不同应激方式与时程对大鼠海马CA3区HSP70表达及血清皮质醇含量的影响

目的：探讨不同应激方式与时程对大鼠海马CA3区热休克蛋白70（HSP70）表达及血清皮质醇含量的影响.方法：采用慢性限制活动应激（CRS）作为可预知性应激动物模型,每天随机给予不同轻度应激刺激建立慢性不可预知性应激（CMS）动物模型,观察两组动物海马CA3区HSP70的表达及血清皮质醇含量.结果：CMS大鼠海马神经细胞开始出现损伤的时间较CRS晚,损伤程度较CRS轻.CRS较CMS大鼠海马CA3区HSP70表达逐渐增强,且与对照组比较有统计学差异（P＜0.01）.应激组大鼠血清皮质醇较对照组高,动态观察显示应激早期达到高峰.结论：CRS大鼠海马的损伤及HSP70的表达均较CMS明显.不同的应激方式下大鼠HSP70细胞保护效应较损伤效应有所延迟,提示应激前诱导HSP70表达可能会起到预防细胞死亡的作用.     

不同应激方法建立焦虑大鼠模型的研究

目的：从不同时间点比较几种不同的应激方法建立焦虑大鼠模型的生物学特点,为寻找最合适的造模方法提供实验依据。方法：70只大鼠随机分为正常组、空瓶应激组、慢性情绪应激（CES）组、束缚应激3 h组、束缚应激6 h组,分别进行造模,于实验第7 d、14 d、21 d分别采用高架十字迷宫和场景恐惧测试测定大鼠的焦虑样行为,旷场测试考察大鼠的焦虑或抑郁样行为,强迫游泳实验测定大鼠的抑郁样行为,采用Elisa试剂盒检测大鼠海马组织中5-HT、DA含量。结果：焦虑样行为学测试结果表明,第14 d起,空瓶应激组、CES组、束缚应激6 h组大鼠开始产生焦虑样行为,此后焦虑样行为愈发明显,强迫游泳实验结果表明,束缚6 h组大鼠的不动时间于第7 d起即显著增加（P＜0.05）。同时,与正常大鼠比较,空瓶应激组和CES组大鼠海马5-HT、DA含量于第14 d开始显著上升（P＜0.05或P＜0.01）。结论：在上述几种焦虑模型中,束缚应激3 h焦虑样行为不明显;束缚应激6 h可能由于应激时间过长,表现出抑郁样行为。空瓶应激和CES能成功建立焦虑大鼠模型,且其焦虑行为表征有一定差异,可根据不同的实验目的选择对应的模型方法。     

长期慢性温和应激对大鼠抑郁样行为及热休克蛋白70的影响

目的 探讨不同时间长度慢性温和应激对大鼠抑郁样行为的影响,及其对热休克蛋白70的影响.方法 将标准鼠龄SD雄性大鼠分为两组,一组接受3周的慢性温和应激,为短期组(n=6).另一组接受6周的慢性温和应激,为长期组(n=5).慢性温和应激前后分别进行糖水偏好实验与敞箱实验,检测大鼠的抑郁样行为.慢性温和应激结束后分别利用Western-Blot、RT-PCR、免疫组化的方法检测大鼠海马与额叶的热休克蛋白70(HSP70)水平.结果 长期组慢性温和应激后糖水偏好程度、水平运动指数、中央格停留时间均高于短期组(P＜ 0.05);Western-Blot检测显示长期组海马与额叶的HSP70(相对光密度值分别为0.81±0.08,0.85 ±0.08)均高于短期组(0.60±0.06,0.85±0.07)(P＜0.05);RT-PCR检测显示长期组海马的HSP70 (0.90±0.05,1.37±0.38)高于短期组(0.78±0.04,1.08±0.14)(P＜0.05);免疫组化显示长期组的HSP70在海马与额叶也高于短期组(P＜0.05).结论 长期慢性温和应激较短期慢性温和应激,大鼠的抑郁症状明显减少,同时伴随的是长期应激大鼠脑的HSP70增加.     

