医院金黄色葡萄球菌耐药性及RAPD研究

目的：研究医院金黄色葡萄球菌耐药性及其与医院环境的相关性，了解医院病原菌的来源。方法：比较金黄色葡萄球菌院感株和环境株的耐药谱和RAPD型别间差异，判断相关性。结果：从耐药谱和RAPD分型综合研究表明，金黄色葡萄球菌院感株和环境株有较大相关性。结论：提示金黄色葡萄球菌的医院感染主要是外源性感染。     

铜绿假单胞菌医院感染与外环境关系的研究

目的 分析比较铜绿假单胞菌(PA)医院感染与外环境中PA的相关性，以了解医院感染病原菌来源。方法 比较PA医院感染株、社区感染株、环境株的耐药谱以及随机引物扩增多态性基因分型(RAPD)型别之间的差异，判断三者之间的相关性。结果 收集PA医院感染株18株，社区感染株17株；1190份环境样中共分离到PA21株，环境分离率为1．76％。耐药谱与RAPD分型表明医院感染株与社区感染株、环境株之间无明显相关性。结论 铜绿假单胞菌医院感染可能以内源性途径为主。     

医院感染金黄色葡萄球菌的流行与耐药机制

目的对医院感染金黄色葡萄球菌进行基因分型,研究流行菌株的传播及其耐药的分子机制,以控制医院感染的发生。方法对分离的21株金黄色葡萄球菌进行RAPD分型,并进行mecA、gyrA、grlA基因分析,研究其耐药机制。结果21株金黄色葡萄球菌根据RAPD带型可分为3型,其中Ⅰ型12株,是医院感染的主要流行株;在临床分离的17株金黄色葡萄球菌中14株对甲氧西林和喹诺酮类均耐药;在耐药株中除1株(13064)外,其余菌株均检测出mecA基因;14株耐药株中均存在gyrA和(或)grlA突变;gyrA突变点为gyrA 84位TCA→TTA,gylA突变点为grlA80位TCC→TTC。结论RAPD基因分型技术简便快捷,可为医院感染金黄色葡萄球菌准确分型,是分子流行病学研究的有效方法;医院医院感染的金黄色葡萄球菌流行株主要为Ⅰ型,有可能经飞沫传播;17株临床分离株中14株存在多重耐药,并有相应的基因变异。     

外环境与医院感染大肠杆菌耐药相关性研究

目的 研究医院感染(NI)大肠杆菌(E．coli)与医院环境E．coli之间的相关性，以了解NI病原菌来源。方法 比较E．coli医院感染株(院感株)、社区感染株、环境株的耐药谱以及随机引物扩增多态性基因分型(RAPD)型别之间的差异，判断三者之间的相关性。结果 收集到E．coli院感株5株，社区感染株17株；1190份环境样中共分离到E．coli 72株，环境分离率为6．05％。耐药率、耐药谱与RAPD分型综合研究表明：在外科院感株和环境株之间有相关性，E．coli NI主要是外源性感染；其它科室，从时间和空间上来看，院感株、社区感染株和环境株之间无相关性，E．coli NI以内源性感染为主。结论 在E．coli NI中外源性和内源性途径均存在。     

47株金黄色葡萄球菌临床血流感染分离株的基因分型研究

目的 研究金黄色葡萄球菌临床血流感染分离株的分子流行病学特征.方法 收集2006年1月至2008年12月解放军总医院分离的临床血流感染金黄色葡萄球菌菌株(共47株),标本来源均为患者静脉血.采用琼脂稀释法检测所有菌株对多种抗生素的耐药性,PCR方法 检测pvl毒素基因,DiversiLab~(TM)Rep-PCR分型系统分析菌株的同源性;对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行葡萄球菌染色体/mec(SCCmec)分型以及ST239型别的快速筛查;综合分型和药敏试验结果,挑选部分代表菌株进行多位点序列分型(MLST).结果 47株血流感染金黄色葡萄球菌中,pvl基因检出率为4.3%.MRSA占51.1%.MRSA均为SCCmec Ⅲ型菌株;Rep-PCR分为A～L共12个型,其中A型为最主要的型,共22株(46.8%),所有的MRSA均属于A、B两型.结论 47株临床血流感染金黄色葡萄球菌中的MRSA绝大部分为多重耐药克隆ST239-MRSA-SCCmecⅢ型.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的流行病学研究

