皮肤致敏性检测中替代方法的研究进展

鉴于动物保护,3R原则的日益提倡,目前发展了很多传统化学物致敏性检测方法的替代方法,本文将这些替代方法分为体内替代方法(如局部淋巴结法等),体外替代方法(如基因标志物,肽反应试验,细胞模型,人工皮肤/重组模型,结构活性关系分析等),并对这些替代方法及其目前的研究进展做一综述。     

皮肤变态反应体外替代方法研究进展

随着动物实验替代方法的兴起及对皮肤变态反应机制的探索不断深入,皮肤变态反应体外替代方法成为研究热点,该文综述了目前建立的皮肤变态反应体外替代方法及其进展,主要包括单细胞体外培养,人造皮肤模型,蛋白(肽)反应和定量构效关系等方法.     

皮肤变态反应试验替代方法研究进展

由于传统的皮肤变态反应试验系统主观性较强和不利于动物福利，各国相继开展了以小鼠实验、体外细胞和器官培养、计算机系统为基础的替代方法的研究，并对这些方法的预测能力进行了评估分析。     

068 皮肤变态反应试验替代方法研究进展

由于传统的皮肤变态反应试验系统主观性较强和不利于动物福利,各国相继开展了以小鼠实验、体外细胞和器官培养、计算机系统为基础的替代方法的研究,并对这些方法的预测能力进行了评估分析.     

皮肤光毒性体外替代试验方法研究进展

皮肤光素性(phototoxicity)是指皮肤首次接触一些化学物质后暴露于光线下产生的毒性反应,或全身接触某种化学物后诱发的类似于皮肤的刺激反应.目前国内外用于化学物皮肤光毒性安全性评价的试验主要有人体斑贴试验、动物皮肤光照实验(豚鼠、兔及大鼠等)和体外试验.     

皮肤刺激性与腐蚀性体外替代模型研究进展

随着人们生活水平的不断提高,市场上的化妆品和日用品等越来越多,接触这些化学品引起的皮肤刺激等不良反应仍然广泛存在。化学品接触引起的皮肤不良反应主要包括皮肤刺激和皮肤腐蚀,皮肤刺激是指皮肤接触化学物超过4h所产生的局部可逆性损害,而皮肤腐蚀是指皮肤接触化学物超过4h所产生的从表皮层到真皮层肉眼可见的局部不可逆性坏死。     

酷暑,别让皮肤受"酷刑"

过敏性皮炎夏天,人们常穿短衫短裤,裸露的肢体容易接触一些刺激物引起过敏反应。接触部位的皮肤轻者出现发红、发痒,重者发生丘疹、水疱,破溃后糜烂、渗出,有疼痛感。     

人细胞系活化试验用于皮肤致敏性测试的实验验证

目的在实验室建立皮肤致敏的体外检测方法人细胞系活化试验(human Cell Line Activation Test,h-CLAT),并对染料前体、染发剂成品的皮肤致敏性进行检测。方法参考OECD 442(E)标准方法,用OECD 442(E)附表2推荐的10种验证物质建立方法,确定实验可靠性,对4种样品进行皮肤致敏性检测。分别使用CCK-8法和流式细胞术检测10种验证物质的细胞毒性并进行比较。结果 10种验证物质检测结果符合OECD 442(E)要求,4种样品的h-CLAT检测结果和LLNA方法结果一致。CCK-8法和流式细胞术检测细胞毒性结果均符合OECD参考范围,两种方法的组内相关系数(Intra-group Correlation Coefficient,ICC)为0. 993。结论在实验室内建立了可靠的h-CLAT检测方法,并且可以应用于部分染发类产品的致敏性检测。     

人细胞系活化试验用于皮肤致敏性测试的实验验证

目的在实验室建立皮肤致敏的体外检测方法人细胞系活化试验(human Cell Line Activation Test,h-CLAT),并对染料前体、染发剂成品的皮肤致敏性进行检测。方法参考OECD 442(E)标准方法,用OECD 442(E)附表2推荐的10种验证物质建立方法,确定实验可靠性,对4种样品进行皮肤致敏性检测。分别使用CCK-8法和流式细胞术检测10种验证物质的细胞毒性并进行比较。结果 10种验证物质检测结果符合OECD 442(E)要求,4种样品的h-CLAT检测结果和LLNA方法结果一致。CCK-8法和流式细胞术检测细胞毒性结果均符合OECD参考范围,两种方法的组内相关系数(Intra-group Correlation Coefficient,ICC)为0. 993。结论在实验室内建立了可靠的h-CLAT检测方法,并且可以应用于部分染发类产品的致敏性检测。     