不同强度和时程应激对大鼠海马HSP70mRNA习惯化表达的影响

目的：观察重复低强度强迫游泳应激后大鼠海马HSP70mRNA表达及习惯化表达;应激强度改变对HSP70mRNA表达的影响。方法：采用反转录-聚合酶链反应（RT PCR）方法,观察重复强迫温水游泳应激导致大鼠海马HSP70mRNA表达的变化和不同应激强度对HSP70mRNA表达的影响。结果：重复强迫温水游泳可导致HSP70mRNA表达习惯化,当再给予4?℃冰水游泳应激时,可引起HSP70mRNA表达增加。结论：重复应激可以导致HSP70mRNA表达习惯化,高强度应激可以逆转低强度应激引起的习惯化效应。     

不同时间点不同应激方法致大鼠焦虑样行为的研究

目的从不同时间点比较几种不同的应激方法建立焦虑大鼠模型的生物学特点,为寻找最合适的造模方法提供实验依据。方法 70只大鼠随机分为正常组、空瓶应激组、慢性情绪应激(chronic emotional stress,CES)组、束缚应激3 h组、束缚应激6 h组,分别进行造模,于实验第7 d、14 d、21 d分别采用高架十字迷宫和场景恐惧测试测定大鼠的焦虑样行为,旷场测试考察大鼠的焦虑或抑郁样行为,强迫游泳实验测定大鼠的抑郁样行为,采用Elisa试剂盒检测大鼠海马组织中5-HT、DA含量。结果焦虑样行为学测试结果表明,第14天起,空瓶应激组、CES组、束缚应激6 h组大鼠开始产生焦虑样行为,此后焦虑样行为愈发明显,强迫游泳实验结果表明,束缚6 h组大鼠的不动时间于第7 d起即显著增加(P0.05)。同时,与正常大鼠比较,空瓶应激组和CES组大鼠海马5-HT、DA含量于第14天开始显著上升(P0.05或P0.01)。结论在上述几种焦虑模型中,束缚应激3 h焦虑样行为不明显;束缚应激6 h可能由于应激时间过长,表现出抑郁样行为。空瓶应激和CES能成功建立焦虑大鼠模型,且其焦虑行为表征有一定差异,可根据不同的实验目的选择对应的模型方法。     

慢性应激对大鼠行为及血清IL-2含量的影响

目的 探讨慢性应激对大鼠体质量、行为和血清IL-2含量的影响.方法 取健康雄性SD 大鼠随机分为对照组(n=10)和应激组(n=10).采用束缚、食物剥夺、昼夜颠倒、鼠笼倾斜和变换合笼饲养对象的复合应激方式建立慢性应激模型,通过旷场试验观察大鼠的行为变化,用电子秤监测大鼠的体质量变化;采用ELISA法测定大鼠血清IL-2的含量.结果 第3周应激后应激组大鼠的体质量增长明显低于对照组(P<0.05);应激组大鼠水平运动得分和垂直运动得分均低于对照组(P<0.05);应激组大鼠血清IL-2含量低于对照组(P<0.05).结论 慢性应激可引起大鼠行为异常,抑制大鼠的体质量增长和机体免疫功能.     

慢性束缚应激造模及观测高血糖相关指标的方法探索

目的 从束缚强度、高脂饮食、血糖测定等方面探索慢性束缚应激模型用于观测高血糖相关指标的方法。 方法 实验SD大鼠施加为期4个周期、每周期10 d、每天12 h的慢性束缚应激,喂饲普通或高脂饲料,并设高脂+链脲佐菌素(STZ)组、单纯高脂组和正常大鼠为对照。每个束缚周期结束后第3 d用针刺大鼠尾静脉取血,血糖仪监测各组大鼠血糖;最后一个束缚周期结束后第3 d处死大鼠,ELISA检测血清胰岛素、肾上腺素和皮质酮水平;胰腺行HE染色及胰岛素、胰高血糖素免疫组织化学检测。 结果 采用慢性束缚应激成功制备高血糖动物模型,成模率为32.5%;慢性束缚应激成模大鼠血清胰岛素水平高于3个对照组(P<0.05),而高脂+STZ组及单纯高脂饮食大鼠血清胰岛素水平与正常对照组比较差异无统计学意义;胰腺HE染色及免疫组化显示慢性束缚应激大鼠胰腺体积增大,胰岛素水平下降(P<0.05);高脂因素可引起胰岛素和胰高血糖素水平均下降(P<0.05);高脂+STZ大鼠胰岛严重破坏,未见胰岛素、胰高血糖素表达。各实验组大鼠血清肾上腺素、皮质酮水平与正常对照组比较差异均无统计学意义。 结论 在本实验造模条件下可成功制备慢性束缚应激高血糖大鼠模型,相关指标检测方法具有可靠性。     

