NF-κB与内耳

核因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)于1986年在B淋巴细胞核提取物中被检出,因其能与免疫球蛋白κ轻链基因的增强子κB序列(5'-GGGACTTTCC-3')特     

喉癌组织细胞核因子κB的表达及意义

目的 :探讨喉癌组织中细胞核因子κB(NF κB)的表达及意义。方法 :应用免疫印迹杂交法测定 2 0例喉癌组织及 10例正常喉黏膜组织的NF κBp6 5蛋白表达水平 ,以及应用凝胶电泳迁移率法测定NF κB的DNA结合活性。结果 :喉癌组织中NF κBp6 5蛋白表达水平及NF κB的DNA结合活性均明显高于喉正常组织 (P <0 .0 5 )。结论 :NF κB是喉癌相关的一种癌蛋白 ,在喉癌的发生和发展中发挥作用。     

鼻息肉中MMP-9和NF-κB的表达研究

目的：研究鼻息肉MMP-9和NF-κB的表达及其意义。方法:应用免疫组化的方法检测正常鼻黏膜和鼻息肉MMP-9和NF-κB的表达，图像分析系统进行半定量。结果:MMP-9在正常对照组中有弱阳性表达，而鼻息肉组的表达显著增强，主要在上皮细胞、炎症细胞、内皮细胞和腺上皮细胞中表达。NF-κB在正常对照组的胞浆呈弱阳性表达，而在鼻息肉的上皮细胞、炎症细胞和间质细胞的细胞核内表达呈强阳性；两种因子表达显著相关。结论:NF-κB和MMP-9的表达可能对鼻息肉的发生和发展有重要作用，而且在鼻息肉中NF-κB可能对MMP-9的表达也有调控作用。     

核因子-kappa B与基质金属蛋白酶-3和基质金属蛋白酶-9在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的:检测鼻咽癌组织中核因子-kappa B(NF-κB)/p65、基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9的表达,探讨鼻咽癌组织中NF-κB/p65、MMP-3、MMP-9的表达与临床意义,以及三者之间的相互关系.方法:运用免疫组织化学方法(SP法)检测鼻咽癌和正常鼻咽部黏膜的活检标本中NF-κB/p65、MMP-3、MMP-9的表达情况,运用λ2检验和Spearman等级相关检验等方法分析其表达与病理分型等临床资料的关系,以及三者之间的相互关系.结果:NF-κB/p65在鼻咽癌中的表达率为78.0%,MMP-3、MMP-9在鼻咽癌中的表达率都为75.6%,与在正常鼻咽部黏膜中的表达差异有统计学意义(P<0.05).NF-κB/p65、MMP-3、MMP-9在鼻咽癌中的表达与淋巴结转移有显著相关性(P<0.05).NF-κB/p65在鼻咽癌中的表达与MMP-3、MMP-9呈正相关,MMP-3和MMP-9之间亦有正相关.结论:NF-κB/p65、MMP-3、MMP-9在鼻咽癌组织中有广泛高表达,并且与淋巴结转移有显著相关性,但和性别、年龄、病理分型、临床分期无明显相关性.NF-κB/p65、MMP-3、MMP-9两两之间均呈正相关,三者在鼻咽癌的致病过程中可能存在协同作用.     

鼻咽癌中EBV LMP1激活NF—κB的实验研究

目的：探讨在鼻咽癌细胞系中ＥＢ病毒潜伏膜蛋白ＬＭＰ１能否激活重要的核转录因子ＮＦ－κＢ,及ＮＦ－κＢ的活化对鼻咽癌细胞猕 表型的影响。方法：我们选用两种鼻咽癌细胞系即有ＬＭＰ１表达的ＣＮＥ－ＬＭＰ１和无ＬＭＰ１表达的ＨＮＥ１,用包含ＮＦ－κＢ结合位点萤虫素酶报道基因共转染的方法及软琼脂集落形成观察两株细胞中的ＮＦ－κＢ的活性。结果：建立稳定表达包含ＮＦ－κＢ结合位点萤虫素酶报道基因的两种细胞株。     

表皮生长因子受体在鼻咽癌中的表达及意义

目的探讨表皮生长因子受体与细胞增殖、转化的关系。方法采用免疫组化ABC法检测24例正常鼻咽黏膜上皮及60例鼻咽癌组织表皮生长因子受体的表达情况。结果表皮生长因子受体在鼻咽癌组织中呈异质性表达,其阳性率明显高于正常黏膜组织(P<0.05),且表达情况与颈淋巴结转移及预后存在相关性。结论表皮生长因子受体在鼻咽癌组织中的表达水平可作为评估鼻咽癌细胞增殖状态、颈淋巴结转移情况及病人预后的一项参考指标。     

