龟板提取物激活wnt/β-catenin通路促大鼠触须部皮肤创面修复

目的探讨龟板提取物(Plastrum Testudinis extracts,PTE)对大鼠触须部皮肤创面修复中Wnt/β-catenin通路的调控。方法分离培养SD乳鼠毛囊干细胞(Hair follicle stem cells,HFSCs),免疫荧光检测细胞表面标志物CD34、CD71表达,CCK-8法检测PTE对HFSCs增殖的影响,Western-blot检测PTE对HFSCs中Gsk-3β、β-catenin蛋白表达的作用;制作SD大鼠触须部皮肤缺损模型,随机分为空白对照组、实验对照组、阳性药物对照组、PTE组,测算动物创面面积和愈合率,病理学及免疫荧光检测创面组织。结果培养的细胞形态饱满,折光性强,呈铺路石样,细胞表面CD34及CD71阳性。CCK-8显示PTE对HFSCs有促增殖作用(P0.01)。PTE作用于HFSCs后,Gsk-3β蛋白(P0.05)下降的同时β-catenin蛋白表达上升(P0.001)。术后7 d各组创面基本愈合,PTE组及阳性药物对照组表皮较其他组薄,毛囊周围有新生表皮参与修复,表皮与真皮结合牢固,真皮无炎性细胞,组织结构排列规则,促修复效果优于其他各组;PTE组修复表皮内Gsk-3β蛋白下降而β-catenin蛋白表达上升。结论 PTE可通过激活HFSCs中Wnt/β-catenin通路促进SD大鼠触须部创面修复。     

组织工程皮肤的构建及其在经皮吸收中的应用

查阅了近20年来的文献,就组织工程皮肤的构建及其在经皮吸收中的应用进行了综述,提出体外培养细胞构建组织工程皮肤成为促进皮肤缺损创面愈合、提高创面修复质量的新途径。     

乳没生肌散对组织工程皮肤修复皮肤缺损的研究

目的 研究乳没生肌散对组织工程皮肤修复皮肤缺损创面的促进作用.方法 将人成纤维细胞种植入胶原海绵,人角质形成细胞种植在表层,构建组织工程皮肤,并移植入裸鼠皮肤缺损创面.移植后2 d,将SPF级裸鼠随机分为实验组和模型对照组,每组4只.实验组选用乳没生肌散对创面进行外敷治疗,隔日换药;模型对照组创面不用药物治疗,隔日涂以生理盐水.组织工程皮肤移植后9 d取材,取移植处组织行冰冻切片,HE染色,观察创面局部表皮厚度及真皮中毛细血管增生情况,免疫荧光双标检测真皮层中Ln、Ⅰ型胶原的表达.结果 组织工程皮肤移植后9 d,实验组与模型对照组相比,创面移植处表皮增厚,真皮中毛细血管增生较多,Ln、Ⅰ型胶原的的分泌增强.结论 乳没生肌散具有促进组织工程皮肤修复皮肤创面的作用.     

十四酸甾醇酯调控Wnt/β-catenin信号通路促皮肤创面修复的研究

目的探讨十四酸甾醇酯(cholesterol myristate)对大鼠皮肤创面修复过程中Wnt/β-catenin通路的调控。方法十四酸甾醇酯作用于大鼠触须部皮肤创面,观察皮肤创面的修复情况,免疫荧光检测皮肤组织中Wnt/β-catenin通路蛋白的表达;体外分离培养SD乳鼠毛囊干细胞(Hair Follicle Stem Cells,HFSCs),免疫荧光检测细胞表面标志物CD34、CK15的表达,CCK-8法检测十四酸甾醇酯对HFSCs增殖的影响,RT-q PCR、Western-blot检测其对HFSCs中Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达。结果术后7 d,十四酸甾醇酯组创面基本愈合,表皮细胞排列紧密,表皮与真皮层连接牢固,可见新生毛细血管;对照组表皮与真皮连接不牢固,表皮排列不规则,仍有炎症浸润。术后4 d,免疫荧光检测十四酸甾醇酯组修复皮肤中β-catenin、Lymphoid enhancing factor 1(LEF1)、cancer-myc(c-myc)、cyclin D1的表达均强于对照组。所培养的细胞表达HFSCs标志物CD34、CK15,十四酸甾醇酯对HFSCs有促增殖作用(P0.01),且β-catenin、LEF1、c-myc、cyclin D1表达上调。结论十四酸甾醇酯通过激活HFSCs中的Wnt/β-catenin通路促皮肤修复。     

