肾小管间质纤维化中转化生长因子β1的表达特征

目的 研究大鼠肾小管间质纤维化中转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）的表达特征。方法 以腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化实验模型,应用免疫组织化学（组化）、逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、原位杂交及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测６只正常及３０只模型大鼠肾组织ＴＧＦ－β１蛋白及基因表达。结果 ６只正常大鼠肾组织ＴＧＦ－β１主要位于皮髓交界处肾小管上皮细胞,ＴＧＦ－β１免疫组化平均阳性表达率为（     

转化生长因子-β1 在梗阻性肾病大鼠肾小管间质纤维化中的作用

目的探讨转化生长因子 (TGF) -β1在梗阻性肾病(UUO)大鼠梗阻肾中致肾小管间质进行性纤维化的作用.方法成年SD大鼠制成UUO模型,在梗阻后3、7、10、14 d处死.免疫组织化学染色法对其肾内α-平滑肌肌动蛋白(SMA)沉积量及侵入肾内的单核巨噬细胞数进行分析;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)对大鼠TGF-β1 mRNA、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1 mRNA及IV型胶原(Col-IV) mRNA转录量进行分析.结果随梗阻时间延长,侵入梗阻肾内单核巨噬细胞数、α-SMA沉积、Col-IV mRNA及TIMP-1 mRNA含量增加;示肾小管间质存在进行性纤维化.同时TGF-β1 mRNA含量明显增加,差异统计学意义(P<0.05).结论 TGF-β1促使梗阻性肾病大鼠肾小管间质进行性纤维化.     

肾小管上皮细胞表型转化在肾小管间质纤维化中的作用

肾小管间质纤维化(tubulointerstitial fibrosis,TIF)几乎是所有慢性肾脏疾病进行性发展的共同通路[1],是导致终末期肾病(ESRD)的主要病理基础.TIF以肾小管萎缩及消失、肾间质慢性炎细胞浸润、肾间质纤维化为特征[2].大量的研究表明,在各种原因引起的慢性肾脏疾病中,肾间质纤维化都可作为肾功能恶化的一个十分准确的预测指标,肾间质纤维化的程度与肾功能的相关性比肾小球硬化与肾功能的相关性更为密切,故小管间质纤维化的发生机制正越来越受到人们重视.     

梗阻性肾病大鼠肾小管间质进行性纤维化的监测

目的:探讨梗阻性肾病肾小管间质进行性纤维变性的发展过程。方法:建立大鼠单侧输尿管梗阻模型(UUO),采用免疫组化染色方法测其双侧肾形态学改变及胶原Ⅳ蛋白和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的沉积;应用RT-PCR定性和半定量的方法测其金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)mRNA、胶原ⅣmRNA的表达。结果:随着梗阻时间延长,梗阻侧肾脏肾小管间质变宽,肾小球无明显变化。梗阻肾内的胶原Ⅳ蛋白和α平滑肌肌动蛋白沉积增加,差异有统计学意义(P<0.05)。胶原ⅣmRNA、TIMP-1mRNA表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);对侧肾脏各项指标变化差异无显著性。结论:该模型稳定可靠,能较好地体现梗阻性肾病中肾小管间质纤维化进行性发展过程。     

结缔组织生长因子在关木通相关肾小管间质肾病肾间质纤维化中的作用

目的 通过观察关木通相关肾小管间质肾病(GMT-TIN)肾小管间质内纤维化相关生长因子表达及细胞外基质(ECM)沉积的特点,探讨其纤维化病变发生与发展的有关环节。方法 22例GMT-TIN患者根据病理特点分为急性组8例、慢性轻型组8例和慢性重型组6例,对其纤维化程度进行半定量分析。应用免疫组化SP法观察肾活检组织标本中,肾小管间质内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)、IV型胶原、结缔组织生长因子(CTGF)和转化生长因子 β1(TGF-β1)的表达情况。分析上述指标之间以及与纤维化病变之间的相关关系。结果 (1)各组肾小管间质内均检测到高表达的α-SMA、FN和IV型胶原,随病变慢性化加重3者表达均明显增强,并与肾间质纤维化程度正相关(P<0.01)。(2)各组肾间质内均出现CTGF及TGF-β1表达,2者间显著正相关(r=O.771,P<0.0001),但在时相上存在一定差异。(3)肾间质内CTGF表达分别与FN及IV型胶原沉积正相关(r=0.6855和0.5964,P<0.01)、与纤维化病变程度正相关(r=0.4941,P<0.05)。结论(1)GMT-TIN肾间质内CTGF的高表达、CTGF与ECM沉积以及纤维化病变的相关性,提示其在GMT-TIN肾间质纤维化病变中起重要作用。(2)CTGF与TGF-β1的相关关系及2者表达时相的差异,进一步支持CTGF可能作为TGF-β1的下游效应因子在纤维化病变     

