思密达联合乌司他丁对百草枯中毒大鼠肿瘤坏死因子-α、转化生长因子-β1的影响

目的:观察思密达联合乌司他丁(UTI)给药对急性百草枯(PQ)中毒大鼠血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的干预作用,探讨其可能的作用机制。方法:将104只SD大鼠随机分为生理盐水对照组(A组)8只、染毒对照组(B组)32只、UTI对照组(C组)32只、思密达联合UTI干预组(D组)32只。染毒后第1、3、5、7天分批处死各组存活大鼠,测定血浆TNF-α、TGF-β1含量。结果:B、C、D组血浆TNF-α、TGF-β1水平于染毒后第1天开始明显升高,与A组比较差异均有统计学意义(P0.01);染毒后第1、3天,C组TNF-α、TGF-β1水平低于B组,差异有统计学意义(P0.05);染毒后第1、3、5、7天,D组TNF-α、TGF-β1表达明显低于B组,差异均有统计学意义(P0.01),且D组TNF-α、TGF-β1水平也低于C组,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:思密达联合UTI能够有效降低PQ中毒大鼠TNF-α、TGF-β1水平,减轻PQ对大鼠的损伤作用。     

姜黄素与地塞米松对百草枯中毒大鼠肺组织损伤治疗作用的对比研究

目的 观察姜黄素和地塞米松对百草枯致肺纤维化大鼠胶原沉积、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 将80只雄性Wistar大鼠随机分为4组,每组20只.百草枯组用百草枯50 mg/kg一次性灌胃染毒,1 h后腹腔注射生理盐水1 ml;姜黄素组染毒1 h后腹腔注射姜黄素200 mg/kg;地塞米松组染毒1 h后腹腔注射地塞米松3 mg/kg;对照组用1 ml生理盐水灌胃,1 h后再腹腔注射生理盐水1 ml.各组每日用药1次,直至处死动物前1 d为止.各组于1、3、7、14 d随机处死5只动物,取肺组织进行苏木素-伊红(HE)染色、Masson染色,观察病理学改变;采用免疫组化染色,检测肺组织中TGF-β1表达水平.结果 地塞米松组和姜黄素组大鼠肺组织胶原沉积较百草枯组明显减少.百草枯组、地塞米松组和姜黄素组7 d和14 d时TGF-β1表达均显著高于对照组,且地塞米松组和姜黄素组明显低于百草枯组(P＜0.05或P<0.01);而地塞米松组和姜黄素组各时间点TGF-β1表达则无明显差异(P均>0.05).结论 姜黄素和地塞米松均可减轻百草枯所致大鼠肺泡炎和肺纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1有关.姜黄素和地塞米松治疗效果无明显差异,但姜黄素比地塞米松副作用少,更具有临床应用价值.     

骨髓间充质干细胞移植对百草枯中毒导致肺纤维化的影响

目的 观察外源性骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠急性PQ中毒导致的肺纤维化是否产生治疗作用及其可能的机制.方法 取54只SD雄性大鼠,随机(随机数字法)分成3组:A组为空白对照组,B组为PQ+ PBS组,C组为PQ+BMSCs组.其中B组、C组均以120mg/kg的PQ溶液予以一次性灌胃染毒,染毒后6hC组大鼠予以尾静脉注入BMSCs 1×106个/mL,而B组大鼠则予以注入相应剂量的PBS.观察各组大鼠的一般情况,于染毒后7d、14 d、28 d处死未死亡的大鼠,取左下肺组织,行HE和Masson染色观察各组肺组织的病理改变情况,根据Szapiel肺泡炎和肺纤维化的分级法进行肺纤维化评分,并行免疫组织化学检测肺组织中TGF-β1及HGF的表达情况;取右下肺,检测HYP对比各组肺组织中的HYP含量的变化情况.结果 肺组织病理改变:染毒7d后可见B组肺泡炎性改变明显,肺泡腔内可见大量渗出液;C组的肺泡炎性渗出相对B组为轻.14 d可见B组肺泡间质水肿及渗出减轻,但肺间质胶原纤维增多;C组间质纤维化沉积程度相对B组较轻.28 d时B组肺间隔增厚普遍可见胶原纤维沉积,肺泡扩张明显,肺泡间隔断裂,肺泡结构紊乱;C组间隔中的胶原纤维化较B组轻,肺泡基本结构仍可见.HYP含量:B组大鼠肺组织HYP含量随着染毒时间的延长呈进行性增加,28 d时达最高峰,各时间点与A组比较均增高(P＜0.01);C组HYP的含量随时间的延长呈进行性增加,28 d达到最高峰,各时间点均较B组减少(P＜0.01).肺组织TGF-β1及HGF的表达:B组大鼠肺组织TGF-β1表达含量增多且分布范围较A组广,TGF-β1的表达在7d为最高峰,此后逐渐减少,但各时间点均高于A组(P＜0.05);C组大鼠肺组织各时间点TGF-β1表达含量均较B组少(P＜0.05).B组肺组织HGF的表达随着时间点延长逐渐增多,但各时间点比较差异无统计学意义(P＞0.05);B组与A组比较略有增多,但差异无统计学意义(P＞0.05);C组肺组织HGF表达含量随着时间的延长逐渐增多,各时间点比较差异有统计学意义(P＜0.05),各时间点与A组及B组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 外源性BMSCs移植对PQ诱导的肺纤维化程度有一定的抑制作用,可能与其上调HGF表达、下调TGF-β1的表达有关.     

