尿中2,5-己二酮气相色谱测定方法探讨

目的建立用10?AP不锈钢柱有效分离尿中2,5-己二酮测定的气相色谱方法。方法将尿样经盐酸水解,乙醚萃取,在气相色谱仪上用10?AP不锈钢柱,在柱温165℃恒温,FID检测器260℃,进样器250℃条件下,以保留时间定性,峰高定量能够准确测量尿中2,5-己二酮的含量。结果方法的最低检出浓度为0.286mg/L,线性范围1.9￣113.4μg,线性回归系数r=0.9991,精密度RSD<10%,平均回收率94.1%￣97.7%。结论本方法能够有效分离和准确测定尿中2,5-己二酮的含量,方法灵敏度和准确度满足工作要求。     

毛细管柱气相色谱内标法检测工人尿中2,5-已二酮

目的 建立工人尿中2,5-已二酮(2,5-HD)的毛细管内标气相色谱检测方法.方法 取工人班后尿2 ml,采用酸水解,乙酸乙酯提取,无水K2CO3进行盐析,使用甲苯做内标物质进行定量测定.结果 尿中2,5-已二酮的出峰时间附近无杂质干扰,并经气-质联用技术证实样品中目标物质确为2,5-已二酮;方法线性范围为0.25～50.00μg/ml;回归系数r=0.998,最低检出限为0.01 μg/ml;样品加标回收率为96.3%(89.5%～106.0%),日内、日间相对标准偏差分别为1.5%～2.2%和4.1%～5.0%.结论 本方法准确可靠、灵敏度高、重现性好、杂质干扰少,可应用于尿中2,5-已二酮的检测.     

尿中2,5-己二酮的毛细管柱气相谱测定法

目的 探讨毛细管柱气相色谱法测定尿中的2,5-己二酮。方法 尿样经酸化后,用乙酸乙酯萃取,然后用毛细管柱气相色谱测定尿中的2,5-己二酮。结果 应用毛细管柱气相色谱测定尿中2,5-己二酮的方法线性范围为0.25-50μg/ml,相对标准偏差（RSD）为6.39%-7.11%,加标回收率为90.27%-106.4%,最低检出限为0.021μg/ml。结论 毛细管柱气相色谱法测定尿中2,5-己二酮线性范围宽,灵敏度高,可靠性好,具有一定的实际应用价值。     

气相色谱法测定尿中的2,5-己二酮

据资料报道：尿中２,５己二酮的浓度与空气环境中正己烷的浓度有明显的相关［１］,国外已将尿中的２,５己二酮作为接触正己烷的生物监测指标［２］。尿中２,５己二酮的测定方法国内尚未见报道,国外资料介绍用Ｃ１８柱分离［３］。二氯甲烷萃取的色谱法的缺点是...     

辽宁省一般人群尿中2,5-己二酮水平研究

目的调查辽宁省一般人群尿中2,5-己二酮水平,分析其人群分布特点。方法将辽宁省划分为东、中、西部地区,采用多阶段分层整群随机抽样的方法,于2009—2010年从东、中、西部三个地区抽取1373名对象进行问卷调查,并采集尿液样品,采用气相色谱-离子阱二级质谱法对尿中2,5-己二酮的含量进行检测,统计分析一般人群尿中2,5-己二酮的分布水平。结果辽宁省一般人群尿中2,5-己二酮几何均数为0.18μg/L,男性和女性尿中2,5-己二酮几何均数分别为0.19μg/L、0.18μg/L(Z=-2.87,P0.01)。结论辽宁省一般人群尿中2,5-己二酮水平存在性别及地区差异。     

