硫酸镁对大鼠创伤性脑损伤组织Ca^2＋影响的实验研究

采用Ｆ自由落体撞击法造成伤性脑损伤（ＴＢＩ）ＳＤ大鼠模型,原子吸收分光光度法测伤边缘脑皮质Ｃａ＾２＋含量;结果：ＴＢＩ后脑皮质Ｃａ＾２＋含量明显升高,伤后４小时即达最高峰,３－４天后才逐渐接近伤前水平,经ＭｇＳＯ４６００ｍｇ／ｋｇ皮下注射的治疗组Ｃａ＾２＋一升幅较损伤组明显减少,结论：Ｃａ＾２＋作为内源性损害因子在ＴＢＩ继发性脑损害中起重要作用,ＭｇＳＯ４能显著降低Ｃａ＾２＋含量。     

兔脑局部缺血后脑组织ATP酶活性及SEP,TCD改变

建立兔脑ＭＣＡＯ局部脑缺血实验模型。用生化方法分别测定Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋，Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性，并行体感诱发电位（ＳＥＰ）及经颅多普勒超声检查（ＴＣＤ）。结果发现：脑缺血早期Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性迅速下降，Ｃａ＾２＋，Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶略有下降。ＳＥＰ的Ｎ１波、Ｐ２波的潜伏期明显延长。ＴＣＤ检查中，ＭＣＡＯ侧不能测出波形，而对侧平均流速（Ｖｍ）显著增快，再通后ＭＣ     

胞内Ca^2＋,Na^＋和ATP的稳定性介导NMDA诱导兴奋保护作用

目的;研究Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）诱导大鼠小脑颗凿神经元兴奋毒性保护作用的机制。方法：分别用Ｃａ＾２＋和Ｎａ＾＋敏感的染料Ｆｕｒａ－２／ＡＭ和ＳＢＦＩ／ＡＭ测定胞内Ｃａ＾２＋和Ｂａ＾＋浓度「（Ｃａ＾２＋）ｉ,（Ｎａ＾＋）ｉ」,并用反向高效液相法测定胞内三磷酸腺苷（ＡＴＰ）的含量。结果：（１）在ＮＭＤＡ预处理组与非处理组,谷氨酸均迅速触发胞内Ｃａ＾２＋反应高峰,两者无显著性差异。而后在ＮＭ     

酚妥拉明对兔去甲肾上腺素性心肌损伤的保护作用

目的：探讨酚妥拉明对去甲肾上腺毒（ＮＥ）性心肌损伤时保护作用的机理。方法：采用静滴超生理量去甲肾上腺素致心肌损伤,观察兔外周血红细胞内ａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋、心肌细胞膜Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋ＡＴＰａｓｅ,Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰａｓｅ的变化及酚妥拉明的保护作用。结果：酚妥拉明组各次指标均与ＮＥ组有显著性差异。结论：Ｓ寻拉明可防止或减轻ＮＥ心肌损伤时Ｃａ＾２＋超载、Ｍｇ＾２＋丢失及能量耗竭。     

Hg^2＋与Co^2＋,Cu^2＋,Mn^2＋,Pb^2＋,Zn^2＋的非有机溶剂萃取 …

目的：实现部分金属离子混合样品中Ｈｇ＾２＋的定量分离。方法：利用ＰＥＧ－ＥＢＴ－（ＮＨ４）２ＳＯ４体系对Ｃｏ＾２＋、Ｃｕ＾２＋、Ｍｎ＾２＋、Ｐｂ＾２＋、Ｚｎ＾２＋、Ｈｇ＾２＋混合溶液进行萃取分离。结果：在ＰＨ８－１０的ＮＨ４ＮＨ４ＣＩ水溶液中Ｃｏ＾２＋、Ｃｕ＾２＋、Ｍｎ＾２＋、Ｐｂ＾２＋、Ｚｎ＾２＋几乎被ＰＥＧ相完全萃取,而Ｈｇ＾２＋几乎不被萃取,从而获得Ｈｇ＾２＋与Ｃｏ＾２＋、Ｃｕ＾２＋、Ｍｎ＾     

