基于UPLC-Q-TOF-MS的淫羊藿化学成分分析

目的建立超高效液相色谱-飞行时间质谱联用法(UPLC-Q-TOF-MS)快速鉴定淫羊藿饮片中的化学成分。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.4 m L/min,柱温35℃,进样量5μL。质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在负离子模式下采集数据,通过保留时间、精确相对分子质量和二级质谱碎片对检测到的化学成分进行鉴定。结果检测到淫羊藿饮片中以脱水淫羊藿素为母核的黄酮类成分17个、以去甲基脱水淫羊藿素为母核的黄酮类成分6个、其他类型化合物6个。再通过分析10批样品中的化学成分,确定了淫羊藿饮片中16个普遍存在的化学成分。结论 UPLC-Q-TOF-MS方法能快速、准确、较全面地鉴定淫羊藿饮片中的化学成分;淫羊藿化学成分的鉴定及普遍存在化学成分的确定为其药效物质基础和质量控制研究提供了实验依据。     

临江产朝鲜淫羊藿黄酮类化合物及淫羊藿苷积累动态研究

目的：确定临江地区的朝鲜淫羊藿生长的不同阶段总黄酮和淫羊藿苷含量的动态变化趋势，为确定合理采收时期提供了科学依据。方法：采用紫外分光光度法测定了其总黄酮的含量，薄层扫描法测定了主要成分淫羊藿苷的含量。结果：总黄酮含量6月20日的样品最高，其余的含量相对降低。淫羊藿苷含量6月20日的样品最高，其余的含量降低较显著。结论：6月下旬的总黄酮和淫羊藿苷含量均最高。认为6月末至7月初采收较为合理。     

淫羊藿中化学成分的UPLC／Q-TOF-MS分析

目的建立淫羊藿Epimedium brevicornu中化学成分的超高压液相色谱一飞行时间质谱（UPLC／Q-TOF-MS）的分析方法。方法Acquity UPLC BEHC 18色谱柱（100mm×2．1mm,1．7μm）,流动相为0．1％甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱;体积流量为0．4mL／min;柱温为45℃;进样量为2μL。质谱检测采用正、负离子模式,电压分别为3．0、2．5kv;离子源温度110℃;雾化温度400℃;雾化气体积流量800L／h。结果在10min内完成淫羊藿中40个化学成分的鉴定。结论建立了一种简单、快速、高效的UPLC／Q．TOF—MS方法对淫羊藿中化学成分进行了鉴定,为全面控制淫羊藿的质量和机理研究提供了基础。     

基于UPLC-Q-TOF-MS的加参片提取物化学成分分析

目的通过建立超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)分析方法,对加参片提取物化学成分进行定性分析,确定加参片提取物的主要化学成分。方法采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-甲醇(B)为流动相梯度洗脱;体积流量0.3 m L/min,采用电喷雾离子化源(ESI),MSE扫描正负离子模式检测。结果通过与对照品比对、数据库匹配、质谱数据分析及参考相关文献,从加参片提取物中共鉴定出68个化学成分,并发现了4个未知化合物,其中包括13个酚酸类成分、6个丹参酮类成分、11个黄酮及其苷类成分、4个强心苷类成分、15个三萜皂苷类成分、7个C21甾体类成分、12个其他类成分及4个未知成分。结论对加参片提取物化学成分进行了较为全面的分析,为加参片的物质基础及质量控制研究打下了良好的基础。     

淫羊藿水提部位化学成分的HPLC-ESI-Q-TOF-MS分析

目的:采用高效液相-电喷雾四级杆飞行时间串联质谱(HPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对淫羊藿水提取部分中的化学成分进行定性分析。方法:采用液相色谱-串联质谱(LC-MS-MS),C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱;质谱使用ESI离子源,正离子与负离子模式下采集数据。结果:通过正、负离子质谱信息及元素组成,分析与相关文献数据对照,共鉴定出10个化合物。结论:通过超高效液相色谱分离,质谱测定相对分子质量及相关文献数据信息检索确定淫羊藿水提取部分中的化学成分,为阐明淫羊藿水提部分的药效物质基础提供有力的证据。     

