蓝莓对肝纤维化大鼠血红素加氧酶-1表达的影响

目的 观察蓝莓对大鼠肝纤维化的预防作用及对血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响.方法 45只SD大鼠随机分为生理盐水对照组(A组)、模型组(B组)、蓝莓汁预防组(C组)、丹芍化纤胶囊预防组(D组)及蓝莓汁加丹芍化纤胶囊预防组(E组),每组9只.CCl4复合因素制备大鼠肝纤维化模型,各预防组给予蓝莓汁或(和)丹芍化纤胶囊灌胃,共饲养8周.测定各组大鼠血清ALT水平及肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的表达,并进行肝组织病理学检查.采用实时荧光定量聚合酶链反应、免疫组织化学法和Western blot分析大鼠肝组织HO 1的mRNA及蛋白质表达.多组间数据比较用单因素方差分析,等级资料用秩和检验.结果 B组大鼠血清ALT水平高于A组[(203.25±31.62)U/L比(57.25±6.88)U/L,F=92.498,P＜0.05)],各预防组较B组明显减少[C、D和E组分别为(149.44±16.51)U/L、(136.88±10.07)U/L和(127.38±11.03)U/L,F=92.498,P＜0.05)].C、D、E组大鼠肝组织匀浆SOD水平分别为(1.36±0.09)U/mg、(1.42±0.13)U/mg、(1.50±0.15)U/mg,高于B组的(1.08±0.19)U/mg(F=13.671,P＜0.05);MDA水平分别为(0.294±0.026)nmol/mg、(0.285±0.025)nmol/mg、(0.284±0.028)nmol/mg,低于B组的(0.335±0.056)nmol/mg(F=20.809,P＜0.05).各预防组肝纤维化程度较B组也有所减轻(x2-24.956,P＜0.05).B组大鼠肝组织HO-1的mRNA和蛋白质表达高于A组(F值分别为4.549和22.926,P值均＜0.05),各预防组大鼠肝组织HO-1的mRNA和蛋白质表达均高于B组,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 蓝莓对CCl4所致大鼠肝纤维化有一定的预防作用;在慢性肝损伤时,蓝莓对HO-1的表达无明显影响.     

细胞色素酶P4502E1介导的氧化应激对人肝星状细胞的活化作用

目的 研究细胞色素酶P4502E1(CYP2E1)介导的氧化应激对人肝星状细胞的活化作用. 方法 以CYP2E1为目的 基因,将CYP2E1表达载体PCI-CYP2E1及空载体PCI-neo转染到人肝癌细胞株HepG2细胞,分别为HepG2/CYP2E1,HepG2/PCI.检测HepG2/CYP2E1,HepG2/PCI及正常HepG23组细胞上清液中丙二醛(MDA)含量.将上述3种细胞分别与人肝星状细胞LX2共培养48 h,分别命名为CYP2E1/LX2组,PCI/LX2组,HepG2/LX2组,提取RNA、上清液,用羟脯氨酸(Hyp)试剂盒检测3组LX2上清液中Hyp含量,用逆转录多聚酶链反应检测LX2细胞内Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶2(MMP2)的mRNA水平,用酶联免疫吸附试验检测3组上清液中LX2分泌的Ⅰ型前胶原羧基肽(PICP)蛋白水平,用明胶酶谱法检测3组上清液中LX2分泌的MMP2酶活性.组间比较用单因素方差分析进行统计学分析. 结果 (1)HepG2/CYP2E1细胞、阴性对照组HepG2细胞及HepG2/PCI细胞的MDA值分别为(6.51±0.25)nmol/ml、(3.07±0.29)nmol/ml和(2.57±0.29)nmol/ml,F值为22.66,P值均<0.01.(2)HepG2/CYP2E1、HepG2、HepG2/PCI 3组细胞培养液中Hyp含量分别为(35.24±3.52)nmol/ml、(24.50±1.37)nmol/ml和(17.77±2.58)nmol/ml,F值为58.89,P值均<0.01; 3组LX2细胞Ⅰ型胶原mRNA水平表达,差异无统计学意义.CYP2E1/LX2组、阴性对照组HepG2组及PCI/LX2组LX2分泌的PICP蛋白吸光度值分别为540.01±11.38、262.57±15.61和231.59±12.76,F值为124.97,P值均<0.01; 3组LX2细胞内MMP2 mRNA水平表达、MMP2的酶活性,差异无统计学意义. 结论 CYP2E1可引起氧化应激,CYP2E可增加LX2细胞外Hyp的合成和分泌.CYP2E1活化了肝星状细胞,可促进其细胞外PICP合成与分泌.     

