衰老大鼠压力超负荷性心肌中原癌基因表达的研究

目的　通过研究原癌基因 (c- myc,c- Ha- ras,c- fos)在衰老及压力超负荷性心肌中的表达 ,回答以下两个主要问题 :(1 )增龄和压力超负荷对心肌生长相关的原癌基因表达有何影响和异同 ?(2 )压力超负荷引起的基因表达的变化是否受心肌本身老化过程的影响 ?方法　 2 0月龄及 6月龄健康雄性 SD大鼠各 1 0只 ,随机分为对照组和腹主动脉缩窄组。Northern杂交分析 c- myc,c- Ha- ras,c- fos基因表达。结果　 c- Ha- ras和 c- fos在6月龄、2 0月龄正常大鼠心室肌中均表达 ,老龄鼠 c- fos的表达水平明显高于青龄鼠 (0 .52 3± 0 .0 7vs 0 .1 85± 0 .0 5) (P<0 .0 5) ;c- Ha- ras则无显著差异 (0 .65± 0 .0 7vs0 .63± 0 .0 6) (P>0 .0 5) ;c- myc在 6月龄和 2 0月龄正常大鼠心室肌中均无表达。腹主动脉缩窄后 ,青龄鼠 c- fos表达水平显著升高 ,为缩窄前的 2 .2倍 (0 .40 7± 0 .0 6 vs 0 .1 85± 0 .0 5) ,(P<0 .0 5) ;老龄鼠 c- fos表达无显著变化 (0 .540± 0 .0 7vs 0 .52 3± 0 .0 7) (P>0 .0 5)。 c- Ha-ras缩窄前后青龄鼠和老龄鼠的表达水平均无显著变化。青龄鼠和老龄鼠缩窄后 c- myc都有表达 ,老龄鼠的表达水平是青龄鼠的 3倍 (0 .345± 0 .0 6vs0 .1 1 5± 0 .0 5) (P<0 .0 5)。结论　原癌基因 (c- my     

脑缺血后c—fos原癌基因表达的改变

缺血后ｃ－ｆｏｓ表达在神经元可塑性，迟发性神经元坏死，梗塞灶远隔部位神经元损害，神经元的缺血耐受性等方面都有重要意义。现就近５年来国外有关方面的研究综述如下。     

原癌基因c—myc,c—fos在自发性高血压大鼠左心室的表达

目的 探讨ＳＨＲ左心室肥厚时原癌基因ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓ表达的变化及其意义。 方法 １６周龄的雄性ＳＨＲ在测量收缩压和体重后处死，年龄、性别和数量配对的正常血压的ＷＫＹ为对照组。取左心室称重，异硫氰酸胍酸－酚氯仿一步法提取组织总ＲＮＡ，用＾３２Ｐ标记的ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓ ｃＤＮＡ探针行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交，同时取左心室组织制备蛋白抽提物进行法提取组织总ＲＮＡ，用＾３２Ｐ标记的ｃ－ｍｙｃ，ｃ－     

固真方对老年大鼠肝脏c—myc,c—fos,p53表达的影响

为了进一步探讨固真方延缓衰老的分子机理，本文用斑点杂交技术研究了固真方对大鼠肝组织与增殖密切相关的基因－原癌基因和抗癌基因Ｐ５３表达的影响。结果显示：ａ．ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓ的表达老年对照组较青年对照组明显降低，而老年用药粗较老年对照组明显增高。ｂ．ｐ５３的表达老年对照朋与青年对照组及老年用药组与老年对照组之间的变化无统计学意义。     

高血压左心室肥厚与心有原癌基因c—fos的表达

研究细胞核内原癌基因ｃ－ｆｏｓ在高血压左室肥厚（ＬＶＨ）发生、发展过程中的作用。方法 采用两种高血压模型即自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和两肾一夹型（２Ｋ１Ｃ）肾血管性高血压大鼠，观察在高血压所致ＬＶＨ的不同阶段，收缩压（ＳＢＰ）、左室重／体重比（ＬＶＷ／ＢＷ）及左心室ｃ－ｆｏｓ基因表达水平的变化。结果 ＳＨＲ在８－１０周龄时已有明显的高血压和ＬＶＨ，其ＳＢＰ与ＬＶＷ／ＢＷ均显著高于对照的ＷＫＹ大鼠，     