褪黑素对急性百草枯中毒大鼠的治疗效果

目的 观察褪黑素(MT)对急性百草枯(PQ)中毒大鼠的治疗效果.方法 选择成年SD大鼠54只,随机分为正常对照组、染毒组和治疗组(每组18只).正常对照组用生理盐水灌胃,染毒组用PQ一次性灌胃(50 mg/kg)染毒,治疗组在染毒后随即腹腔注入MT 10 mg/kg,1次/d.分别于1d、3 d和7 d测定3组大鼠血清中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,并观察大鼠中毒表现及肺组织病理改变.结果 PQ染毒后大鼠血清中MDA含量显著高于对照组(P＜0.01);而血清SOD及GSH-Px活力明显低于对照组(P＜0.05).与染毒组比较,治疗组大鼠血清MDA含量下降;GSH-Px和SOD活力逐渐升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).其中毒表现及肺组织病理学改变均明显减轻.结论 MT可减轻急性PQ中毒引起的脂质过氧化反应,改善大鼠的中毒症状.     

地塞米松对大鼠光气急性肺损伤血管生成素-1、2的影响

目的 探讨地塞米松对大鼠光气急性肺损伤(ALI)血管生成素-1、2(Ang-1,2)表达的影响.方法 采用大鼠光气吸入性肺损伤动物模型.36只SD大鼠随机(随机数字法)分为3组:正常对照组(吸入与光气染毒组同等流量的空气)、光气染毒组(吸入8.33 mg/L纯度为100％的光气5min)、地塞米松处理组(尾静脉注入2.5 mg/kg地塞米松1h后,吸入同等剂量的光气).染毒2h后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)测定中性粒细胞细胞数、蛋白含量和肺湿/干质量比(W/D).采用双抗体夹心酶标免疫分析法(ELISA法)测定各组血清和BALF中Ang-1,2水平.RT-PCR法对肺脏组织中Ang-1,2和Tie-2mRNA的水平进行半定量研究.Western blot技术检测肺脏组织中Ang-1,2和Tie-2蛋白含量.结果 与正常对照组比较,光气染毒组肺W/D、BALF中中性粒细胞数和蛋白含量明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组的肺W/D、BALF中中性粒细胞数和蛋白含量明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组比较,光气染毒组血清、BALF及肺组织中Ang-1和Tie-2表达明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组Ang-1和Tie-2表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组比较,光气染毒组血清、BALF及肺组织中Ang-2表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组Ang-2表达明显下降,差异具有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).结论 地塞米松可能通过抑制Ang-2表达并促进Ang-1和Tie-2表达来有效地保护大鼠光气吸入性急性肺损伤.     

饱和氢气盐水对大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探讨饱和氢气盐水在油酸导致的大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用及其机制.方法 将健康成年SD大鼠80只随机分为4组:对照(Ⅰ)组、肺损伤(Ⅱ)组、肺损伤静脉H2干预(Ⅲ)组和肺损伤腹腔H2干预(Ⅳ)组,每组20只.检测血气分析;肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和NF-kB p65含量;并观察肺组织病理变化.结果 与注射油酸前比较,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组在注射油酸3h后PaO2显著降低(P＜0.05).同时与Ⅰ组比较也存在PaO2显著降低(P＜0.05).此外,Ⅲ和Ⅳ组PaO2显著高于Ⅱ组(P＜0.05),且Ⅳ组PaO2高于Ⅲ组(P＜0.05).与Ⅰ组比较,Ⅱ组肺组织MPO活性及MDA水平显著增加(P＜0.01),Ⅲ和Ⅳ组肺组织MPO活性及MDA水平明显增加(P＜0.05),Ⅲ和Ⅳ组肺组织MPO活性及MDA水平与Ⅰ组比较显著降低(P＜0.05),且Ⅳ组肺组织MPO活性及MDA水平较Ⅲ组低(P＜0.05).Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组大鼠肺组织TNF-α、IL-1β和NF-κB p65水平明显高于Ⅰ组(P＜0.05).与Ⅱ组比较饱和氢气盐水治疗可降低油酸致肺损伤大鼠肺组织TNF-α、IL-1β和NF-κB p65水平(P＜0.05),且腹腔给药治疗较尾静脉给药治疗可更进一步降低油酸致肺损伤大鼠肺组织TNF-α、IL-1β和NF-κB p65水平(P＜0.05).结论 饱和氢气生理盐水能够降低大鼠油酸肺损伤模型中肺的损伤程度,且经腹腔注射给药效果更好,其机制可能与氢分子在体内的选择性抗氧化作用以及对肺组织内炎细胞浸润和炎症级联反应的抑制有关.     