细胞色素P450 2E1在脂肪性肝炎大鼠肝组织的表达及作用

目的探讨细胞色素P4502E1(CYP2E1)在脂肪性肝炎大鼠肝组织内的表达和作用。方法通过高脂饮食和逐渐增加酒精灌胃量持续16周建立Wister大鼠脂肪性肝炎动物模型,造模结束时检测模型组和正常组动物血脂、游离脂肪酸(FFA)和肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)含量;免疫组化标记检测肝组织CYP2E1表达;RT-PCR法检测CYP2E1 mRNA的水平。结果实验结束时,模型组大鼠血脂和血清FFA较正常组显著增高(P<0.01);肝组织MDA较正常组显著增高(P<0.01),而SOD和GSH较正常组明显减低(P<0.01);肝组织内CYP2E1及其基因表达较正常组显著升高(P<0.01),并与肝组织内MDA、脂肪变程度、炎症计分呈明显正相关(r值分别为0.652,0.913和0.943,P值均<0.05),与SOD、GSH呈显著负相关(r值分别为-0.916,-0.766,P<0.01)。结论脂肪性肝炎大鼠肝脏内CYP2E1呈诱导表达状态,后者可能通过增强氧应激,降低抗氧化能力,加重脂质过氧化等过程参与了脂肪性肝炎的形成。     

细胞色素P450 2E1在大鼠急性肝损伤中的表达及其意义

目的研究细胞色素P4502E1在大鼠急性肝损伤中的表达变化及其意义。方法随机将Wista大鼠分成正常对照组和急性肝损伤组，采用四氯化碳制备急性肝损伤模型，并按染毒时间分为3、6、12、24、36和48h6个亚组，每组5只大鼠。采用western blot方法测定染毒后不同时间点肝组织细胞色素P4502E1蛋白的表达变化；测定大鼠血清ALT、AST水平和肝组织MDA浓度、SOD活性的变化以及采用电子自旋共振（ESR）技术测定大鼠肝组织自由基（ROS）浓度变化，HE染色观察肝组织病理形态学改变；结果四氯化碳可明显导致大鼠肝脏损伤，表现为：血清ALT、AST水平显著升高，肝组织MDA浓度和ROS含量显著增加。SOD活性明显下降，和正常对照组相比，差异均十分显著（P〈0．01）；western blot结果显示：细胞色素P4502E1在正常大鼠肝组织中有表达，染毒3h后表达增强，12h达到高峰，明显高于正常对照组（P〈0．05），其表达趋势与ROS浓度变化相一致。结论细胞色素P4502E1蛋白在大鼠急性肝损伤时表达显著增强，提示其在中毒性肝损伤的发病中可能具重要的病理生理意义，并与四氯化碳诱导的氧化应激反应密切相关。     

金纳多对大鼠肝脏细胞色素P450酶活性的影响

2007年8月～2007年9月,我们观察了金纳多对大鼠肝脏细胞色素P450酶(CYP450)活性的影响,现报告如下. 材料:21只SD大鼠,雄性,体质量175～230 g;金纳多,7-乙氧基异喹唑,红霉素,Folin试剂,牛血清白蛋白(BSA),氨基比林,NADPH,CO,甲醛,乙酞丙酮;TU-1901双光束紫外分光光度计,F-3010荧光光度计,高速冷冻离心机,匀浆机.     

细胞色素P450ⅡE1与肝病

细胞色素Ｐ４５０ⅡＥ１对肝毒性物质如乙醇,ＣＣｌ４等具有特异性的代谢作用。为此,本论述了细胞色素Ｐ４５０ⅡＥ１在肝病发病机制中的作用。     

细胞色素P450ⅡE1与肝病

细胞色素P450ⅡE1对肝毒性物质如乙醇、CCl_4等具有特异性的代谢作用。为此,本文论述了细胞色素P450ⅡE1在肝病发病机制中的作用。     

三七总甙对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织细胞色素P450 2E1表达的影响

目的研究三七总甙对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织细胞色素P450 2E1表达的影响。方法用脂肪乳剂灌胃法诱导大鼠非酒精性脂肪肝模型，并给予三七总甙干预，观察肝组织病理学形态的变化，采用免疫组化法检测肝组织细胞色素P450 2E1的表达，酶标仪法测定肝内丙二醛（MDA）、超氧化物岐化酶（SOD）、游离脂肪酸（FFA）含量。结果与模型组比较，三七总甙干预组肝细胞的脂肪变程度明显减轻，脂滴减少，CYP 2E1的表达受到明显抑制，肝内SOD活性升高，MDA、FFA显著降低。结论三七总甙能显著抑制大鼠脂肪肝CYP 2E1的表达，减轻脂质过氧化反应，因而具有防治脂肪肝的作用。     