目的了解某院患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的感染和医院环境中MRSA的污染情况,研究临床和相应环境标本中MRSA的同源性,寻找MRSA医院感染的传染源及传播途径。方法采用Vitek-2细菌鉴定系统鉴定金黄色葡萄球菌;以头孢西丁纸片琼脂扩散法和mecA基因聚合酶链反应（PCR）鉴定MRSA随机扩增多态性DNA（RAPD）技术进行同源性分析。结果临床标本分离的金黄色葡萄球菌中,MRSA占58．54％（24／41）;环境标本分离的金黄色葡萄球菌中,MRSA占38．10％（16／42）。MRSA菌株经RAPD扩增后均可见数量不等（4～6条）的条带,分型率达100％。经聚类分析,24株临床MRSA菌株分为4型,其中以RAPDⅠ型为主（14株）;16株环境MRSA菌株分为3型,亦以RAPDⅠ型为主（13株）。烧伤科与神经外科各有4例患者及其周围环境分离出同源菌。结论该院临床标本及医院环境标本中MRSA分离率较高,RAPDⅠ型MRSA为其主要流行株且存在RAPDⅠ型MRSA菌株克隆传播。外源性途径是MRSA医院感染的主要来源。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究

目的 研究湖南省4所综合医院分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分子流行病学特点,为临床预防、临测MRSA的流行,并制定合理的防治方案提供确实可靠的依据.方法 采用质粒图谱分析4所医院MRSA是否存在质粒流行,并分析其型别;采用RAPD分析对住院患者、环境、医务人员分离的MRSA进行同源性分析.结果 对89株MRSA进行质粒图谱分析,有7株未检测到质粒,82株携带有质粒,可分为17型,4所医院MRSA均存在1～2种主要质粒的流行;经RAPD分型89株MRSA可分为A、B、C、D、E 5型,其中A型85株占所有菌株的95.50%,B型1株、C型1株、D型1株、E型1株.结论 质粒图谱分析及RAPD分型方法 可很好用于MRSA分子流行病学分析,医院MRSA临床株与环境株及湖南省4所综合医院之间MRSA 菌株具有同源性,呈暴发流行.     

烧伤患者创面金黄色葡萄球菌感染的耐药性与流行病学分析

目的了解烧伤患者创面感染金黄色葡萄球菌的耐药性及流行状况。方法收集烧伤病房2007年10-12月之间63例患者创面分离的金黄色葡萄球菌63株,纸片扩散法检测其对10种抗生素的耐药率、随机引物扩增PCR(RAPD)检测其流行状况。结果63株金黄色葡萄球菌对氨苄西林的耐药率最高,没有检测到对万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。56株金黄色葡萄球菌为耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA),7株为甲氧西林敏感的葡萄球菌(MSSA),除万古霉素外,MRSA对其他9种抗生素的耐药率比MSSA高16.1%～100%,63株金黄色葡萄球菌经RAPD分型分为7个基因型,其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、ⅤⅥ、Ⅶ型分别占12.7%、17.5%、9.5%、39.7%、9.5%、6.3%、4.8%。结论烧伤患者创面金黄色葡萄球菌分离株对多种抗生素具有高耐药性,以MRSA感染为主,基因型以Ⅳ型为主。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型及同源性研究

目的对下呼吸道标本中分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药机制、同源性及分子生物学分型进行研究,从分子水平了解其耐药特点,为临床用药提供参考依据。方法于2012年7月-2013年4月住院患者送检的下呼吸道标本中分离出金黄色葡萄球菌66株,常规方法进行分离鉴定,根据2013年CLIS规定检测其耐药性;PCR技术检测mecA基因,对其进行SCCmec分子生物学分型及耐消毒剂基因(qacA/B)检测;利用RAPD技术对其进行同源性分析。结果凝胶电泳结果表明,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分子分型全部为ccrAB3型,mecA、qacA/B基因的携带率100.0%,并且同源性分析有5个克隆型。结论临床分离的下呼吸道标本耐甲氧西林金黄色葡萄球菌全部为ccrAB3型,并对普通消毒剂有相当程度的抗性;分离到的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中同源性分型不同菌株耐药率与其基因型之间存在有一定的关系,且这些菌株均为多药耐药株。     

医务人员与住院患者鼻前庭携带金黄色葡萄球菌的研究

目的探讨医务人员和住院患者鼻前庭携带金黄色葡萄球菌(SAU)的相互关系和对发生与控制医院感染的影响。方法对医院发生SAU感染较多科室的医务人员和住院>1周患者的鼻前庭进行采样,常规方法对SAU鉴定和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)确认;K-B纸片扩散法进行药敏试验并分型;对SAU进行随机引物扩增多态DNA检测并做同源性分析;比较SAU的耐药谱分型和随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型之间的差异,判断医务人员和住院患者鼻前庭携带SAU的相关性。结果从290份医务人员和患者鼻前庭标本中分离出45株SAU,根据药敏试验结果,按耐药模式45株细菌分为5型;RAPD聚类分析可以将本组细菌分为8个类型。结论部分医务人员和患者之间以及患者与患者之间鼻前庭携带的SAU有较高的同源性。     

