蛋白酶体抑制剂对骨关节炎大鼠NF-κB 信号通路的影响

 目的 观察蛋白酶体抑制剂MG-132 对骨关节炎软骨及滑膜组织NF-κB 信号通路的影响。方法 SD大鼠144 只, 离断前十字韧带及内侧半月板建立膝关节骨关节炎模型, 随机分为四组: MG-132 组, 造模术后24 h于膝关节腔内注射100 μl 质量浓度为0.007 g/L的MG-132 溶液;DMSO(二甲基亚砜, Dimethyl sulfoxide)组, 造模术后24 h于膝关节腔内注射100 μl 体积分数为0.1% 的DMSO溶液;假手术组, 仅行关节囊切开;正常对照组, 仅于膝关节腔内注射100 μl 质量浓度为0.007 g/L 的MG-132 溶液。术后2、4 和12 周处死动物, 于膝关节软骨组织及滑膜组织取材, 行病理形态学观察, 根据Mankin 评分标准进行半定量评估;应用RT-PCR 法检测NF-κB p65、I-κB、TNF-α、IL-1β等基因mRNA的表达水平;荧光分光光度法检测20S 蛋白酶体活性, 并行相关性分析。结果 MG-132 组各时相的Mankin评分均比DMSO组低, 假手术组与正常对照组相近且较前两组低, 差异有统计学意义。MG-132组各时相的软骨及滑膜组织中NF-κB p65、IL-1β、TNF-αmRNA 表达水平均低于DMSO组, 除2 周滑膜组织NF-κB p65 和12 周软骨组织IL-1βmRNA外差异均有统计学意义。MG-132 组术后2 周软骨组织及4 周滑膜组织I-资B mRNA表达水平高于DMSO 组, 差异有统计学意义。结论 MG-132 具有减轻滑膜炎症、保护关节软骨的作用, 从而延缓骨关节炎进程。     

中医药通过NF-κB信号通路治疗骨关节炎的研究进展

随着全球人口老龄化的进展,骨关节炎的发病率也逐年上升,必将成为一大社会公共卫生问题。骨关节炎发病机制复杂,中药因其多成分、多途径、多靶点的特点在治疗骨关节炎方面具有巨大潜力。大量研究表明中医药可通过调节NF-κB信号通路抑制炎症反应、氧化应激、基质降解、细胞凋亡等治疗骨关节炎。本文综述了中医药通过NF-κB通路治疗骨关节炎的研究进展,以期为未来的基础和临床研究提供参考。     

microRNA-223调控NF-κB信号通路干预骨关节炎的研究进展

骨关节炎作为老年疾病中的一种退行性疾病,对它的研究一直被认为是重点和难点,而如何延缓骨关节炎的进展成为最主要的问题。microRNA-223作为骨科疾病的关键调节因子,其表达的变化对延缓骨关节炎的进展具有调节作用。由于核因子-κB(nuclear factor-kappa B, NF-κB)信号通路作为经典的与骨关节炎相关的信号通路,对骨关节炎的发生及发展可进行调节,且研究发现microRNA-223可以通过对NF-κB信号通路的调控,延缓骨关节炎的进展。本文就microRNA-223对NF-κB信号通路在骨关节炎发病中的作用进行综述,以期为microRNA-223在治疗骨关节炎方面提供一些新的治疗思想。     

麻黄碱调控AMPK/NF-κB信号通路改善大鼠膝骨关节炎的实验研究

目的 探讨麻黄碱(Ephedrine)调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对大鼠膝骨关节炎(KOA)的影响。方法 建立KOA大鼠模型，将大鼠分为Sham组、KOA组、Ephedrine组(40.0 mg/kg)、Ephedrine(40.0 mg/kg)+Compound C组(0.2 mg/kg),药物分组干预后，分别检测大鼠膝关节宽度与疼痛阈值，番红O-固绿染色观察软骨组织病理变化并进行Mankin评分，ELISA法检测关节液TNF-α、IL-1β、COX-2水平，免疫组化检测软骨组织IL-1β、MMP-13蛋白表达，Western blot检测AMPK/NF-κB通路相关蛋白水平。结果 与Sham组比较，KOA组软骨组织损伤严重，膝关节宽度、Mankin评分、关节液TNF-α、IL-1β、COX-2水平及软骨组织IL-1β、MMP-13、p-NF-κB p65/NF-κB p65水平显著升高，疼痛阈值及软骨组织p-AMPK/AMPK水平显著降低(P<0.05);与KOA组比较，Ephedrine组软骨组织病理损伤减轻，膝关节宽度、Man...     