N-乙酰半胱氨酸对急性肺损伤大鼠肺组织转化生长因子-β1表达影响的研究

目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对急性肺损伤(ALI)肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 将24只SD大鼠随机分为正常对照组、ALI模型组、地塞米松干预组和NAC干预组4组,每组6只.经尾静脉注射内毒素脂多糖(LPS,5 mg/kg)制备大鼠ALI模型,在肺损伤模型成功后24 h处死大鼠,取左叶肺组织,观察各组大鼠肺组织病理和TGF-β1免疫组化染色结果.结果 NAC干预组肺部炎性细胞浸润、渗出、出血较ALI模型组明显减轻;ALI模型组肺组织TGF-β1免疫组化染色灰度值较正常对照组明显减少(155.42±3.58比190.81±6.28,P＜0.01),表示其表达明显增加;NAC干预组及地塞米松干预组肺组织TGF-β1免疫组化染色的灰度值明显高于ALI模型组(187.30±20.92和193.99±17.80比155.42±3.58,P均＜0.01),表示其表达明显降低;且NAC干预组、地塞米松干预组与正常对照组间表达水平比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 NAC在ALI的早期可抑制肺组织TGF-β1的表达,肺组织病理亦显示肺部病变明显改善,从而达到对ALI的保护作用.     

甘草酸二铵对急性肺损伤大鼠肺组织转化生长因子β1及高迁移率族蛋白1表达的影响

目的 观察甘草酸二铵(GL)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达的调控作用及对血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)表达的影响.方法 将24只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为生理盐水组、ALI组和GL干预组,每组8只.ALI组、GL干预组分别给予内毒素(LPS)5 mg/kg尾静脉注射;LPS注射前1 h,GL干预组给予GL 20 mg/kg静脉注射.观察12 h后各组大鼠肺组织病理,测定肺湿干质量比(W/D)、PaO2,并采用逆转录-PCR反应检测肺组织TGF-β1 mRNA、HMGB1 mRNA的表达,ELISA法测定血清TNF-α、IL-10浓度.结果 ①ALI组TNF-α明显高于生理盐水组(P<0.01)和GL干预组(P<0.01).ALI组IL-10明显高于生理盐水组(P<0.01),但低于GL干预组水平(P<0.05).②ALI组TGF-β1 mRNA、HMGB1 mRNA的表达水平明显高于生理盐水组 (P均<0.01)和GL干预组(P<0.05和P<0.01).③ALI组肺组织出现充血、水肿、中性粒细胞浸润,GL干预组肺部炎症较ALI组减轻.结论 甘草酸二铵可能通过抑制TGF-β1 mRNA、HMGB1 mRNA及TNF-α的表达和增强抗炎介质IL-10的表达,从而起到减轻ALI的作用.     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的:观察氯沙坦对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏病变的保护作用及其机制.方法:将链脲佐菌素诱导的DM大鼠分为模型组(DM组)和氯沙坦治疗组(LOS组),另设正常对照组(NC组).氯沙坦治疗组予腹腔注射氯沙坦30 mg/(kg·d),NC组和DM组则予同体积的生理盐水.12周后收集尿样并取血,检测血糖(BG)、血肌酐、尿素氮,尿β2-微球蛋白(β2-MG)和24 h尿白蛋白排泄率(UAER),测尿和血中TNF-o和TGF-β1浓度,计算肾脏肥大指数,观察肾小球病理变化.结果:DM组尿素氮、血肌酐、UAER、血糖、β2-MG、肾重/体重明显增高(P＜0.01或P＜0.05),血、尿中TNF-α和TGF-β1浓度显著增高(P＜0.01或P＜ 0.05).氯沙坦治疗组上述指标显著低于DM模型组(P＜0.01或P＜0.05),肾脏病理明显改善.结论:氯沙坦可降低血和尿中TNF-α、TGF-β1浓度,减少尿蛋白排泄,有助于保护肾功能.     

饱和氢气生理盐水对油酸致急性肺损伤大鼠肺的保护作用

目的 探讨饱和氢气生理盐水是否对油酸所致大鼠急性肺损伤具有保护作用.方法 将健康成年SD大鼠30只,随机分为对照组、油酸+生理盐水组和油酸+饱和氢气生理盐水组,每组10只.对照组(假手术组):予股动脉置管留取血气标本,待血流动力学稳定后经尾静脉注入生理盐水0.1 mL/kg;油酸+生理盐水组:注入高纯度油酸0.1 mL/kg,余同对照组;油酸+饱和氢气生理盐水组:注入高纯度油酸5 min后给予腹腔注射饱和氢气生理盐水5 mL/kg,余同油酸+生理盐水组;同时予前两组腹腔注射等量生理盐水,3 h后再次留取动脉血标本并处死大鼠.检测血气分析,肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和NF-κB p65水平;观察肺组织病理变化.结果 与注射油酸前比较,生理盐水治疗组和饱和氢气生理盐水治疗组在注射油酸3 h后PaO2显著降低(P<0.05),且显著低于对照组(P<0.05).此外,饱和氢气生理盐水治疗组PaO2显著高于生理盐水治疗组(P<0.05).与对照组比较,生理盐水治疗组和饱和生理氢气盐水治疗组肺组织MPO活性及MDA水平显著增加(P<0.01,P<0.05),且饱和氢气生理盐水治疗组显著低于生理盐水治疗组(P<0.05).生理盐水治疗组和饱和氢气生理盐水治疗组肺组织TNF-α、IL-1β和NF-κB p65水平显著高于对照组(P<0.05),且饱和氢气生理盐水治疗组显著低于生理盐水治疗组(P<0.05).结论 饱和氢气生理盐水能够降低大鼠油酸肺损伤模型中肺的损伤程度,其机制可能与氢分子在体内的选择性抗氧化作用有关.     