EGFR及其信号途径与肿瘤放射敏感性

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)已被表明与放射耐受性有关.作为治疗靶基因,通过对EGFR的抑制可增加放射敏感性,提高放射治疗的效果,为肿瘤的综合治疗又提供了一条途径.本文分别阐述了EGFR表达水平与放射敏感性的关系,EGFR介导的信号转导途径在放射敏感性中的作用,以及在肿瘤中应用EGFR抑制剂增加放射敏感性及抑制剂增敏与EGFR表达的关系.     

环氧合酶-2及表皮生长因子受体在鼻咽癌中的表达及相关性

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)、表皮生长因子受体(EGFR)在鼻咽癌患者组织及血清中的表达及二者的相关性。方法 随机收集鼻咽癌患者66例,同时收集慢性鼻炎60例及健康人30例,应用免疫组化法和ELISA法分别检测3组人群的鼻黏膜组织及血清中EGFR的含量,对两组数据进行统计分析及相关性探讨。结果 鼻咽癌组、慢性鼻炎组及健康对照组COX-2阳性表达率分别为87.9%、73.3%、43.3%,EGFR阳性表达率分别为84.8%、78.3%、50%,两种蛋白在鼻咽癌组织中的表达均显著高于对照组;鼻咽癌患者血清COX-2、EGFR水平均高于健康人(P=0.022,P=0.017)血清中表达水平;COX-2、EGFR的表达与鼻咽癌临床分期有关,并且两者在组织中的表达呈正相关(r=0.558,P=0.021)。结论 COX-2、EGFR在鼻咽癌组织及血清中均有较高表达,表达情况与临床分期显著相关,并且二者表达情况呈正相关性,COX-2及EGFR在鼻咽癌的发生与发展过程中起重要作用。     

shRNA-hIAP2增强CNE-1鼻咽癌细胞对放射敏感性的实验研究

目的构建人凋亡抑制蛋白（ human inhibitor of apoptosis protein2, hlAP-2 ）的shRNA,靶向抑制hlAP-2基因联合放疗,探讨其对CNEl鼻咽癌细胞株放射敏感性的影响。方法首先采用MTT法确定最佳放射剂量;再构建4条hlAP-2．shRNA沉默片段并用脂质体法转染CNEl细胞,最后采用实时荧光定量PCR（Q—PCR）和免疫印迹法（Westernblot,WB）筛选出最佳沉默shRNA序列;用最佳沉默shRNA序列转染CNEl细胞,分别设置转染放射线照射组与未转染放射线照射组,采用实时定量PCR和WB检测hlAP．2的基因及其蛋白表达;流式细胞术测细胞凋亡,transwell测细胞侵袭能力。结果MTr法明确4Gv为最佳放射剂量;Q-PCR和WB检测结果显示4条hlAP-2-shRNA均能有效抑制hIAP-2mRNA及蛋白表达（P〈0．05）,以hIAP-2-shRNA2沉默效果最显著（P〈0．05）;Q—PCR和WB检测结果显示转染hlAP-2-shRNA2后照射组与未转染hlAP-2-shRNA2照射组的CNEl细胞中hlAP-2基因与蛋白表达比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）;流式细胞术检测结果显示转染hIAP-2-shRNA2后照射组比未转染hlAP-2-shRNA2照射组凋亡率差异具有统计学意义（P〈0．05）;transwell检测结果显示转染hIAP-2-shR-NA2后照射组与未转染hIAP-2-shRNA2照射组侵袭能力差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论转染hIAP-2基因沉默后放射可增加鼻咽癌细胞凋亡率,降低其侵袭能力,能够起到放疗增敏作用。     

