脂质代谢及破骨细胞活性在激素性股骨头坏死塌陷发生过程中的作用研究

目的:通过诱导激素性股骨头坏死的动物模型并观测模型的相关指标,研究脂质代谢及破骨细胞活性在激素性股骨头坏死塌陷发生过程中的作用.方法:将雄性SD大鼠40只(150 g左右),随机分为空白对照组和激素实验组,腹腔注射大肠杆菌内毒素后,实验纽每周1次臀肌注射醋酸强的松龙35.5 mg/kg,对照组每周1次臀肌注射生理盐水2 ml,于第12周用药结束后处死动物,进行血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(Trap-5b)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、软骨下骨生物力学、股骨骨密度测定,制作HE染色病理切片,进行茜红素和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)染色,并进行统计分析.结果:实验组的血清总胆固醇、甘油三酯、抗酒石酸酸性磷酸酶5b含量显著升高(P<0.01),局部骨髓内出现大量破骨细胞,骨质丢失严重(P<0.01),软骨下骨生物力学性能显著下降(P<0.01).结论:脂质代谢紊乱是激素性股骨头坏死重要的发病机制;破骨细胞活性增强、数量增加,引起骨质严重丢失导致的软骨下骨生物力学性能下降是股骨头塌陷的直接原因.     

miRNA在激素性股骨头坏死中的作用研究进展

激素性股骨头坏死(SONFH)是使用糖皮质激素导致的无菌性股骨头坏死。其可能的发病机制包括激素诱导的成骨细胞凋亡、成脂与成骨分化失衡及股骨头微循环受损等。近年来,微RNA(miRNA)逐渐成为非编码RNA领域的研究热点,部分miRNA已被证实与SONFH的发病机制密切相关。该文拟从SONFH患者或动物模型的miRNA表达失调、miRNA对SONFH进展的调控作用及miRNA对SONFH的潜在诊疗价值等方面作一综述,为SONFH的预防和治疗提供新思路。     

早期激素性股骨头坏死骨细胞凋亡的实验研究

目的探讨细胞凋亡在早期激素性股骨头缺血坏死中的意义。方法新西兰兔60只，雌雄不拘，体重2．6～3．5kg，随机分为实验组和对照组，每组30只。实验组予耳缘静脉注射马血清（10ml／kg）2次，每次间隔2周；马血清注射完毕2周后，连续3d腹腔内注射甲基强的松龙（45ml／kg·d）。对照组腹腔注射等量生理盐水。分别于给药后2、4、6和8周采用气栓法处死动物，切取双侧股骨头标本，行组织形态学、透射电镜观察及TUNEL法凋亡细胞检测。结果给药后4周，实验组凋亡细胞数为112．33‰±26．12‰，明显高于对照组47．01‰±22．95‰（P〈0．01）；随着时间推移，凋亡细胞逐渐增多。给药后6、8周，实验组空骨陷窝百分比分别为17．23％±3．44％、28．56％±3．45％，对照组分别为11．29％±2．89％、11．26％±2．75％，二者差异均有统计学意义（P〈0．05）。给药后6、8周透射电镜观察，实验组见部分骨细胞有完整核膜、染色质浓集、电子密度增加等凋亡特征；对照组骨细胞占据整个骨陷骨，细胞突起较多、细胞器丰富，线粒体发达。结论细胞凋亡在早期激素性股骨头缺血坏死中起重要作用。     

激素性股骨头坏死与骨细胞脂肪变性的实验研究

给家兔注射大剂量激素后，可引起股骨头骨细胞坏死，同时有大量骨细胞发生脂肪变性及坏死。用药第４周，电镜下可见股骨头部骨细胞内出现异常增多的脂滴，此后骨细胞内脂肪逐渐增多。在用药第１０周，骨细胞内充满大量脂肪，细胞核被挤向细胞的边缘，核变性，深染，细胞器消失。另外，实验动物肝脏脂肪变性，股骨头骨小梁内空缺骨陷窝增多，骨髓腔内脂肪细胞增大。我们认为股骨头部骨细胞脂肪变性及坏死是激素性股骨头坏死的一个变化过程，并能加重股骨头坏死的进展。     