不规则趋化因子在百草枯致大鼠急性肺损伤过程中的表达

目的 通过观察不规则趋化因子(fractalkine,FKN,又称CX3CL1)在百草枯(paraquat,PQ)中毒早期大鼠血清及肺组织的表达,探讨FKN在PQ致大鼠急性肺损伤的作用.方法 SD大鼠66只,随机(随机数字法)分为染毒组(36只)和对照组(30只).染毒组腹腔注入PQ (22 mg/kg),对照组给等量生理盐水.每组分别在染毒后6、12、24、72及120 h处死大鼠.测定肺脏系数,检测血清及肺组织匀浆FKN含量(ELISA法),观察肺组织病理改变(HE染色)及FKN的表达(免疫组化法).应用SPSS 19.0软件分析数据.结果 在各观察时间点(6、12、24、72及120 h),染毒组肺脏系数分别为(5.03 ±0.07、5.17±0.10、5.46±0.10、5.68±0.15及5.83±0.11),明显高于对照组(4.49 ±0.20、4.28±0.13、4.45±0.17、4.31 ±0.19及4.31±0.16),差异具有统计学意义(P＜0.01);染毒组血清FKN质量浓度(pg/mL)分别为140.9±15.8、157.9±17.6、188.8±24.8、224.4±18.1及229.9±10.0,明显高于对照组(121.7±12.8、121.6±12.1、118.3±14.0、122.8±12.4及120.5±8.8),差异具有统计学意义(6h时P＜0.05,其余P＜0.01);染毒组肺组织匀浆FKN质量浓度(pg/mL)分别为(4 222.0±641.1、5 021.0±514.5、5 911.6±478.1、7 092.2±652.9及7 639.3±666.6),明显高于对照组(2 860.2±477.3、3 068.9±446.0、3 168.7±728.5、3 178.0±488.2及3 147.3±426.6),差异具有统计学意义(P＜0.01).镜下观察,与对照组相比,染毒组大鼠肺组织病理改变为炎性细胞浸润、肺组织充血水肿及结构破坏等急性肺损伤表现,并随时间推移逐渐加重.FKN主要表达于支气管和肺泡上皮细胞、肺小动脉内皮细胞中,FKN表达增多的区域炎性细胞浸润增多.肺组织匀浆FKN含量与肺脏系数呈正相关(r=0.937),血清FKN含量与肺组织匀浆FKN含量呈正相关(r=0.968).结论 FKN与PQ致大鼠急性肺损伤的发病过程紧密相关.     

百草枯中毒大鼠肾组织Livin蛋白与Caspase-3的表达及干预

目的 观察急性百草枯(Paraquat,PQ)中毒大鼠肾组织Livin蛋白及Caspase-3的表达及乌司他丁(Ulilnastatin,UTI)的干预作用.方法 将54只SD大鼠随机分为对照组(A组)、PQ组(B组)和UTI组(C组),每组各18只.B,C组以生理盐水稀释PQ 80 mg/kg一次性灌胃;C组灌胃后以UTI 105 U/kg腹腔注射,每天1次;A组等量生理盐水一次性灌胃.于不同处理后24,48,72 h分别用免疫印迹法(Westem-bolt)和免疫组化法测定不同时间点肾组织中Livin蛋白及Caspase-3表达的情况,同时观察大鼠肾组织病理变化.结果 A组肾组织结构清晰;B组肾组织结构清晰度明显下降,染毒24 h可见充血、水肿及空泡变性等病理变化,且随时间延长而加重,重者可见核固缩,细胞结构消失,肾小球、髓质部亦可受累;C组病理变化较B组明显减轻.A组Caspase-3蛋白多不表达;B组染毒24h在皮质部肾小管上皮细胞的胞膜及胞浆中Caspase-3蛋白呈阳性表达;C组亦出现表达,但表达水平较PQ组降低,各组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).与A组比较,各时间点B组和C组肾组织Livin蛋白的表达明显增强,尤以C组为甚,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 PQ中毒肾损伤主要表现为上皮细胞变性、浊肿、部分坏死.Caspase-3参与了PQ中毒肾损伤的发病过程.UTI对PQ中毒大鼠肾组织有保护作用,可能是通过促进Livin表达、抑制Caspase-3表达起作用,但其调节途径尚需进一步探讨.     

