七叶皂甙钠抗大鼠视网膜缺血-再灌注后视网膜细胞凋亡的保护作用

目的 在大鼠视网膜缺血-再灌注损伤模型上,研究七叶皂甙钠对视网膜缺血-再灌注损伤后视网膜内细胞凋亡的影响.方法 60只大鼠随机分为对照组及七叶皂甙钠组,每组30只.通过结扎大鼠左颈总动脉1 h,然后再灌注.七叶皂甙钠组腹腔注射七叶皂甙钠1.5 mg/kg,对照组腹腔注射生理盐水1 mL/kg,分别检测1、6、12、24、48、72 h各时段大鼠视网膜内的细胞凋亡,每时段大鼠各5只.结果 再灌注后,细胞凋亡主要出现于视网膜的神经节细胞层和内核层,偶尔在外核层可见凋亡细胞.再灌注后1、6、12、24、48、72 h对照组细胞凋亡平均发生率分别为1.8±0.1,7.1±0.2,18.2±1.4,34.7±2.1,22.6±0.9,16.3±0.4,而在七叶皂甙钠组分别为1.7±0.2,4.2±0.6,11.9±1.1,17.8±0.9,13.5±0.7,6.8±0.4,七叶皂甙钠对细胞凋亡的平均保护效应为38.1%.结论 七叶皂甙钠可以抑制再灌注后细胞凋亡的发生,对大鼠视网膜具有保护作用.     

局灶性脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡及七叶皂甙钠干预的研究

目的:观察七叶皂甙钠在大鼠脑缺血再灌注后神经元细胞凋亡过程中的作用。方法:运用大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,比较正常对照组、假手术组、缺血3h组、缺血3h再灌注3h/6h/12h/24h/48h/72h组、缺血3h再灌注β-七叶皂甙钠药物干预后3h/6h/12h/24h/48h/72h组等大鼠脑组织中的神经元凋亡情况。结果:七叶皂甙钠干预治疗后,缺血组缺血侧凋亡阳性细胞减少。结论:七叶皂甙钠有明显抑制大鼠脑缺血再灌注后神经元细胞凋亡的作用。     

七叶皂甙钠对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠 Bcl-2 和Caspase-3表达及细胞凋亡的影响

目的:探讨七叶皂甙钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后Bcl-2和Caspase-3蛋白表达及神经细胞凋亡的影响。方法：采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血再灌注模型大鼠随机分为模型组、生理盐水组、七叶皂甙钠组。假手术组手术过程同缺血再灌注模型组,但不闭塞大脑中动脉。采用免疫组织化学染色结合显微图像分析检测再灌后不同时相脑组织缺血半暗带区Bcl-2和 Caspase-3蛋白的动态表达。应用原位末端转移酶标记（TUNEL）染色观察脑组织缺血半暗带区内细胞凋亡的情况。结果:七叶皂甙钠组脑缺血半暗带区Bcl-2蛋白表达上调,与模型组及生理盐水组相比差异有统计学意义(P<0.05);七叶皂甙钠组脑缺血半暗带区Caspase-3蛋白的表达则明显受到抑制,与模型组及生理盐水组相比差异有统计学意义(P<0.05);同时可见七叶皂甙钠组各时相大鼠脑缺血半暗带区神经细胞凋亡数明显低于模型组及生理盐水组（P<0.01）,且凋亡高峰时下降明显。结论:七叶皂甙钠可能通过上调Bcl-2表达,下调Caspase-3的表达,发挥对脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

β-七叶皂甙钠对大鼠视网膜缺血再灌注损伤中单核细胞趋化因子-1表达的影响

目的 了解β-七叶皂甙钠对大鼠视网膜缺血再灌注损伤中单核细胞趋化因子-1（MCP-1）表达的影响作用。方法建立大鼠视网膜缺血再灌注模型，分治疗组和缺血再灌注组，每组包括缺血再灌注后1、6、12h，24、48和72h。每组5只。治疗组给予β-七叶皂甙钠腹腔内注射，缺血再灌注组不予处理。以免疫组织化学法检测不同时期视网膜中的MCP-1的表达。在不同时间段擞大鼠视网膜ERG检测。结果 β-七叶皂甙钠治疗组各期MCP-1的表达低于缺血再灌注未治疗组，而EKGb波波幅明显高于未治疗组（P〈0．05）。结论 β-七叶皂甙钠能下调视网膜缺血再灌注损伤中MCP-1的表达而对视网膜具有保护作用。     