朝鲜淫羊藿中的非黄酮类化合物

目的研究朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum的非黄酮类化学成分。方法采用硅胶、SephadexLH-20、ODS柱色谱分离朝鲜淫羊藿干燥地上部分的非黄酮类化学成分;应用物理化学方法及1D和2DNMR方法分析确定化学结构;用MTT法检测化合物对大鼠骨肉瘤UMR106细胞增殖的影响。结果从朝鲜淫羊藿水提取物中分离得到2个倍半萜类化合物和2个9,10-二氢菲类化合物,分别鉴定为:3,7,11-三甲基-2,6-十二二烯-1,10,11-三羟基-10(S)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3,7,11-trimethyl-2,6-dodecadien-1,10,11-trihydroxy-10(S)-O-β-D-glucopyranoside,Ⅰ)、淫羊藿苷C1(icarisideC1,Ⅱ)、淫羊藿苷A5(icarisideA5,Ⅲ)、epimedoicarisosideA(Ⅳ)。结论化合物Ⅰ为新化合物,命名为淫羊藿苷F(icarisideF),化合物Ⅲ为首次从该种植物中分离得到;化合物Ⅱ~Ⅳ有促进UMR106细胞增殖的作用。     

金樱子中脂肪酸成分分析研究

目的 了解中药金樱子中脂肪酸的组成和含量.方法 采用两种提取方法(方法Ⅰ、方法Ⅱ)对金樱子中的脂肪酸进行了甲酯化,所得脂肪酸甲酯经GC-MS分析.结果 方法Ⅰ与方法Ⅱ分别检测出19种和22种脂肪酸,主成分均为亚油酸、亚麻酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸.方法 Ⅱ的不饱和脂肪酸成分为54.60%,是方法Ⅰ的1.25倍,含量分别为亚油酸29.17%、α-亚麻酸16.61%、油酸8.58%和花生一烯酸0.24%,并且金樱子的不饱和脂肪酸的百分含量低于已报道含量94.9%.结论 产地与测定方法对金樱子的脂肪酸检测结果均有影响,比较得乙醚素氏提取法效果更好.     

临江产朝鲜淫羊藿黄酮类化合物及淫羊藿苷积累动态研究

目的:确定临江地区的朝鲜淫羊藿生长的不同阶段总黄酮和淫羊藿苷含量的动态变化趋势,为确定合理采收时期提供了科学依据.方法:采用紫外分光光度法测定了其总黄酮的含量,薄层扫描法测定了主要成分淫羊藿苷的含量.结果:总黄酮含量6月20日的样品最高,其余的含量相对降低.淫羊藿苷含量6月20日的样品最高,其余的含量降低较显著.结论:6月下旬的总黄酮和淫羊藿苷含量均最高.认为6月末至7月初采收较为合理.     

生长季节变化对朝鲜淫羊藿中黄酮类成分的影响

朝鲜淫羊藿Epim edium koreanumNakai是药典规定的药材淫羊藿的主要来源植物之一。郭宝林等曾报道了朝鲜淫羊藿中的淫羊藿苷和总黄酮的含量远高于药用淫羊藿的其他物种[1]。然而后来的研究报道没有支持这一结果,却发现淫羊藿苷的含量常低于其他种类,甚至低于药典标准[2-5]。经采收期研究发现,朝鲜淫羊藿在5月上旬至中旬期间含量是最高的,其后降低[6],而文献[1]的材料来自于5月初开花期,此时新叶刚刚萌出,不是朝鲜淫羊藿的采收季....     

千斤拔中黄酮类成分的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的 采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)对瑶药千斤拔中黄酮类成分进行分析,并对主要成分进行鉴定.方法 用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)/乙腈(B)梯度洗脱,使用ESI离子源,正、负离子模式下采集数据.结果 10 min内对千斤拔醇提物进行UPLC的快速分离,根据高分辨质谱结果和MS/MS碎片、结合对照品信息和相关文献,鉴定出千斤拔中20种黄酮类成分.结论 应用UPLC/Q-TOF-MS技术可以快速有效地分析千斤拔中黄酮类成分及其二级质谱的裂解规律.     

