人胎胸腺细胞的荧光染色观察

运用7690—Xu荧光染色法观察不同胎龄胎儿胸腺细胞的荧光映象,发现:不同胎龄人胎胸腺细胞悬液呈现相似形态和相似分布特征的8种异质性荧光图像的细胞.E花环实验和密度梯度离心分离结合7690—Xu荧光染色观察显示:墨黑核细胞和部分深蓝核细胞为分化早期细胞,淡桔黄核黄质细胞为分化晚期细胞,灰蓝核细胞和灰黄核细胞为处于分化中期的细胞.     

胶体金法研究胎儿胸腺上皮网状细胞的细胞学观察

为了探讨胎儿胸腺上皮网状细胞发育过程的结构特点,用胶体金免疫组化法及电镜观察60例胎龄12～42周胸腺。结果表明:不同类型的上皮网状细胞中间丝有多寡之别并含有不同类型角蛋白;中间丝多者细胞器相对减少。角蛋白阳性反应细胞体积随胎龄增长而增大,但阳性细胞出现率与胎龄关系不大。角蛋白阴性反应细胞电镜下可见丰富的内质网、线粒体及核糖体,提示该细胞主要有分泌胸腺激素功能。     

防己对培养的绿色荧光蛋白小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的:研究防己对绿色荧光蛋白(GFP)小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法:采用原代培养技术、荧光显微镜、DNA凝胶电泳以及免疫细胞化学方法观察不同浓度防己对GFP小鼠胸腺细胞凋亡程度的影响。结果:防己在1-100μg／ml可不同程度抑制小鼠胸腺细胞的增殖,荧光染色可见典型凋亡小体, DNA凝胶电泳有典型的DNA梯形条带,免疫细胞化学可观察到Fas与FasL阳性表达细胞。结论:不同浓度防己(1-100μg／ml)可不同程度抑制GFP小鼠胸腺细胞的增殖,促进其凋亡,其凋亡可能通过Fas／FasL系统而诱导。     

TLR在小鼠胸腺中的表达及其在胸腺细胞发育中的可能作用

检测体外培养和体内发育过程中,胎鼠胸腺处于不同发育阶段时Toll样受体(TLR)的表达,阐明TLR表达量与胸腺细胞发育相关性,为TLR和胸腺细胞发育分化相关研究提供基础数据。无菌取15d胎龄胎鼠胸腺进行体外培养(FTOC),在培养不同时间点(2d,4d,6d),检测处于不同发育期胸腺TLR的表达;同时在孕期不同天数(15~19d),分别取胎鼠胸腺,检测在体内发育过程中胸腺TLR的表达;在FTOC中加入二脱氧鸟苷培养6d以制备胸腺基质细胞,检测基质细胞与胸腺细胞TLR表达情况。结果:小鼠胸腺中检测到多种TLR。FTOC培养中:培养第2天(F2)开始检测到各种TLR,到培养第6天(F6),TLR1,TLR3,TLR6,TLR7,TLR8明显上调,而TLR4,TLR5保持低水平,TLR4在培养第6天又下降;体内发育过程中:TLR6表达量随胎龄增加有较明显上调,TLR1,TLR3-8保持低水平表达;TLR2,TLR9体内体外都未检测到明显表达。在对胸腺细胞与基质细胞TLR表达比较中发现TLR1,TLR5,TLR6,TLR7高表达于胸腺细胞。胎鼠胸腺表达某些TLR,并且在发育不同阶段表达量有所改变,提示TLR可能参与胸腺细胞的发育过程。     

胎儿胸腺发育过程中T细胞抗原受体的表达

目的:检测不同胎龄胎儿胸腺组织内T细胞抗原受体(TCR)的表达及发育规律.方法:18～40周胎儿胸腺组织,采用免疫组织化学SP法检测TCRαβ和TCRγδ的表达. 结果:胚胎21周,胸腺组织开始出现TCRαβ和TCRγδ阳性细胞.TCRαβ阳性细胞主要分布被膜下及小叶间隔中,围绕血管成群分布.TCRγδ阳性细胞的分布与TCRαβ阳性细胞相似, 但细胞数量较TCRαβ阳性细胞少.38周以后胎儿胸腺内TCR阳性细胞主要分布在皮髓质交界处,被膜下及小叶间隔中的TCR阳性细胞较早期少.结论:TCR阳性细胞在胚胎早期开始出现,其分布部位提示局部微环境有利于这些细胞的分化发育.     