白细胞介素-6(IL-6)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达及β-七叶皂甙钠对其的影响作用

目的:研究分析白细胞介素-6(IL-6)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达及β-七叶皂甙钠对其表达的影响作用。方法:建立大鼠视网膜缺血再灌注模型,72只SD大鼠采用随机分组法分为观察组和对照组,对照组进行缺血再灌注,观察组则在此基础上加以β-七叶皂甙钠治疗。每组按再灌注后不同时段又分为1h、6h、12h、24h、48h、72h组,每小组6只大鼠,以原位杂交法检测视网膜中IL-6的表达,每只大鼠处死前行视网膜电图(ERG)检测。结果:观察组在6h开始检测到IL-6的表达,但总体低于对照组(P0.05),差异具有统计学意义;对照组b波波幅明显低于观察组(P0.05),差异具有统计学意义。结论:IL-6在视网膜缺血再灌注损伤中发挥重要作用,β-七叶皂甙钠可以通过抑制IL-6达到减轻视网膜缺血再灌注损伤的目的。     

IL-6在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达及β-七叶皂甙钠对其表达的影响

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达及β-七叶皂甙钠对其表达的影响作用。方法建立大鼠视网膜缺血再灌注模型,60只SD大鼠随机分为缺血再灌注组和缺血再灌注+β-七叶皂甙钠治疗组。每组按再灌注后不同时间段分为1,6,12,24,48和72h组,每组5只,以原位杂交法检测视网膜中IL-6的表达,每只大鼠处死前行视网膜电图(ERG)检测。结果缺血再灌注组在6h开始检测到IL-6的表达,在24h表达最强,以后逐渐减弱。缺血再灌注+β-七叶皂甙钠治疗组在再灌注6h未能检测到IL-6的表达,在第12h有NF-eB和IL-6的表达,24h表达最强,但低于缺血再灌注组(P<0.05)。缺血再灌注组在再灌注6h后各期ERG波幅明显低于缺血再灌注+β-七叶皂甙钠治疗组(P<0.05)。结论IL-6在视网膜缺血再灌注损伤中发挥重要作用,β-七叶皂甙钠可能通过抑制IL-6而减轻视网膜缺血再灌注损伤。     

探究β-七叶皂甙钠对大鼠视网膜缺血再灌注损伤中单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达的影响作用

目的:研究分析β-七叶皂甙钠对大鼠视网膜缺血再灌注损伤中单核细胞趋化因子-1(Mc P-1)表达的影响作用。方法:建立大鼠视网膜缺血再灌注模型,将大鼠分为观察组和对照组,两组包括缺血再灌注后1h,5h,10h,20h,40h,80h组,各6只。观察组使用β-七叶皂甙钠在大鼠腹腔内注射,对照组则不做任何处理。然后用免疫组织化学法检测大鼠在各个时期视网膜中Mc P-1的表达,对大鼠的视网膜的各个阶段做er G检测。结果:观察组各阶段的Mc P-1的表达都比对照组低,并且er Gb波的波幅显著高于对照组(P0.05)。结论:β-七叶皂甙钠调节大鼠视网膜缺血再灌注损伤中单核细胞趋化因子-1(Mc P-1)的表达,对大鼠视网膜起到保护作用。     