处理牙本质浸提液对牙髓细胞分化方面作用的研究

【摘要】目的从束缚强度、高脂饮食、血糖测定等方面探索慢性束缚应激模型用于观测高血糖相关指标的方法。方法实验SD大鼠施加为期4个周期、每周期10d、每天12h的慢性束缚应激,喂饲普通或高脂饲料,并设高脂+链脲佐菌素(STZ)组、单纯高脂组和正常大鼠为对照。每个束缚周期结束后第3d用针刺大鼠尾静脉取血,血糖仪监测各组大鼠血糖;最后一个束缚周期结束后第3d处死大鼠,ELISA检测血清胰岛素、肾上腺素和皮质酮水平;胰腺行HE染色及胰岛素、胰高血糖素免疫组织化学检测。结果采用慢性束缚应激成功制备高血糖动物模型,成模率为32.5%;慢性束缚应激成模大鼠血清胰岛素水平高于3个对照组(P<0.05),而高脂+STZ组及单纯高脂饮食大鼠血清胰岛素水平与正常对照组比较差异无统计学意义;胰腺HE染色及免疫组化显示慢性束缚应激大鼠胰腺体积增大,胰岛素水平下降(P<0.05);高脂因素可引起胰岛素和胰高血糖素水平均下降(P<0.05);高脂+STZ大鼠胰岛严重破坏,未见胰岛素、胰高血糖素表达。各实验组大鼠血清肾上腺素、皮质酮水平与正常对照组比较差异均无统计学意义。结论在本实验造模条件下可成功制备慢性束缚应激高血糖大鼠模型,相关指标检测方法具有可靠性。     

束缚应激模型大鼠体重及生化指标含量变化

目的 研究束缚应激条件下大鼠体重、行为及生化指标变化.方法 选择Wistar大鼠30只随机分为3组:正常对照组,束缚3周组和束缚5周组.监控大鼠体重变化,并采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测束缚应激大鼠血清皮质酮(CORT)、去甲肾上腺素(NE)、热休克蛋白70(HSP70)、IL-2和IL-4的含量变化.结果 束缚应激后,大鼠体重增长缓慢且有明显的行为变化,5种生化因子含量也均有明显的变化.与对照组相比,束缚3周和5周之后,CORT、NE、HSP70、IL-4含量分别升高了11.25％和46.65％、25.16％和39.09％、5.15％和13.49％、9.86％和18.69％(除束缚3周组HSP70外,其余均P＜0.05),且NE、CORT和IL-4含量升高具有时间依赖性;IL-2含量显著降低了15.43％和16.01％ (P ＜0.05),但不具有时间依赖性.结论 束缚应激可改变大鼠免疫功能及调节神经递质作用,CORT、NE、HSP70、IL-2和IL-4可作为重要的分子靶标.     

石斛多糖对慢性疲劳综合征大鼠学习记忆能力及血清细胞因子的影响

目的 观察石斛多糖对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠学习记忆能力及血清细胞因子的影响.方法 实验大鼠随机分为4组,每组10只:正常组,模型组,石斛多糖低、高剂量组.采用束缚+冷水游泳的复合应激法制备CFS大鼠模型,检测各组大鼠空间学习记忆能力及血清TGF-β和IFN-γ水平.结果 石斛多糖可缩短Morris水迷宫测试中大鼠探索路径和搜台潜伏期(P＜0.05或P＜0.01),提高游泳速度(P＜0.05或R0.01);缩短穿梭箱测试中大鼠潜伏期、进入错误区和电击时间(P＜0.05或P＜0.01),减少受到电击的次数(P＜0.05或P＜0.01);并降低大鼠TGF-β水平,升高IFN-γ水平.结论 石斛多糖可改善CFS大鼠的认知功能障碍,增强CFS大鼠细胞免疫功能.     

加味七方胃痛颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠血清胃泌素含量及HSP70表达的影响

目的探讨加味七方胃痛颗粒对慢性萎缩性胃炎（CAG）模型大鼠血清胃泌素含量及胃组织热休克蛋白70（HSP70）表达的影响。方法采用致癌化学物MNNG复制CAG动物模型,给药后对各组大鼠测定胃酸、采用ELISA法检测血清胃泌素含量、S-P法检测HSP70的表达。结果加味七方胃痛颗粒大、中、小剂量组和胃复春组与模型组比较,血清胃泌素含量显著升高（P〈0.01）;加味七方胃痛颗粒大剂量组与胃复春组相比,HSP70蛋白表达增加（P〈0.05）。结论加味七方胃痛颗粒对CAG模型大鼠具有促进胃酸分泌,提高血清胃泌素含量及增强HSP70的表达的作用。     