原癌基因c—fos及c—myc在血管成形术后异常表达的实验研究

选用日本大耳白兔制做动脉粥样硬化模型，行血管成形术，采用核酸分子杂交技术对术后动脉壁平滑肌细胞（ＳＭＣ）原癌基因的表达情况进行实验观察。结果表明：ｃ－ｆｏｓ及ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ在术后１５ｍｉｎ表达增加，分别在３０ｍｉｎ及２ｈ达高峰，５ｈ恢复到实验的基础水平。提示：血管成形术后的早期有和细胞增殖分化关系密切的癌基因的异常表达；可能为血管成形术后ＳＭＣ增殖的主要原因；可为基因治疗血管成形术后再狭窄提     

固真方对老年大鼠肝脏c－myc、c－fos、p53表达的影响

为了进一步探讨固真方延理衰老的分子机理，本文用斑点杂交技术研究了固真方对大鼠肝组织与增殖密切相关的基因──原癌基因（ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ）和抗癌基因ｐ５３表达的影响。结果显示：ａ．ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ的表达老年对照组较青年对照组明显降低（Ｐ＜０．０１）．而老年用药组较老年对照组明显增高（Ｐ＜０．０１）。ｂ．ｐ５３的表达老年对照组与青年对照组及老年用药组与老年对照组之间的变化无统计学意义。     

卡托普利对自发性高血压大鼠心肌肥厚和心肌纤维化的效应（摘要）

卡托普利对自发性高血压大鼠心肌肥厚和心肌纤维化的效应（摘要）陈义汉龚兰生最近，一些学者认为高血压左室肥厚向心力衰竭发展的决定因素是心肌胶原的过度沉积，即心肌纤维化，而不是心肌细胞本身，故防止或逆转心肌纤维化可能有助于维护心脏功能。本实验探讨卡托普利（...     

Graves病患者甲状腺肿组织中原癌基因h-ras和c-myc的表达研究

目的 以β-actin为内参照物,研究原癌基因h-ras和c-myc在Graves病(GD)患者甲状腺肿组织中的表达.方法 Trizol法提取26例GD和31例正常甲状腺组织标本中的mRNA,逆转录-PCR法获取cDNA,多重PCR法分别同时扩增h-ras和β-actin或c-myc和β-actin,扩增产物行1.5%琼脂糖凝胶电泳,用GelBase/GelBiot-Pro软件分析获得各标本的h-ras或c-myc和β-actin的密度值.结果 h-ras在GD组中的表达较正常组有增高趋势(P=0.082),两组h-ras/β-actin的比值分别为(-x±s):0.457±0.102和0.413±0.051.c-myc在GD组的表达显著高于正常组(P＜0.01),两组c-myc/β-actin的比值分别为(-x±s):0.599±0.080和0.367±0.044.在GD组和正常组中h-ras和c-myc的表达均无显著相关关系(P＞0.05).结论 h-ras和c-myc在GD患者甲状腺肿组织中的表达均有不同程度的增高且两者间无显著相关关系.     

肝癌组织中p62~（c－myc）表达及其意义

应用免疫组织化学（ＡＢＣ法）技术对４８例原发性肝癌患者的肝癌及癌旁石蜡包埋组织中ｐ６２~（ｃ－ｍｙｃ）进行检测，结果显示ｐ６２~（ｃ－ｍｙｃ）的阳性率在肝癌中为８３．３％（４０／４８），在癌旁组织为８９．６％（４３／４８），说明ｃ－ｍｙｃ基因的激活与肝癌癌变过程有密切关系。同时对ｐ６２~（ｃ－ｍｙｃ）表达的意义进行了讨论。     

Expression of cellular oncogenes in the myocardium during the developmental stage and pressure-overloaded hypertrophy of the rat heart