大鼠毛囊干细胞的体外培养及相关检测的实验研究

目的：建立体外分离培养、扩增、鉴定大鼠毛囊干细胞（rat hair follicle stem cells,rHFSCs）的方法,观察其生物学特性。方法：切取1周龄SD大鼠触须部皮肤,用、Dispase酶和IV型胶原酶混合液消化,显微镜下分离毛囊隆突部,用组织块法培养rHFSCs,培养基为DMEM／F12基础培养基,加不同浓度的KSR血清替代物、青链霉素混合液、L-谷氨酰胺、非必需氨基酸、EGF、bFGF、羟基乙醇和氢化可的松。用IV型胶原差速贴壁法纯化rHFSCs,再通过细胞免疫荧光染色及Q-PCR检测相关基因来联合鉴定,分别取不同代rHFSCs检测细胞增殖能力和活力。结果：以上方法分离、培养、纯化的HFSCs呈典型的铺路石状,贴壁较牢,克隆形成能力强。免疫细胞化学鉴定可见角蛋白15（Keratin-15,Krt15）、整合素a6（Integrin-a6,Itga6）和整合素β1（Integrin-131,Itgβ1）抗体表达呈阳性。纯化后的细胞最初2～3d细胞处于生长的潜伏期,5～6d时细胞处于对数生长期;从第7代开始,随着传代次数的增加,细胞活力也明显下降。O-PCR检测发现,经过全新的培养体系得到的干细胞活性大,拥有较强的增殖能力,几乎不舍有表皮角质形成细胞。结论：改进的显微镜联合组织块法分离培养rHFSCs,经IV型胶原差速贴壁法筛选后,可得到高纯度的rHFSCs,细胞增殖能力强,可以为干细胞组织工程学构建人工毛囊、血管及皮肤等提供良好的种子细胞。     

大鼠毛囊干细胞体外培养及基因转染方法

目的：探讨大鼠毛囊干细胞体外培养和基因转染的方法.方法：采用组织块法分离、培养大鼠触须隆突部毛囊干细胞,经Ⅳ型胶原差速贴壁法纯化后,采用碱性磷酸酶染色和细胞免疫荧光染色进行细胞鉴定,测定细胞生长曲线,并分别采用脂质体和慢病毒质粒进行毛囊干细胞基因转染.结果：经两次Ⅳ型胶原贴壁筛选后,毛囊干细胞呈克隆性生长,具有典型的干细胞生物学特征,碱性磷酸酶染色阳性,角蛋白-15、整合素-α6和整合素-β1表达均为阳性.细胞生长曲线显示毛囊干细胞在接种后第3天时出现干细胞克隆;第5天和第6天时细胞处于对数生长期.脂质体介导的毛囊干细胞基因转染率为1.55％～17.21％,中位数9.63％;慢病毒介导的毛囊干细胞基因转染率为62.14％ ～79.42％,中位数71.52％.结论：采用组织块法分离、培养大鼠触须隆突部毛囊干细胞,经Ⅳ型胶原差速贴壁法纯化后,毛囊干细胞可保持较好的生长状态和较强的克隆形成能力,且慢病毒介导毛囊干细胞基因转染比脂质体转染更高效、稳定.     