大鼠视网膜缺血再灌注损伤过程中细胞凋亡的变化

目的在大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型上,研究视网膜缺血再灌注损伤后视网膜内细胞凋亡的动态变化.方法30只大鼠随机分为6组,每组5只.通过结扎大鼠左颈总动脉1 h,然后再灌注,检测1、6、12、24、48、72 h各组大鼠视网膜内的细胞凋亡.结果再灌注后,细胞凋亡主要出现于视网膜的神经节细胞层和内核层,大鼠视网膜在再灌注6 h逐渐出现细胞凋亡,12 h逐渐增加,24 h细胞凋亡达到高峰,偶尔在外核层可见凋亡细胞.然后细胞凋亡逐渐减少,但是,到了术后72 h,仍然可见视网膜内有细胞凋亡.结论通过结扎颈总动脉,可以见到大鼠视网膜的缺血再灌注损伤,而细胞凋亡在视网膜缺血再灌注损伤中发挥着重要作用.到了手术后72 h,损伤的视网膜尚未完全恢复.     

β-七叶皂甙钠对大鼠短暂性局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的: 探讨β-七叶皂甙钠对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用. 方法: 40只雄性SD大鼠,随机分为4组,即对照组,β-Ae-5, β-Ae-10和β-Ae-20保护组,保护组大鼠脑缺血前30 min腹腔注射β-七叶皂甙钠注射液,剂量分别为5, 10, 20 mg/kg,对照组腹腔注射等量的生理盐水. 动物模型采用右侧颈内动脉线栓法致大脑中动脉阻闭120 min,术后观察24 h神经行为学变化并评分,24 h处死动物,取大脑行TTC染色以测量脑梗死容积. 结果: 术后动物均表现一定神经功能障碍,24 h内对照组神经功能障碍逐渐加重,β-七叶皂甙钠保护则呈减轻趋势. 24 h神经功能评分, β-七叶皂甙钠保护组分别为(1.2±0.9), (1.1±0.7)和(1.2±0.8),明显低于对照组(2.1±0.6)(P<0.05). 脑梗死容积β-七叶皂甙钠组分别为(87.9±21.3) mm3, (68.2±15.2) mm3和(63.8±18.3) mm3,均明显小于对照组(195.8±31.3) mm3(P<0.05). 结论: β-七叶皂甙钠对短暂性局灶性脑缺血损伤呈非剂量依赖性保护作用.     

大鼠视网膜缺血再灌注损伤中生存素和半胱氨酸蛋白酶-3及白细胞介素-1α的动态变化及意义

目的 研究大鼠视网膜缺血再灌注(RIR)损伤过程中生存素(Survivin)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及血清中白细胞介素-1α(IL-1α)的动态表达及意义.方法 建立大鼠视网膜缺血再灌注损伤动物模型:选用SD大鼠42只,随机分为两组:A对照组6只;B实验组36只(每个时间段6只).B组采用结扎单侧颈总动脉的方法诱导大鼠视网膜缺血60 min,恢复视网膜血供,建立1、6、12、24、48、72 h 的RIR模型.A组仅暴露单侧颈总动脉不结扎.结果 ①视网膜缺血再灌注后对视网膜的损伤,在形态学上表现为视网膜内层细胞减少,层次变薄.②缺血再灌注12 h凋亡细胞数开始逐渐增加,24 h细胞凋亡数达到高峰,之后又逐渐减少.③实验组在RIR 1 h后视网膜神经节细胞层(GCL)和内核层(INL) Caspase-3表达开始出现,再灌注6 h明显升高,12 h达高峰,与对照组相比差异有统计学意义(P <0.01).Survivin表达延迟于Caspase-3 的表达,再灌注12 h开始增加,24 h后达到高峰,以后逐渐降低,与对照组相比差异有统计学意义(P <0.01).④IL-1α正常对照组有较低表达,在缺血再灌注后1 h表达升高,6 h达到高峰,并且持续到12 h后开始发生降低,72 h后基本上降为正常.结论 ①视网膜缺血再灌注后对视网膜的损伤,在形态学上表现为视网膜内层细胞减少,层次变薄.②细胞凋亡可能是视网膜缺血再灌注后视网膜损伤的主要方式,其发生与Survivin和Caspase-3的变化存在密切的关系.③ IL-1α在缺血再灌注早期即开始升高,参与了缺血再灌注的损伤过程.     