拘束冷应激对大鼠肾脏热休克蛋白表达和血清皮质醇含量的动态影响

目的：研究拘束冷应激对大鼠肾脏组织热休克蛋白（heat shock protein 70,HSP70）表达和血清中皮质醇（Cortisol,CORT）含量的动态影响及可能的机制。方法：选取50日龄清洁级大鼠77只,随机分为7组,即0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0 h。采用拘束冷应激法,应激相应时间后,用免疫组织化学方法观察大鼠肾脏组织HSP70的表达,并检测血清中CORT含量。结果：血清中的CORT浓度在1.5 h呈现最高值,其余各时点变化不明显。光镜下可见HSP70在肾小球毛细血管内皮细胞的胞核及肾小管上皮细胞的胞核和胞浆中均有表达。肾脏中HSP70的表达首先呈增加的趋势,1.5～2.5 h HSP70持续高表达（P〈0.01）,之后下降（P〈0.05）。结论：适当强度的拘束冷应激能诱导肾脏组织中HSP70的合成,并且随着时间的延长而增加,但过度的拘束冷应激则可能降低或阻断肾脏HSP70的表达。     

慢性应激对大鼠心肌超微结构与热休克蛋白70表达的影响

目的研究慢性应激对大鼠心肌细胞的损害和动员的保护因素。方法将青年雄性Wistar大鼠随机分为对照组11只和实验组12只。实验组大鼠每笼1只喂养。实验第1～21天,接受各种不同的应激。对照组大鼠群养不给任何刺激。实验第22天杀死所有大鼠,速取心左室心尖部心肌各4块,制成电镜切片用透射电镜观察,制成免疫组化切片免疫组化法检测蛋白HSP70表达,进行图像分析。结果与对照组相比,实验组体质量明显下降[(239.17±32.18)粒,P<0.01],水平穿越格数减少[(19.12±9.76)次,P<0.01]、直立次数减少[(9.47±3.93)次,P<0.05]、修饰次数减少[(3.98±2.19)次,P<0.05],粪便粒数增多[(4.83±2.13)粒,P<0.01]、中央格停留时间增加[(5.10±2.11)s,P<0.01]。结论慢性应激可引起大鼠体质量下降及行为学改变。慢性应激可引起心肌细胞超微结构改变,慢性应激可引起心肌HSP70表达增强。     

宁夏枸杞和运动训练对慢性心理应激大鼠的影响

目的:研究枸杞子和运动训练对慢性心理应激的大鼠体重、行为、血清皮质醇的影响,探讨枸杞和运动训练联合作用对慢性心理应激的大鼠的调节作用。方法:在建立慢性心理应激模型基础上,施加枸杞和运动训练进行干预,将大鼠随机分为8组:对照组、应激组、运动训练组、运动训练+应激组、枸杞组、枸杞+应激组、枸杞+运动组、枸杞+运动+应激组。分析宁夏枸杞和运动训练对慢性心理应激大鼠体重、行为、血清皮质醇的影响。结果:应激组大鼠体重增长值与其它各组比较明显降低(P<0.05);枸杞组、枸杞+运动组与对照组相比较,体重增长明显(P<0.05);应激组潜伏期和其它各组比明显延长(P<0.05),运动、枸杞和应激对大鼠潜伏期的影响存在交互作用,使大鼠的潜伏期减少(P<0.05)。应激组穿行格数与对照组、运动组、枸杞组、枸杞+应激组、枸杞+运动+应激组比较明显减少(P<0.05),枸杞和运动对大鼠穿行格数存在显著的交互作用,使大鼠的穿行格数增加(P<0.05)。应激组直立次数和对照组、枸杞组、运动组、枸杞+应激、枸杞+运动+应激组相比明显减少,差异有显著性(P<0.05),枸杞和运动对大鼠的直立次数存在显著的交互作用,使大鼠的直立次数增加(P<0.05)。应激组修饰时间和对照组、运动组、枸杞组、枸杞+运动组、枸杞+运动+应激组比较明显减少(P<0.05)。应激组大鼠皮质醇含量和其它各组比较明显升高(P<0.05),枸杞和应激对大鼠皮质醇含量之间存在显著的交互作用,使大鼠的皮质醇含量增加(P<0.05)。结论:①宁夏枸杞和运动训练能够调节因慢性心理应激引起的体重增长减缓状态,提高体重增长的速度。②宁夏枸杞和运动训练能改善慢性心理应激大鼠抑郁样的表现。③慢性心理应激能使大鼠的皮质醇含量增高,宁夏枸杞和运动训练能够降低由慢性心理应激引起的皮质醇含量的增高。     