细胞色素P4502 E1抑制剂DDC上调人星状细胞基质金属蛋白酶-1表达

目的细胞色素P450 2E1（CYP2E1）可以诱导肝星状细胞合成I型胶原增加,而此效应可被CYP2E1抑制剂阻断,但其机制仍不清楚。本研究旨在研究CYP2E1抑制剂DDC可能的抗纤维化机制。方法将稳定表达CYP2E1的人肝细胞系C3A-CYP2E1与人星状细胞系LX-2共培养,并给予CYP2E1抑制剂DDC处理。DDC处理24h后收取共培养上清及LX-2细胞。ELISA检测共培养上清中前I型胶原含量,半定量PCR及实时荧光定量PCR测定LX-2细胞中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、I型胶原和基质金属蛋白酶抑制因子-1（TI MP-1）的相对转录水平。结果 ELISA结果显示,与未加DDC的对照组相比,DDC处理组共培养上清中的前I型胶原含量下降,差异具有统计学意义。半定量PCR及实时荧光定量PCR均显示,与未加DDC的对照组相比,DDC处理组LX-2细胞中MMP-1的相对转录水平明显增加,差异具有统计学意义;而I型胶原和TIMP-1的相对转录水平无明显改变。结论 CYP2E1抑制剂DDC主要通过上调MMP-1的表达,以发挥其抑制I型胶原合成的作用,而对I型胶原和TI MP-1的转录无明显影响。     

复方中药对酒精性脂肪肝肝细胞色素P450ⅡE1表达的影响

目的 研究复方中药对酒精性脂肪肝肝细胞色素P450ⅡE1(CYPⅡE1)表达的影响。 方法 在大鼠饮水中逐步加入40％的乙醇(v/v)形成酒精性脂肪肝模型,同时给予复方中药干预,观察肝组织病理形态的变化和肝CYPⅡE1的表达,测定肝丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、维生素E含量的变化,并与对照组比较。 结果 中药组的肝组织脂肪变性基本恢复正常,免疫组织化学和原位杂交证明复方中药能显著抑制脂肪肝肝CYPⅡE1的表达,同时肝内MDA和SOD、GSH、维生素E含量恢复到接近正常。 结论 复方中药能显著抑制酒精性脂肪肝肝CYPⅡE1的表达,具有防止酒精性脂肪肝的作用。     

肝细胞色素P450 2E1在实验性肝纤维化组织中的表达

目的 研究肝细胞色素Ｐ４５０ ２Ｅ１在实验性肝纤维化组织中的表达。方法 ８只Ｗｉｓｔａｒ大鼠,建立四氯化碳（ＣＣｌ４）肝纤维化模型,用免疫组织化学方法观察肝纤维化模型肝组织中肝细胞色素Ｐ４５０ ２Ｅ１。结果 正常肝组织内,ＣＹＰ ２Ｅ１表达仅见于中央静脉周围区,主要表达于肝腺泡Ⅲ区,２～３层细胞厚,肝细胞浆和细胞膜可见ＣＹＰ ２Ｅ１表达。在ＣＣｌ４模型肝组织中,ＣＹＰ ２Ｅ１表达的强度增加,分布的     