万寿菊提取物对大鼠视网膜光损伤过程中细胞凋亡因子Caspase-3的影响

目的:探讨万寿菊提取物对大鼠视网膜光损伤过程中细胞凋亡因子半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)的影响.方法:SD大鼠 40只,随机分为正常对照组、模型对照组、万寿菊提取物低剂量 组与高剂量组,各 10只.除正常对照组外,其余 3组大鼠均缝成开睑,采用日光灯照射,照光强度 (3000±100)Lux,持续 12h.光照射完毕后立即拆除缝线送回暗环境饲养笼中饲养 12h,再重复以上 过程,连续 3次,光照射时间总计 36h,建立视网膜光损伤模型.各组在光照前充分暗适应 36h,暗 适应前万寿菊提取物低剂量组、高剂量组大鼠给药,1天 1次,直至光照后 7天.实验结束,处死大 鼠,检测视网膜细胞中 Caspase-3表达情况.结果:光照后模型对照组大鼠视网膜外核层细胞浆中 Caspase-3阳性物质弥漫分布,含量增多.其面积、平均光密度、积分光密度和平均黑度均高于正 常对照组(P<0.05),而万寿菊低剂量治疗组视网膜外核层细胞浆中 Caspase-3阳性物质减少明显,四项指标与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),高剂量治疗组阳性物质减少不明显.结论:万寿菊提取物对大鼠视网膜光损伤有修复作用,其作用机制可能与减少 Caspase-3的表达,从而拮抗细胞凋亡有关.     

黄芪皂甙Ⅳ对大鼠脑缺血/再灌注损伤海马神经元凋亡及Livin、 Caspase-9、 Caspase-3表达的影响

目的:探讨黄芪皂甙Ⅳ对大鼠脑缺血/再灌注损伤后海马区Livin、Caspase-9、Caspase-3及神经元细胞凋亡表达的影响.方法:观察黄芪皂甙Ⅳ对神经功能评分、海马区Lvin、Caspase-9、Caspase-3表达及细胞凋亡指数变化.结果:与模型组比较,黄芪皂甙Ⅳ组海马区Livin表达增高,神经功能损害评分、...     

姜黄素对自发性高血压大鼠缺血再灌注后视网膜细胞凋亡及p53表达的影响

[目的]探讨姜黄素对自发性高血压大鼠缺血再灌注后视网膜细胞凋亡及凋亡相关基因p53表达的影响和意义。[方法]制作大鼠视网膜缺血再灌注(retinal ischemia reperfusion,RIR)模型,将自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)随机分为假手术组(SH)、缺血再灌注组(IR)、姜黄素处理组(CU)和对照组(SC),每组又分为再灌注后2h、6h、24h、72h和7d等5个亚组(n=9)。用TUNFL(terminaldeoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling)法观察大鼠视网膜和视网膜毛细血管细胞凋亡,分光光度法检测视网膜Caspase-3酶表达活性,用免疫组织化学SP法检测再灌注后不同时段视网膜组织中p53蛋白表达变化。[结果]与IR组比较,CU组能显著减少视网膜和视网膜毛细血管的细胞凋亡数量(P<0.01),抑制p53蛋白表达(P<0.01)。[结论]姜黄素对SHR视网膜缺血再灌注损伤有保护作用,调控凋亡相关基因p53蛋白的表达可能是其作用机制之一。     