中山地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析及基因分型研究

目的 了解中山地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床分离株耐药性及基因型,为MRSA治疗及感染控制提供数据及分子生物学支持。方法 收集2015年1月至2015年10月中山市7家医院临床分离到的MRSA,采用WOHONET 5.6对耐药数据进行统计分析,PCR检测MRSA耐药基因mecA携带情况,采用多重PCR对分离株进行葡萄球菌染色体mec基因盒(SCCmec)分型。结果 2015年1月至2015年10月7家医院共分离到50株MRSA,所有MRSA分离株均检出mecA基因,检出率为100%。SCCmec各分型数量依次为I型1株(2%),II型2株(4%),III型28株(56%),IV型6株(12%),V型12株(24%),有1株不能分型。中山市古镇人民医院分离MRSA株主要为SCCmecIII型,其他6家医院主要为SCCmecIV型及V型。MRSA对青霉素耐药率为100%,对红霉素(90%)、庆大霉素(86%)、左氧氟沙星(84%)、诺氟沙星(84%)、克林霉素(76%)耐药率较高,对奎奴普丁/达福普丁(4%)耐药率较低,未检出替考拉宁及万古霉素耐药株。SCCmec III型菌株对庆大霉素、利福平、左氧氟沙星、诺氟沙星、复方新诺明、克林霉素、红霉素、奎奴普丁/达福普丁及四环素耐药率高于SCCmec V型菌株。结论 mecA是MRSA携带最常见的耐药基因,中山地区分离MRSA株在规模较大的医院主要以SCCmec III型为主,基层医院以SCCmec IV及V型为主,SCCmec III型对常用抗菌药敏感性较差,耐药机制较为复杂,临床科室及医院感染控制部门应重点监控该型细菌,避免院内感染暴发。     

随机扩增多态DNA指纹技术的研究及在检测医院感染中的应用

目的 探讨医院感染常见病原菌的基因鉴定及分型方法,了解其分子流行病学情况。方法 优化随机扩增多态ＤＮＡ指纹技术（ＲＡＰＤ）的实验条件,利用ＲＡＰＤ技术成功地检测了儿科病房呼吸道合肥病毒（ＲＳＶ）、脑外科病房铜绿单胞菌（ＰＡ）及血液病房白色念珠菌（ＣＡ）的医院感染。同时进行了ＲＳＶ分离、ＰＡ菌和ＣＡ菌培养。结果 构建了金黄色葡萄球菌（ＳＡ）、志贺菌（ＳＢ）、大肠埃希菌（ＥＣ）、肠炎沙门菌（Ｓａｌｍ（     

金黄色葡萄球菌感染的临床特征及毒力基因分布

 目的 研究不同感染类型的金黄色葡萄球菌(SA)临床特征及毒力基因分布情况。方法 收集2018年1月-2020年12月包头市参加全国细菌耐药监测网11所成员医院临床分离的SA。回顾性分析纳入菌株的患者病历资料,分析其感染临床特征及耐药性。将菌株进行分层抽样,从中抽取样本作为试验菌株进行毒力基因检测。采用WHONET 5.6及SPSS 22.0软件进行数据分析。结果 共收集SA 2 452株。其中外科感染932例,呼吸道感染504例,血流感染172例,其他类型感染844例。SA感染患者以男性为主(68.23%)。不同性别、年龄SA感染患者的感染类型分布情况比较,差异均有统计学意义(均P<0.001)。外科感染、呼吸道感染、血流感染主要以<60岁患者为主。外科感染患者住院时间>2周的比率较高,占39.21%。呼吸道感染SA患者的病死率较高,为76.39%。不同感染类型患者的白细胞数、中性粒细胞、中性粒细胞百分比、血小板计数、凝血酶原时间水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。不同感染类型患者的C反应蛋白、降钙素原、白细胞介素-6、D-二聚体、纤维蛋白原降解产物水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。不同感染类型MRSA对环丙沙星、庆大霉素、左氧氟沙星、莫西沙星的耐药率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。clfa、clfb、scn、coa、nuc、hla、hld基因在不同感染类型中均具有较高的携带率(>94%),LukED在外科感染中所占比率高于其他3种感染类型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 临床分离的SA携带较多毒力基因,毒性较强,且不同感染类型SA耐药性存在差异。     

