无细胞耻垢分枝杆菌疫苗对豚鼠的长期毒性研究

目的:观察无细胞耻垢分枝杆菌疫苗对豚鼠的长期毒性。方法:48只豚鼠随机均分成无细胞耻垢分技杆菌疫苗低、中、高剂量组(疫苗用量分别为50,250和500μg·kg-1)和阴性对照组,每周1次,连续7周肌内注射疫苗,阴性对照组给予等体积的生理氯化钠溶液。在实验前、中、末期(n=12)和恢复期(n=4)观察动物体重、白蛋白和球蛋白比值、抗疫苗抗体IgG和总IgE的含量;在实验末期和恢复期对豚鼠作病理组织学检查和骨髓细胞学检查。结果:阴性对照组豚鼠抗疫苗抗体IgG始终为阴性,疫苗组豚鼠注射疫苗后抗疫苗抗体IgG阳转;各组豚鼠在整个实验过程中体重稳定增加,白蛋白和球蛋白比值未见明显改变,血清IgE均为阴性;各脏器未见病理性损害和免疫复合物沉积,各脏器系数与阴性对照组比较未见统计学差异;骨髓各系造血细胞未见抑制现象。结论:无细胞耻垢分枝杆菌疫苗对豚鼠无长期毒性。     

无细胞耻垢分枝杆菌疫苗的Ⅰ期临床研究*

目的：通过Ⅰ期临床研究探讨无细胞耻垢分枝杆菌疫苗（M．S疫苗）的人群安全性和耐受性，并初步观察该疫苗对结核病高危人群皮试反应强度的影响。方法1给55例健康志愿者注射不同剂量的疫苗（8．7，17．5和35．0μg），每例注射6次，每2周注射1次。通过对受试者的随访、心率和血压测试、血液常规、尿液常规、肝功能、胸部X-片以及肝、胆、脾、胰的B超检查以及PPD皮肤试验，评估M．S疫苗的不良反应，并比较疫苗注射前后PPD反应强度的变化。结果：在55例、330例次M．S疫苗注射过程中，发生14例、17例次的轻度不良反应，包括局部疼痛、淋巴结肿大、发热、局部硬结、心慌、皮疹和乏力，轻度不良反应总发生率为25．5％（14／55），未发生中度及重度不良反应；PPD皮试强阳性者经不同剂量M．S疫苗的注射，PPD皮试反应强度均显著降低（P〈0．05）。结论：M．S疫苗具有较高安全性，并可显著降低结核病高危人群PPD皮试反应的强度。     

耻垢分枝杆菌乳酸氧化酶的制备

用表面薄层培养法大量培养耻垢分枝杆菌,菌体用超声波破壁后提取乳酸氧化酶.粗酶经硫酸铵分级沉淀、热处理、透析抽提、Sephadex G-200柱层析后获得精酶.精酶经醋酸纤维素薄膜电泳分析为一个蛋白质组份.比活力为125;收率为38%.     

异烟肼耐药耻垢分枝杆菌的建立及药物敏感性的测定

耐药结核病的涌现,使发展新型抗耐药结核药物变得尤为迫切。本研究选择生长快且无致病性的耻垢分枝杆菌为研究对象,探索快速评价药物抗异烟肼耐药结核分枝杆菌的能力。inhA是异烟肼的作用靶点,由于inhA的突变或者过表达可以引起结核分枝杆菌对异烟肼耐药性的产生。通过将inhA克隆入pMV261中,构建过表达inhA的耻垢分枝杆菌。结果显示,过量表达inhA的耻垢分枝杆菌对异烟肼的敏感性下降了100倍以上。建立了利用刃天青为指示剂的抗异烟肼耐药株的快速药效评价方法,可快速对药物的活性进行定性或定量评价,为进行新型抗结核药物的高通量筛选和药效评价奠定基础。     

无细胞百日咳疫苗加强接种对百日咳流行病学的影响

百日咳仍是某些国家重要的公共卫生问题.儿童接种百日咳疫苗后发病率有所降低,但在某些国家仍未得到有效控制.为了进一步降低百日咳发病率,许多国家实施了学龄前无细胞百日咳疫苗加强接种.此文综述了学龄前加强接种百日咳疫苗的效果以及对百日咳流行病学的影响,并讨论了青少年和成年人加强接种对百日咳流行病学的影响.     