蛋白酶体抑制剂通过NF-κB通路对急性肾损伤的保护作用

急性肾损伤(AKI)是一种常见的临床疾病,涉及多学科。由多种病因导致,整体发病率及死亡率较高。肾缺血再灌注损伤(IRI)作为AKI的主要发病机制之一,且炎症被认为是肾IRI发生发展中最重要的病理生理机制之一。单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)已被证明与AKI有关。IκBα的磷酸化以及核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的激活,可以释放MCP-1,并介导AKI的发生。相关的研究表明,IκBα主要通过泛素-蛋白酶体途径降解。本文通过阐述蛋白酶体抑制剂可通过抑制IκBα的磷酸化以及NF-κB信号通路的激活,从而阻止炎性因子的释放,以此来减轻AKI的机制,为蛋白酶体抑制剂治疗AKI的可能性提供前景。     

NF-κB信号传导通路在大鼠急性结肠炎应激反应中的作用

目的探讨NF-κB通路在大鼠急性结肠炎应激反应中的作用.方法建立大鼠急性结肠炎应激模型,固定化蛋白印迹法（Western blot）检测脊髓内I-κB蛋白水平,逆转录-聚合酶链式反应法（RT-PCR）检测脊髓内COX-2 mRNA水平,免疫组化法检测L5-S1和C2-4脊髓内COX-2蛋白水平.结果结肠内灌注6%醋酸可产生明显局部炎症反应;急性结肠炎0.5 h后L5-S1脊髓内I-κB蛋白表达明显上调（P＜0.05）;急性结肠炎3 h后L5-S1脊髓内COX-2 mRNA表达开始增加,24 h后达到高峰;免疫组化结果显示结肠炎24 h后胞浆内COX-2蛋白表达增加.结论大鼠急性结肠炎时,NF-κB通路可能通过调控COX-2的表达而介导炎症反应,I-κB有可能成为急性结肠炎治疗的靶点.     

miR-146a介导TLR4/NF-κB信号通路延缓骨关节炎的作用及机制

骨关节炎（osteoarthritis, OA）作为慢性低度炎症性疾病，对它的研究一直是重点和难点，因此如何延缓OA的进展成为最主要的问题。miR-146a作为维持软骨稳态的关键调节因子，其表达的变化对软骨退变和炎症具有调节作用。Toll样受体4(toll-like receptor 4, TLR4)/核因子-κB(nuclear Factor-κB, NF-κB)信号通路通过调节免疫炎症反应，维持软骨代谢稳态。虽然miR-146a介导TLR4/NF-κB信号通路延缓OA已有研究，但是具体作用机制仍然不完善。本研究通过miR-146a介导TLR4/NF-κB信号通路对炎症及软骨细退变方面的综述，为OA的治疗提供理论依据和潜在分子靶标。     

脊髓NF-κB信号通路在大鼠持续性术后痛中的作用

目的 评价脊髓NF-κB信号通路在大鼠持续性术后痛中的作用.方法 选择鞘内置管成功的成年雄性SD大鼠90只,体重200～250 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=30):假手术组(S组)、持续性术后痛组(SMIR组)和吡咯烷二硫代氨基甲酸盐组(PDTC组).SMIR组和PDTC组采用皮肤/肌肉切口牵拉法制备大鼠持续性术后痛模型;S组仅分离暴露肌肉,未牵拉.术后1d时开始,PDTC组于30s内鞘内注射NF-KB抑制剂PDTC 10 ng,S组和SMIR组鞘内注射等容量生理盐水,1次/d,连续7d.于术前1 d(T0)、术后1 d(T1)、3 d(T2)、7 d(T3)、12 d(T4)和22 d(T5)时,测定机械缩足反应阈值(MWT);各时点MWT测定结束后,随机取5只大鼠,断头处死后取脊髓组织,采用ELISA法测定TNF-α含量.结果 与S组比较,T1-5时SMIR组MWT降低,T2时PDTC组MWT降低,T3-5时SMIR组和PDTC组脊髓TNF-α含量升高(P＜0.05或0.01);与SMIR组比较,T2-5时PDTC组MWT升高,T3.4时脊髓TNF-α含量降低(P＜0.05或0.01).结论 脊髓NF-κB信号通路参与了大鼠持续性术后痛的发生发展.     