胸腺微环境及其作用

胸腺是Ｔ淋巴细胞分化发育的场所，胸腺微环境由胸腺基质细胞、细胞外基质和细胞因子等构成。在胸腺基质细胞中，上皮细胞最多，分布最广。上皮细胞的分化、成熟和增殖依赖于胸腺内发育阶段的各Ｔ细胞亚群。位于胸腺内不同区域的基质细胞在Ｔ细胞发育的不同阶段起重要作用。血胸屏障是胸腺微环境中一个特殊结构，前Ｔ细胞可通过粘附分子，在趋化因子等作用下穿过血胸屏障进入胸腺，在胸腺内完成其分化发育过程。     

胎儿胸腺年龄变化及其临床意义

作者观察100例胚胎(胎龄第9周—足月)测量其体重和胸腺重,并取其中45例胸腺做成组织切片,用统计学方法求出胸腺重与年龄的相关与回归,探索胸腺的正常发育规律,依据其年龄变化,提出胸腺移植时胎儿胸腺供体的恰当年龄的解剖学依据。     

胸腺小体在胸腺发育中的形态发生及其功能探讨

用组织化学与免疫组织化学技术对8例人胎(胎龄16～32周)的胸腺进行研究,观察在其发育过程中胸腺小体的形态变化及增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)、花生凝集素(Peanut Aggulutinin,PNA)和细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)等的表达特征.结果显示:胸腺小体是在胸腺发育阶段由胸腺上皮细胞呈同心圆状排列而成,且胎儿胸腺中单个和融合状的胸腺小体都较成体胸腺中明显增多.围成胸腺小体的上皮细胞从周边向中央,角蛋白含量明显减少,增殖能力逐渐减弱,表现为逐渐退化的过程.证实胸腺小体是处理退变的上皮细胞的场所.另外,在胸腺小体的上皮细胞膜有PNA受体的表达,这提示在胸腺的发育成熟过程中,胸腺小体上皮细胞与胸腺细胞之间可能存在着相互识别相互诱导的作用.     

胸腺细胞对胸腺上皮细胞增殖的影响

为了分析胸腺细胞在胸腺上皮细胞发育中的作用，本文作者在体外分析了胸腺细胞对小鼠胸腺上皮细胞系（ＭＴＥＣ１）增殖的作用。结果表明，不同的胸腺细胞亚群以及胸腺细胞裂解液均能促进ＭＴＥＣ１增殖，考的松耐受性胸腺细胞和ＣＤ３－４－８－细胞具有同样的促进ＭＴＥＣ１增殖的作用，其促进程度与两种细胞的数量有关，胸腺细胞和ＭＴＥＣ１为２０１或４０１时，其促进作用最强。胸腺细胞裂解液在高浓度（１２稀释）时，能促进ＭＴＥＣ１增殖，在低浓度时则不影响ＭＴＥＣ１的增殖。本实验提示，胸腺细胞可以通过细胞－细胞相互作用以及分泌细胞因子影响ＭＴＥＣ１的增殖。     

胸腺病理在重症肌无力胸腺切除手术后远期预后生存分析中的作用

目的：探讨重症肌无力胸腺切除术后影响远期生态的因素。方法：采用胸腺切除手术治疗170例重症肌无力患者，对其中124例进行了超过40个月的远期随访，运用COX回归模型分析影响远期预后的有关因素（包括胸腺的各病理类型、性别、年龄、病程、术前临床Osserman分型和治疗）。同时运用免疫组织化学染色检测36例胞腺石腊标本中的T细胞和B细胞的数量，并与远期预后做等级相关分析。结果：重症肌无力胸腺切除术后不同的胸腺病理类型远期生态率有明显差异，表现为胸腺增生＞良性胸腺瘤＞胸腺萎缩＞恶性胸腺瘤（P＜0.050，胸腺中T细胞和B细胞的数量与术后的远期预后呈显著负相关（P＜0.05）。结论：胞腺不同的病理类型是影响重症肌无力胸腺切除术远期预后的重要因素，而且胸腺中T细胞和B细胞的数量也与预后相关。     