肝毒性评价体外替代模型研究进展

随着“3R原则”及“21世纪毒理学测试：远景与策略”的提出,毒理学评价的重点从体内测试转向了体外模型的应用,从而推动了体外替代模型的发展,毒性替代模型也受到越来越多学者的关注。肝脏是外源化学物质代谢的重要场所,一些经肝脏代谢的外源化学物会引起以炎症、氧化应激和坏死为特征的肝脏损害,因此,利用肝毒性替代模型来预测外源化学物的肝毒性至关重要。本文重点概述了2D肝细胞、肝脏切片和3D肝脏肝毒性评价体外替代模型的现状和发展,同时对药物性肝损伤（drug-induced liver injury,DILI）生物标志物、DILI诊断方法以及与DILI相关的新兴技术进行了系统的阐述。     

生活日用品引起皮肤不良反应的调查研究

为了解生活日用品对皮肤产品的不良作用，以及为制订生活日用品的卫生标准提供依据，通过个案病历调查对７１例生活日用品引起的皮肤疾患病例分析，其中１例为刺激性接触性皮炎，７０例为变应性接触性皮炎。女性占７８．９％，高于男性，此与妇女从事家务劳动、佩戴首饰较多有关。引起病变的前４位生活日用品为洗涤剂、金属制品、橡胶制品、纺织品。引起病变的原因可能与生活日用品中含有的变应原和刺激物以及皮肤接触程度、部位有关     

人源THP - 1细胞系活化试验在化妆品皮肤致敏性评价中的应用研究

目的 建立基于人源THP - 1细胞系的皮肤致敏性体外替代测试方法（h - CLAT）,探讨其应用于化妆品体外皮肤致敏性评价的可行性。方法 参考OECD 442E测试指南,通过对10种标准化学品的致敏性预测建立h - CLAT试验方法,验证其准确性及灵敏度,再对10种特殊类化妆品产品进行皮肤致敏性评价,并与体内皮肤变态反应判定结果进行比较分析。结果 使用h - CLAT方法准确判定了10种标准化学品的皮肤致敏性,10种化妆品产品中,9种产品的预测结果与体内皮肤变态反应的判定结果具有一致性,均为无致敏性,1种产品被判定为具有潜在致敏性,与动物试验结果不一致。结论 基于有害结局路径（AOP）AOP理论,体外人源细胞系活化试验可作为化妆品皮肤致敏性评价的一种筛查方法,但针对体外替代试验的局限性,仍需整合其他测试方法进行皮肤致敏性预测。     

急性毒性体内及体外替代方法研究进展

急性毒性试验是毒理学安全性评价第一阶段基础性试验,是毒理学安全性评价制订卫生管理标准不可或缺的重要依据[1],其主要目的是求出受试化合物对试验动物的半数致死剂量(LD50).传统急性毒性试验虽然可较精确测量LD50,但以死亡为其观察终点,使用动物较多,工作量较大,耗费较多人力物力.随着近年动物“3R”(减少reduction,优化refinement,替代replacement)原则的提出和人类对动物福利的关注,以动物模式为基础的毒理学研究系统和评价方法逐渐受到挑战,动物替代试验方法备受关注.本研究对近年急性毒性体内和体外替代方法进展综述如下.     

肾毒性评价体外替代模型研究进展

随着《21世纪毒性测试:愿景与策略》的提出,毒性测试的重点开始从整体动物实验转向基于人类细胞或细胞组分等替代方法的测试策略.由于肾毒性物质的靶器官选择性,且药物诱导的肾损伤是新药开发时需解决的重要问题,故需良好的体外替代模型来评价包括药物在内的外源性化合物的肾脏毒性.然而,现有的体外模型由于缺少肾小管上皮细胞在体内的形...     

儿童与青少年牛奶致敏特征分析

目的:调查儿童及青少年人群牛奶过敏原致敏阳性率,探讨牛奶致敏的年龄、疾病分布特征和致敏特点。方法:回顾性研究。本研究共纳入2018年6月至2020年11月就诊于北京世纪坛医院变态反应科门诊的818例疑诊食物过敏的未成年患者。采用ImmunoCAP荧光酶联免疫法对患者血清进行牛奶sIgE检测,定义sIgE 1级为轻度致敏...     