内毒素刺激前后鼻黏膜上皮细胞中Toll样受体4 mRNA及核因子κB p50亚型mRNA的表达及意义

目的探讨内毒素(即脂多糖,lipopolysaccharide,LPS)刺激前后 Toll 样受体4(Tolllike receptor 4,TLR4)mRNA 和核因子 kB(nuclear factor kB,NF-kB)p50亚型 mRNA 在正常鼻黏膜上皮细胞中的表达及意义。方法在15例成人鼻中隔偏曲患者(无鼻-鼻窦炎)矫正术中,取正常中鼻甲外侧黏膜组织各2份行组织外植块培养,其中15份加 LPS 刺激培养为 LPS 组,另外为培养组。应用 HE 染色光镜下观察鼻黏膜组织上皮细胞的病理形态学改变;应用核酸分子原位杂交技术检测离体培养正常鼻黏膜组织上皮细胞中 TLR4 mRNA 和 NF-kB p50 mRNA 的表达情况。结果①LPS刺激后,光镜下见正常鼻黏膜上皮细胞纤毛有粘连成束、胞体增大的病理形态学改变;②LPS 组 TLR4mRNA 表达明显高于培养组;LPS 组表达阳性区平均吸光度为1.283±0.027,培养组为0.538±0.038,二组间差异有统计学意义(t=1.761,P<0.05);③NF-kB p50 mRNA 在 LPS 组均出现阳性表达,而培养组阳性率仅为26.7%。LPS 组明显高表达于培养组,且以胞核表达为主,LPS 组表达阳性区平均吸光度为1.668±0.037;培养组为0.372±0.052,二组间差异有统计学意义(t=2.624,P<0.01)。结论 LPS 能通过 TLR4活化 NF-kB p50,进而激活正常鼻黏膜上皮细胞。这可能在 LPS 对鼻黏膜上皮细胞激活和损伤效应中具有一定的作用。     

酪氨酸激酶受体B在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的：探讨酪氨酸激酶受体B（TrkB）及其配体脑源性神经营养因子（BDNF）的表达水平在鼻咽癌（NPC）发生与发展中的作用。方法：用免疫组织化学染色法检测TrkB及其配体BDNF在NPC患者活检切片中的表达。结果：TrkB和BDNF在NPC组中的阳性表达率分别为82．5％（47／57）和52．6％（30／57）,均高于鼻咽炎组（均P〈0．05）;TrkB在NPC组中的表达水平与肿瘤的TNM分期及临床分期有关,在T3＋T4、Ⅲ＋Ⅳ期比在T1＋T2、Ⅰ＋Ⅱ期高（均P〈0．05）;NPC伴颈部淋巴结转移组较非转移组的表达高（P〈0．05）;TrkB和BDNF的表达在NPC组织学类型之间差异无统计学意义（P〉0．05）;BDNF的表达与NPC TNM分期、临床分期及有无颈部淋巴结转移无关（均P〉0．05）;NPC组中TrkB与BDNF的表达无相关性（r=0．049,P〉0．05）。结论：TrkB及其配体BDNF表达上调对NPC的发生具有重要作用,NPC组织中TrkB及其配体BDNF蛋白表达水平可作为预测NPC发生及浸润转移的重要指标。     

变应性鼻炎鼻黏膜组织中NF-κB p50表达及其与DNA结合活性的研究

目的:探讨核转录因子-κB亚单位p50(NF-κB p50)在季节性变应性鼻黏膜中的表达及活性状态.方法:采用免疫组织化学方法检测16例季节性变应性鼻炎(SAR组)下鼻甲黏膜组织中NF-κB p50的表达,其中6例为非发作期患者,10例为发作期患者;并与10例鼻中隔偏曲患者下鼻甲黏膜进行对照.采用电泳迁移率滞后分析(EMSA)检测鼻黏膜组织中核蛋白提取物与特异性NF-κB探针的结合活性.结果:NF-κB p50在SAR组及对照组中均有表达,p50阳性表达主要分布在2组鼻黏膜的上皮细胞、炎性细胞、腺上皮细胞及血管内皮细胞的胞质和部分胞核中;SAR组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率发作期是(41.83 ±4.43)%,非发作期是(37.19±3.93)%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05).对照组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率仅(8.89±1.32)%.SAR组(包括发作期和非发作期)与对照组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率间比较差异有统计学意义(P<0.01);SAR组NF-κB的DNA结合的32P标记电泳带密度扫描值为32.14±8.73,与对照组(11.12±3.42)比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:在对照组鼻黏膜中保持低水平的表达,在SAR鼻黏膜中表达显著增高,且其与DNA-蛋白结合活性增高,提示NF-κB p50可能参与维持鼻黏膜的生理功能,并在SAR鼻黏膜持续慢性炎症反应中起重要作用.     