祛瘀生肌法对皮肤实验性创面修复的组织形态变化的影响

目的 :研究祛瘀生肌法对创面愈合过程中组织形态的影响。方法 :选取健康雄性日本纯种大耳白兔2 0只 ,在兔背部头侧 1/3处 ,脊柱旁开 1.5cm区域 ,左右对称 ,做 2 - 3个创面 ,面积 4× 5cm2 ,采用自身对照法 ,随机确定左右创面为实验组或对照组 ,分别在造模后 3、5、7、9、14、18天取实验组和对照组创面中心及边缘组织块 ,光镜下观察创面组织形态。结果 :祛瘀生肌法在创面修复早期具有促进血管新生、细胞增殖的作用 ,在修复后期实验组出现胶原排列整齐的特点。结论 :为祛瘀生肌法促进创面修复 ,减少瘢痕形成的作用提供形态学依据。     

姜黄素联合脂肪间充质干细胞促进大鼠皮肤创面愈合的作用及机制研究

目的:探讨姜黄素联合脂肪间充质干细胞(ADSCs)促进大鼠皮肤创面愈合的效应及相关信号通路的研究。方法:用酶消化法分离和培养大鼠ADSCs,流式细胞仪鉴定干细胞表面抗原。取活性良好的第3代细胞,不同浓度(0、2.5、5、10、20、40μmol/L)的姜黄素作用于ADSCs,通过CCK8法测定干细胞的存活率,筛选姜黄素最适宜浓度。40只雄性SD大鼠切除背部直径1 cm全层皮肤,建立皮肤创面模型,按照不同治疗方法分为模型对照组、干细胞组、姜黄素20μmol/L组、姜黄素20μmol/L联合干细胞组,测量记录各组0、3、7、14 d的皮肤创面愈合率。治疗后7 d ELISA法检测大鼠血清成纤维细胞生长因子(FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。治疗后14 d HE染色观察各组大鼠皮肤创面情况,Masson染色观察胶原纤维含量,免疫荧光观察干细胞数量及分布情况。荧光定量PCR检测各组大鼠皮肤创面组织内Wnt4、β-catenin mRNA表达。结果:流式细胞仪鉴定ADSCs表面抗原CD44、CD90阳性,CD34阴性。CCK8法检测姜黄素在20μmol/L时对干细胞增殖无明显毒性作用。与模型对照组比较,干细胞组、姜黄素20μmol/L组、姜黄素20μmol/L联合干细胞组的皮肤创面愈合率、胶原纤维面积百分比、血清生长因子FGF、VEGF、TGF-β明显升高(P<0.05),血清炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α明显降低(P<0.05),Wnt4、β-catenin mRNA表达明显上调(P<0.05),与姜黄素20μmol/L联合干细胞组比较,姜黄素组FGF、VEGF、TGF-β含量、胶原纤维面积明显降低,IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高,Wnt4、β-catenin mRNA明显下调(P<0.05或P<0.01)。姜黄素20μmol/L联合干细胞组皮肤创面中的ADSCs荧光表达明显高于干细胞组(P<0.05),ADSCs主要分布在真皮层和表皮基底层。结论:姜黄素联合ADSCs可促进大鼠皮肤创面愈合,提高移植后干细胞的存活率,可能与刺激相关生长因子分泌,减少炎症因子含量,上调Wnt4/β-catenin相关信号通路有关。     

生肤灵对人体皮肤缺损的临床研究

目的:探讨生肤灵治疗人体皮肤缺损的临床效果。方法:60例不同原因所致的皮肤缺损病人按抽签法均分为两组,治疗组30例采用暴露的创面上涂抹生肤灵,控制较高的室温及保持创面湿润,对照组30例创面清洁处理后不用任何药物,任其自然愈合。结果:经记录观察3d、7d、12d、18d等不同时间创面愈合情况,评价皮肤愈合质量。治疗组比对照组在愈合时间上有显著性差异(P<0.05);在创面表面积缩小情况及皮肤再生方面均有显著疗效(P<0.01)。组间比较无显著性差异(P>0.05)。组织病理学观察:治疗组白细胞增高时间提前,表皮再上皮化提前,伤口局部成纤维细胞数量和肉芽组织形成显著多于对照组。结论:生肤灵可以诱导皮肤恢复正常的结构,促进缺损皮肤及瘢痕切除后的皮肤再生,对多种原因所致的皮肤缺损均有良好的治疗作用。     