分枝杆菌抗原的理化性质对结核杆菌亚单位疫苗研制的影响

结核杆菌引起的结核病仍是全球主要的公共卫生问题,结核病的最终控制需要安全有效疫茁的研制。一种有效的抗结核病眶单位疫苗需要确认和分离结核杆菌的关键组分,这些组分应能诱导保护性免疫应答。通过分析结核杆菌组分的理化性质和免疫生物学特性可确认候选亚单位疫苗。本文重点讨论了分枝杆菌组分的理化性质对保护性免疫应答的诱导及对嗣后抗结核病亚单位疫苗研制的影响。     

无细胞百日咳疫苗的质量控制

20 0 3年 5月 6日～ 7日 ,世界卫生组织 (WHO)百日咳疫苗标准化和质量控制工作组在法国费内 -伏尔泰召开会议 ,对无细胞百日咳疫苗质量控制方法的国际协作研究结果进行了讨论 ,并提出了相关建议     

托烷司琼预防术后镇痛所致恶心呕吐疗效分析

目的比较托烷司琼的不同给药方式对术后恶心、呕吐的预防作用。方法 A组术毕静注托烷司琼5mg后连接镇痛泵;B组术毕静注托烷司琼2mg后镇痛泵内加入3mg;C组托烷司琼5mg加入镇痛泵内。结果与C组比较,A组和B组术后2、4和8h恶心的发生率明显降低。结论在静脉注射2mg的基础上于镇痛泵内加入托烷司琼3mg,可有效预防恶心、呕吐的发生,为最佳给药方案。     

无细胞百日咳疫苗抗体活性持久性监管研究

目的：比较不同类型无细胞百日咳疫苗免疫小鼠后诱导的抗体应答及其持久性。方法：将来自于3家企业,采用2种不同工艺生产的无细胞百日咳疫苗（组分苗和共纯化苗）按一定比例稀释后分别给3组小鼠皮下接种,0.5 mL/只,于第4周加强免疫,剂量与初免疫相同。于免疫后第4周、第5周、第8周、第12周、第17周、第30周、第40周、第50周和第65周取血,分离血清,检测小鼠血清中抗百日咳抗体IgG水平（抗-PT和抗-FHA）和PT的中和抗体水平,并对其结果进行分析比较。结果：两类疫苗组检测结果比较,在免疫后第30周之前,两组之间抗-PT和抗-FHA水平无显著性差异;但在30周之后,两组之间抗-PT和抗-FHA水平有显著性差异（P < 0.05）,组分苗组抗体水平高于共纯化苗组。中和抗体方面,组分苗组中和抗体水平高于共纯化苗组,两组比较有显著性差异（P < 0.05）。结论：两种类型的百日咳疫苗免疫小鼠后均能诱导产生体液免疫应答,组分苗组的抗体持久性（包括百日咳抗体IgG和百日咳PT中和抗体）强于共纯化苗组;且百日咳IgG抗体与中和抗体之间具有一定的相关性。     

生物信息资源在耻垢分枝杆菌EmbB多克隆抗体制备中的应用

目的建立通过生物信息学手段制备耻垢分枝杆菌(M.smegamatis)EmbB(Sm EmbB)多克隆抗体的方法。方法应用生物信息资源在Sm EmbB的N端寻找一段18个氨基酸的特异短肽,合成后将其与白喉类毒素分子相连,以所形成的复合物免疫动物制备抗Sm EmbB的多克隆抗体。结果 Western blot结果显示获得的抗体可特异地作用于Sm EmbB。结论通过生物信息学手段制备多克隆抗体方法的建立解决了对蛋白质功能研究中缺乏抗体的困扰,为特殊蛋白质的抗体制备提供了借鉴。     