成纤维细胞生长因子与肾小管间质纤维化的关系

多数慢性肾功能衰竭都伴有肾小管间质纤维化,研究肾小管间质纤维化对于揭示慢性肾功能衰竭的发生机制有着重要的意义。已有动物实验证实,损伤和再生的肾小管能够合成和分泌较多的成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）［ｌ］,而且细胞 因子对靶细胞的作用需要相应的受体。我们采用原位杂交和免疫组织化学（免疫组化）的方法检测ＦＧＦ及其相应的受体（ＦＧＦＲ）在伴有肾小管间质纤维化的增生硬化性肾炎的肾穿刺组织的表达情况,试图阐明ＦＣＦ在肾小管间质纤维化发生过程中的作用。 一、材料和方法 １．材料：选自１９９６年到１９９７年北京 医…     

17-β雌二醇对肾间质纤维化防治作用的探讨

目的探讨17-β雌二醇对肾间质纤维化防治作用可能的机制。方法雌性SD大鼠30只,随机分为4组：①对照组;②生理雌激素组;③低雌激素组;④17-β雌二醇组。21d后光镜观察单侧梗阻肾组织病理改变;通过免疫组化方法检测转化生长因子（TGF-β1）、α-平滑肌动蛋白（α-SMA）;并用RT-PCR方法检测肾组织α-SMAmRNA的表达。结果单侧输尿管梗阻各组出现肾小管间质纤维化改变,其肾组织TGF-β1。和α-SMA表达上调（P〈0．01）;与生理雌激素组相比,低雌激素组纤维化病变加重,上述物质表达均明显增多（P〈0．05）;而17-β雌二醇组则病变均减轻（P〈0．05）。结论注射17-β雌二醇可能通过下调TGF-β1,和α-SMA的表达,抑制细胞外基质的生成,进而韶到延绣肾间后纤维化的作用．     

蛋白尿致肾小管间质纤维化的机制及防治

肾间质纤维化是各种不同病因的慢性肾脏病进展到终末期肾病（ESRD）的共同病变过程。动物实验和临床试验表明，各种肾脏疾病进行性肾功能恶化主要取决于肾间质损伤的严重程度。蛋白尿是肾小球疾病的共同临床表现，长期蛋白尿不仅引起肾小球硬化，而且可以直接导致肾小管间质损伤，后者与肾小球疾病进展的关系更为密切。我们的研究发现，在血压、肾功能均正常且其他各项临床指标相近的条件下，显著蛋白尿IgA肾病患者的肾小球及肾小管间质损害程度更为严重，蛋白尿可作为独立的致病因子，直接造成IgA肾病患者肾小管间质损害。因此，研究肾间质纤维化的分子机制，探索有效的防治措施，对延缓ESRD的进程意义重大。本文重点阐述蛋白尿致肾小管间质损伤的机制及防治现况。     

碱性成纤维细胞生长因子与肾小管间质纤维化

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是成纤维细胞生长因子家族成员之一,主要作用是促进多种细胞分裂,诱导内皮细胞转化。近年发现,bFGF可促进肾小管细胞再生并使其向成纤维样细胞转化,能刺激肾小球系膜细胞增殖;同时还与TGF-β之间存在正反馈环,在肾小管间质纤维化过程中起重要作用。     