左旋多巴干预激素性股骨头坏死中骨细胞凋亡的实验研究

目的 探讨左旋多巴对激素性股骨头坏死中骨细胞凋亡的影响.方法 健康成年中国大耳白兔44只,随机分为三组.模型组,15只,经耳缘静脉注射10 μg/kg脂多糖,24 h后于右侧臀肌注射20mg/kg甲基泼尼松龙,共3次,每次间隔24 h.治疗组,15只,与模型组相同方法建模,注射完成后当日开始口服左旋多巴,剂量0.4 g·kg~(-1)·d~(-1).对照组,14只,于相同时间点注射等量生理盐水.制模后6、8周,各组分别处死7只,处死前行双髋关节X线摄片及MR检查,处死后取双侧股骨头标本,行HE染色并用TUNEL法测定细胞凋亡,观察组织病理学改变并进行细胞凋亡分析.制模后8周,采血测定3组兔子血清中胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)水平.结果 模型组X线片显示股骨头骨密度不均匀,可见有囊性变或硬化骨;HE染色显示骨小梁变细、稀疏、连续性中断,骨髓组织脂肪变性,空骨陷窝明显增多;TUNEL检测显示骨小梁内存在大量凋亡骨细胞.而治疗组X线片显示股骨头接近正常,骨密度均匀增高;组织病理学显示骨小梁连续性完整,制模后6、8周的空骨陷窝率分别为13.33‰±3.06‰及25.97‰±6.29‰,低于模型组的21.44‰±4.77‰及33.86‰±8.38%(P<0.01);骨细胞凋亡指数分别为74.93‰±14.32‰及120.67‰±13.13‰,低于模型组的102.56‰±18.96‰及202.02‰±18.99‰(P<0.01);制模后8周治疗组动物血清IGF-1含量为(14.78±2.37)ng/ml,高于模型组的(10.12±2.49)ng/ml(P<0.01);统计学分析显示模型组骨细胞凋亡指数与空骨陷窝率呈明显正相关(r=0.74,P<0.01).结论 左旋多巴可以减少激素诱导的骨细胞凋亡,减少股骨头坏死的发生.而左旋多巴通过体内代谢促进IGF-1的合成及释放可能是其预防及治疗激素性股骨头坏死的生物学途径之一.     

坏死状凋亡通路抑制剂在兔早期激素性股骨头坏死中的作用

目的探讨坏死状凋亡及其抑制剂Necrostatin-1(Nec-1)在兔早期激素性股骨头坏死中的作用机制,为股骨头坏死的研究提供新的理论依据。方法选取84只健康成年新西兰兔,雌雄不限,体重(2.9±0.3)kg,适应性喂养1周。选择60只采用激素联合脂多糖法构建早期激素性股骨头坏死模型,其余24只为空白对照模型。造模6周后MRI对动物模型进行筛选,50只发生早期股骨头坏死,选2只进行病理学观察,其余48只利用简单随机数法随机平均分为模型组和治疗组,治疗组给予每日1.65 mg/kg剂量静脉注射Nec-1,模型组和空白对照组按同剂量每日注射生理盐水,给药后分别于2、4、8周三个时间点处死动物并取双侧股骨头标本,通过大体观察、HE染色及透射电镜观察骨坏死情况;免疫组化及Western Blot检测受体相互作用蛋白1(RIP-1)的蛋白表达情况。利用单因素方差分析比较三组不同时间点空骨陷窝率,利用Quantity One半定量分析各组及同一组不同时间点蛋白表达情况,利用Image Pro Plus对免疫组化各组及同一组不同时间点平均蛋白吸光度行半定量分析,对半定量结果行单因素方差分析。结果兔早期股骨头坏死模型成模率83.3%。Nec-1治疗组在不同时间点的透射电镜下形态学改变及平均空骨陷窝率较模型组均改善(t值分别为2.41,2.43,4.13,P均小于0.05),但均劣于空白组(t值分别为8.42,8.80,11.38,P均小于0.05);免疫组化半定量分析示RIP-1表达治疗组与模型组相比在第2周,第4周,第8周均有统计学差异(t值分别为6.28,4.00,2.35;P均小于0.05)。Western Blot电泳结果提示RIP-1蛋白表达趋势与免疫组化结果相同,半定量分析示治疗组与模型组在第2周,第4周,第8周RIP-1表达有统计学差异(t值分别为6.89,3.69,2.50;P均小于0.05)。结论坏死状凋亡参与激素性股骨头坏死的发生,Nec-1通过对坏死状凋亡抑制从而对激素性股骨头坏死有一定的保护作用。     