NF-κB相关信号通路在胰腺癌发病中的作用

胰腺癌是外科恶性程度最高的肿瘤之一,随着分子生物学的发展,对胰腺癌的发病机制也有了很大的了解.胰腺癌细胞中存在着多种信号通路传导的异常,包括:Notch信号通路,k-ras信号通路,hedghog信号通路,NF-κB信号通路等,其中由于NF-κB信号的改变在胰腺癌细胞中普遍存在,故考虑NF-κB在胰腺癌各信号通路相互作用中有着重要地位,本文针对NF-κB在胰腺癌细胞中参与的相关信号通路进行综述.     

HMGB1介导TLR4/NF⁃κB信号通路干预骨关节炎研究进展

骨关节炎(osteoarthritis, OA)作为临床常见老年退行性疾病，目前尚无有效治疗手段。研究发现OA是一种慢性低度炎性疾病。损伤相关分子模式HMGB1（high mobility group box-1）在OA病理过程中发挥中心分子作用。HMGB1与固有免疫模式识别受体TLR4(toll-like receptor 4, TLR4)结合后激活NF-κB信号通路导致OA软骨退变和滑膜炎等免疫炎症反应。通过综述HMGB1介导TLR4/NF-κB信号通路在OA发病机制中的作用，为靶向阻断HMGB1治疗OA提供理论依据和参考。     

NF-κB信号通路在鞘内注射血小板活化因子诱发大鼠痛敏中的作用

目的 评价NF-κB信号通路在鞘内注射血小板活化因子(PAF)诱发大鼠痛敏中的作用.方法 鞘内置管成功的雄性SD大鼠64只,体重200～250 g,随机分为6组:人工脑脊液(ACSF)对照组(AC组,n=16)鞘内注射ACSF 10μl;PAF诱发大鼠痛敏组(PAF组,n=16)鞘内注射PAF 10μg(溶于10μl ACSF);二甲基亚砜(DMSO)对照组(DC组,n=8)和低、中和高剂量SC-514组(S1-3组,n=8)分别于鞘内注射PAF前2 h腹腔注射0.1%DMSO溶液2 ml、SC-514(溶于2 ml 0.1%DMSO溶液)10、50、100 mg/kg.分别于鞘内给药前、给药后5、15、30、45和60 min时测定机械痛阈和热痛阈,随后每间隔30 min测定1次,连续4 h,ELISA法检测脊髓TNF-α和IL-lβ的表达.结果 鞘内注射PAF可诱发机械痛敏和热痛敏,上调大鼠脊髓TNF-α和IL-1β的表达;Iκβ激酶-β抑制剂SC-514可剂量依赖性地减轻PAF诱发的痛敏,抑制脊髓TNF-α和IL-1β的表达上调.结论 NF-κB信号通路参与了鞘内注射PAF诱发大鼠痛敏的过程.     

NF-κB信号通路的激活与椎间盘退变的关系

[目的]探讨NF-κB信号通路在椎间盘退变中的激活机制及其作用。[方法]按照Pfirrmann椎间盘退变分级系统对患者进行分级,分别收集2012~2013年上海市第一人民医院手术患者的正常和退变椎间盘组织(退变102例,正常9例),生化检测试剂盒测定椎间盘组织中丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)含量;凝胶迁移试验(EMSA)检测细胞核内NF-κB蛋白结合活性;RT-PCR和Western blotting检测凋亡相关分子CHOP和Caspase-3表达。[结果]椎间盘退变组织中MDA、MPO水平较正常对照组明显增加;EMSA显示髓核细胞核中NF-κB活性增高;RT-PCR和Western blotting结果显示椎间盘退变组织中凋亡相关分子CHOP和Caspase-3水平明显增高。[结论]髓核细胞受氧化应激作用后可通过激活NF-κB通路导致细胞凋亡从而在椎间盘退变中发挥作用。     

膜肾颗粒通过抑制NF-κB信号通路保护膜性肾病大鼠肾脏

目的:探讨膜肾颗粒通过抑制NF-κB信号通路减轻膜性肾病大鼠的肾损伤和炎症反应。方法:将SD大鼠随机分为正常组和造模组,造模组通过注射阳离子化牛血清白蛋白(cBSA)构建MN模型,随机分为模型组、膜肾颗粒组及环孢素A组。给药4周后,检测24 h UTP、TC、BUN及Scr水平,肾组织行常规病理,蛋白免疫印迹法检测肾组织目的蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组24 h UTP、TC水平显著升高(P<0.01),p-NF-κB p65、NLRP3和IL-1b表达显著升高(P<0.01),Nephrin和Podocin表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,治疗组24 h UTP、TC水平显著降低(P<0.01),p-NF-κB p65、NLRP3和IL-1b表达明显降低(P<0.01,P<0.03),Nephrin和Podocin表达显著升高(P<0.01)。结论:膜肾颗粒对膜性肾病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与NF-κB信号通路有关。     