Proto-oncogenes have been revealed to participate in normal cell proliferation as well as in cell transformation. Since cardiac myocytes are terminally differentiated, they cannot divide except in the fetal period. To determine the role of cellular oncogenes in the growth of the heart, the expression pattern of eight cellular oncogenes during the developmental stage and pressure-overloaded hypertrophy of the rat hearts were examined in vivo. Northern blot analysis was performed with eight oncogene probes (myc, fos, Ha-ras, src, erbA, erbB, sis, myb). Pressure overload increased the levels of cellular (c-) fos, c-myc, and c-Ha-ras. An increase of c-fos and c-myc was detected at 30 minutes and 2 hours, respectively; the levels peaked at 8 hours, and they returned to baseline by 48 hours after aortic constriction. However, the level of c-Ha-ras showed a gradual increase. During the course of development, the expression of c-myc was detectable only in the embryonic stage, whereas the expression of c-fos was not detected in the fetal period, was increased after birth, and peaked in 200-day-old adults. The expression of c-Ha-ras was almost the same throughout the development. Cellular oncogenes were expressed in the heart in response to pressure overload and in a stage-specific manner. These results suggest that cellular oncogenes may participate in the normal developmental process and hypertrophy of hearts and that the cellular hypertrophy induced by pressure overload may share a similar mechanistic pathway with cell proliferation.     

肝癌h—met,c—mycP^16蛋白表达与细胞增殖状态的研究

目的和方法：用免疫组化法检测了３０例肝癌的ｈ－ｍｅｔ，ｃ－ｍｙｃ，Ｐ１６和ＣＤＫ４蛋白的表达，旨在了解肝癌细胞的增殖调控与多基因表达异常的关系。结果：结果显示，ｈ－ｍｅｔ，ｃ－ｍｙｃ，Ｐ１６和ＣＤＫ４蛋白在肝癌的表达率分别为５３３％，７２４％，２６７％和６０％。它们之间的表达率有显差异（Ｐ＜００１）。Ｐ１６表达率与ＣＤＫ４的表达间有负向关系；ｈ－ｍｅｔ表达率与ＣＤＫ４之间显正向关系；而ｃ－ｍｙｃ基因在肝癌组织的表达与ＣＤＫ４之间相互独立无明显关系。结论：结果提示Ｐ１６基因表达低下是促进肝癌细胞恶性增长的原因之一     

MDM2与P14ARF在结肠肿瘤中的表达及意义

目的 探讨MDM2和P14ARF（alternative reading frame)在人结肠癌组织中的表达及其意义。方法 用免疫组织化学方法检测36例癌旁正常结肠组织，28例结肠腺瘤及42例结肠癌中二者的表达及其与组织分化程度的关系。结果 MDM2、P14ARF在癌旁正常结肠组织，结肠腺瘤，结肠腺癌中的阳性表达率分别为0、0、21．4％和100％、82．14％、80．95％。MDM2在结肠腺癌中的表达率明显高于癌旁正常结肠组织及腺瘤组织（P＜0．05），P14ARF在结肠腺瘤和结肠腺癌中的表达率均明显低于癌旁正常结肠组织（P＜0．05）。MDM2和P14ARF在不同分化程度结肠癌中的表达率分别为11．1％，24．0％，25．0％和88．9％、92．0％、37．5％。MDM2在不同分化程度结肠癌中的表达无明显差异（P＞0．05），而P14ARF在低分化结肠癌中的表达明显低于高分化和中等分化的结肠癌（P＜0．05）。结论 MDM2和P14ARF在人结肠癌中的表达异常可能与结肠癌的发生发展有关。     

Expression of myc and ras oncogenes in two newly established neuroblastoma cell lines

Summary Two new neuroblastoma cell lines, KG-MH and KM-YH have been established from fresh tumour samples. In vitro growth characteristics are presented together with a karyological analysis. Northern and Southern blot experiments have been performed using molecularly cloned probes for c-myc, N-myc, c-Ha-ras, c-Ki-ras, and N-ras oncogenes. Both cell lines showed expression for N-myc, while c-myc expression was not detected. Cell line KM-YH, with a rather long population doubling time of 78 h, showed additional expression for the three ras genes.     