肺复张对肺内/外源性急性呼吸窘迫综合征模型犬呼吸生理和肺形态学影响的比较

目的 探讨以压力-容积(P-V)曲线为导向的肺复张(RM)策略对肺内/外源性急性呼吸窘迫综合征(ARDSexp/ARDSp)模型犬呼吸生理和肺形态学的影响.方法 将24只健康杂种犬按随机数字表法均分为两组,分别以静脉注射油酸0.1 ml/kg复制ARDSexp模型,以气管内注入盐酸2 ml/kg复制ARDSp模型.每种模型再随机均分为肺保护通气策略(LPVS)组和LPVS+RM组.LPVS组采用LPVS进行机械通气(MV);LPVS+RM组先进行以P-V曲线为导向的RM,RM采用压力控制通气(PCV),压力上限为高位转折点(UIP),呼气末正压(PEEP)为低位转折点(LLP)+2 cm H2O(1 cm H2O=0.098 kPa),维持60 s后再按LPVS进行MV.两组MV时间均为4 h.观察动物基础状态(成模前)及RM前后的氧合指数(PaO2/FiO2)、呼吸力学指标变化;采用低流速法记录准静态P-V曲线并计算UIP、LIP ;根据肺CT比较不同肺充气区容积占全肺容积的百分比.结果 成模前和RM前两组PaO2/FiO2及UIP、LIP比较差异均无统计学意义.RM后4 h,两种模型LPVS+RM组PaO2/FiO2和肺顺应性(Crs)均较同模型LPVS组显著升高[ARDSexp模型PaO,/FiO2(mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa):263.9±69.2比182.8±42.8,Crs(ml/cm H2O):11.3±4.2比9.7±3.7;ARDSp模型PaO2/FiO2(mm Hg):193.4±33.5比176.4±40.2,Crs(ml/cm H2O):10.1±3.9比9.0±3.9,P＜0.05或P＜0.01],气道压力明显低于同模型LPVS组[ARDSexp模型吸气峰压(PIP,cm H2O):24.1±7.4比30.2±8.5,气道平台压(Pplat,cm H2O):19.1±7.3比25.6±7.7;ARDSp模型PIP(cm H2O):26.6±8.4比29.6±10.3,Pplat(cm H2O):21.9±7.3比25.1±8.4,P＜0.05或P＜0.01];且ARDSexp模型改善程度较ARDSp模型更为显著(P＜0.05或P＜0.01).两种模型LPVS+RM组肺组织闭合区和充气不足区所占比例均较同模型LPVS组明显减少,正常充气区所占比例明显增加[ARDSexp模型闭合区:(9.9±3.1)%比(16.3±5.2)%,充气不足区:(10.2±4.2)%比(23.4±6.7)%,正常充气区:(76.2±12.3)%比(57.5±10.1)%;ARDSp模型闭合区:(14.3±4.8)%比(1 8.2±5.1)%,充气不足区:(17.4±6.3)%比(24.1±5.9)%,正常充气区:(63.2±10.7)%比(54.6±11.3)%,P＜0.05或P＜0.01];且ARDSexp模型各充气区所占比例改善程度均明显优于ARDSp模型(均P＜0.05).结论 对于不同原因ARDS,以P-V曲线为导向的RM均具有增加肺氧合、改善肺顺应性和肺组织通气的作用,且对ARDSexp的治疗效果明显优于ARDSp.

Abstract：

Objective To determine effects of recruitment maneuver (RM) guided by pressure-volume (P-V) curve on respiratory physiology and lung morphology in canine models of acute respiratory distress syndrome of pulmonary or extrapulmonary origin (ARDSp and ARDSexp). Methods Twenty-four healthy dogs were randomly divided into two groups with 12 dogs each: ARDSexp and ARDSp. Each dog in ARDSexp group was injected with oleic acid 0. 1 ml/kg through femoral vein, and each dog in ARDSp group received hydrochloric acid 2 ml/kg via trachea. Subsequently, dogs with both models were randomly subdivided into lung protective ventilation strategy (LPVS) group and LPVS+RM group, respectively. Dogs in LPVS group were given LPVS only without RM. RM guided by P-V curve was performed in LPVS+RM group followed by LPVS and pressure controlled ventilation (PCV) mode was selected. Phigh was set at upper inflection point (UIP) of the P-V curve, positive end-expiratory pressure (PEEP) was set at lower inflection point (LIP)+2 cm H2O (1 cm H2O=0. 098 kPa), and the duration of RM was 60 seconds. The duration of mechanical ventilation (MV) in both subgroups was 4 hours. The oxygenation index (PaO2/FiO2), relative lung mechanical indexes were measured in two ARDS models before establishment of ARDS model, and before and after RM. The UIP and LIP were calculated with P-V curve. The percentage of different volume in ventilation of lung accounting for total lung volume was compared by CT scan.Results The PaO2/FiO2, UIP and LIP did not showed significant differences among all groups before ARDSand before RM. PaO2/FiO2 and respiratory system compliance (Crs) were significantly elevated in LPVS+RM group of both models 4 hours after RM compared with corresponding LPVS group [PaO2/FiO2(mm Hg,1 mm Hg=0. 133 kPa) of ARDSexp model: 263. 9±69. 2 vs. 182.8±42. 8, Crs (ml/cm H2O) of ARDSexp model: 11.3±4. 2 vs. 9. 7±3. 7; PaO2/FiO2(mm Hg) of ARDSp model: 193. 4±33.5 vs. 176. 4±40. 2, Crs (ml/cm H2O) of ARDSp model: 10.1±3.9 vs. 9.0±3.9, P＜0. 05 or P＜0.01], and the airway pressure was significantly declined compared with corresponding LPVS group [peak inspiratory pressure (PIP),cm H2O) of ARDSexp model: 24. 1±7. 4 vs. 30. 2±8. 5, plateau pressure (Pplat, cm H2O) of ARDSexp model: 19.1±7.3 vs. 25.6±7.7; PIP (cm H2O) of ARDSp model: 26.6±8.4 vs. 29.6±10.3, Pplat (cm H2O) of ARDSp model: 21.9±7. 3 vs. 25.1±8.4, P＜0. 05 or P＜0. 01]. Moreover, PaO2/FiO2, Crs,PIP and Pplat were improved better in ARDSexp model than ARDSp model (P＜ 0. 05 or P＜ 0. 01).Compared with LPVS maneuver, RM plus LPVS maneuver could significantly decrease the proportion of closure and hypoventilation region, and increase the proportion of normal ventilation region in both models [closure region of ARDSexp model : (9.9±3.1) % vs. (16. 3± 5. 2) %, hypoventilation region of ARDSexp model: (10. 2±4.2)% vs. (23. 4±6. 7)%, normal ventilation region of ARDSexp model: (76. 2±12. 3)%vs. (57.5±10. 1)%; closure region of ARDSp model: (14.3±4. 8)% vs. (18. 2±5.1)%, hypoventilation region of ARDSp model : (17.4±6. 3) % vs. ( 24. 1 ± 5. 9) 0%, normal ventilation region of ARDSp model :(63. 2 ± 10. 7 ) % vs. ( 54. 6±11.3 ) %, P ＜ 0. 05 or P ＜ 0. 01]. All of the ventilation regions were better improved with ARDSexp model than ARDSp model (all P＜0. 05). Conclusion RM guided by P-V curve could help obtain better oxygenation, improve pulmonary compliance and lung ventilation in ARDSexp and ARDSp, and better treatment effects are seen in ARDSexp dogs than ARDSp dogs.     