金樱子的本草考证

通过本草考证整理历代本草与古籍文献,梳理金樱子在历代本草中的名称、基原、产地和采收加工炮制方法,为合理开发利用金樱子资源提供本草学依据。其在本草中多以金樱子记载,我国南部大部分地区均有分布,味酸、涩,性温、平,无毒,主归脾、肾、膀胱经,具有固精、缩尿、涩肠、止带等功效。历代本草中所记载的金樱子即历版《中华人民共和国药典》所规定的金樱子Rosae Laevigatae Fructus,其基原和采收加工炮制方法与现代基本一致,产地存在一定变迁。     

广西金樱子HPLC指纹图谱

目的:建立广西产金樱子的HPLC指纹图谱,并进行聚类分析和主成分分析,为评价其质量提供依据。方法:采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以甲醇-0.2%磷酸水溶液作为流动相,进行梯度洗脱,柱温25℃,流速0.8 m L·min-1,检测波长255 nm,进样量10μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012.1版软件对10批样品进行共有峰确认及相似度评价。运用SPSS 22.0统计学软件对HPLC指纹图谱进行聚类分析和主成分分析。结果:色谱评价软件共标定出共有色谱峰13个,从中选择了10个稳定性好,吸收峰强,特征明显的色谱峰作为金樱子指纹图谱的共有峰。用对照品指认了其中的3个化学成分,分别为儿茶素、橙皮苷、芦丁。10批金樱子样品指纹图谱的相似度均0.96。通过聚类分析,将不同产地的10批样品分为3类,并且2个主成分的累计方差贡献率为82.98%。结论:该研究能为广西金樱子质量标准的提高提供数据支持,并为其品质与开发利用提供评价依据。     

金樱子多糖含量变异规律与优良种质筛选

目的：为金樱子种质资源利用与开发提供依据。方法：收集浙江、重庆、湖南、陕西、广东、安徽、江西等省金樱子野生种质资源20份,考察经纬度、海拔、农艺性状指标,用苯酚-硫酸法测定果实多糖含量,用SPSS 17.0软件进行单因素ANOVA方差分析与相关性分析,用DPS 9.05软件进行主成分分析与聚类分析。结果：不同种源金樱子间农艺性状与多糖含量存在极显著差异（P<0.01）,浙江种源多糖含量相对较高;多糖含量与农艺性状、生境因子间存在一定的变异规律,与叶长宽比、果实纵横径比、经度呈显著正相关,与果实横径呈显著负相关,与果实单重、果肉重、纬度相关性较低;10个生长与成分性状可简化为4个主成分,累计贡献率达94.69%;20个种源可划分为5类,其中类群Ⅰ植株叶片与果实狭长,多糖含量较高,类群Ⅳ与类群Ⅴ植株叶片大而宽厚,果实大而狭长,果肉重指标高。结论：共筛选出5个农艺性状表现优良种质与4个高多糖含量种质,可作为高产、优质金樱子新品种育种材料。     

金樱子蜜炙工艺优选及其质量控制

目的:优选金樱子蜜炙工艺,建立蜜炙金樱子乙酸乙酯部位的指纹图谱,为该药材的炮制工艺标准化和质量控制提供参考。方法:以总多糖、总黄酮和浸出物含量的综合评分为指标,采用U7(76)均匀设计考察加蜜量、炒制温度、炒制时间和稀释用水量对金樱子蜜炙工艺的影响。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004B版软件进行指纹图谱分析,流动相乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~20 min,5%~9%A;20~30 min,9%~15%A;30~35 min,15%~17%A;35~60 min,17%~27%A;60~75 min,27%~30%A;75~90 min,30%~40%A),检测波长360 nm。结果:最佳蜜炙工艺为加药材量20%炼蜜,用水稀释炼蜜使稀释用水/炼蜜量0.4,炒制温度180℃,炒制时间6 min。10批次蜜炙金樱子乙酸乙酯部位指纹图谱共标定出7个共有峰,各批次样品的指纹图谱相似度均>0.80。结论:采用多指标综合加权评分法优选的金樱子蜜炙工艺稳定可行,建立的指纹图谱研究方法简单、准确、重复性好,可用于蜜炙金樱子的质量控制。     