谷氨酸介导皮质神经元Ca^2＋／CaM PKⅡ活性下降的机理研究

目的 研究谷氨酸对Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性的影响及其原因。方法 以培养的胎鼠皮质神经元为材料，采用＾３２Ｐ掺入滤纸片法测Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳及放射为影研究Ｃａ＾２＋／ＣａＭ依赖怀内源蛋白后磷酸化水平变化。     

DDPH抑制HECCM促PASMC增殖时第二信使变化的研究

采用ＭＴＴ比色、荧光技术和放免技术观察了猪肺动脉低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）和１－（２,６－二甲基苯氧基）－２－（３,４－二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对猪肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣｓ）增殖、第二信使（〔Ｃａ＾２＋〕和ｃＡＭＰ）的影响。结果显示：①ＨＥＣＣＭ促进ＰＡＳＭＣ增殖,而ＤＤＰＨ可抑制之,抑制率为７７．４６％。②ＨＥＣＣＭ升高ＰＡＳＭＣｓ内〔Ｃａ＾２＋〕,而ＤＤＰＨ可对     

酮替芬对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨酮替芬对大鼠急性前脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 采用Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ四动脉结扎法略加改良制作动物模型。记录ＥＥＧ,检测脑水分、脑组织内ＣＫ、ＭＤＡ、ＳＯＤ、Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶。结果酮替芬可以促进模型鼠ＥＥＧ的恢复,减轻脑水肿,使脑组织ＣＫ释放和ＭＤＡ含量减少,提高 ＳＯＤ、Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶的活性。结论 酮替     

败血症大鼠肝细胞核Ca^2＋摄取释放功能的改变

观察败血症时肝细胞核Ｃａ＾２＋摄取及释放功能的改变。方法：通过结扎并穿刺盲肠制作大鼠败症模型,差速离心制备细胞核,进行＾４５ＲＢＣＣＢＣ Ｔ ＴＯＣＨＹＴ ＩＭＪ ＰＧ ,ＸＦＪＳ：ＭＴＹ ＴＬＤ ＵＧＨ ＪＨ ＡＤＷＥＸＥＧ ＩＶ ＷＪＲＦＭ Ｋ ＩＹＴＢＹ     

高钾离子引起PC12细胞内游离Ca2+浓度升高的机制

目的：分析高钾离子（Ｋ＾＋）引起ＰＣ１２细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）升高的可能机制。方法：利用ＭｉｒａＣａｌ Ｉｍｉａｇｅ Ｓｙｓｔｅｍ检测［Ｃａ＾２＋］ｉ，Ｃａ＾２＋荧光探针为Ｆｕｒａ－２／ＡＭ。结果：（１）ＫＣ１浓度为３０￣１００ｍｍｏｌ／Ｌ时，可剂量依赖性地诱导ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ升高；（２）在细胞外无Ｃａ＾２＋时，高Ｋ＾＋对ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ无影响；（３）Ｌ－     

钙离子选择性微电极在钙制剂药代动力学研究中的应用

目的　用自制的钙离子选择性微电极 (Ca2 +- ISME)测定游离钙 ,拟反映体内钙被吸收的真实水平。方法　建立了血清样品中钙离子测定方法 ,并进行三种具有代表意义的补钙剂的大鼠药代动力学对比研究。经灌胃给药 ,定时取血 ,制备血清并测定其钙离子浓度。结果　三种制剂在血中的达峰时间不完全一致 ,但其 AU C间经 t检验无显著性差异。结论　 Ca2 +- ISME可用于钙制剂的药物代谢动力学研究     

酸对人和牛牙齿组织脱矿力的对比研究

目的 检测酸对人牙釉质、牛牙釉质与牛牙本质的脱矿力，评价其脱矿机制。方法 实验分为人牙釉质与牛牙釉质对比组（每组１０粒牙齿），牛牙釉质与牛牙本质对比组（每组１０颗牙齿），分别进行酸蚀处理，采用自制的中性载体钙离子选择性微电极（Ｃａ＾２＋ＩＳＭＥ）测试酸蚀模型中的Ｃａ＾２＋浓度，进行对比分析。结果 酸对牛牙釉质的脱矿力显著大于对人牙釉质的脱矿力（Ｐ〈０．０５）；酸对牛牙本质的脱矿力显著大于对牛牙釉质的脱矿力（Ｐ〈０．０５）。结论 酸对不同种类的牙齿硬组织的脱矿力具有明显差异，故在不同实验对象和样本的选择上应予考虑和重视。     