IL-7对胸腺T细胞及树突状细胞体外分化发育的影响

目的:探讨IL-7对胸腺T细胞及胸腺树突状细胞分化的影响。方法:摘取15～16日龄胎鼠胸腺进行体外器官培养(胚胎胸腺器官培养-FTOC),分别将细胞因子IL-7和培养基滴加在胸腺小叶上,12天后收集不同条件下经FTOC培养获得的胸腺细胞,流式细胞仪检测细胞表面分子CD4、CD8、CD11c、B220、Ia等的表达,通过光学显微镜观察细胞形态,通过细胞计数检测细胞数目的变化。再将经FTOC培养获得的胸腺细胞和异源的T细胞进行混合淋巴细胞反应,通过MTT法检测T细胞的增殖情况。结果:细胞计数结果表明添加外源性IL-7组的胸腺细胞数目明显减少,流式细胞仪检测结果显示其中胸腺CD4-CD8-双阴性细胞及CD8+单阳性细胞比例有所增加,而CD4+CD8+双阳性细胞比例显著下降,CD4+单阳性细胞比例没有明显变化;此外,B细胞和树突状细胞、NK细胞数量均有不同程度的增加。结论:IL-7在胸腺T细胞及胸腺树突状细胞的分化发育中发挥重要的调节作用。     

166胸腺细胞与胸腺基质细胞的相互作用

胸腺内Ｔ细胞细胞依赖胸腺微环境提供的多种信号完成正常发育过程，然而研究发现无论在自然或实验条件下胸腺细胞的减少均可导致胸腺上皮细胞减少，从而提示胸腺微环境和胸腺细胞之间存在相互依赖关系。即Ｔ细胞的发育依赖于胸腺微环境同时Ｔ细胞的存在对形成和维持正常的胸腺微环境也是必需的。     

胸腺上皮细胞的起源与分化

胸腺提供复杂的微环境来调节T细胞的存活、分化、选择和迁移,是T细胞发育、分化和成熟的场所也是自身免疫耐受的中心。胸腺上皮细胞包括胸腺皮质上皮细胞和髓质上皮细胞,其来源于内胚层,并由胸腺上皮祖细胞分化而来。胸腺上皮细胞的分化空间结构的建立有赖于转录因子和信号通路分子在胸腺上皮细胞不同时段复杂的分子调控。胸腺上皮细胞成熟过程也是胸腺上皮细胞一系列特异性表面标记分子的变化过程,对胸腺上皮细胞特异标记分子的研究是分析胸腺上皮细胞复杂分化过程的重要工具。本文重点探讨胸腺上皮细胞起源发展模型及分化过程中分子调控作用,以期更好的理解胸腺上皮细胞如何成为能够支持T细胞分化的特异哺育者。     

不同生长期小鼠胸腺T细胞不同亚群的变化及ROCK抑制剂对衰老小鼠胸腺再生的促进作用

目的研究各发育阶段小鼠胸腺细胞、胸腺上皮细胞(TEC)和脾脏中T细胞的变化,探索Rho相关卷曲蛋白激酶(ROCK)抑制剂对衰老小鼠胸腺再生的作用。方法取幼年、青年、中年及老年期C57BL/6雌鼠的胸腺和脾脏,流式细胞术分析小鼠胸腺细胞、TEC及脾脏中T细胞亚群;ROCK抑制剂体外处理衰老进程中小鼠TEC,荧光酶联斑点分析仪观察细胞增殖情况;ROCK抑制剂处理20月龄衰老小鼠,流式细胞术检测小鼠胸腺细胞、TEC及脾脏中T细胞亚群的变化。结果随月龄增加,胸腺细胞、TEC总数及各细胞亚群数量均显著降低;脾脏中总CD4⁺T细胞及CD8⁺T细胞比例无显著性改变,但CD4+初始T细胞、CD8+初始T细胞和CD4+近期胸腺迁出细胞(RTE)在脾脏中所占比例呈下降趋势;ROCK抑制剂在体外促进衰老进程中小鼠TEC增殖,ROCK抑制剂在体内使衰老小鼠胸腺细胞、TEC以及外周脾脏中T淋巴细胞各亚群数量明显增加。结论随着小鼠月龄增加,胸腺呈进行性退化。ROCK抑制剂可以显著缓解衰老小鼠胸腺的萎缩,促进衰老小鼠胸腺再生。     