Erbin在肾间质纤维化中的表达和作用

目的 探讨Erbin在肾脏间质纤维化中表达量的变化及上调Erbin对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK52E）转分化的影响。 方法 体内实验采用SD大鼠5/6肾切除法建立肾纤维化动物模型,收集并检测各组血清中Scr、BUN水平;Masson染色观察肾间质纤维化程度;免疫组化及Western印迹检测Erbin的分布与表达。 体外实验采用TGF-β1（10 μg/L）刺激NRK52E细胞72 h建立上皮细胞-间充质转分化（EMT）细胞模型;免疫荧光及Western印迹法检测E钙黏蛋白（E-cadherin）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达变化;RT-PCR及Western 印迹法检测Erbin的表达变化。用脂质体2000将质粒 Prk5-myc-Erbin瞬时转染至NRK52E细胞,Western印迹法观察上调Erbin表达后对上述各种指标的影响。 结果 （1）假手术组大鼠肾功能正常[Scr（33.96±7.28） μmol/L、BUN（8.11±2.55） mmol/L],Masson染色未见肾间质纤维化,Erbin在肾小管表达较少;模型组大鼠Scr [（140.52±61.11） μmol/L]、BUN[（34.23±7.66） mmol/L] 均显著高于假手术组（均P < 0.05）,肾间质可见明显纤维化,Erbin 在肾小管表达也明显增加,是假手术组的2.9倍（P < 0.01）。（2）正常NRK52E 细胞表达E-cadherin,少量表达Erbin和α-SMA。TGF-β1刺激后,NRK52E细胞E-cadherin表达显著减少,Erbin和α-SMA则表达增加（均P < 0.05）;而转染质粒Prk5-myc-Erbin可逆转TGF-β1诱导的NRK52E细胞E-cadherin表达下调,并可抑制α-SMA表达上调（均P < 0.05）。 结论 Erbin在肾间质纤维化中表达增加,上调Erbin表达可抑制TGF-β1诱导NRK52E发生EMT, 提示Erbin在肾脏纤维化中可发挥保护作用。     

黄葵胶囊对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的保护作用

目的：采用单侧输尿管梗阻（UUO）致肾间质纤维化大鼠模型,观察黄葵对肾脏转化生长因子β激活激酶（TAK1）表达的影响。方法：96只大鼠随机分为假手术组、模型组（UUO组）、黄葵治疗组及缬沙坦治疗组,术后7、14、21 d各组分别处死8只大鼠,HE及Masson染色观察UUO大鼠梗阻侧肾脏病理变化,原位杂交、RT-PCR及Western-bloting检测肾组织TAK1的表达。结果：在UUO术后第7天梗阻侧肾脏出现明显的间质纤维化,并随着时间的进展而明显;在不同时限内模型组及治疗组TAK1表达较假手术组比较均增高（P〈0.01）,经黄葵干预后,梗阻侧肾组织间质纤维化程度有所减轻,且TAK1表达明显减少（P〈0.01）。结论：黄葵可能通过下调TAK1表达,从而减轻间质纤维化的病程进展。     

肝细胞生长因子与肾间质纤维化

肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）是一种对多种器官具多效性的多肽细胞因子,它不仅在肝脏再生、肝硬化、肺纤维化、肿瘤等发生中起重要作用,对于肾损伤后肾小管的修复与再生至关重要。研究表明,HGF能够阻止慢性肾衰竭的发生发展及抑制转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF—β1）的表达。体外试验中,HGF通过抑制不同肾脏细胞中TGF-β1的表达,从而达到抑制肾小管上皮细胞一肌成纤维细胞转分化（tubular epithelial to mesenchymal transition,EMT）的目的。近期还有研究表明HGF还可通过多种不同机制阻断＆md信号转导通路以对抗TGF-β1的致纤维化作用。     

肾小管上皮细胞转分化在肾间质纤维化中的作用

肾间质纤维化（ｒｅｎａｌｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｆｉｂｒｏｓｉｓ，ＲＩＦ）几乎是所有各种肾脏疾病进展到终末期肾功能衰竭的共同途径。Ｒｉｓｄｏｎ［１］、Ｓｃｈａｉｎｕｃｋ［２］、Ｓｔｒｉｋｅｒ［３］等对人类疾病中的肾脏病理性改变及试验动物肾小球损害模型进行的大量研究表明，各种慢性肾小球疾病病人的肾小球滤过率（ＧＦＲ）下降率与肾小管萎缩之间存在着显著的正相关。Ｂｏｈｌｅ［４］等分析了大量病人的肾活检标本，又一次发现间质炎症细胞浸润的程度而非小球中炎症细胞的浸润程度与肾小球疾病的ＧＦＲ下降相关［５］。…     