人参皂甙Re对急性缺血再灌注心肌细胞凋亡及fas基因表达的影响

目的　研究人参皂甙Re对急性缺血再灌注心肌细胞凋亡及fas基因表达的影响 ,探讨人参皂甙Re抑制缺血再灌注心肌细胞凋亡的分子机制。方法　结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支 (LAD) ,建立大鼠急性缺血再灌注动物模型。 30只大鼠分 3组 (每组 10只 ) :人参皂甙Re组 ,缺血再灌注组和假手术组。用透射电镜和TUNEL法检测心肌细胞凋亡 ,并用光学显微镜进行凋亡细胞计数 ,免疫组化法检测Fas蛋白表达 ,利用图像分析系统检测阳性结果的平均吸光度 (A)值进行定量分析。结果　心肌细胞的凋亡数在缺血再灌注组、假手术组和人参皂甙Re治疗组每视野分别为 134 4 5± 4 5 6 1、 0 18± 0 0 9和 90 6 6± 19 2 2 ,各组间的心肌细胞凋亡数有显著差异 (P <0 0 5 )。缺血再灌注组、假手术组和人参皂甙Re治疗组的Fas蛋白的平均A值分别为 :0 13± 0 0 3、 0 0 6± 0 0 1和 0 0 7± 0 0 1,人参皂甙Re治疗组与缺血再灌注组相比差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。结论　人参皂甙Re能显著抗急性缺血再灌注损伤诱导的心肌细胞凋亡 ,抑制急性缺血再灌注诱导心肌细胞内Fas蛋白表达可能是作用机制之一。     

利鲁唑对急性高眼压致大鼠视网膜损伤的保护作用

目的 探讨腹腔内注射利鲁唑对急性高眼压所致的大鼠视网膜损伤的保护作用.方法 将120只大鼠分为正常对照组、高眼压对照组及利鲁唑干预组,每组40只.采用前房灌注的方式建立急性高眼压模型,免疫组化及末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP 缺口末端标记法(TUNEL) 分别测定3组大鼠再灌注后12、24、48、72 h的Caspase-3蛋白表达情况及大鼠视网膜各层细胞的凋亡水平,HE染色观察各组大鼠视网膜结构改变.结果 与高眼压对照组相比,利鲁唑干预组视网膜增厚及结构紊乱情况明显减轻,不同时间点Caspase-3的表达水平及凋亡细胞数明显降低(P< 0.05).结论 利鲁唑可减少大鼠急性高眼压损伤后视网膜神经节细胞凋亡,对视网膜具有一定的保护作用.     

兔视网膜缺血再灌注损伤中Caspase-9的表达和雌激素对其影响

目的:探讨研究兔视网膜缺血再灌注中Caspase-9表达的变化及苯甲酸雌二醇对其的影响。方法:实验动物随机分为假手术组、缺血组、治疗组,缺血组和治疗组分为再灌注后1h、6h、12h、24h、48h和72h6个时间段。制作兔视网膜缺血再灌注损伤动物模型,镜下观察视网膜形态变化,通过免疫组织化学SABC法检测不同时段视网膜组织中的Caspase-9的表达变化。结果:雌激素治疗组各观察指标表达结果与缺血组相比,表达量相对明显减弱,在再灌注6h、12h、24h、48h、72h时段差别P<0.05,具有统计学意义。结论:苯甲酸雌二醇可以抑制视网膜缺血再灌注损伤时凋亡基因Caspase-9在视网膜表达的增高,进而抑制细胞凋亡来实现其对视网膜缺血再灌注损伤的治疗作用。     

丹红注射液对大鼠皮质神经元体外模拟缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨体外模拟缺血再灌注后大鼠皮质神经元内质网应激诱导凋亡的机制及丹红注射液对其的干预作用.方法 体外培养大鼠皮质神经元,神经元特异性烯醇酶(NSE)鉴定神经元纯度.建立体外培养大鼠皮质神经元模拟缺血再灌注模型,随机分为对照组(始终正常培养)、缺血再灌注组(体外模拟缺血再灌注)、治疗组(缺血再灌注加丹红注射液干预),应用免疫组织化学、免疫荧光染色方法鉴定神经元纯度;流式细胞术Annexin V、PI双标检测神经元凋亡率及活性半胱天冬酶(Caspase)-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达;Western-blot免疫印迹分析法检测活性Caspase-12、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、Bcl-2及细胞色素C蛋白表达.结果 大鼠皮质神经元可纯化体外培养.皮质神经元体外模拟缺血6 h再灌注24、 48 h细胞凋亡率分别为(17.95±1.03)%、(22.62±0.98)%,丹红治疗组(8 mL/L)分别为(9.74±0.56)%、 (3.93±0.23)%,两组比较差异有统计学意义(χ2=7.164、10.650,P<0.05).体外模拟缺血再灌注诱导神经元GRP78表达上调,活性Caspase-12表达增加,但与治疗组比较差异无显著性(t=0.591、1.772,P>0.05).神经元缺血再灌注后细胞色素C表达增加,Bcl-2表达减少,活性Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达增加,丹红注射液治疗后细胞Bcl-2表达增加,细胞色素C释放减少,活性Caspase-3、 Caspase-8、Caspase-9含量降低,两组比较差异有显著性(t=8.374～25.235,P<0.05、0.01).结论 内质网应激参与神经元体外模拟缺血再灌注后细胞凋亡,丹红注射液能抑制模拟缺血再灌注后细胞凋亡.     

