S组比较,IR组心率和血压降低（P<0.05）;与IR组比较,EM50组心率和血压有所增高（339.94±26.65 vs 284.01±34.99;75.02±14.45 vs 55.83±20.98,P<0.05）;血浆中乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌钙蛋白I、白介素-6、肿瘤坏死因子-α和丙二醛含量或活性下降（P<0.05）,氧化应激指标超氧化物歧化酶活性增加（132.77±8.25 vs 84.10±12.42,P<0.05）;p-Akt蛋白表达水平较高（0.61± 0.06 vs 0.38±0.04,P<0.05）,Bax基因和cleaved caspase-3蛋白表达量降低（1.70±0.39 vs 3.78±0.71;0.30±0.08 vs 0.53±0.07,P< 0.05）,Bcl-2基因的表达量升高（1.20±0.44 vs 0.55±0.25,P<0.05）;与EM50组比较,EM50+Wort组心率和血压降低（P<0.05）;血浆中乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌钙蛋白I、白介素-6、肿瘤坏死因子-α和丙二醛含量或活性增加（P<0.05）,氧化应激指标超氧化物歧化酶活性降低（P<0.05）;p-Akt蛋白表达水平较低（P<0.05）,Bax基因和cleaved caspase-3蛋白表达量升高（P<0.05）,Bcl-2基因表达量降低（P<0.05）。结论 EM-1后处理可调节细胞凋亡,减轻心肌缺血再灌注损伤。PI3K/Akt信号通路可能对EM-1后处理产生的心肌保护效应发挥一定的介导作用。     

Toll样受体4在脓毒症大鼠心肌中的表达

目的 观察Toll样受体4(TLR4)在脓毒症大鼠心肌组织中的表达,探讨其在脓毒症心肌损伤发生机制中的作用.方法 将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(SH组,n=20)及脓毒症组(CLP组,n=20),采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症动物模型,24 h后,检测各组的血清脑钠肽(BNP)、肌钙蛋白I(cTnI)的水平,观察心肌组织病理变化及心肌组织肿瘤坏死因子(TNF-α)和TLR4的表达水平.结果 CLP组大鼠出现明显的心肌损伤(心肌水肿及炎性细胞浸润,心肌细胞结构松散、紊乱),CLP组大鼠血清BNP和cTnI水平分别为(5.33±0.26)ng/mL、(3.89±0.13)ng/mL,均高于SH组的(1.05±0.19)ng/mL和(0.87±0.07)ng/mL,差异均有显著统计学意义(P<0.01);CLP组大鼠心肌组织的TNF-α和TLR4表达水平分别为(23.71±1.59)ng/mL、(38.03±5.02),均高于SH组的(8.99±0.52)ng/mL和(11.32±2.51),差异均有显著统计学意义(P<0.01).结论 TLR4在脓毒症大鼠心肌组织中表达上调,TLR4可能在脓毒症心肌损伤发病机制中起重要作用.     

虎杖苷对脓毒症致急性肾损伤小鼠的保护作用

目的 观察虎杖苷对盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture,CLP）所致脓毒症诱导的急性肾损伤小鼠的影响,并初步探讨其作用机制。方法 建立小鼠CLP诱导的脓毒症致急性肾损伤模型,随后用不同剂量的虎杖苷（50、100、300 mg/kg）干预,观察小鼠一般情况,并于手术24 h后,用试剂盒方法测定血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）水平,ELISA法测定血清白细胞介素-6（IL-6）表达量,Western blotting法检测肾脏诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白水平,并取肾脏组织进行病理分析。结果 与模型组相比,虎杖苷明显改善小鼠一般情况,同时降低血清BUN、Cr、IL-6及肾脏中iNOS蛋白水平,缓解肾脏组织损伤,并呈一定的剂量依赖关系。结论 虎杖苷对脓毒症致急性肾损伤具有保护作用,其作用机制可能与其抑制血清IL-6及肾脏中iNOS蛋白表达有关。     

CC16在脓毒症大鼠心肌中的表达

目的 观察Clara细胞分泌蛋白(Clara cell secretory 16-KD protein,CC16)在脓毒症大鼠心肌组织中的表达,探讨其在脓毒症心肌损伤发生机制中的作用.方法 将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(SH组,n=20)及脓毒症组(CLP组,n=20),采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症动物模型,24 h后,检测各组的血清脑钠肽(BNP)、肌钙蛋白I(cTnI)的水平,观察心肌组织病理变化及心肌组织CC16的表达水平.结果 CLP组出现明显的心肌损伤,CLP组血清BNP、cTnI高于SH组(P<0.01),心肌CC16低于SH组(P<0.01).结论 CC16在脓毒症大鼠心肌组织中表达下降,CC16可能在脓毒症心肌损伤发病机制中起重要作用.     

阻断白介素-3减轻脓毒血症小鼠的炎症反应

目的  探究阻断白介素-3（IL-3）对脓毒性小鼠炎症反应的作用及其潜在机制。方法  小鼠盲肠结扎穿孔手术（CLP）后,分为野生型小鼠组和IL-3缺陷型小鼠组,每组13只,连续7 d观察和记录小鼠的死亡数。另取野生型小鼠和IL-3缺陷型小鼠,每组20只,分为3组进行实验：①组小鼠分别在CLP后0、12和24 h进行临床症状评分和体温测量;另在24 h测血压,采血,用于测定干扰素-α（IFN-α）、白介素-1β（IL-1β）和白介素-6（IL-6）水平;②组小鼠分别在CLP后0、6、12和24 h采血并在24 h取材（肝、肺）,用于测定中性粒细胞、单核细胞总数及病理、免疫组织化学分析;③组小鼠分别在CLP后0和24 h采血并收集支气管肺泡灌洗液用于蛋白总量和生化指标[天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）]的测定。结果  与野生型小鼠组比较,CLP后IL-3缺陷型小鼠的存活率和体温升高（P <0.05）,血压良好,临床症状评分下降（P <0.05）。此外,与野生型小鼠组比较,CLP后IL-3缺陷型小鼠炎症细胞因子IFN-α、IL-1β和IL-6水平降低（P <0.05）;肺和肝组织中的中性粒细胞和单核细胞总数降低（P <0.05）;支气管肺泡灌洗液中的总蛋白和血生化指标（AST、ALT）也降低（P <0.05）。结论 阻断IL-3能够减轻脓毒性小鼠的炎症反应,提高脓毒性小鼠的存活率。