纳米硫化铜复合物光热治疗对舌鳞状细胞癌的体内外抑制作用

目的 探讨BSA@CuS-PEG纳米复合物的制备、表征、功能及其对舌癌的抗肿瘤效应的作用。方法 采用透射电镜,动态光散射,Zeta电位分析及紫外吸收光谱分析方法分析BSA@CuS-PEG纳米复合物的表征,利用近红外II区激发光（1064 nm）探究其光热性能,同时采用CCK-8实验评估该纳米复合物的细胞毒性,流式细胞学实验分析细胞周期分布水平。最后,构建单侧皮下荷瘤模型探究BSA@CuS-PEG纳米复合物的体内抗肿瘤作用。结果 成功制备BSA@CuS-PEG纳米复合物,在0.5 W/cm2功率的近红外光照射下其变化温度值（ΔT）约为30 ℃,具有优良的光热性能。CCK8实验表明：单纯BSA@CuS-PEG对肿瘤细胞无明显毒性;而相比于纯材料组,BSA@CuS-PEG联合近红外光照射对Cal27及SCC9舌癌细胞具有显著抑制增殖作用（P<0.001）。同时细胞周期分析显示：相比于纯材料组,BSA@CuS-PEG联合近红外光照射使Cal27及SCC9舌癌细胞更多被阻滞于G2/M期（P<0.001）。小鼠单侧皮下荷瘤模型表明：相比于生理盐水联合近红外光照射处理组,BSA@CuS-PEG联合近红外光照射发挥显著的体内抗肿瘤作用（P<0.001）。结论 BSA@CuS-PEG纳米复合物具有良好的光热效应,体内外抗肿瘤效应,为舌癌原发灶无创早期诊断和非手术治疗提供一种潜在思路和手段。     

基于氧化亚铜纳米颗粒的光热/化学动力协同策略体外抑制胃癌细胞的迁移

目的 探讨氧化亚铜(Cu₂O)纳米的制备、物化表征及其胃癌抗肿瘤效应的作用。方法 采用透射电镜,动态光散射,Zeta电位分析及紫外吸收光谱分析方法分析Cu₂O纳米的形貌、粒径大小及类芬顿性能,利用不同浓度的Cu₂O纳米对细胞进行处理,并进行光照或者非光照处理,并分别采用细胞增殖-毒性实验(CCK-8)、Transwell细胞迁移实验评估该纳米的体外抗肿瘤作用效应。结果 制备的Cu₂O纳米为100 nm左右的类圆形结构,在近红外光(NIR, 0.5/cm2)照射5 min后Cu₂O纳米温度从25℃提高到50℃,同时Cu₂O纳米在过氧化氢浓度和pH为近中性的条件下(pH=6.5)可催化大量活性氧(ROS)生成。CCK-8试验表明：相比于对照组,Cu₂O纳米对胃癌细胞具有浓度依赖性抑制增殖作用;Transwell细胞迁移实验表明：Cu₂O纳米能抑制胃癌细胞的迁移能力。结论 Cu₂O铜基纳米颗粒具备...     

近红外克酮酸菁光热剂及其纳米制剂对肿瘤的光热治疗效果

光热治疗（photothermal therapy,PTT）是一种通过外部光源照射光热剂（photothermal agent,PTA）,将光能转换为热能以杀伤肿瘤细胞的肿瘤治疗手段,具有靶向性强、侵入性小、不良反应少等优势。光热剂是决定光热治疗效果的关键因素之一。克酮酸菁（croconaine,CR）及其纳米制剂由于具有强烈的近红外（near-infrared,NIR）吸收、高的光热转换效率以及优异的化学和热稳定性等优点,近年来已被用做PTA,并取得了良好的肿瘤PTT效果。本文就目前文献所报道的用于光热治疗的克酮酸菁分子结构及结构改造对光热性质的影响,以及其纳米制剂的肿瘤光热治疗效果进行了综述,可为后续开发高效的光热诊疗试剂提供借鉴与参考。     