Hedgehog信号通路在激素性股骨头坏死作用机制中的研究进展

糖皮质激素的不正确使用导致股骨头内骨代谢异常、脂代谢失衡、血微循环障碍是激素性股骨头坏死发生、发展的重要原因之一。Hedgehog通路作为一条高保守信号通路,在组织器官骨骼的形成发育以及疾病过程中有着重要调控作用。近年来,随着精准医学的进一步发展以及对于细胞和分子生物学的广泛深入研究,发现Hedgehog信号通路可以通过促进骨髓间充质干细胞成骨分化,抑制脂肪细胞的生成,加速血管内皮细胞的新生对激素性股骨头坏死进行有效的靶向调控。现以Hedgehog信号通路在激素性股骨头坏死病理机制中发挥的调控作用进行综述,以期为临床治疗激素性股骨头坏死提供精确的靶点。     

激素性股骨头坏死中的低氧反应通路

激素性股骨头坏死以成骨细胞和骨细胞凋亡为特征.糖皮质激素可造成股骨头血液供应障碍,从而导致或参与股骨头坏死的发生.近年来的研究日益关注低氧和糖皮质激素之间的相互影响,并发现低氧诱导因子1在低氧反应通路中起着关键作用.针对其中关键环节进行干预,可能是目前激素性股骨头坏死治疗在分子生物学方面提出的一条新思路.     

激素性股骨头缺血坏死研究进展

在 2 0世纪 5 0年代后期人们 [1]发现股骨头缺血坏死(Avascular Necrosis of the Fem oral Head ANFH)与系统性红斑狼疮 (SL E)有关系 ,特别是在经皮质激素 (CorticosteroidCS)治疗后。随后 Jones及 Cruess等相继发现肾移植后应用CS的病人可继发 ANFH。 1988年日本骨科学会调查发现非创伤性 ANFH,34.7%是由于 CS治疗引起的。虽然人们已经知道 CS与 ANFH之间有相关性 ,但其发病机理仍不十分明了 [2 ,3 ] ,CS的剂量与 ANFH的关系也不清楚 [1] 。1　关于 CS诱导的 ANFH的病理机制 ,目前主要有以下几种学说 :1.1　脂代谢紊乱…     

激素性股骨头坏死治疗分析

许多需要长期大量服用激素的疾病可引起股骨头坏死。我院自1985～1998年共治疗ZO例激素性股骨头坏死,报道如下。临床资料一、一般资料本组20例34髋,男17例29髋,女3例5髋。年龄最小4o岁,最大65岁,平均47岁。Ficat分期1期4例7髓,Ⅰ～Ⅱ期3例5髋,Ⅱ期2例3髓,Ⅱ～Ⅲ期3例6髋,Ⅲ期4例6髋,Ⅲ～Ⅳ期2例4髋,Ⅳ期2例3髋,双髋发病率7O％。系统性红斑狼疮使用激素治疗致股骨头坏死12例21髋,类风湿关节炎致股骨头坏死3例5髓,痛风致股骨头坏死2例3髋,脊髓空洞症致股骨头坏死2例3髋,内分泌紊乱致股骨头坏死1例2髋。二、治疗方法本组治疗…     

脂肪组织巨噬细胞在激素性股骨头坏死发病机制及治疗中的作用

股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)是目前世界医学界亟待攻克的难题,被称为"髋关节的冠心病".ONFH的自然病程包括两方面,即股骨头渐进性塌陷和髋关节继发性骨关节炎.根据股骨头坏死的病因可将其分为创伤性和非创伤性两种.临床上,激素性ONFH发病率已占非创伤性ONFH的首位[1].多年来,虽然国内外学者作出大量的研究工作,但ONFH的病因和发病机制仍不完全清楚.     