丹黄散对糖尿病大鼠创面愈合及新生皮肤中CK14、CK15表达的影响研究

目的探讨丹黄散对糖尿病大鼠创面愈合及新生皮肤中细胞角蛋白14(CK14)、细胞角蛋白15(CK15)表达的影响。方法链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型大鼠成功后,将实验大鼠随机分成丹黄散组、西药组、模型对照组和空白对照组,每组20只。在所有实验动物背部两侧制作直径约1 cm的圆形全层皮肤缺损创面,从造模当日开始,丹黄散组清创后外撒丹黄散后无菌棉纱覆盖;西药组清创后用山莨菪碱、庆大霉素和胰岛素的无菌棉纱外敷,空白对照组及模型对照组清创后无菌棉纱覆盖。分别于造模3 d、7 d、14 d、21 d后观察和记录各组创面未愈合面积,计算各时间点创面愈合率;取各组大鼠创缘新生皮肤组织进行HE染色,观察创缘组织修复情况及局部炎症反应;采用免疫组化法检测各组大鼠创缘组织中CK14和CK15蛋白表达情况。结果丹黄散组大鼠3 d时可见少量肉芽组织开始形成,21 d时创面基本愈合结痂,无死亡大鼠;西药组大鼠7 d时可见肉芽组织出现,到21 d表皮覆盖大部分创面,无死亡大鼠;模型对照组大鼠创面愈合缓慢,7 d、12 d各死亡1只,21 d时创面大多未愈合;空白对照组大鼠3 d时即可见新鲜肉芽组织生成,18 d时死亡1只,21 d时创面基本愈合。西药组、丹黄散组大鼠各时间点创面愈合率及创面组织中CK14、CK15表达水平均明显高于模型对照组(P均<0.05);丹黄散组大鼠3 d、7 d时创面愈合率及创面组织中CK14、CK15表达水平与西药组比较差异无统计学意义(P均>0.05),14 d、21 d时均明显高于西药组(P均<0.05)。结论丹黄散可有效促进糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合,机制可能与有效调控CK14、CK15表达有关。     

皮肤及其增白药

美丽的皮肤是美容的第一起点。本文科学地介绍了皮肤的结构、功能 ,皮肤颜色的形成及黑素的代谢 ,并简要介绍了皮肤增白药的分类及美白疗效良好、不良反应极少的皮肤增白药熊果苷和抗坏血酸     

葡萄、葡萄皮

植物名 Vitisz,inifera。 活性成分与药理作用葡萄和葡萄制剂中具有多种药理活性成分。各种类型的酚性化合物如花青素、肉桂酸酯和黄烷-3-醇类有利于预防心脏病。这些酚性化合物具有抗氧化作用和预防低密度脂蛋白（LDL）氧化的作用。     

皮肤病尊麻疹的中医解析

荨麻疹是一种发病范围广且治疗难的常见皮肤病,中、西医学目前对该病均做了大量的研究,但中医学对荨麻疹病的记载与研究历史更为悠久,本文主要从中医学的角度对荨麻疹的病因、分类及治疗等方面做一个较全面的解析。     

值得推荐的一种备皮方法

外科择期手术前1～3天进行剃毛各皮，是我国历年来的护理常规之一，但近年国外许多研究报道前常规剃毛只是简单的剃除表面毛发，而皮肤表面细菌主要位于毛发的根部，因此传统剃毛备皮无助于清除细菌，非便对降低手术切口感染率没有任何临床意义，还会对术区造成一定程度的皮肤划痕或片状皮损，破坏了皮肤完整性，增加细菌移生现象，因此推荐不剃毛的改良各皮方法进行各皮。但四肢骨折部位的手术尤其涉及骨与关节部位的手术无菌要求高或由于体毛较粗长等原因，以及国内日益紧张的医患关系，导致院方为避免不必要的纠纷，不得不仍采用传统剃毛方法进行备皮。     

象皮和拟替代品猪皮、鱼鳞中胶原及其抗氧化活性研究

目的:研究传统中药象皮和拟替代品猪皮、鱼鳞的胶原结构和抗氧化活性.方法:通过正交试验设计法,优选了象皮胶原的最佳提取条件,与拟替代品胶原对其结构和含量进行比较,采用水杨酸法测定其各自清除羟基自由基能力.结果:首次从象皮中提取了结构完整且质量较多的胶原,与拟替代品的胶原结构类型相似,其象皮胶原、猪皮胶原、鱼鳞胶原清除自由基能力衡量值IC5o分别为0.51,0.60,0.42g·L-1.结论:通过比较和鉴定,象皮胶原蛋白为Ⅰ型胶原,抗氧化能力较强,明确了象皮的有效成分,为今后进一步探讨象皮替代品研究提供了重要参考依据.     