亚低温对急性肺损伤大鼠肺泡表面活性蛋白A含量的影响

目的 探讨亚低温对内毒素脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡表面活性蛋白A(SP-A)含量的影响.方法 按随机数字表法将40只雄性Wistar大鼠分组.采用气管内滴入LPS制备ALI动物模型;对照组气管内只滴人生理盐水.模型组和对照组分别于术后1 h和8 h处死8只大鼠;亚低温组于滴入LPS 1 h后将体温降低并维持在32.5～33.0℃,8 h后处死8只大鼠.各组分别于术前及术后1 h、8 h测定动脉血气,并计算氧合指数(PaO2/FiO2);采用酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中SP-A含量;光镜下观察肺组织形态结构的变化.结果 气管内滴入LPS 1 h后,大鼠PaO2/FiO2均达到ALI的诊断标准.与对照1 h组比较,模型1 h组BALF中SP-A含量(μg/L)明显降低(53.27±1.95比74.81±6.55,P＜0.01);模型8 h组和亚低温8 h组SP-A含量(4.35±2.76和51.36±2.33)均较对照8 h组(70.81±5.01)明显降低,但亚低温8 h组SP-A含量较模型8 h组明显增高(均P＜0.01).光镜下观察,对照1 h和8 h组肺泡结构基本正常;模型8 h组肺组织炎症反应最重;模型1 h组和亚低温8 h组肺组织炎症反应较模型8 h组有所减轻.结论 亚低温能延缓内毒素诱导的ALI大鼠早期肺泡内SP-A含量下降的程度,在一定程度上可减轻肺损伤.

Abstract：

Objective To investigate the effect of hypothermia (HT) on the concentration of surfactant protein A (SP-A) during lipopolysaccharide (LPS) induced acute lung injury (ALI) in rats.Methods Forty male Wistar rats were randomly divided into three groups. The ALI model was reproduced by LPS intratracheal instillation; only saline was instilled intratracheally for control group. Rats in both model group and control group were sacrificed respectively at 1 hour and 8 hours (each n= 8). In HT group the body temperature was lowered to 32. 5 - 33.0 ℃ 1 hour after LPS instillation, and 8 rats were sacrificed st 8 hours. The arterial blood gas was determined in all the groups before and 1 hour and 8 hours after instillation of saline or LPS, and the oxygenation index (PaO2/FiO2) was calculated. The concentration of SP-A in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was determined by enzyme linked immunosorbent assay. The morphological changes in lung tissue of rats were observed under light microscope. Results At 1 hour after intratracheal instillation of LPS, the PaO2/FiO2 of each group reached the diagnostic criterion of ALI.Compared with control 1-hour group, the SP-A (μg/L) in BALF of model 1-hour group was decreased (53. 27±1.95 vs. 74. 81±6. 55, P＜0. 01); the SP-A in model 8-hour group and HT 8-hour group (4.35±2. 76 and 51.36±2. 33) was both obviously decreased compared with control 8-hour group (70. 81±-5. 01,both P＜0. 01). Compared with model 8-hour group, the SP-A of HT 8-hour group was obviously increased (P＜0. 01). Results of light microscopic examination, it was revealed that the alveolar structure of control 1-hour group and control 8-hour group was almost normal. Inflammatory response in lung tissues in model 8-hour group was found to be most serious; compared with model 8-hour group, inflammatory response in lung tissues in model 1-hour group and HT 8-hour group was reduced in certain degree. Conclusion A certain extent of HT may reduce lung injury of early endotoxin-induced ALI rats by delaying lowering of alveolar SP-A levels.     