2,5-己二酮对小鼠视网膜损伤的实验研究

目的 研究2,5-己二酮(2,5-HD)对小鼠视网膜组织形态学的影响及对视网膜组织的脂质过氧化作用,揭示正己烷对视网膜损伤的发病机制.方法 48只昆明种小鼠随机分为空白对照组、阴性对照组和2,5-HD染毒组.空白对照组12只,不做任何处理;阴性对照组12只,腹腔注射生理盐水;2,5-HD染毒组24只(分为2、4和8周染毒组),腹腔注射质量分数为2.5％的2,5-H-HD溶液,剂量为400 mg/kg,每日给药1次.光学显微镜下观察2,5-HD对视网膜组织的病理形态学影响;并且测定视网膜组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量.结果 空白对照及阴性对照组小鼠视网膜结构正常.2,5-HD染毒8周组光感受器内外节分界不清,排列疏松紊乱;外丛状层呈疏松网状结构,染色不均;神经节细胞层可见胞核深染固缩坏死.随着2,5-HD染毒时间的延长,SOD活力逐渐降低,MDA含量增加,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 2,5-HD可造成小鼠视网膜组织损伤,脂质过氧化作用是致视网膜损伤的机制之一.     

2,5-己二酮对SK-N-SH细胞中神经生长因子表达水平的研究

目的分析2,5-己二酮对人SK-N-SH细胞中神经生长因子表达水平变化的研究,探讨正己烷中毒的分子机制。方法分别以0、10、20、40 mM的2,5-己二酮持续染毒12 h后,以Q-PCR及Western Blot方法检测各组人SKN-SH细胞中神经生长因子的变化趋势。结果 2,5-己二酮染毒后,人SK-N-SH细胞神经生长因子mRNA及其蛋白表达水平均明显下调,可见染毒后SK-N-SH后细胞分泌的神经生长因子是降低的。结论 2,5-己二酮可以引起人SK-N-SH细胞NGF表达水平降低,说明NGF表达降低在2,5-己二酮对人SK-N-SH细胞的早期毒性及慢性毒作用机制中起着重要作用。     

2,5-己二酮诱导大鼠脊髓中神经丝含量变化的研究

目的 观察2,5-己二酮(2,5-HD)诱导大鼠脊髓中神经丝(NF)含量变化,以探讨正己烷中毒性神经病的分子机制.方法 雄性Wistar大鼠70只随机分为0、2、4、8周对照组和2、4、8周染毒组,每组10只.经腹腔注射2,5-DH予染毒组动物,剂量为400 mg/kg,建立正己烷中毒性神经病模型,对照组注射等量的盐水.利用步态评分评价大鼠周围神经病症状的进展,免疫印迹法(Western Blotting)检测脊髓组织高、中和低相对分子质量神经丝(NF-H、NF-M和NF-L)含量的变化.结果 HD染毒2周后,大鼠逐渐出现肌力降低、步态异常、瘫痪等表现,至染毒8周结束时大鼠呈现典型的中毒性周围神经病特征.随着2,5-HD染毒的进行,大鼠脊髓NF含量呈进行性下降.与0周对照组相比,2、4和8周染毒组大鼠脊髓上清中NF-H含最分别下降15.7%、57.0%和58.0%,NF-M含量分别下降36.0%、61.3%和65.2%,NF-L含量分别下降20.8%、43.9%和44.3%,差异均有统计学意义(P<0.01);在脊髓沉淀中,与0周对照组比较,染毒4、8周组NF-H含量分别下降35.6%和43.2%,NF-L含量分别下降26.4%和42.1%,差异均有统计学意义(P<0.01);2、4和8周染毒组大鼠脊髓沉淀中NF-M含量分别下降23.3%、33.9%和63.7%,差异有统计学意义(P<0.01).大鼠脊髓组织中NF-H、NF-M和NF-L含量与步态评分的复相关系数分别为0.8912,0.9282和0.8981,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 2,5-HD染毒诱导的脊髓组织中NF亚单位含量下降,可能是正己烷神经毒性的机制之一.     

血清中氯美扎酮测定的气相色谱法

目的 建立血清中氯美扎酮定性定量的气相色谱测定法,为临床救治氯美扎酮中毒提供诊断依据.方法 取0.5 ml血清加50g/L氢氧化钠50μl混匀,加乙酸乙酯2.0 ml充分震荡萃取,静置5 min,4000 r/min离心,取上清液,氮气吹干.50μl无水乙醇定容,气相色谱法测定,1.0μl进样.结果 血清中氯美扎酮浓度在5.0～100 μg/ml范围内呈线性,最低检出浓度2.0 μg/ml.回归方程y=962.8x+1543.6,相关系数为0.9995,方法回收率为82.5％～101.3％;相对标准偏差(RS)为:3.5％～4.91％.日内、日间RSD分别为3.18％～4.49％和4.16％～4.95％.结论 该方法操作简便、分析快速,结果准确.为临床治疗疑似氯美扎酮中毒患者的药物定性定量检测,提供了一种简便准确的检测方法.     