心功能不全大鼠心肌诱生型一氧化氮合酶基因的表达

目的 探讨心功能不全大鼠心肌一氧化氮合酶（ｍｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ,ＮＯＳ）活性变化的机制。方法 复制容量超负荷心功能不全大鼠模型,用原位核酸分子杂交技术检测心肌诱生型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ,ｉＮＯＳ）ｍＲＮＡ的表达,用免疫组化技术检测心肌ｉＮＯＳ。结果 容量超负荷心功能不全大鼠心肌ｉＮＯＳ基因有达。结论 心功能不全心肌一氧化     

BALB/c小鼠衰老过程中大脑皮质组织基因表达的改变

目的 鉴别和克隆小鼠衰老相关基因，为揭示人体衰老机制提供线索。方法 利用改进逆转录-多聚酶链反应(DDRT-PCR)技术分析了4月龄和24月龄BALB／c小鼠大脑皮质组织中mRNA的差异表达。结果 确定了42个差异表达cDNA片段，在衰老小鼠中表达上调和下调者各21个。其中17个为已知编码蛋白功能的基因片段，12个为已知基因序列但未知功能的基因片段，13个可能为新基因片段。在已知蛋白功能的基因中，与氧化应激、能量产生和蛋白质代谢等相关的基因分别为2个、3个和4个，此外还有参与细胞凋亡、神经退行性变和生长发育调节等基因表达的改变。结论 小鼠衰老可能与机体氧化应激状态、能量产生和蛋白质代谢等的改变有关。     

大鼠心肌梗死后的原癌基因表达

目的本实验旨在探讨心肌梗死后左心室重构的分子生物学机制。方法用地高辛标记的原位杂交方法观察了大面积心肌梗死后存活心肌细胞的原癌基因c-myc。c-fos及c-jun的mRNA水平的动态变化，并用巯甲丙脯酸进行干涉。大鼠随机分为三组：（1）单纯心肌梗死组；（2）梗塞给药组；（3）假手术组。梗塞给药组于手术前3d开始饲以巯甲丙脯酸（2g／L）。结果左室非梗塞区心肌的c-myc，c-fos及c-jun的mRNA水平手术后24h达峰值，c-myc于手术后10d，c-jun于手术后7d恢复到假手术组水平，但c-fos于术后持续高表达。在梗塞给药组，c-myc，c-fos于手术后7d、10d，c-jun于手术后各时间点其mRNA水平达假手术组程度。结论上述基因在非梗塞区心肌均有过量表达，持续时间较长，转换酶抑制剂对其有所抑制。     

WHV/myc转基因小鼠肝癌发生过程中的基因异常

目的探测ＷＨＶ／ｍｙｃ转基因小鼠肝癌发生过程中有关基因在肝脏中的异常表达。方法用原位杂交方法检测ＷＨＶ／ｍｙｃ转基因小鼠肝肿瘤形成的不同阶段,ｃ－ｍｙｃ转染基因、胰岛素样生长因子Ⅱ（ＩＧＦ－Ⅱ）基因ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｆｏｓ和ｃ－Ｈ－ｒａｓ等基因的表达。结果ｃ－ｍｙｃ转染基因和ＩＧＦ－Ⅱ基因在转基因小鼠出生后早期的肝脏中异常表达,随后表达水平即降低至不能测出。上述两基因的表达在肝肿瘤形成期重新出现。ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｆｏｓ和ｃ－Ｈ－ｒａｓ基因在转基因小鼠肝癌发生前肝脏中的表达强度明显高于正常小鼠。结论ｃ－ｍｙｏｔ染基因和ＩＧＦ－Ⅱ基因在小鼠出生后早期和肿瘤形成期的异常表达对肝肿瘤的发生和瘤细胞转化表型的维持可能具有重要意义;在ｃ－ｍｙｃ转染基因表达的“沉默”期,一些癌基因在肝脏中的异常表达对日后肝脏肿瘤的形成可能也具有一定作用。