大鼠视网膜缺血再灌注损伤中细胞凋亡的动态表达

目的研究大鼠视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）后视网膜细胞凋亡的动态变化。方法42只大鼠随机分为两组,对照组6只;实验组按照缺血时间段1h、6h、12h、24h、48h、72h随机分为6组,每组6只,通过结扎大鼠劲总动脉1h后再灌注．检测各组大鼠视网膜内凋亡细胞。结果再灌注后,细胞凋亡主要在内核层和外核层表达。大鼠视网膜缺血再灌注6h逐渐出现细胞凋亡,24h细胞凋亡达到高峰,然后细胞凋亡逐渐减少。结论细胞凋亡在视网膜缺血再灌注损伤中发挥着重要作用。     

七叶皂苷钠对大鼠视网膜缺血再灌注损伤SOD和MDA的影响

目的：探讨七叶皂苷钠对大鼠视网膜缺血再灌注损伤过程中 SOD和MDA表达的影响。方法：采用前房加压法制备大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型,将SD大鼠随机分为正常组、缺血再灌注模型组和七叶皂苷钠治疗组,各组于术后3天检测视网膜组织中SOD活性和MDA含量。结果：大鼠视网膜缺血再灌注损伤后,七叶皂苷钠治疗组与缺血再灌注模型组相比,SOD活性明显升高,MDA含量明显降低,差异有统计学意义。结论：七叶皂苷钠可抵抗视网膜缺血再灌注损伤后的氧化损伤,其作用机制可能与提高SOD活性和降低MDA含量有关。     

缺血再灌注损伤后大鼠视网膜细胞凋亡与低氧诱导因子1α表达的关系

目的研究缺血再灌注损伤后大鼠视网膜细胞凋亡与低氧诱导因子1α（HIF-1α）的表达变化并探讨两者的相关性。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组和缺血再灌注损伤1 d、3 d和5 d组（n=6）。眼前房灌注生理盐水调节大鼠眼压至110 mmHg并持续50 min,制作实验性视网膜缺血再灌注损伤模型。制备视网膜切片,测量内网层（IPL）、内核层（INL）厚度及节细胞层（GCL）细胞数;采用DNA原位末端标记（TUNEL）法检测视网膜凋亡细胞;免疫组织化学染色观察损伤后不同时间HIF-1α在视网膜细胞中的表达;采用RT-PCR检测HIF-1αmRNA的表达。结果缺血再灌注损伤1 d、3 d和5 d组大鼠的IPL和INL厚度显著小于正常对照组（P〈0.01）,GCL细胞少于正常对照组（P〈0.05）。视网膜细胞凋亡位于GCL;缺血再灌注损伤1 d、3 d和5d组的细胞凋亡率均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。缺血再灌注损伤1 d、3 d、5 d组视网膜GCL的HIF-1α蛋白表达阳性细胞比例分别为（47.88±14.71）%、（50.28±13.11）%、（43.09±10.04）%,与视网膜细胞凋亡率呈正相关（r=0.953）。缺血再灌注损伤3 d组视网膜细胞HIF-1αmRNA表达明显高于正常对照组（P〈0.05）。结论缺血再灌注后大鼠视网膜细胞凋亡与HIF-1α的表达均增加,两者呈正相关;HIF-1α的表达可能参与视网膜细胞凋亡。