结核分支杆菌毒力相关基因mig的克隆研究

在结核病的发生过程中，毒力其着重要的作用，因为只有毒力菌株才可致病。结核菌的毒力可以理解为其引起结核病的能力。而致病性与毒力因子总是联系在一起的。结核菌是典型的胞内寄生菌，但只有有毒株才能在细胞内存活和繁殖。可以推测毒力因子在毒力株的巨噬细胞复制中起关键作用，而目前对毒力因子的分子机制—毒力相关基因知之甚少。为了在分子水平了解毒力因子的作用机制，我们克隆了与结核分支杆菌在巨噬细胞内复制有关的基因mig(macrophage induced gene)，以期在分子水平研究结核分支杆菌的致病机理。     

冻干治疗用母牛分支杆菌菌苗对耐多药肺结核患者临床疗效及细胞免疫功能的影响

目的:寻找耐多药结核病免疫治疗的有效药物。方法:79例耐多药肺结核患者(MDRTB)随机分为治疗组46例和对照组33例,两组患者抗痨方案均为“3AkPaThLevl15PaThLevl”,治疗组加用“母牛分支杆菌菌苗”。治疗1～3个月后观察疗效及检测外周血T淋巴细胞亚群。结果:治疗1、2、3个月后治疗组患者痰菌阴转率(41.3%、63.0%、80.4%)、X线片肺部病灶吸收好转率(30.4%、50.0%、67.4%)分别优于对照组(12.1%、27.3%、39.4%,P<0.001;6.1%、21.2%、27.3%,P<0.05);治疗3个月后治疗组外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+显著高于对照组(P<0.01),CD8+显著低于对照组(P<0.05)。结论:母牛分支杆菌菌苗可增强耐多药肺结核患者的细胞免疫功能,利用患者康复,可用于耐药结核病免疫治疗。     

左氧氟沙星联合微卡治疗复治老年肺结核疗效的观察

目的：观察和评价含有左氧氟沙星的化疗方案联合应用微卡（母牛分枝杆菌）治疗复治老年肺结核的疗效。方法：将97例老年肺结核患者随机分为：治疗组（V＋M组）50例,对照组（H组）47例;化疗方案：治疗组4VHZM/5VHL3,对照组4HZO/5HZO。观察两组痰菌阴转率、病灶吸收率、空洞闭合率以及免疫功能改善情况。结果：治疗组痰菌阴转率、病灶吸收率、空洞直径缩小率分别为84%、85%、66%,明显高于对照组的42%、35%、26%（P〈0.01）。治疗组CD3、CD4较治疗前明显升高,CD8明显降低,CD4/CD8比值升高,两组不良反应率差异无显著性（P〉0.05）。结论：左氧氟沙星与微卡联用可提高复治老年肺结核的疗效,使用安全。     

Esat6-卡介苗重组疫苗的构建免疫原性及抗结核作用的初步研究

目的构建结核分枝杆菌esat6-卡介苗重组疫苗,研究其免疫原性及抗结核作用,以期获得结核病预防性或治疗性疫苗。方法通过基因工程重组技术将结核分枝杆菌保护性抗原esat6的编码基因与穿梭质粒载体pYUB295重组,采用电穿孔技术导入卡介苗中,应用聚合酶链反应(PCR)扩增、聚丙烯酰胺凝胺电泳(PAGE)鉴定重组卡介苗。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其血清中特异性抗体,用MTS法分析其脾淋巴细胞增殖指数。通过观察esat6-卡介苗重组疫苗对结核分枝杆菌感染的预防试验中实验动物半数死亡时间、一定时间内的死亡率、大体病变、T细胞及B细胞免疫功能等指标评价esat6-卡介苗重组疫苗对结核分枝杆菌感染的预防效果。结果PCR扩增、限制性内切酶酶切、DNA测序鉴定、PAGE电泳表明成功地构建了esat6基因pYUB295重组质粒,ESAT6蛋白在卡介苗中分泌表达。重组卡介苗免疫原性试验表明:esat6-卡介苗重组疫苗组有ESAT6特异性抗体产生,45d时达到最高水平。脾淋巴细胞增殖试验表明各组刺激指数均达2.0以上,esat6重组卡介苗免疫组小鼠脾淋巴细胞的刺激指数稍高于对照组。预防试验表明:esat6-卡介苗重组疫苗组、卡介苗组与生理盐水对照组比都能延长结核分枝杆菌感染小鼠的半数死亡时间,降低2个月内的死亡率。其中esat6-卡介苗重组疫苗组效果显著,与卡介苗组比有显著差异。结核分支杆菌攻击后2个月,处死小鼠时,小鼠脏器大体病变及脏器培养结果表明:esat6-卡介苗重组疫苗免疫组小鼠比其他各组小鼠结核菌的负荷轻。抗体检测结果及淋巴细胞增殖实验各组结果差异无统计学意义。结论正确构建了esat6-卡介苗重组疫苗,esat6-卡介苗重组疫苗能提高卡介苗对结核分枝杆菌感染的预防作用。     