尿中2,5-己二酮的气质联用测定法

目的 建立测定尿中2,5-己二酮的毛细管气质联用测定法.方法 尿样经酸化后,用乙酸乙酯提取,提取液用气相色谱-质谱联用仪进行检测,利用保留时间和化合物特征离子定性,选择离子法定量.结果 取样2.0ml,提取液1.0ml,进样1.0 μl,分流比为10：1,尿中2,5-己二酮的线性范围为0.25～15.00mg/L;相对标准偏差（RSD）为1.75%～4.99%;加标回收率为92.0%～106.8%;检测限（LOD）为0.028 mg/L;定量限（LOQ）为0.25mg/L.结论 建立的方法灵敏度高,干扰少,可靠性优于气相色谱法,适用于尿中2,5-己二酮含量的测定.     

大蒜油对正己烷在小鼠体内代谢成2,5.己二酮的影响

目的 探讨大蒜油对正己烷(n-hexane)在小鼠体内代谢成2,5.己二酮(2,5.hexanedione,2,5-HD)的影响.方法 取健康成年昆明种小鼠,随机分为正己烷染毒组和大蒜油干预组,分别灌胃给予正己烷和大蒜油,染毒结束后取血,分离血清经乙酸乙酯萃取后气相色谱法测定血清中2,5-HD含量.结果 (1)一次性给予4000 mg/kg正己烷后,小鼠血清中2,5-HD含量随时间延长而增加,10 h后达峰值,20 h后几乎不能检出;(2)对照组小鼠血清中未检出2,5-HD;随着正己烷染毒量的增加,小鼠血清中2,5-HD含量明显增加,2000、4000和6000 mg/kg组染毒8 h后小鼠血清2,5-HD含量分别为8.04、16.68和22.38μg/ml,呈明显的剂量一效应关系;(3)不同周龄小鼠给予正己烷8 h后血清中2,5-HD含量有明显差异,5周龄组(22.83;μg/ml)分别大于4周(19.59μg/ml)和6周龄组(16.42μg/ml),差异有统计学意义(P<0.05);(4)不同性别小鼠给予同剂量正己烷后,雌性小鼠血清中2,5-HD含量(13.22 t,g/na)高于雄鼠(10.34μg/ml),差异有统计学意义P<0.05;(5)正己烷染毒前后2 h分别给予80 mg/kg大蒜油,血清中2,5-HD含量与单纯染毒组相比均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),但染毒前给药组较染毒后给药组更低,但差异无统计学意义(P>0.05);染毒前2 h给予不同剂量大蒜油,10、20、40、80 mg/kg大蒜油+3 000 mg/kS正已烷组小鼠血清2,5-HD含量比染毒组分别降低16.2%、20.8%、22.8%和32.1%,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),呈明显的剂量一效应关系.结论 在雌性小鼠血清中正己烷的代谢产物2,5-HD高于雄性;5周龄小鼠血清2,5-HD含量较4周和6周龄小鼠高;正己烷染毒前后给予大蒜油可明显减少2,5-HD的生成.     

血清中甲基对硫磷和乐果测定的气相色谱法

目的 选用氮磷检测器(NPD)及脉冲火焰光度检测器(PFPD),建立气相色谱仪同时检测血清中甲基对硫磷和乐果的方法.方法 取1 ml血清,加入2 ml乙酸乙酯振荡、离心提取,重复3次,提取液吹氮浓缩至近干,然后准确加入1.0 ml乙酸乙酯,振荡混匀,气相色谱测定.结果 两种目标化合物在0～4.0 μg/ml浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9992～0.9998;NPD和PFPD的检出限分别为0.04 μg/L和0.01 μg/L;乐果和甲基对硫磷的加标回收率分别为93%～110%和91%～102%;乐果和甲基对硫磷的批内精密度分别为1.6%～7.0%、2.6%～6.1%,批间精密度分别为5.4%～9.5%、4.7%～8.4%.结论 该方法线性范围宽,灵敏度高,精密度好,适用于职业接触和普通中毒人群血清中甲基对硫磷及乐果的测定.     