肾纤康抗大鼠肾间质纤维化的实验研究

目的:探讨肾纤康防治肾间质纤维化的作用机制.方法:将大鼠随机分为4组,即假手术组、模型组、肾纤康组、苯那普利组,采用左侧输尿管梗阻方法造模,用免疫组织化学方法作肾间质转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、纤维连结蛋白(FN)检测,并观察肾脏病理学变化.结果:模型组和各治疗组肾间质TGF-β1、ColⅢ、FN面积比明显增加,与假手术组相比统计学差异(P＜0.05).与模型组相比,肾纤康治疗组、苯那普利治疗组肾间质TGF-β1、ColⅢ、FN面积比减少,有统计学差异(P＜0.05).肾纤康组与苯那普利组肾间质TGF-β1、ColⅢ、FN面积比无统计学差异.结论:肾纤康通过下调TGF-β1在肾间质的表达,抑制ECM的增生、积聚,防止肾间质纤维化,对大鼠单侧输尿管梗阻所致肾损害有明显保护作用,其作用与苯那普利相当.     

水飞蓟素对大鼠肾小管间质纤维化的影响

目的：通过建立单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型,观察水飞蓟素对肾小管间质纤维化和Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法：72只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、水飞蓟素治疗组（治疗组）。模型组和治疗组采用左侧输尿管结扎术造成单侧输尿管梗阻,治疗组术前24h给予大鼠水飞蓟素灌胃（30mg.kg-1.d-1）;假手术组采用游离左侧输尿管而不结扎作对照。各组分别于实验的第7、14、21天分批处死动物8只利用肾小管间质病理指数评分评价梗阻肾组织病理学改变,SABC法检测各组肾组织中Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果：治疗组肾小管间质病理积分明显低于模型组（P〈0.01）。免疫组化显示治疗组肾脏Ⅲ型胶原蛋白的表达明显低于模型组（P〈0.01）。结论：水飞蓟素部分通过减少小管间质Ⅲ型胶原沉积减少而达到减轻肾间质的纤维化的肾保护作用。     

Erbin在肾间质纤维化中的表达和作用

Objective To investigate the expression of Erbin in renal interstitial fibrosis (RIF) and the effect of over-expression of Erbin on transforming growth factor β1 (TGF-(β1)-induced epithelial-mesenchymal transition (EMT) in NRK52E cells. Methods In vivo, the model of renal fibrosis was induced by 5/6 subtotal nephrectomy in rat. Scr and BUN was detected and Masson staining was used to evaluate the level of renal tissue fibrosis. The location and expression of Erbin in renal tissue were detected by immunohistochemistry and Western blotting. In vitro, after NRK52E cells were treated by TGF-β1 (10 μg/L) for 72 h, immunofluorescence and Western blotting were used to obverse the expression and distribution of E-cadherin and α-SMA. The expression of Erbin mRNA and protein were detected by RT-PCR and Western blotting respectively. NRK52E cells were transiently transfected with Prk5-myc-Erbin plasmid via lipofectamine 2000, then the expressions of Erbin, E-cadherin and α-SMA were detected by Western blotting. Results (l)Compared to sham group with Scr (33.96±7.28) μmol/L and BUN (8.11±2.55) mmol/L, rats in 5/6 nephrectomy model with Scr (140.52±61.11) μmol/L and BUN (34.23±7.66) mmol/L revealed renal dysfunction. Masson staining indicated kidney interstitial fibrosis, and the expression of Erbin was significantly increased in renal tissue(2.9 folds), especially in tubular epithelia. (2)In vitro, the expressions of Erbin and α-SMA were markedly increased (2.3 folds and 2.1 folds, P<0.05, respectively) and the expression of E-cadherin was dramatically decreased in NRK52E cells stimulated by TGF-β1, which were consistent with immunofluorescence results. TGF-β1-induced E-cadherin suppression and a-SMA induction could be efficiently blocked by over-expression of Erbin (all P <0.05). Conclusions Erbin is up-regulated in renal interstitial fibrosis, and over-expression of Erbin can partly inhibit renal EMT induced by TGF-β1, which indicates Erbin playing an protective role in renal fibrosis.     

肾小管上皮细胞表型转化与肾间质纤维化

肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)几乎是所有各种肾脏疾病进展到终末期肾衰竭(end-stage renal distase,ESRD)的共同途径.近年来已经认识到无论是原发性肾小球疾病或是肾血管及小管间质性疾病,肾功能的损害程度均与小管间质病变的程度密切相关,而与肾小球病理严重程度并不相关.肾小管间质病变程度是反映肾功能下降严重程度和判断预后最重要的指标.肾间质纤维化在人类肾脏疾病转归中起主导作用.     