三磷酸肌醇、钙离子在胃泌素促人结肠癌SW480细胞株增殖中的作用

目的：探讨胃泌素对人结肠癌细胞株ＳＷ４８０内三磷酸肌醇（ＩＰ３）、钙离子（Ｃａ２＋）的影响及其在细胞增殖中的作用,为结肠癌抗信息传导治疗提供实验依据。方法：①３Ｈ－肌醇标记细胞进行ＩＰ３分析。②应用Ｃａ２＋荧光指示剂Ｆｕｒａ－２检测细胞内Ｃａ２＋的浓度。③ＭＴＴ比色分析法检测活细胞数（吸光度Ａ值）。结果：５肽胃泌素（Ｐｅｎｔａｇａｓｔｒｉｎ,ＰＧ）可使ＳＷ４８０细胞内ＩＰ３、Ｃａ２＋水平升高,同时活细胞数Ａ值增加;５肽胃泌素与其受体拮抗剂丙谷胺（Ｐｒｏｇｌｕｍｉｄｅ,ＰＧＬ）合用时,癌细胞内ＩＰ３、Ｃａ２＋水平和活细胞数Ａ值均无明显变化。结论：提示胃泌素可能通过肌醇脂质信号传导途径促进人结肠癌细胞株ＳＷ４８０的增殖     

胞内游离钙浓度测定平台的建立

目的：建立一种简单有效的细胞内游离钙浓度测定平台。方法：用Fura-2作为荧光指示剂标记细胞内Ca2＋,在倒置荧光显微镜下交替检测340nm和380nm激发的荧光强度,计算F340/F380代表的Ca2＋相对浓度,再校正为标准浓度。结果：给予细胞刺激（如10mM咖啡因）,F340/F380迅速增高,表明细胞内游离钙浓度迅速升高。对于快速变化的胞内Ca2＋信号,系统反应灵敏、迅速,能很好地捕捉相关钙浓度变化。结论：由此建立起了一种简单有效的细胞内游离钙浓度测定平台,并应用于实际工作。这一平台在平滑肌细胞及心肌细胞游离钙浓度测定中都得到了充分的应用,平台建设中的第一手资料具有重要参考价值。     

丙咪嗪对人血小板胞浆游离钙的影响

目的：观察丙咪嗪体外对人血小板胞浆游离钙的影响。方法：用Ｆｕｒａ２－ＡＭ荧光钙离子指示剂在体外测定人血小板胞浆游离钙离子浓度。结果：丙咪嗪明显抑制凝血酶诱导的血小板胞浆游离钙的升高，ＩＣ５０（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ５０％）为２０．０μｍｏｌ／Ｌ。丙咪嗪对凝血酶诱导的内钙释放亦有明显抑制作用（Ｐ＜０．０１）。结论：丙咪嗪不仅明显抑制人血小板胞外Ｃａ２＋跨膜内流而且抑制胞内储存Ｃａ２＋释放     

Sarcoplasmic reticulum Ca2+ depletion by caffeine and changes of [Ca2+](i) during refilling in bovine airway smooth muscle cells