用金樱根治疗老年性尿失禁的临床研究

[目的]观察金樱根与中药缩泉丸治疗老年尿失禁的作用。[方法]选择53例患者，随机分为两组，观察组27例，用金樱根汤剂治疗；对照组26例，用目前治疗尿失禁的代表中药缩泉丸治疗。观察期为20d，10d为1个疗程，观察患者临床症状及各项指标的变化。[结果]观察组和对照组患者的临床症状及各项指标均明显改善，但金樱根的疗效要优于缩泉丸。[结论]金樱根是临床上治疗老年尿失禁较为理想的药物，值得进一步研究推广。     

金樱子中多糖含量动态变化的研究

目的:确定金樱子最佳采收期、最佳采收成熟度和最佳产地加工方法.方法:采用紫外分光光度法对不同采收期、不同成熟度和不同产地加工方法的金樱子果实和果肉中多糖含量进行了比较研究.结果:10月中、下旬至11月中、上旬这一段时期金樱子果粉和果肉粉中多糖含量积累较高,为金樱子果实的最佳采收时期,采收时应分期分批适时采收金樱子的成熟果实,采摘过早或过迟,不但影响药材的外形质量,也影响药材的内在质量.金樱子产地加工方法以40℃烘干的效果较为理想.结论:为确定金樱子最佳采收期、最佳采收成熟度和最佳产地加工方法提供依据和参考.     

金樱根质量标准研究

目的:制定金樱根的质量标准.方法:对金樱根的安全水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物以及挥发性醚浸出物进行测定.用紫外分光光度法测定金樱根中总黄酮的含量.结果:金樱根的安全水分为不超过13.53％,总灰分不超过5.03％,酸不溶性灰分不超过1.21％,冷浸法水溶性浸出物不低于11.03％,热浸法水溶性浸出物不低于22.18％,冷浸法醇溶性浸出物不低于18.08％,热浸法醇溶性浸出物不低于26.65％,挥发性醚浸出物不少于0.32％;总黄酮含量不低于7.41％,平均加样回收率为103.27％,RSD 2.03％ (n =5).结论:该方法操作简便、准确、重复性好,可以用于中药金樱根的质量控制.     

不同产地金樱子根、茎、果中多糖含量的比较研究

目的 通过测定4个不同产地的金樱子根、茎、果中多糖含量,初步探讨金樱子的根和茎是否能在一定程度上代替果实入药,为进一步解决金樱子药材资源匮乏问题提供科学依据。方法 采用紫外分光光度法对不同产地的金樱子中根、茎、果多糖含量进行测定。结果 4个产地金樱子根、茎的多糖含量都比果实的多糖含量低,且差异具有统计学意义。结论 金樱子根和茎不能代替果实入药。     

Box-Behnken响应面法优选金樱子提取工艺

目的筛选金樱子提取工艺。方法以金樱子总皂苷、总酚酸含量为评价指标,乙醇浓度、提取时间、料液比、提取次数为考察因素,采用Box-Behnken响应面设计,Design-Expert8.0.5软件分析试验数据,建立多元二次回归方程,筛选金樱子提取工艺参数。结果筛选出金樱子的最佳提取工艺参数为:乙醇浓度62.79%,料液比13.12∶1,提取时间137.93 min,提取次数1.85次,考虑到实际操作方便及工业大生产的实用性,将提取工艺参数修订为乙醇浓度60%,料液比13∶1,提取时间2 h,提取次数2次。结论本研究筛选出的参数可为金樱子的提取工艺提供依据。     

金樱根不同炮制品的总鞣质含量比较

目的:考察比较金樱根生品及其不同炮制品中总鞣质的含量,以评估不同炮制方法对总鞣质含量的影响。方法:采用紫外-可见分光光度法测定金樱根不同炮制品总鞣质的含量。结果:总鞣质含量为:生品(7.53%)>盐制(5.17%)>醋制(4.93%)>黑豆汁制(4.51%)。结论:炮制方法对金樱根中总鞣质含量的影响较大。