肾衰保肾胶囊对肾间质纤维化大鼠TGF—β1及其受体mRNA表达的影响

目的：研究肾衰保肾胶囊对慢性肾衰竭大鼠转化生长因子-β1（TGF-β1）及其受体mRNA表达的影响，探讨该药物抗肾间质纤维化的机制。方法：建立腺嘌呤致大鼠慢性肾衰竭模型，通过免疫组化二步法、半定量RT—PCR分别检测TGF-β1及其受体mRNA的表达水平。结果：肾衰保肾胶囊明显抑制TGF-β1及其受体mRNA的表达，治疗组与模型组比较，有统计学差异（P〈0．01）。结论：肾衰保肾胶囊能抑制肾间质纤维化，其机制可能是通过抑制TGF-β1及其受体mRNA的表达起作用。     

Erbin在肾间质纤维化中的表达和作用

Objective To investigate the expression of Erbin in renal interstitial fibrosis (RIF) and the effect of over-expression of Erbin on transforming growth factor β1 (TGF-(β1)-induced epithelial-mesenchymal transition (EMT) in NRK52E cells. Methods In vivo, the model of renal fibrosis was induced by 5/6 subtotal nephrectomy in rat. Scr and BUN was detected and Masson staining was used to evaluate the level of renal tissue fibrosis. The location and expression of Erbin in renal tissue were detected by immunohistochemistry and Western blotting. In vitro, after NRK52E cells were treated by TGF-β1 (10 μg/L) for 72 h, immunofluorescence and Western blotting were used to obverse the expression and distribution of E-cadherin and α-SMA. The expression of Erbin mRNA and protein were detected by RT-PCR and Western blotting respectively. NRK52E cells were transiently transfected with Prk5-myc-Erbin plasmid via lipofectamine 2000, then the expressions of Erbin, E-cadherin and α-SMA were detected by Western blotting. Results (l)Compared to sham group with Scr (33.96±7.28) μmol/L and BUN (8.11±2.55) mmol/L, rats in 5/6 nephrectomy model with Scr (140.52±61.11) μmol/L and BUN (34.23±7.66) mmol/L revealed renal dysfunction. Masson staining indicated kidney interstitial fibrosis, and the expression of Erbin was significantly increased in renal tissue(2.9 folds), especially in tubular epithelia. (2)In vitro, the expressions of Erbin and α-SMA were markedly increased (2.3 folds and 2.1 folds, P<0.05, respectively) and the expression of E-cadherin was dramatically decreased in NRK52E cells stimulated by TGF-β1, which were consistent with immunofluorescence results. TGF-β1-induced E-cadherin suppression and a-SMA induction could be efficiently blocked by over-expression of Erbin (all P <0.05). Conclusions Erbin is up-regulated in renal interstitial fibrosis, and over-expression of Erbin can partly inhibit renal EMT induced by TGF-β1, which indicates Erbin playing an protective role in renal fibrosis.     

γ-干扰素对梗阻性积水肾间质纤维化的治疗作用

目的 探讨γ干扰素(IFN-γ)对梗阻性肾积水肾间质纤维化的抑制作用及其可能的机制.方法 将65只雄性SD大鼠随机分成4组:治疗组(20只)、模型组(20只)、药物对照组(20只)、假手术组(5只).在建模和给药后的第3、7、14、21、28天,每组各随机处死动物4只(假手术组1只).采用苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察病变肾脏间质纤维化的情况;采用聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)的mRNA表达情况;免疫组织化学法观察以上三种蛋白的变化.结果 模型组大鼠术后肾间质逐渐出现纤维化改变,并随梗阻时间的延长逐渐加重,TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ的mRNA和蛋白表达亦逐渐升高.第14天,模型组TGF-β1和α-SMA的表达量达到高峰,28 d时各指标的表达均达到最高,TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ分别为51.84%、72.59%和68.73%.治疗组各指标在不同时间点均低于模型组,第28天时,三项指标依次为33.84%、32.59%和48.73%,与模型组比较P＜0.05.Banff评分显示治疗组间质纤维化程度明显减轻(P＜0.01).其余两组未见肾间质纤维化改变.结论 IFN-γ具有减轻积水后肾间质纤维化程度的作用,该作用与其下调TGF-β1的表达、抑制肌成纤维细胞(MyoF)激活和减少Col-Ⅰ生成有关.