Effect of beta-carotene on hepatic cytochrome P-450 in ethanol-fed rats

BACKGROUND: Hepatotoxicity of ethanol is increased by beta-carotene in both rodents and nonhuman primates. Furthermore, in smokers who are also drinkers, beta-carotene increases the incidence of pulmonary cancer. The hepatotoxicity was associated with proliferation of the membranes of the smooth endoplasmic reticulum, suggesting the involvement of cytochromes P-450. Therefore, the aim of the present study was to assess the effect of beta-carotene and ethanol treatment on rodent hepatic cytochromes P-450. METHODS AND RESULTS: Weanling male Sprague-Dawley rats were pair-fed beta-carotene (56.5 mg/l of diet) for 8 weeks, with and without ethanol (Lieber-DeCarli, 1994 liquid diet). As expected, ethanol increased CYP2E1 (measured by Western blots) from 67 +/- 8 to 317 +/- 27 densitometric units (p < 0.001). Furthermore, beta-carotene potentiated the ethanol induction to 442 +/- 38 densitometric units (p < 0.01) with a significant interaction (p = 0.012). The rise was confirmed by a corresponding increase in the hydroxylation of p-nitrophenol, a specific substrate for CYP2E1, and by the inhibition with diethyl dithiocarbamate (50 microM). Beta-carotene alone also significantly induced CYP4A1 protein (328 +/- 49 vs. 158 +/- 17 densitometric units, p < 0.05). The corresponding CYP4A1 mRNA (measured by Northern blots) was also increased (p < 0.05) and there was a significant interaction of the two treatments (p = 0.015). The combination of ethanol and beta-carotene had no significant effect on either total cytochrome P-450 or CYP1A1/2, CYP2B, CYP3A, and CYP4A2/3 contents. CONCLUSIONS: Beta-carotene potentiates the CYP2E1 induction by ethanol in rat liver and also increases CYP4A1, which may, at least in part, explain the associated hepatotoxicity.     

利尿剂对高血压大鼠细胞色素P450表氧化酶及血管紧张素Ⅱ1型受体基因表达的影响

目的　噻嗪类利尿剂是广泛使用的降血压药物 ,然而其降血压机理仍然不完全清楚。本研究观察了氢氯噻嗪和吲哒帕胺对自发性高血压大鼠 (SHR)细胞色素P4 5 0 (CYP)表氧化酶 2C11及血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1)基因表达的影响 ,以探讨其降低血压的分子机制。方法　成年雄性SHR随机分为三组 ,分别每日经胃管给予氢氯噻嗪 (10mg/kg)、吲哒帕胺 (0 6 2 5mg/kg)和等量去离子水灌胃 ,并测量血压和 2 4h尿量。 4周后 ,检测主要脏器的CYP表氧化酶 2C11和AT1表达情况及形态学变化。结果　氢氯噻嗪和吲哒帕胺用药 1周后动物血压降低 ,4周时降压幅度达到非常显著水平 ,与对照组比较P <0 0 1。同时在mRNA和蛋白质水平上调肾脏、心脏和主动脉中CYP表氧化酶 2C11和下调AT1基因表达 ;胶原染色显示 ,两种药物均能显著减少心肌胶原沉积 ,减轻高血压所致的肾脏损害。结论　噻嗪类利尿剂氢氯噻嗪和吲哒帕胺可能通过上调CYP表氧化酶及下调AT1降低血压和保护器官。     

抗组胺药敏感性细胞色素P450在大鼠肝硬化中的变化

目的研究四氯化碳诱导大鼠肝硬化的不同时期肝脏微粒体中抗组胺药敏感性细胞色素Ｐ４５０（ＨＰ４５０）及血液中组胺水平的变化趋势。方法采用３Ｈｍｅｐｙｒａｍｉｎｅ为放射性配体,利用受体配体结合研究技术检测ＨＰ４５０,同时采用荧光法检测外周血液中组胺水平。结果在肝硬化早期,大鼠肝脏微粒体中ＨＰ４５０的水平降低明显,在肝硬化中期和晚期,ＨＰ４５０水平的降低逐渐达到一最低水平的稳定值。ＨＰ４５０的内在亲和力也随之改变,早期Ｋｄ值明显下降,受体的亲和力升高,然后随着病变的发展,Ｋｄ值逐渐升高,即受体的亲和力逐渐下降,但各期Ｋｄ值经统计学检验后差异无显著性（与对照组相比Ｐ＞０．０５）。动物血液中的组胺水平早期明显升高,到了中期和晚期后组胺下降的幅度逐渐减低。结论组胺水平在肝硬化大鼠体内升高显著,可能对肝硬化的形成起着重要的作用。     

Hepatoprotective effects of S-adenosyl-L-methionine against alcohol-and cytochrome P450 2E1-induced liver injury

S-adenosyl-L-methionine (SAM) acts as a methyl donor for methylation reactions and participates in the synthesis of glutathione. SAM is also a key metabolite that regulates hepatocyte growth, differentiation and death. Hepatic SAM levels are decreased in animal models of alcohol liver injury and in patients with alcohol liver disease or viral cirrhosis. This review describes the protection by SAM against alcohol and cytochrome P450 2E1-dependent cytotoxicity both in vitro and in vivo and evaluates mechanism...