基于双重类酶活性钯负载氧化石墨烯纳米酶对脑胶质细胞凋亡的影响

目的：构建钯负载氧化石墨烯（GO@Pd）纳米酶，探究其类酶活性对脑胶质细胞凋亡的影响。方法：通过原位生长法合成GO@Pd纳米酶并进行表征；体外检测GO@Pd的类超氧化物歧化酶（SOD）活性、类过氧化物酶（POD）活性和消耗谷胱甘肽（GSH）的能力；并利用亚甲基蓝检测其羟基自由基（·OH-）的生成；通过细胞增殖试剂盒评价GO@Pd的体外生物安全性；分别将Pd、GO和GO@Pd与人脑星形胶质母细胞瘤（U-118MG）细胞共同孵育,利用DCFH-DA荧光探针检测各组细胞内活性氧（ROS）水平；通过线粒体膜电位染色检测各组细胞内线粒体膜电位变化。结果：经一系列材料表征表明成功制备了大小均一、分散性良好的GO@Pd纳米酶；类酶活性检测结果显示，GO@Pd同时拥有类SOD和类POD双重类酶活性，并且可以催化H2O2生成·OH-和消耗GSH；当GO@Pd浓度在0～100μg/mL之间，C8-D1A细胞活力保持在90%以上；与空白对照组相比，GO@Pd组的U-118MG细胞内ROS水平显著升高（P<0.001），并且其线粒体膜电位染色结果红色/绿色荧光强度比值显著降低（P<0.000 1）...     

5-ALA治疗和hTERT mRNA的反义寡核苷酸联合应用对人卵巢癌细胞的杀伤作用及其机制

目的：观察5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）光动力治疗（PDT）和人端粒酶催化亚单位 (hTERT) mRNA的反义寡核苷酸（ASODN)联合应用对人卵巢癌3AO细胞的增殖抑制及促凋亡作用,探讨两种方法联合应用协同促进对人卵巢癌3AO细胞的杀伤作用机制。方法：采用MTT法筛选不同浓度5-ALA 和激光能量照射对人卵巢癌3AO细胞增殖抑制作用的最佳组合参数; RT-PCR法检测hTERT ASODN和SODN转染后hTERT mRNA表达水平的变化。将人卵巢癌3AO细胞分为空白
对照组、hTERT ASODN转染组、hTERT SODN转染组、5-ALA PDT组、hTERT ASODN转染+5-ALA PDT组和hTERT SODN转染+5-ALA PDT组,应用MTT法检测各组人卵巢癌3AO细胞增殖抑制率;应用膜联蛋白V-硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/碘化丙啶(PI)双染色结合流式细胞术检测
各组人卵巢癌3AO细胞凋亡率。结果：5-ALA PDT对人卵巢癌3AO细胞的增殖抑制作用随着光敏剂浓度的增加和激光能量的增大而增加(P<0.05);不同浓度hTERT ASODN转染人卵巢癌3AO细胞24 h后,hTERT mRNA表达水平呈浓度依赖性下调(P<0.05),而hTERT-SODN对人卵巢癌3AO细胞hTERT mRNA表达无显著影响(P>0.05)。hTERT ASODN转染+5-ALA PDT (5-ALA浓度为0.5 mmol•L-1,激光能量密度为2.50 J•cm-2)组人卵巢癌3AO细胞的增殖抑制率高于5-ALA PDT组和hTERT ASODN组(P<0.05)。hTERT ASODN转染+5-ALA PDT组人卵巢癌3AO细胞的凋亡率为29.28％,显著高于hTERT ASODN 转染组（12.79％）和5-ALA PDT组（21.19％)(P<0.05）。结论：hTERT ASODN转染与5-ALA PDT联合治疗可协同增强对人卵巢癌3AO细胞的增殖抑制作用,其机制可能与联合作用促进细胞凋亡有关联。     