核桃青皮流浸膏对银屑病小鼠皮肤屏障功能的影响及机制研究

目的探讨核桃青皮流浸膏对咪喹莫特乳膏致银屑病小鼠皮肤屏障功能的影响及机制。方法制备不同浓度的核桃青皮流浸膏,采用咪喹莫特乳膏制作银屑病模型,给药后通过PASI评分、HE染色观察各组小鼠皮肤变化及组织结构变化,利用RT-PCR检测各组小鼠皮肤组织中水通道蛋白-3(aquaporin3,AQP3)、神经酰胺(ceramide,Cer),丝聚合蛋白(filaggrin,FLG)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-14(Caspase14)四种相关保湿因子表达的改变。结果给予不同浓度核桃青皮流浸膏的实验组较模型组皮损部位红肿程度轻、鳞屑面积小,皮肤光滑,增厚程度轻,镜下表皮增生情况有缓解,尤其高剂量组较假手术组无显著性差异(P>0.01);中、高剂量组AQP3、Cer、FLG、Caspase14表达分别与模型组比较均具有显著性差异(P<0.01),高剂量与阳性药组相比,四种物质的表达均不具有显著性差异(P>0.01)。结论核桃青皮流浸膏对咪喹莫特乳膏致银屑病小鼠模型病理的变化有改善作用,其增强皮损组织中AQP3、Cer、FLG、Caspase14四种相关保湿因子的表达是改善皮肤损伤的可能机制之一,治疗作用与给药量成线性关系,且高浓度效果不劣于卡泊三醇组。     

糖尿病患者足部皮肤的护理

糖尿病足是糖尿病严重的并发症之一，一旦发生难以治愈，是造成患者截肢的主要原因，给患者带来巨大的精神压力，严重影响生活质量。所以，加深患者对本病的认知程度、积极预防和治疗，是防止本病发生的关键。     

Shiunko promotes epithelization of wounded skin

Shiunko is a traditional botanic formula (ointment) which is used clinically for the treatment of wounded skin caused by cuts, abrasions, frost or burn. The aim of this study was to evaluate the effect of Shiunko on epithelization of wounded skin. Experimental cutting wounds on the back skin of Sprague-Dawley rats were induced. Different bacterial inoculations (Pseudomonus aeruginosa and Staphylococcus aureus) and treatment (Shiunko, Povidone-iodine and saline) were arranged herein. The incidences of infection and the speed of epithelization were evaluated. We observed that the incidences of wound infection following Pseudomonas aeruginosa inoculation were lower on both the Shiunko-treated group (0%, p < 0.01) and Povidine-iodine-treated group (5%, p < 0.05), than the saline-treated group (40%). The Shiunko-treated group reported higher percentages of complete epithelization not only on the sterilized wounds (100%) but also on the contaminated wounds (90%) when compared to the saline-treated group (60% sterilized wounds, 40% and 50% contaminated wounds) on day 7 (p < 0.01). Povidone-iodine did not promote epithelization of wounded skin, whereas Shiunko did.     

慢性皮肤溃疡的辩证施护

慢性皮肤溃疡是一种常见病，因其迁延不愈及愈后极易复发等特点，如臁疮、席疮等，成为临床护理中的难题。多继发于下肢静脉曲张，局部创伤，长期卧床导致局部长期受压，其特点是溃疡发生前患部长期皮肤瘀斑，粗糙，溃烂后疮口经久不愈或虽已收口，每因局部损伤而复发。运用中医辨证护理原则对我科慢性皮肤溃疡患者开展辨证护理，现将护理介绍如下。     

消瘊丸治疗皮疣

皮肤上长疣,是临床常见的皮肤病。笔者自拟消瘊丸治疗皮疣,临床效果很好,值得临床推广应用。