ABCB1基因过甲基化修饰在激素性股骨头坏死中的作用

[目的]探讨ABCB1基因过甲基化修饰对激素性股骨头坏死(ONFH)骨髓间充质干细胞(MSCs)功能失调的影响。[方法]选取18例激素性股骨头坏死患者和18例的股骨颈骨折患者,无菌条件下抽取患者股骨骨髓,密度梯度离心法体外分离培养MSCs,取第三代细胞实验。实验分三组:ONFH组(骨坏死患者的MSCs)、5′-氮杂胞苷组(ONFH组的细胞经5′-氮杂胞苷干预72 h)、正常对照组(股骨颈骨折患者的MSCs)。分别检测3组细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)。提取全基因组DNA,亚硫酸氢盐测序(BSP)检测ABCB1基因启动子区的甲基化情况。[结果]与正常对照组相比,ONFH组MSCs增殖能力下降、ROS上升、MMP降低,差异有统计学意义(P0.05)。15μmol/L 5′-氮杂胞苷干预培养后能明显促进ONFH的MSCs增殖能力,降低ROS,提高细胞内的MMP,并且接近正常对照组水平,5′-氮杂胞苷组与ONFH组差异有统计学意义(P0.05)。亚硫酸氢盐测序结果显示:激素性股骨头坏死患者MSCs的ABCB1基因启动子甲基化程度明显高于对照组(P0.05),15μmol/L 5′-氮杂胞苷处理后甲基化程度接近正常对照组水平(P0.05)。[结论]激素性股骨头坏死骨髓间充质干细胞中存在ABCB1基因过甲基化修饰,并导致其功能失调。     

激素性股骨头坏死治疗研究进展

激素性股骨头坏死(SANFH)是骨科难治性疾病之一,病情通常进展迅速,严重影响患者生活。目前,非手术治疗及各种手术治疗均有一定效果,但各有利弊,对治疗的选择尚存争议。随着分子生物学的迅速发展,干细胞和外泌体也被加入到SANFH治疗策略中,其效果令人期待。该文对SANFH治疗的研究进展作一综述。     

骨组织神经在激素性股骨头坏死中作用的探讨

糖皮质激素诱发股骨头坏死的机制目前有多种,但其发病确切机制仍存在争议,从而使得其预防性的治疗措施无法实施.与此同时,越来越多的实验和临床研究揭示了正常的骨代谢需要骨组织中感觉神经和交感神经的参与.故作者认为骨组织神经的损伤和(或)改变在激素诱发的股骨头坏死发病中起到作用,并就此进行探讨.     

长链非编码RNA在激素性股骨头坏死发病机制中的作用

激素性股骨头坏死(SANFH)是由于长期或者大剂量使用激素使股骨头的血供受损或中断,造成股骨头的骨细胞、骨髓成分死亡和骨组织结构破坏的骨科常见的难治性疾病。SANFH的发病机制一直是骨科领域的研究热点,以下这些发病机制是目前学者们普遍认可的：脂肪代谢紊乱、骨髓间充质干细胞(BMSC)异常分化、细胞凋亡、血液供应不足和基...     