蛇胸腺的神经内分泌细胞

为了进一步了解蛇胸腺实质组织的内分泌特性，用１６种激素和神经递质的抗血清对其进行组织化学观察。结果显示，蛇胸腺含有一些呈ＣＣＫ、ＣＲＦ、Ｅｎｄ、Ｇａｓ、Ｇｌｕ、ＧＲＰ、５－ＨＴ、Ｍｏｔ，Ｎｅｕ和ＳＳ免疫反应的细胞，其中以ＣＣＫ、ＣＲＦ，５－ＨＴ、Ｇａｓ、Ｍｏｔ和ＳＳ反应较强，ＣＣＫ，ＣＲＦ、５－ＴＨ和Ｇａｓ阳性细胞较多。这类细胞形态结构与胸腺上皮细胞明显不同，而与弥散神经内分泌细胞相似。这表明蛇胸     

胸腺上皮细胞上清液促进85细胞增殖的研究

胸腺是T细胞分化发育的场所。源于骨髓的前T细胞迁入胸腺后,在胸腺微环境作用下,经阳性和阴性选择过程,发育分化成功能性T细胞迁至外周[1]。目前对胸腺基质细胞如何影响成熟T细胞株的研究较少。为此,本文利用体外原代培养人胸腺上皮细胞,比较不同培养条件下细胞生长情况。...     

绿色荧光蛋白在环磷酰胺处理小鼠胸腺中表达的研究

目的:探讨绿色荧光蛋白(GFP)在环磷酰胺(CY)处理小鼠胸腺中的表达。方法:将质粒pEGFP-c3和梭华SofastTM基因转染试剂按一定比例配制成转染液,经腹腔注入3组小鼠(每组15只)进行转染。转染24h后分别注射0.5、1、2mg/只的CY,并设对照组(15只)。18h后称小鼠体质量,然后处死动物,无菌取胸腺并称重,用PBS洗出细胞,制成单细胞悬液,于荧光显微镜下观察GFP的表达情况。结果:GFP可在小鼠胸腺中表达,且GFP 细胞数与CY的剂量相关。高剂量的CY处理可导致胸腺明显萎缩、胸腺细胞总数及GFP 细胞数的减少。结论:转染质粒pEGFP-c3并经CY处理的小鼠及正常对照组小鼠的胸腺中均可表达GFP,但CY处理的小鼠胸腺中GFP的表达情况明显低于对照组小鼠。     

用单克隆抗体显示小鼠胚胞腺上皮细胞的分化

以小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体ＭＴＳ６、５、２０、３３，用免疫酶法观察了小鼠胚（１２～１９ｄ）胸腺上皮细胞的不同亚类和分化。第１２天胚胸腺原基中有少数细胞开始显示ＭＴＳ６弱阳性反应。第１３ｄ胚胸腺皮质中有些胸腺上皮细胞显示ＭＴＳ５阳性。第１５ｄ胸腺皮质和髓质中有些胸腺上皮细胞开始呈ＭＴＳ２０阳性反应。第１７ｄ胚髓质中可见少数胸腺上皮细胞开始呈ＭＴＳ３３阳性反应。第１９ｄＭＴＳ５、６阳性反应的胸腺上皮     

老龄小鼠性腺摘除后胸腺的形态学变化

本文观察了15月龄雌雄ICR小鼠于性腺摘除后第25天胸腺的变化。与对照组相比,胸腺增大,重量增加,皮质增厚且皮髓质分界明显,细胞密度显著增大;皮质/髓质立体计量数值、细胞总数、胸腺细胞数/mm~2及ANAE阳性细胞、非淋巴细胞(NLC)、巨噬细胞(Mφ)一胸腺细胞花环的百分率均增高;电镜下胸腺细胞与明型上皮性网状细胞或Mφ形成的花环更多见。外周血ANAE阳性淋巴细胞明显增多。以上结果表明,老龄小鼠于性腺摘除后,胸腺呈现明显的形态学逆转变化。     

胸腺微环境

胸腺微环境孙品伟，吴江声（北京医科大学组织学与胚胎学系，北京１０００８３）胸腺是中枢淋巴器官，胸腺细胞发生是在胸腺微环境中进行的。这一微环境由胸腺基质细胞和胸腺细胞共同组成。胸腺基质细胞包括胸腺上皮细胞和非上皮细胞两种成分，后者又包括少量肌样细胞和多...