不同晶胶比液体复苏对重症急性胰腺炎患者血管外肺水指数的影响

目的 探讨不同晶胶比液体复苏对重症急性胰腺炎(SAP)患者血管外肺水(EVLW)的影响.方法 回顾性分析本院2009年1月至2010年12月重症医学科24例SAP患者的临床资料.所有患者的胸内血容量指数(ITBVI)均＜750 ml/m2,以ITBVI 850～1 000 ml/m2作为复苏终点.以晶胶比3:1为界,将患者分成低晶胶比组(13例)和高晶胶比组(11例),观察液体复苏前及复苏后即刻(0)、24、48、72 h患者血流动力学、血管外肺水指数(EVLWI)、氧合指数(PaO2/FiO2)、膀胱内压(ICP)、B型钠尿肽(BNP)的变化;采用脉搏指示连续心排血量(PiCCO)热稀释法测定EVLWI,用放射免疫法测定BNP.结果 ①早期采用不同晶胶比液体复苏均可改善SAP患者血流动力学指标.②复苏后72 h高晶胶比组总液体量[(16 438±1 758)ml]、晶体液量[(13 459±425)m1]及晶/胶比值(4.50±0.23)均明显高于低晶胶比组[分别为(13 895±1 783)ml、(6 945±454)ml、2.32±0.18,P＜0.05或P＜0.01].③与低晶胶比组比较,高晶胶比组复苏后48 h和72 hPaO2/FiO2(mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa)明显下降(48 h:186.51±42.26比268.35±34.18,72 h:172.85±21.50比263.95±24.20),EVLWI、ICP及BNP均明显升高[EVLWI(ml/kg)48 h:14.52±1.08比10.40±1.16,72 h:14.92±0.86比10.52±1.02;ICP(cm H2O,1 cm H2O=0.098 kPa)48 h:16.23±1.32比13.05±1.70,72 h:17.39±1.56比13.42±1.65;BNP(ng/L)48 h:424.29±74.25比225.32±53.58,72 h:620.49+79.53比288.28±68.78,P＜0.05或P＜0.01].④Pearson相关分析显示:EVLWI与PaO2/FiO2呈显著负相关(r=-0.71,P＜0.01),与ICP、BNP呈显著正相关(r1=0.63,r2=0.56,均P＜0.01).结论 对SAP患者早期应监测EVLWI、ICP及BNP以指导液体复苏,且宜采用提高胶体比例的限制性液体复苏策略.     

血管紧张素Ⅱ对大鼠肺泡上皮钠通道表达的影响

目的 探讨外源性血管紧张索Ⅱ (Ang Ⅱ)对大鼠肺泡液体清除及肺泡上皮钠通道(ENaC)表达的影响。方法 按随机数字表法将15只SD大鼠分为对照组、Ang Ⅱ组及Ang Ⅱ 1型受体阻滞剂ZD7155干预组,每组5只。Ang Ⅱ组和ZD7155干预组大鼠经左侧颈静脉置管后,微量泵持续泵入外源性Ang Ⅱ10 μg．kg-1．min-1;对照组泵入等量生理盐水。ZD7155干预组于泵入Ang Ⅱ前30 min经腹腔注射10 mg/kg ZD7155。6h后观察肺组织病理学改变;用伊文思蓝标记5％白蛋白法测定离体肺组织肺泡液体清除率(AFC);用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定ENaC mRNA表达,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)测定ENaC蛋白表达。结果 Ang Ⅱ组AFC较对照组显著降低[（6.16±3.01）％比(16.10±3.46)％,P＜0.01],ZD7155干预组AFC较Ang Ⅱ组显著升高[（10.60±2.05）％比(6.16±3.01)％,P＜0.05]。Ang Ⅱ组α-ENaC mRNA表达较对照组显著升高（0.663±0.068比0.236±0.030,P＜0.01）,ZD7155干预组α-ENaC mRNA表达较Ang Ⅱ组显著降低（0.386±0.061比0.663±0.068,P＜0.01）;β-ENaC及γ-ENaC的mRNA表达无明显差异。与对照组比较,Ang Ⅱ组α-ENaC蛋白表达显著增加(0.343±0.053比0.145±0.030,P＜0.01),β-ENaC和γ-ENaC的蛋白表达显著降低（0.286±0.038比0.512±0.055,0.144±0.040比0.460±0.066,均P＜0.01）;与Ang Ⅱ组比较,ZD7155干预组α-ENaC蛋白表达显著降低(0.228±0.045比0.343±0.053,P＜0.01),β-ENaC和γ-ENaC的蛋白表达显著升高(0.358±0.043比0.286±0.038,0.220±0.033比0.144±0.040,均P＜0.05)。结论 外源性Ang Ⅱ通过其1型受体途径调节ENaC基因及蛋白表达,减弱大鼠肺泡液体清除,加重肺水肿。     

百草枯中毒急性肺损伤TNF-α的表达及大黄保护作用的机制

目的 观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在百草枯(PQ)中毒人鼠急性肺损伤中的表达,探讨大黄可能的作用机制.方法 PQ 50 mg/kg灌胃染毒制作PQ中毒Spragne-Dawley(SD)大鼠急性肺损伤模型.144只SD大鼠随机分为:空白对照组(A组,n=24),染毒组(B组,n=48),大黄组(C组,n=48)和空白十预组(D组,n=24).PQ(50 mg/kg)染毒,15 min内牛大黄(300 mg/kg·d)灌胃十预.血球记数板记数肺泡灌洗液巾中性粒细胞和细胞总数,Lowry法测定蛋白含量,计算中性粒细胞百分比及肺泡通透指数.取左肺HE染色脱察组织病理变化,免疫组织化学法检测TNF-α的表达.计量资料以均值±标准筹(x±s)表示,绀问单冈素方差分析,两两组间比较采用q检验,结果以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 与A组相比,B组肺组织充血、水肿,炎性细胞浸润,少数见纤维化改变,肺泡灌洗液中性粒细胞比、蛋白含量及肺泡通透指数显著增高(P＜0.01);TNF-α染毒12 h表达明显增加,免疫组织化学评分(IHS)升高,1 d达高峰,差异有统计学意义(P＜0.05).之后维持较高水平,减轻趋势平缓.C组病理改变减轻,TNF-α亦呈阳性表达,IHS升高,但与B组相比,表达延迟,升幅减低,减弱趋势明显,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 抑制TNF-α的表达,减轻炎症反应,可能是大黄减轻PQ中毒人鼠急性肺损伤的有效途径之一.     