生物力学因素在激素性股骨头坏死中对软骨细胞的作用

目的建立大鼠激素性股骨头坏死正常负重和超负重模型,探究力学因素在激素性股骨头坏死中对于软骨细胞的作用。方法4月龄健康Wistar大鼠随机分成实验组与对照组。臀肌注射地塞米松磷酸钠(20mg/kg),每周1次,共计8w。实验组,置于1km/h跑步机中,强迫动物跑动,形成股骨头坏死超负重模型;对照组,生理状态下正常负重。分别于2、4、6、8w处死大鼠,取右侧股骨头标本,行免疫组织化学法Bcl-2和MMP-1染色,比较不同组之间的累计光密度(IOD)值。取左侧股骨头行组织病理学检查。结果实验组Bcl-2和MMP-1累计光密度(IOD)与对照组比较,第4周起有明显统计学差异(P0.05)。实验组Bcl-2和MMP-1表达随激素注射时间增加有统计学意义(P0.05),q检验显示实验组Bcl-2和MMP-1表达从4w开始两两之间有统计学意义,8w时表达最多(P0.05)。实验组8w时病理学呈股骨头坏死表现。结论力学因素通过影响Bcl-2和MMP-1的生成,调节着软骨细胞的凋亡,促进软骨组织的改建。     

生物力学因素对大鼠激素性股骨头坏死的作用

目的:通过对使用激素后不同时段大鼠股骨头生物力学性质的测定,探究激素性股骨头坏死的发病机理。方法:4月龄健康Wistar大鼠随机分成实验组与对照组造模,实验组形成股骨头坏死超负重模型,对照组生理状态下正常负重。分别于2、4、6、8周处死,取右侧股骨头标本,于EnduraTEC ELF3200生物力学材料动态力学性能测试系统行压力测定,计算样本纵向最大位移、刚度、压缩过程能量吸收等生物力学参数。结果:实验组中各个时期股骨头骨小梁宽度、刚度低于同期对照组,最大形变、压缩能量吸收均高于同期对照组(P0.05),随超负重时间延长,骨质疏松程度增加。结论:随着激素注射和超负重时间的延长,骨质疏松、骨细胞凋亡明显;在激素条件下,负重增加骨小梁的断裂,降低股骨头的生物力学性质,成为引起激素性股骨头坏死塌陷的直接外部因素。     

骨免疫调控成骨在激素性股骨头坏死的作用

骨免疫调控成骨是骨修复领域研究的热点,调节性T细胞（regulatory T cells, Treg）是介导骨免疫成骨的核心细胞且与激素诱发ONFH密切相关。骨损伤后Treg细胞经CCL22/CCR4轴调控定向归巢至损伤局部并经STAT5/FoxP3通路激活合成促组织修复因子,并与BMSCs串话调控成骨成血管促进骨修复。MiR-155/SOCS1调节回路调控STAT5/FoxP3通路的激活,激素抑制MiR-155,促进SOCS1表达抑制STAT5/FoxP3通路与Treg细胞激活。调控Treg细胞定向归巢,MiR-155靶向转染T细胞抑制SOCS1表达,激活STAT5/FoxP3通路与Treg细胞,协同构建由Treg细胞介导的骨免疫调控成骨微环境,调控BMSCs成骨成血管修复骨坏死,从骨免疫研究激素性ONFH发病机制和防治是新思路。     

TNFα和VEGF在激素性股骨头坏死中的变化

[目的]通过应用马血清、激素作用新西兰兔，诱导激素性股骨头坏死动物模型。分析TNFα、VEGF在激素性股骨头坏死中的作用。[方法]将20只健康新西兰兔随机分成2组，每组10只。A组为模型组。每只用马血清10ml／kg。经兔耳缘静脉注射。间隔2周，按5ml／kg剂量连续2d注射马血清各1次。间隔2周后，注射醋酸泼尼松龙。按7．5mg／kg腹腔注射3次。B组：正常对照组。动物注射激素5周后，采血，应用ELISA法测血清中TNF-α浓度。处死模型组，标本进行常规组织病理学检查，免疫组化分析股骨头VEGF的表达。[结果]模型组兔血清TNF-α浓度明显高于正常组（P〈0．01）。组织病理学检查显示：部分血管栓塞。骨髓腔内造血组织明显减少。免疫组化结果显示：骨细胞及骨髓组织VEGF表达明显减少。[结论]血清中TNF-α浓度升高及股骨头骨髓组织VEGF表达减少可能是激素性股骨头坏死发生的重要因素。