高温和香烟对鼠早期胚胎脑HSP70及蛋白质的影响

目的　探讨高温、香烟及其联合对鼠胎脑热休克蛋白 70 (HSP 70 )及蛋白质合成的影响。方法　孕d 10的大鼠给予高温 (4 0～ 42℃ )和香烟烟雾水溶物 (0～ 2支 /只鼠 )处理 ,取胎鼠全脑 ,用Westerndotblot和Lowrey方法测量HSP 70和蛋白质含量。结果　高温 (4 0～ 41℃ )、高浓度的香烟烟雾 (1.5支 /只鼠和 2 .0支 /只鼠 )及其联合与对照组比较胎脑蛋白质明显减少 ,与温度、温度持续时间及香烟浓度明显相关 ,并且高温与香烟具有联合作用 ;结果还显示高温和高浓度香烟均使胎脑HSP 70明显升高 ,高温与香烟联合其胎脑HSP70合成量与单独高温组相比HSP 70变化不明显。结论　高温、香烟烟雾及其联合可引起胎脑蛋白质含量减少 ,并诱导胎脑HSP 70合成 ,但香烟的诱导作用较高温弱 ,与高温联合胎脑HSP70的合成表现出交叉适应性反应。     

慢性应激对不同月龄大鼠行为学及雌激素水平的影响

目的：观察慢性应激对不同月龄大鼠行为学及雌激素水平的影响。方法：青年（2月龄）及老年（15月龄）雌性Wistar大鼠共36只，随机分为对照组（16只）和应激组（20只）。应激组接受慢性不可预见性应激刺激21d，随后正常饲养1周。对照组不进行任何处理。各组均于应激前、应激结束后即刻及应激后1周进行旷场实验，观察动物行为学改变。然后经尾静脉取血2ml，以放射免疫法测定血清雌二醇含量。结果：与对照组相比，应激组大鼠行为学得分和血清雌二醇水平均显著下降（P＜0.05）；老年组大鼠较青年组大鼠变化显著（P＜0.01）。且应激结束后1周差异仍具有统计学意义（P＜0.05）。结论：慢性应激对不同月龄大鼠的应激损伤程度存在差异，应激对老年大鼠的外显行为和生殖内分泌功能的损伤程度均较青年大鼠严重，提示衰老是影响机体应激反应性的重要因素之一。     

热处理在脑缺血再灌注损伤中的作用及其机制

目的：明确热处理对脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法：将实验大鼠随机分为热处理组与对照组,对比观察两组动物脑缺血10 min再灌注后12 h时脑组织内HSP70的表达及超氧化物歧化酶（SOD）与丙二醛（MDA）的活力。结果：热处理组的SOD活性及HSP70蛋白的表达于缺血再灌注后明显高于对照组,而MDA的活性明显低于对照组。结论：热处理诱导产生的HSP70可能对脑缺血再灌注损伤有保护作用。热处理可能是通过HSP70清除脑组织自由基和修复脑组织损伤蛋白质,进而实现对脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

HSP70在严重烧伤大鼠心肌中的表达及其保护作用的研究

目的 研究热休克蛋白70(HSP70)在严重烧伤大鼠心肌中的表达变化规律，并观察诱导热休克反应对烧伤后心肌损害的保护作用。方法 72只Wistar大鼠随机分为单纯烫伤组(B组)、亚砷酸钠预处理组(SA组)，于致伤前及30％TBSAⅢ度烫伤后3、6、12、24、48h检测血清心肌钙蛋白Ⅰ含量变化，Western blot检测心肌组织HSP70蛋白表达情况。结果 大鼠严重烧伤后3h心肌组织HSP70蛋白表达显著升高，伤后48h达高峰。大鼠烫伤后3h血清心肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)含量即开始明显升高，伤后12h达高峰。亚砷酸钠预处理可显著诱导机体的热休克反应，SA组伤后多数时相点血清cTnⅠ含量显著低于B组，且波动幅度较小。结论 严重烧伤早期即可引起心肌组织HSP70蛋白表达显著增强，HSP70蛋白可能在烧伤后早期心肌损害中发挥其内源性抗损伤机制。