ICU铜绿假单胞菌感染暴发的随机扩增多态性DNA分子分型 FREE

目的对铜绿假单胞菌（PA）进行随机扩增多态性ＤＮＡ(RAPD)分子分型,探讨重症监护室(ICU)中PＡ医院感染的流行规律。方法采用RAPD技术对13株分离自某院ICU临床诊断为医院感染肺炎患者下呼吸道标本的PＡ进行分型，并与抗菌药物耐药谱分型比较。结果13株PＡ产生A型（12株，92.31%）和B型（1株，7.69%）2种耐药表型，优势耐药表型为A型；RAPD分型可分2型，分别为Ⅰ型(6株，46.15%)和Ⅱ型(7株，53.85%)。7株分子Ⅱ型和5株分子Ⅰ型的耐药A型PA是优势菌株，可判断为引起ICU中PA医院感染暴发的病原菌。结论ICU存在PA暴发流行，流行株为耐药A型/分子Ⅱ型、耐药A型/分子Ⅰ型。PA产生多重耐药性，RAPD分型是目前比较理想的分子流行病学溯源手段。     

住院患者与医院环境耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析

[目的]了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）在医院内的流行及耐药特征,为预防和控制MRSA引起的院内感染提供科学依据。[方法]以上海某区一家综合性二级医院临床患者标本中分离的78株金黄色葡萄球菌（SA）和同时期该医院诊疗环境中分离的53株sA共131株sA为研究对象,分别用头孢西丁药敏纸片法和PCR法检测MRSA,K-B法检测该131株sA对15种抗菌药物的敏感性。[结果]131株SA中,MRSA构成比为55．73％（73／131）。其中,临床分离株和环境分离株中的MRSA构成比分别为52．56％（41／78）和60．38％（32／53）,两者相比差异无统计学意义（JP〉0．05）。临床MRSA株主要分布于痰液及伤口分泌物;环境MRSA株主要分布于床头柜、监护仪以及医护人员手。抗菌药物敏感性实验显示,MRSA对β-内酰胺类药物耐药率100％,对糖肽类药物、利奈唑胺、利福平高度敏感,对其他抗菌药物均呈多重耐药。[结论]MRSA在医院内有较高流行度,而且呈多重耐药性。应加强抗生素的合理使用,及时进行MRSA院内感染目标性监测,切实做好MRSA感染患者的消毒隔离工作。     

预防性应用抗菌药物对急性心肌梗死患者医院感染的影响

目的 研究预防性应用抗菌药物对急性心肌梗死患者医院感染的影响.方法 将医院2010年1月-2011年2月收治的180例急性心肌梗死患者随机分组,分别给予不同治疗方案,观察两组患者医院感染率、感染部位、病原菌分布、治愈率及住院时间的差异.结果 两组患者医院感染部位,A组感染部位以呼吸道及消化道多见,B组以呼吸道多见;住院时间及治愈率比较两组差异无统计学意义;两组患者发生医院感染共30例,检出病原菌32株、其中A组真菌8株,肠杆菌科细菌3株、非发酵菌3株、革兰阳性球菌2株;B组真菌1株、肠杆菌科细菌7株、非发酵菌2株、革兰阳性球菌6株;A组真菌占50.0％,B组真菌占6.3％;两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 预防性应用抗菌药物,在减少急性心肌梗死医院感染发生率,提高急性心肌梗死治愈率中无积极意义,相反可增加真菌感染的概率.     

MLST和PFGE在耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌医院感染监测中的应用

 目的 探讨某院重症监护病房(ICU)患者、医院环境中耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)菌株的同源性,为医院感染防控提供理论依据。方法 收集2017年9—12月某三甲医院ICU患者、环境中连续分离的CRKP菌株,进行耐药表型、碳青霉烯酶基因检测,采用多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子同源性分析。结果 共收集10株CRKP菌株,其中9株分离自5例患者的临床感染标本,1株分离自气压治疗仪面板。10株菌均携带产KPC酶基因;MLST分型均为ST11型;共有5种PFGE带型,其中5株带型完全一致,为流行菌株,1株菌株与流行菌株带型仅相差1条条带,其余4株菌带型相近,但与流行株带型差异较大。气压治疗仪面板分离的1株CRKP菌株与患者来源的4株CRKP菌株耐药表型、PFGE型别及ST型别完全一致,考虑为仪器共用造成的医院感染。分离自同一重症胰腺炎患者腹腔引流液、血标本的CRKP菌株PFGE带型完全一致,推测CRKP可能通过腹腔感染入血。结论 PFGE和MLST对明确医院感染细菌传播路径,个体细菌感染路径以及遗传变异有重要意义,有助于从切断感染途径方面入手指导控制多重耐药菌的传播。