纳米二氧化硅颗粒对血管内皮细胞的毒性及其凋亡诱导作用

目的:研究纳米二氧化硅(SiO₂)颗粒的血管内皮细胞毒性和可能的作用机制,为探讨纳米SiO₂颗粒毒性效应及安全性评价提供参考依据。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)随机分为对照组和不同浓度纳米SiO₂颗粒暴露组,暴露浓度分别为12.5、25.0、50.0及100.0 mg·L^-1。采用透射电镜(TEM)观察纳米SiO₂颗粒粒径、形貌及分散性。细胞处理24 h后,电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)法测定细胞中硅水平;MTT法测定细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞膜的完整性;DCFH-DA荧光探针标记激光共聚焦显微镜观察细胞中活性氧(ROS)水平;DAPI染色荧光显微镜下观察细胞核形态;Annexin Ⅴ/PI双染标记流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率;罗丹明123线粒体试剂盒检测细胞线粒体膜电位。结果:TEM观察,纳米SiO₂颗粒分布均匀,大小一致,颗粒呈球形,分散性好,未发生聚集。用Image J 软件计算得到颗粒平均粒径为(57.66 ± 7.30)nm。与对照组比较,纳米SiO₂颗粒作用于HUVECs后,细胞活力下降(P<0.05),细胞中硅水平和培养液中LDH活性增加(P<0.05),细胞中ROS水平升高,线粒体膜电位下降,甚至发生细胞凋亡。上述细胞效应均表现为随颗粒作用浓度的增加而逐渐明显,呈现一定的剂量依赖关系。结论:纳米SiO₂颗粒具有血管内皮细胞毒性,可诱导ROS生成和氧化应激,从而破坏细胞膜、损伤线粒体,最终引发细胞凋亡。     

Mn2+掺杂普鲁士蓝纳米颗粒T1-T2双模磁共振成像和光热治疗的体外研究

目的 制备一种Mn²⁺掺杂普鲁士蓝纳米颗粒,用于检测体外T1-T2双模磁共振成像和光热治疗效果。方法 采用微乳液法,以二氯化锰、氯化亚铁和铁氰化钾为原料制备Mn²⁺掺杂普鲁士蓝纳米颗粒;观察纳米颗粒的体外T1-T2双模磁共振成像性能;考察808 nm 激光照射后纳米颗粒的升温效果;通过CCK-8法和AM/PI活死细胞染色法观察体外光热治疗效果。结果 成功制备了Mn²⁺掺杂普鲁士蓝纳米颗粒,粒径为39.46±0.42 nm,电位为-25.9±1.2 mV,粒径均匀,分散性好;808 nm激光照射10 min 后,纳米颗粒分散系可以升温至 90 ℃。由 7T 磁共振测得的数据拟合获得 r1 值为 0.68（mmol/L）^-1s^-1,r2 值为 3.65（mmol/L）^-1s^-1,具有良好的T1-T2双模磁共振成像效果;在808 nm激光照射下,可显著降低细胞存活率（P<0.05）;CCK-8 法和AM/PI活死细胞染色法的结果均显示纳米颗粒对HepG2细胞具有良好的光热治疗效果。结论 成功制备了粒径均一的Mn²⁺掺杂普鲁士蓝纳米颗粒,该纳米颗粒的T1-T2双模磁共振成像效果和体外光热治疗效果良好,且无明显细胞毒性。     

白藜芦醇通过保护线粒体功能延缓骨髓间充质干细胞衰老

目的: 探讨白藜芦醇对骨髓间充质干细胞（MSC）衰老的影响及其机制。方法: 分离SD乳鼠（7日龄）MSC,传代培养至第3代后检测0、1、10、50 g/L D-半乳糖对MSC衰老的影响,确定D-半乳糖诱导MSC衰老的最佳浓度。再将细胞随机分为10、50、100 μmol/L白藜芦醇组及对照组。衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色观察各组细胞衰老变化;DCFH-DA染色检测总活性氧水平;MitoSOX Red染色检测线粒体活性氧水平;线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1法）检测线粒体膜电位变化;纯化线粒体膜通道孔（mPTP）比色法检测线粒体膜通道开放水平;蛋白质印迹法检测衰老相关蛋白p53、p16、γ-H2AX表达和细胞质内线粒体细胞色素C外泄水平。结果: 10、50 g/L D-半乳糖可明显增加SA-β-gal染色阳性MSC数量和线粒体活性氧水平（均P < 0.01）。与对照组比较,白藜芦醇组SA-β-gal染色阳性细胞数减少（均P < 0.01）,p53、p16和γ-H2AX表达减少,细胞内总活性氧和线粒体活性氧水平下降（均P < 0.01）,线粒体膜电位下降（P < 0.05或P < 0.01）,膜通道开放水平降低（P < 0.05或P < 0.01）,细胞质内细胞色素C外泄减少。结论: 白藜芦醇可保护MSC线粒体功能,延缓MSC衰老。     