化妆品致敏性的LLNA:BrdU-ELISA和h-CLAT检测法

目的比较小鼠局部淋巴结试验(local lymph node assay:BrdU-ELISA,LLNA:BrdU-ELISA)和人细胞系活化实验(human cell line activation test,h-CLAT)检测化妆品皮肤致敏性的能力。方法购买市售7种防晒类和祛斑类化妆品,分别按照OECD442(B):LLNA:BrdU-ELISA和OECD442(E):h-CLAT标准方法对样品进行致敏性检测。结果 7种受试物中,LLNA:BrdU-ELISA方法判定4种为致敏阳性物,h-CLAT方法判定6种为致敏阳性物。结论在化妆品致敏性检测中,可以使用h-CLAT方法作为初筛手段,替代部分动物实验。     

BrdU掺入法评估化学物皮肤致敏性的实验研究

目的探讨BrdU掺入法在检测和评价化学物对小鼠皮肤接触致敏性的应用。方法选择24只雌性BALB/C小鼠随机分为6组,受试物为2,4-二硝基氯苯(DNCB)和三氯乙烯(TCE),对照组受试物为AOO溶剂。将受试物连续3d涂抹于小鼠双耳背,第4天腹腔注射BrdU标记液,第5天摘取小鼠耳部淋巴结,称重,然后制备淋巴细胞悬液,用ELISA检测技术测定BrdU掺入淋巴细胞的水平,将实验组的小鼠耳部淋巴结重量和BrdU标记指数分别与对照组进行方差分析比较。结果溶剂对照组的小鼠淋巴结重量为(0.0060±0.0015)g,0.10、0.25、0.50、1.00%浓度的DNCB实验组的淋巴结重量为(0.0120±0.0014)、(0.0137±0.0006)、(0.0156±0.0017)、(0.0241±0.0035)g,20%TCE实验组的小鼠淋巴结重量为(0.0155±0.0017)g;溶剂对照组的BrdU标记指数为0.157±0.023;各浓度的DNCB实验组的BrdU标记指数分别为0.349±0.009、0.412±0.013、0.445±0.009、0.536±0.026;20%TCE实验组的BrdU标记指数为0.433±0.025。DNCB各浓度组、TCE组的淋巴结重量和BrdU标记指数与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论BrdU掺入法作为一种改良的局部淋巴结实验方法,它具有评估化学物皮肤接触致敏性的能力。     

介绍一种皮肤刺激体外替代新方法

介绍了被ECVAM验证的皮肤刺激体外替代新方法EpiSkinTM、改良EpiDermTMSIT和SkinEthicTMRHE方法．可以代替家兔来进行皮肤刺激试验．最大程度上保护了动物．为我国医疗器械生物学评价替代方法领域提供了更加广阔的空间。     

春天 让宝宝远离过敏

进入春季，又到了小儿过敏高发的时节．尤其是当宝宝接触到空气中漂浮的花粉和细菌孢子等致敏物质后。皮肤公立马给“颜色”看．出观红肿、发痒等过敏性皮炎等异常现象。     

溴脱氧尿嘧啶核苷掺入法作为皮肤致敏试验替代方法研究

目的 探讨应用溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)示踪和酶联免疫吸附测定(ELISA)的局部淋巴结试验(LLNA:Br-dU-ELISA法)替代LLNA(放射法)作为皮肤变态反应试验替代方法的可行性.方法 雌性BALB/c小鼠随机分组,每组4只.选择27种受试物进行测试,每种受试物视情况设3～4个剂量组和1个溶剂时照组.将受试物连续3d涂抹于小鼠双耳背,第5天腹腔注射BrdU标记液,第6天摘取小鼠耳部淋巴结,制备淋巴细胞悬液,采用ELISA技术测定BrdU掺入细胞的水平.选择3种受试物进行3次重复性试验以了解结果的重现性;将27种受试物的LLNA:BrdU-ELISA法与文献报告的LLNA(放射法)结果比较,分析方法的致敏性判别能力及分级结果的一致性和相关性.结果 LLNA:Br-dU-ELISA法结果重现性较好(F=2.890,P＞0.05);与LLNA(放射法)相比,该方法对27种化学物的致敏性判别能力较好(灵敏度= 95.00%,特异度=85.71%,符合率=92.59%),致敏性分级结果有较好的一致性和相关性(Kappa=0.575,Gamma=0.959).结论 LLNA:BrdU-ELISA法可作为皮肤变态反应试验的替代方法应用于化学物皮肤致敏性评价.