NF-κB信号通路在胰腺癌转移调控中的作用机制

胰腺癌是恶性程度较高的肿瘤之一,绝大多数患者最终死于其广泛转移.多种基因介导的细胞信号通路参与了胰腺癌侵袭和转移的调控.核因子-κB是其中关键的调控通路之一.研究发现,核因子-κB通路对细胞增生、凋亡抵抗、血管形成、上皮间质转化、炎症反应和应激反应等一系列与转移相关的生物学过程具有重要的调控作用,并且可以上调Hedgehog、MMPs等介导转移的信号通路,为临床医师更好地理解胰腺癌转移的调控机制,进一步寻找高敏感性的肿瘤标志物及选择性强的治疗靶点提供了新的思路.     

利多卡因对LPS诱导大鼠腹腔巨噬细胞NF-κB活性的影响

目的 探讨利多卡因对LPS诱导大鼠腹腔巨噬细胞NF-κB活性的影响.方法 取wistar大鼠腹腔巨噬细胞,以2 × 106/ml的密度接种于12孔培养板,每孔1 ml.纯化处理后随机分为5组,每组10孔.正常对照组(C组)加入RPMI-1640培养液1 ml,L组加入含100 ng/ml LPS的RPMI1640培养液1 ml,LL1组、LL2组和LL3组分别加入含有2、20、200μg/ml利多卡因+100 ng/ml LPS的RPMI-1640培养液1 ml.孵育24 h后,收集上清液,测定高迁移率族蛋白B1(HMGB1)浓度;取细胞沉淀,测定HMGBl mRNA表达水平和NF-κB活性.结果 与C组比较,其他各组HMGB1浓度、HMGB1mRNA表达和NF-κB活性均升高(P＜0.05);与L组及LL1组比较,LL2组和LL3组上述指标降低(P＜0.05).LL3组HMGB1 mRNA表达水平低于LL2组(P＜0.05).结论 利多卡因可抑制LPS诱导大鼠腹腔巨噬细胞NF-κB活化,从而抑制HMGB1的合成与释放.     

小檗碱激活AMPK/NF-κB/TNF-α信号通路对肾病综合征大鼠肾损伤的影响

目的:从5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/核转录因子-κB(NF-κB)/肿瘤坏死因子-α(TNF-α)信号通路，探究小檗碱改善肾病综合征(NS)大鼠肾损伤的可能机制。方法:尾静脉注射阿霉素建立NS大鼠模型，随机分为模型组、小檗碱治疗组、激素治疗组、AMPK抑制剂组、小檗碱+AMPK抑制剂组，每组15只，另取15只对照组大鼠。各组连续给药治疗5周后，收集尿液检测24 h尿蛋白；取动脉血检测血浆白蛋白、血脂水平；PAS染色观察肾组织形态变化；Western blot法检测肾组织AMPK、p-AMPK、NF-κB、p-NF-κB、TNF-α、白细胞介素-6(IL-6)、脂肪酸移位酶(FAT/CD36)、P糖蛋白(P-gp)表达水平。结果:与对照组相比，模型组大鼠肾小球血管袢与球囊壁黏连、肾小管管腔狭窄、肾小管上皮细胞水肿、坏死及空泡化等病理损伤严重，24 h尿蛋白、血脂水平升高，血浆白蛋白含量、AMPK活性、与AMPK有关的炎性反应蛋白及促脂质吸收相关蛋白表达降低(P<0.05)。小檗碱治疗或激素治疗，均可改善NS大鼠肾脏损伤，降低24 h尿蛋白、血脂水平，升高血浆中白蛋白含...     