一种新的复合型野战创伤早期抗休克液的实验研究

目的 依据失血性休克发生的理论基础和长期的临床实践经验,配制一种新的"复合型战地抗休克液",并利用大鼠失血性休克模型进行评价.方法 建立大鼠失血性休克模型.以乳酸林格液和羟乙基淀粉的2∶1混合液(LH)作为对照组休克复苏液;以添加地塞米松和呋塞米的LH作为加药组休克复苏液;复苏4 h后取血和器官标本检测生化、肝功能指标和肺组织含水量,并观察组织病理学变化.结果 两组液体均可使失血性休克大鼠平均动脉压恢复到基础值.与对照组比较,加药组血生化指标均无明显差异,但大鼠复苏后肺组织湿/干重比值明显降低(4.56±0.14比4.88±0.29,P＜0.05),丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平显著下降[ALT:(73.02±41. 89)U/L比(193.85±104.49)U/L;AST:(199.06±108.70)U/L比(395.25±137.08)U/L,均P＜0.05],利尿作用明显[开始排尿时间:(76±20)min比(153±14)min;尿量:(9.6±5.2)ml比(1.5±2.2)ml,P＜0.01和P＜0.05],腹水量减少[(1.3±0.6)ml比(5.0±3.0)ml,P＜0.05].肝、肺和小肠组织病理学观察也显示加药组损伤轻于对照组.结论 本研究中设计的"复合型战地抗休克液"配方简单,用于大鼠失血性休克复苏可快速恢复并稳定血流动力学,同时可起到减轻组织水肿及肝、肺、小肠损伤的作用.

Abstract：

Objective To propose a resuscitation fluid with a new formula for resuscitation of shock in battlefield on the basis of pathogenesis of hemorrhagic shock and clinical experiences, and to evaluate its safety and effectiveness in a rat hemorrhagic shock model. Methods After hemorrhagic shock was (referred to as LH)was used for resuscitation in animals of control group; LH supplemented with dexamethasone and furosemide(referred to as LHDF)was used as resuscitation fluid for experimental group.After 4 hours of infusion, blood and major organs were obtained for serum biochemical tests, lung water content measurement and histopathological observation. Results The mean arterial pressure of rats of both control and experimental groups recovered rapidly after resuscitation. There was no significant difference in the parameters of serum biochemistry between control group and experimental group. The wet/dry weight ratio of lung tissue in experimental group was significantly lower than control group(4. 56±0. 14 vs. 4. 88±0. 29, P＜0. 05). The blood alanine aminotransferase(ALT)and aspartate aminotransferase(AST)levels in experimental group were also significantly lower than in control group[ALT:(73. 02±41.89)U/L vs.(193. 85 ± 104. 49)U/L; AST:(199.06 ± 108. 7)U/L vs.(395.25 ± 137.08)U/L, both P＜0. 05).Diuretic effect was obviously observed in experimental group than control group[time of start urination:(76±20)minutes vs.(153±14)minutes; urine volume:(9. 6±5. 2)ml vs.(1.5±2. 2)ml, P＜0. 01 and P＜0. 05], and the amount of ascitic fluid in experimental group was significantly lower than in control group [(1.3 ± 0. 6)ml vs.(5.0 ± 3.0)ml, P＜ 0. 05). Histopathological observation of the liver, lung and intestine also showed less pathological changes in experimental group than in control group. Conclusion The designed battlefield anti-shock fluid in this study has been shown to be effective in fluid resuscitation for hemorrhage shock in rats, with reduced tissue edema and less injury to the liver, lung and intestine.     

信息支持对老年髋部骨折患者术前焦虑的影响

目的探讨信息支持对老年髋部骨折患者术前焦虑的影响。方法采用随机数字表法对入选的髋部骨折手术患者分为观察组（n=31）和对照组（n=30）;两组均给予常规的术前宣教,观察组增加根据疾病的不确定感理论4个方面制定的信息支持内容;观察两组患者干预前和干预后的焦虑值（STAI）、心率（HR）、收缩压（SBP）及舒张压（DBP）,并分别进行比较。结果观察组干预前后STAI、HR、SBP、DBP分另Ⅱ为（50．2±3．4）VS（38．5±3．0）分、（91．1±7．9）VS（75．3±8．2）次／min、（149．2±18．7）VS（126．9±12．8）mmHg、（85．3±9．6）VS（73．7±7．1）mmHg,干预前后差异均有统计学意义（P〈0．01）;干预前观察组与对照组AV、HR、SBP及DBP比较均无统计学意义（P〉0．05）;干预后观察组AV、HR、SBP及DBP均低于对照组（P〈0．01,P〈0．05）。结论以疾病的不确定感理论为依据制订信息支持内容降低老年髋部骨折患者术前焦虑的效果优于常规方法。