补骨脂素加长波紫外线光化学疗法对K562细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

目的：研究补骨脂素（psoralen，PSO}加长波紫外线（ultraviolet—A，UVA）光化学疗法（PUVA）对人白血病细胞K562凋亡及线粒体膜电位的影响。方法：K562细胞与不同浓度PSO，接受或不接受UVA照射后共同培养，透射电子显微镜下观察细胞超微结构改变，流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化，采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果：PUVA处理后的K562细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变。PSO、UVA照射及PUVA均可使细胞凋亡率增加，线粒体膜电位下降；PUVA的作用显著强于前两者（P〈0．01）。结论：PUVA可诱导白血病K562细胞发生凋亡，诱导凋亡途径之一为下调线粒体膜电位水平。     

活性氧介导紫花牡荆素诱导卵巢癌HO-8910细胞调亡

目的:探讨紫花牡荆素(Casticin,CAS)诱导人卵巢癌HO-8910细胞凋亡是否涉及活性氧生成和线粒体膜去极化。方法:体外培养HO-8910细胞。AnnexinⅤ/PI双染色流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率;H2DCFH-DA探针FCM检测细胞活性氧生成;Rh123探针FCM分析细胞线粒体跨膜电位。结果:CAS诱导HO-8910细胞凋亡率增高,呈剂量依赖性。CAS以浓度依赖方式增高HO-8910细胞内活性氧水平。CAS处理细胞的Rh123平均荧光强度显著降低,表明CAS具有诱导细胞线粒体膜去极化作用。N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)部分拮抗CAS诱导细胞凋亡,并能减弱CAS诱导活性氧生成和线粒体膜去极化作用。结论:CAS诱导卵巢癌HO-8910细胞凋亡作用机制可能与促进细胞活性氧生成介导的线粒体膜去极化相关。     

叶绿素衍生物光动力学疗法对不同肿瘤细胞的体外杀伤效应

目的 :研究叶绿素衍生物 (CPD4 )光动力学疗法 (PDT)对人卵巢癌细胞、肝癌细胞、胆囊癌细胞的体外杀伤效应。方法 :应用MTT比色分析法研究PDT CPD4对人卵巢癌细胞 (3AO)、肝癌细胞 (HCC)、胆囊癌细胞 (GBC SD)的光动力杀伤效应。结果 :PDT对人卵巢癌细胞、肝癌细胞、胆囊癌细胞杀伤效应明显 ,CPD4的光动力学杀伤效应与药物浓度呈正相关 ,并与激光能量有关。结论 :光动力学疗法对人卵巢癌细胞、肝癌细胞、胆囊癌细胞有明显杀伤效应 ,且与激光能量、药物浓度有关     

光动力作用对膀胱癌细胞线粒体相关调控蛋白Bcl-2/Bax表达的影响

目的探讨激光活化BPD-MA光动力诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制.方法应用免疫组织化学染色检测激光活化BPD-MA光动力作用后人膀胱癌细胞BIU-87线粒体相关调控蛋白Bcl-2和Bax蛋白表达水平.结果激光活化BPD-MA光动力作用后膀胱癌细胞线粒体相关调控蛋白Bcl-2表达显著低于对照组(P<0.05),而Bax蛋白表达水平无明显改变(P>0.05),但Bax/Bcl-2 比值较对照组明显上升(P<0.05).结论激光活化BPD-MA光动力作用后人膀胱癌细胞BIU-87线粒体相关调控蛋白Bcl-2表达水平的下降、Bax/Bcl-2比值的上升.激光活化BPD-MA光动力作用可能通过调控线粒体相关调控蛋白Bcl-2和Bax蛋白表达水平诱导人膀胱癌细胞株BIU-87发生凋亡.     

近红外光响应性复合纳米颗粒介导光热消融与自由基生成用于乳腺癌细胞的联合治疗

目的:制备新型聚多巴胺复合纳米颗粒,探究其对乳腺癌细胞的联合治疗.方法:以血清白蛋白,2,2-偶氮双[2-(2-咪唑啉-2-基)丙烷]二盐酸盐(AIPH),多巴胺为前驱物,通过一步氧化聚合法制备新型聚多巴胺纳米颗粒(AIPH@PB NPs);利用马尔文粒度分析仪、X射线光电子能谱和傅里叶红外光谱表征其理化学特性;利用紫...     