An improved method of analysing 2,5-hexanedione in urine

A short gas-chromatographic method for analysing urinary concentrations of 2,5-hexanedione is based on acid hydrolysis of urine at pH below 0.1 and "purification" of the urine samples by microcolumns containing an octadecyl-silane phase. A 5% acetonitrile solution allows a fairly selective elution of 2,5-hexanedione from the microcolumns. Recovery of 2,5-hexanedione from urine is as great as 79.9%. The variation coefficient of the measurements is 2.8%. The results obtained from different working conditions and using packed or wide bore or capillary gas-chromatographic columns are reported.     

The method of choice for the determination of 2,5-hexanedione as an indicator of occupational exposure to n-hexane

Summary To identify the method of choice for analysis of urine for 2,5-hexanedione (2,5-HD) as an indicator of occupational exposure to n-hexane, the end-of-shift urine samples of 36 n-hexane exposed male workers and 30 non-exposed male workers were analyzed for 2,5-HD under three conditions of hydrolysis, i.e. enzymic hydrolysis at pH 4.8, acid hydrolysis at pH 0.5, and without hydrolysis. The 2,5-HD concentrations thus determined were examined for correlation with 8-h, time-weighted average exposure concentrations of n-hexane measured by diffusive sampling. The regression analysis showed that the 2,5-HD concentrations without any hydrolysis correlated best with the intensity of exposure to n-hexane. No 2,5-HD was detected in the urine of the non-exposed subjects under the analytical conditions with no hydrolysis. Thus, the analysis without hydrolysis was considered to be the method of choice from the viewpoint of simplicity in analytical procedures, sensitive separation of the exposed from the non-exposed, and quantitative increase in the amount of 2,5-HD after n-hexane exposure.A part of this work was presented at the 63rd Annual Meeting of Japan Association of Industrial Health, held in Kumamoto, Japan, on 3rd–6th April, 1990     

Acetone-induced changes in the toxicokinetics of 2,5-hexanedione in rabbits

Male rabbits were intravenously injected with 2,5-hexanedione or 2,5-hexanedione plus acetone. A toxicokinetic analysis showed that a two-compartment model satisfactorily described the kinetics of 2,5-hexanedione in rabbits. Simultaneous dosing with acetone altered the toxicokinetic model which best described the plasma concentration versus time data. The model-independent parameter body clearance, calculated according to the trapezoidal rule, showed a decrease in the body clearance of 2,5-hexanedione in rabbits simultaneously injected with acetone. The results suggest that toxicokinetic interference may partly explain the neurotoxic potentiation of that which occurs in 2,5-hexanedione-induced axonopathy as a response to simultaneous exposure to acetone.     

尿2,5-己二酮在职业危害评价中作为生物标志物应用指标的探讨

目的对车间空气中正己烷和作业环境人群尿中2,5-己二酮测定,验证2,5-己二酮作为生物代谢物在接触正己烷的职业危害评价中的意义。方法对6家皮件加工厂黏胶车间空气中正己烷和作业人群尿中2,5-己二酮进行同步测定,另选择1家服装加工厂和1个职业服装学校作为非接触正己烷对照组进行对比分析。结果环境空气中正己烷浓度与作业职工尿中2,5-己二酮含量呈正相关,r=0.899,P<0.05;通过对检测尿样中2,5-己二酮异常值逆向调查,验证其作为接触正己烷的生物标志物具有的实际意义,采用SPSS混合样本剖析法分析,对不同接触人群的尿2,5-己二酮测定值统计,推测其生物限值在8.92￣11.36mg/L范围。结论尿2,5-己二酮可以作为接触正己烷职业危害评价中灵敏、特征性强的生物标志物应用指标。