BACKGROUND: In airway smooth muscle (ASM), Ca2+ influx in response to the Ca2+ depletion of the sarcoplasmic reticulum (SR) seems to play a role in the regulation of intracellular free Ca2+ concentrations ([Ca2+](i)). This study evaluates some possible Ca2+ entry pathways activated during SR-Ca2+ depletion induced by 10 mM caffeine. METHODS: Enzymatically dispersed bovine ASM cells were loaded with Fura-2/AM to permit measurement of [Ca2+](i) changes in single cells. RESULTS: Caffeine (10 mM) induced a transient increase in [[Ca2+](i) that depleted SR-Ca(2)+ content. After caffeine washout, a decrease in basal [Ca2+](i) (undershoot) was invariably observed, followed by a slow recovery. This phenomenon was inhibited by cyclopiazonic acid (5 microM). External Ca(2)+ removal in depolarized and nondepolarized cells induced a decrease in basal [Ca2+](i) that continued until depletion of the SR-Ca2+ content. The decrease in [Ca2+](i) induced by Ca2+-free physiological saline solution (PSS) was accelerated in caffeine-stimulated cells. Recovery from undershoot was not observed in Ca2+-free PSS. Depolarization with KCl and addition of D600 (30 microM) did not modify recovery. Similar results were obtained when the Na(+)/Ca2+ exchanger was blocked by substituting NaCl with KCl in normal PSS (Na(+)-free PSS) or by adding benzamil amiloride (25 microM). CONCLUSIONS: SR-Ca2+ content plays an important role in the Ca2+ leak induced by Ca2+-free medium, and does not depend on membrane potential. Additionally, recovery from undershoot after caffeine depends on extracellular Ca2+, and neither voltage-dependent Ca2+ channels nor the Na(+)/Ca2+ exchanger are involved.     

容积性钙内流与花生四烯酸介导性钙内流之间的相互作用

目的：在人胚肾细胞（HEK293 cells）研究容积性钙内流和花生四烯酸激活性钙内流的相互作用。方法：采用荧光探针Fura2/AM技术测定HEK293细胞内钙对花生四烯酸、Thapsigargin反应变化。结果：容积性钙内流可被花生四烯酸明显抑制,花生四烯酸所致钙内流亦可被容积性钙内流激动剂所抑制,这种交互抑制并非由药物化学性互相影响,肌浆网钙泵的抑制,钙池耗竭,或来自于容积性钙内流本身。相反,这种抑制可能与容积性钙内流激活过程和花生四烯酸激活过程相互作用在关。结论：容积性钙内流与花生四烯酸所致的钙内流呈现相互抑制作用,这种抑制可防止细胞出现中毒性钙超载。     

甲胎蛋白对人肝癌Bel7402 细胞 Ca2+浓度的影响

目的研究甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)对人肝癌细胞信息传递物质Ca2+浓度的影响.方法采用由脐带血血清中提纯的AFP作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,通过共聚焦显微镜扫描,观察不同时间细胞内Ca2+浓度的变化.结果在AFP作用4 min时能显著提高Bel7402细胞内Ca2+浓度,与对照组比较升高204.1%,随后缓慢下降,到作用10 min时降到正常水平.结论AFP能通过改变细胞Ca2+浓度从而调节人肝癌Be17402细胞内信息传递.     

甲胎蛋白对人肝癌Bel7402细胞Ca~(2+)浓度的影响

目的:研究甲胎蛋白(alpha-fetoproteinAFP)对人肝癌细胞信息传递物质Ca2+浓度的影响。方法:采用由脐带血血清中提纯的AFP作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,通过共聚焦显微镜扫描,观察不同时间细胞内Ca2+浓度的变化。结果:在AFP作用4min时能显著提高Bel7402细胞内Ca2+浓度,与对照组比较升高204.1%,随后缓慢下降,到作用10min时降到正常水平。结论:AFP能通过改变细胞Ca2+浓度从而调节人肝癌Bel7402细胞内信息传递。     

Ca^2＋对人精子穿透无透明带金黄地鼠卵的影响

应用人精子穿透无透明带金黄地鼠卵（SPA）技术，在BWW培养液中分别以不同浓度的Ca^ （1．71mmol,3.42mmol,5.13mmol,1.71mmol和ETA0．50mmol,1.71mmol和EGTA1．71mmol),对10例人精液标本进行分析，研究Ca^ 对人精子体外获能和穿透无透明带金黄地鼠卵的生物学效应，同时用透射电镜观察精子的亚细胞结构变化。结果表明：对照组（Ca^ 1．71mmol)穿透率为82．2％，而试验组的穿透率显著降低（P＜0．01），分别为9．5％，0，17．2％，0。Ca^ 对人精子亚微结构的影响主要发生在精子的顶体和颈部。本试验初步表明Ca^ 与人精子获能和顶体反应存在着一定的依存关系，Ca^ 浓度过高（＞1．71mmol）或过低（＜1．71mmol)，对精子获和穿透能力都有明显的抑制作用。