EXPERIMENTAL STUDY ON CYTOTOXIC EFFECTS OF HYPERBARIC OXYGEN AND PHOTODYNAMIC THERAPY ON MOUSE TRANSPLANTED TUMOR

An experimental study on the cytotoxic effects of hyperbaric oxygen combined with photodynamic therapy (fBO-PDT) on mouse transplanted tumors S180 and Ca759 was carried out using a self-dcsigned device of laser irradiation in hyperbaric oxygen chamber. The results re-vealed that HBO combined with PDT had a stronger tumor-cytotoxic effect than PDT alone (p<0.01). This study provided evidence for the theory that singlet-state oxygen plays an important role in PDT, and clarified the mechanism that mitochondria is initially implicated in the damage.     

5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学治疗胃癌的实验研究

目的探讨5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)介导的光动力学对人胃癌细胞MGC-803的治疗作用.方法将不同浓度的5-ALA加入细胞培养基中,随之给予相同剂量的激光辐射;之后用固定浓度的5-ALA处理细胞,并给予不同剂量的激光辐射.MTT法测定细胞生存率.结果在相同的辐射剂量下,经0.25、0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L的5-ALA处理的细胞生存率分别为(70.07±5.37)%、(50.04±4.99)%、(34.53±5.30)%、(26.89±4.44)%和23.90%±2.80%,除2.0和4.0 mmol/L5-ALA两组间外,其余各组间具有显著性差异(F=266.39,P＜0.001).在相同的5-ALA的浓度下,辐射剂量为6.25、12.5、25.0、50.0、100 J/cm2的细胞生存率分别为(83.50±10.43)%、(67.96±9.23)%、(33.80±8.26)%、(23.31±5.98)%和(14.96±3.50)%,各组之间有显著性差异(F=226.31,P＜0.0001).而单用5-ALA处理细胞,对应于其浓度为0.25、0.5、1.0、2.0,和4.0 mmol/L时的细胞生存率分别为(96.46±6.72)%、(97.48±5.27)%、(98.33±6.67)%、(99.47±6.97)%和(95.66±7.72)%,各浓度之间无显著性差异(F=0.79,P=0.5383).单纯激光辐射,其剂量为6.25、12.5、25.0、50.0、100.0 J/cm2时的细胞生存率也无显著性差异(F=0.61,P=0.6551).结论在较低的浓度范围内,5-ALA介导的光动力学治疗对人胃癌MGC-803细胞的杀伤作用随着5-ALA浓度的增加而增加,在较高浓度时则存在饱和现象,杀伤力与光剂量成正比.单纯激光不能产生光动力效应,5-ALA本身对细胞无毒性作用.5-ALA介导的光动力学治疗是很有希望的胃癌治疗方法.     

一种近红外光响应的温敏性纳米载药系统的研究

采用晶种生长法,以十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）作为软模板制备了长约50 nm、长径比为3.9的尺寸均一的用于近红外热疗的金纳米棒。通过静电层层组装(LbL)技术,将聚电解质和牛血清白蛋白组装到金纳米棒上,得到在水溶液中均匀分散的功能化温敏性纳米载药体系,同时利用基团之间静电作用力使带正电荷的小分子抗肿瘤药物盐酸阿霉素嵌合在该多功能的运载系统中。在近红外激光照射下,金纳米棒吸收光能转化成的热能使高聚物崩解,导致阿霉素从系统中释放出来,从而达到光热疗法与化疗方法联合治疗肿瘤的目的。     

人膀胱癌光动力学治疗的电镜观察

电镜观察15例光动力学治疗前后膀胱移行细胞癌的活检材料,证实此治疗对膀胱癌有显著作用。肿瘤组织内的毛细血管对光动力学作用最为敏感,照光20min后即出现明显损伤,24h后,毛细血管几乎完全坏死崩解。癌细胞的破坏出现较晚,迟于毛细血管。治疗4d后肿瘤组织水肿、出血,几全部坏死。治疗21～80d后,瘤床仍水肿并有出血及坏死物质复盖。表明血管的结构损伤与功能障碍在肿瘤光动力学治疗机理中起主要作用。