经支气管镜微波治疗联合瘤体注射治疗中央型肺癌疗效探讨

目的：探讨支气管内微波治疗联合局部瘤体注射治疗中央型肺癌的疗效。方法：将2006-02/2009-05齐齐哈尔医学院附属第三医院呼吸内科收治的38例晚期中央型肺癌患者随机分为治疗组和对照组。治疗组20例采用支气管内微波治疗并局部瘤体注药,对照组18例仅进行局部瘤体注药。结果：20例治疗组平均微波治疗联合药物注射3.5次,症状改善率90%,KPS评分提高率95%,支气管镜下病灶好转率80%,胸部CT肺不张或阻塞性肺炎好转率75%,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：晚期中央型肺癌患者采用支气管内微波治疗联合局部瘤体注射疗法,能有效的缓解呼吸困难,解除阻塞,提高生活质量,且优于单纯局部药物注射疗法。     

中西医结合治疗慢性阻塞性肺疾病的临床疗效分析

目的探索盐酸氨溴索与黄芪注射液治疗慢性阻塞性肺疾病的临床疗效。方法将120例慢性阻塞性肺气肿患者随机分为两组,对照组给予常规治疗,实验组在常规治疗基础上加用盐酸氨溴索与黄芪注射液,检测并比较两组患者的动脉血气分析指标[动脉血氧饱和度（SaO2）、动脉血氧分压（PaO2）、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）、血红蛋白（Hbg）、用力肺活量（FVC）以及第1秒用力呼气容积百分比（FEV1%）]和临床疗效。结果实验组SaO2（t=4.839,P=0.000）、PaO2（t=3.521,P=0.001）、FVC（t=2.717,P=0.008）、FEV1%（t=4.555,P=0.000）高于对照组,而PaCO2（t=3.452,P=0.001）、Hbg（t=4.783,P=0.000）低于对照组。实验组临床疗效也优于对照组（Z=2.550,P=0.011）,实验组有效率为95%,对照组有效率为85%。结论盐酸氨溴索和黄芪注射液治疗方案临床疗效好,在慢性阻塞性肺气肿患者的临床治疗中有较高的应用价值。     

疫苗临床试验现场选择及评估的探讨

疫苗临床试验通常由省级疾病预防控制中心作为负责机构,在市、县级疾病预防控制中心开展实施,为保证疫苗临床试验的质量,省级疾病预防控制中心需建立完善的疫苗临床试验现场选择及评估标准,对现场的硬件设施、软件条件等进行评估。结合湖北省疾病预防控制中心近几年在疫苗临床试验现场选择及评估方面积累的经验,从疫苗临床试验现场选择基本原则及考虑要点、现场评估要点、现场选择及评估中存在的问题几个方面入手,探讨疫苗临床试验研究现场选择及评估要点,以期为国内同行提供借鉴与参考。     

氟西汀联合性感集中训练法治疗早泄疗效观察

目的观察氟西汀联合性感集中训练法治疗早泄（PE）的临床疗效,为治疗该病提供更多参考。方法将2013年8月至2014年2月该院收治的69例PE患者随机分为治疗组（35例）和对照组（34例）。对照组采用性感集中训练法,治疗组在对照组基础上服用氟西汀20 mg/d,疗程4周。比较两组患者治疗后性生活满意度。结果治疗组患者治疗后性生活满意度好转率和显效率[65.71%（23/35）、22.86%（8/35）]优于对照组[52.94%（18/34）、2.94%（1/34）],差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论氟西汀联合性感集中训练法治疗PE临床有效率较高,不良反应较少。