氯沙坦对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌NF-κB表达的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ Ⅰ型受体阻断荆氯沙坦对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌NF-KB表达的影响。方法 健康雄性SD大鼠42只，随机分为4组：对照组（C组，n=6）、缺血再灌注组（I／R组，n=12）、氯沙坦5mg／kg组（LOSl组，n=12）、氯沙坦10mg／kg组（LOS2组，n=12）。采用左冠状动脉前降支结扎30min、开放制备心肌缺血再灌注损伤模型，缺血前15min I／R组静脉注射生理盐水1ml/100g，LOS1组、LOS2组给予相应剂量氯沙坦。再灌注60min时处死大鼠，计算心肌梗死百分比及缺血百分比，电镜下观察心肌细胞的超微结构，采用增强化学发光免疫印记技术测定心肌NF-κB的表达。结果 与C组比较，I／R组心肌梗死面积百分比及心肌NF-κB表达升高，心肌病理学损伤较重；与I／R组比较，LOS1组和Los2组心肌梗死面积百分比及心肌NF-κB表达降低，心肌病理学改变较轻，LOS2组对心肌的保护作用较好。结论 氯沙坦对大鼠心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用，高剂量较低剂量更有效，其机制与下调心肌NF-κB表达有关。     

清热解毒中药对TNF-α诱导的小鼠肾小球系膜细胞NF-κB信号转导通路的影响

目的:以清热解毒中药金银花、连翘等为研究对象,重点观察其对TNF-α诱导的SV40 MES 13 NF-κB信号通路的影响,探讨清热解毒中药治疗肾脏病的有效机制。方法:通过MTT检测10味清热解毒中药对SV40 MES 13生长的影响,从中选出毒性小、作用浓度范围广的3种中药金银花、连翘、蒲公英作为研究对象分别作用于TNF-α刺激的SV40MES 13细胞,MTT检测其增殖、ELISA检测细胞浆p-IκBα、细胞核和细胞浆NF-κBp65及培养上清液中MCP-1、IL-6的表达。结果:(1)TNF-α能明显促进SV40 MES 13的增殖(P<0.05或P<0.01),药物处理组能抑制TNF-α刺激的SV40MES 13的增殖(P<0.01)。TNF-α与药物联合作用时抑制作用比单独药物处理更明显,呈浓度依赖性。(2)ELISA结果显示不同药物处理组细胞浆p-IκBα、细胞核NF-κBp65蛋白表达明显减低(P<0.01),细胞培养上清液中MCP-1、IL-6的含量明显降低(P<0.01),相同浓度的3种中药以金银花作用更明显。提示清热解毒药可以浓度依赖性地抑制SV40 MES 13的IκBα的磷酸化,减少细胞核NF-κB p65表达,阻止NF-κB核转位,从而抑制NF-κB活性,减少下游因子的分泌。结论:中药金银花、连翘、蒲公英可以抑制SV40 MES 13 NF-κB炎症信号通路的激活从而抑制SV40 MES 13的增殖并减少其下游因子的表达,该作用可能是清热解毒中药改善肾脏病炎性损伤的重要机制。     

NF-κB与糖尿病肾病的研究进展

糖尿病肾病是糖尿病最普遍的并发症,其通常导致终末期肾衰和很高的死亡率.核因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)是包含二聚体转录因子的家族其能调控包括炎症和细胞增殖在内的许多基因的表达.NF-KB可能通过高糖、高脂,肾素血管紧张素醛固酮系统、肾脏血流动力学和遗传等多种途径参与糖尿病肾损伤的发生发展.靶向于NF-κB介导的肾脏损伤的治疗被认为是干预糖尿病肾病的有效手段.     

吗啡预先给药对急性心肌缺血大鼠心肌NF-κB水平的影响

目的研究吗啡预先给药对急性心肌缺血大鼠心肌NF-κB水平的影响,探讨吗啡的心肌保护作用机制。方法健康雄性SD大鼠54只,随机分为3组(n=18):假手术组(S组)、心肌缺血组(I组)、吗啡组(M组)。I、M组开胸后结扎冠状动脉左前降支,S组仅穿线不结扎。M组在结扎冠状动脉15 min前经尾静脉注射吗啡1.25 mg·kg-1,S、I组注射等量生理盐水。缺血6 h后处死动物,取缺血区心肌组织观察病理学改变,应用免疫组织化学法检测心肌NF-κB表达,用流式细胞术检测心肌NF-κB激活情况。结果光镜下M组心肌缺血情况比I组重,但比S组轻;I组心肌NF-κB表达及激活百分率大于M组,但小于S组(P<0.05)。结论吗啡预先给药在一定程度上抑制心肌缺血大鼠心肌NF-κB的表达、激活,对心肌有一定的保护作用。