EGCG对鼻咽癌细胞增殖抑制和凋亡诱导时NF-κB和caspase-3的表达变化

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate,EGCG）作用于鼻咽癌CNE-2细胞后,对转录因子NF-κB和凋亡效应酶caspase-3表达的影响,以及这两个基因的表达与鼻咽癌细胞凋亡和增殖的关联性。方法体外培养鼻咽癌细胞CNE-2,MTT法检测细胞增殖的抑制作用;Hoechst染色检测细胞凋亡;流式细胞仪分析细胞周期的改变。RT-PCR检测NF-κB和caspase-3的表达。结果EGCG能明显的抑制鼻咽癌细胞增殖,诱导其凋亡,并表现为浓度依赖性：流式分析显示,EGCG干预鼻咽癌细胞CNE-2在48小时后,细胞被阻滞于G1期。80mg/L EGCG处理鼻咽癌细胞24小时和48小时后,均能下调NF-κB表达,上调caspase-3表达。结论EGCG可能通过抑制NF-κB和诱导caspase-3的表达来发挥其抗鼻咽癌细胞的生物学作用。     

核转录因子κB p65在喉癌中的表达及临床意义

目的：探讨核转录因子κBp65（NF-κBp65）在喉癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学及原位杂交方法,检测48例喉癌组织和20例正常喉黏膜组织中NF-κBp65的表达水平及与肿瘤生物学行为间的关系。结果：①NF-κBp65的表达在喉癌与正常喉黏膜组织间的差异有统计学意义（P〈0.05）。②NF-κBp65的高表达与颈淋巴结转移和临床分期有相关性,而与肿瘤部位及病理分化无相关性。结论：NF-κBp65是判断喉癌预后极具价值的指标。     

核因子κB在分泌性中耳炎动物模型鼓室黏膜中的表达

目的检测核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)在分泌性中耳炎(secretory otitis media,SOM)动物模型鼓室黏膜中的表达,探讨NF-κB活化在SOM发病机制中的作用。方法应用灭活肺炎链球菌注入豚鼠中耳腔,制作SOM动物模型,采用免疫组织化学的方法检测致病鼠鼓室黏膜上皮在注入细菌后6h、1d、3d、7d及14d后NF-κBp65、TNF-α和IL-1β的表达及其关系。结果SOM动物模型的鼓室黏膜上皮中NF-κBp65在术后6h就有表达,24小时表达最强,随后表达明显下降,TNF-α和IL-1β的表达也出现相应波动。结论灭活肺炎链球菌致SOM的早期,NF-κB即被激活,在鼓室黏膜中出现过度表达,并与SOM发病中的重要致炎因子TNF-α和IL-1β的产生相关,提示NF-κB与SOM发病机制密切相关。     

NF-κB抑制剂对慢性鼻咽炎豚鼠鼻咽黏膜炎症细胞增殖与凋亡活性的影响

目的 观察核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)特异性抑制剂吡咯二硫代氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对慢性鼻咽炎豚鼠鼻咽黏膜组织浸润炎症细胞增殖与凋亡活性的影响,探讨慢性鼻咽炎在鼻咽癌前病变发生与发展过程中的地位.方法 利用细菌病毒联合法建立豚鼠慢性鼻咽炎模型,然后将模型鼠随机分为慢性鼻咽炎对照组和PDTC干预组,并平行设置正常对照组.经药物处理后,取各组动物鼻咽黏膜组织观察病理组织学改变,免疫组化法检测鼻咽黏膜NF-κB p65和增殖细胞核抗原(PCNA)表达活性,末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术检测浸润炎症细胞凋亡指数.结果 模型组鼻咽黏膜组织浸润炎性细胞NF-κB p65表达活性明显高干正常对照组(P<0.01),PDTC干预组则明显低于模型组;模型组浸润炎症细胞凋亡时间延长、增殖活性升高,PDTC干预组炎症细胞凋亡活性、增殖水平与正常对照组的差异无统计学意义.结论 NF-κB抑制剂PDTC对慢性鼻咽炎黏膜组织中浸润炎症细胞的增殖活性显示明显抑制效应,其机制可能是通过促进靶细胞凋亡活性而发挥效应,提示鼻咽炎有演变为鼻咽癌前病变的潜在风险.     

喉癌EGFR和PCNA表达及DNA含量的研究

研究喉鳞癌中表皮生长因子受体、增殖细胞核抗原的表达和ＤＮＡ含量,分析各指标间的相关性及与喉癌临床生物学行为和预后的关系。方法：用免疫组化ＳＰ法和图像分析仪检测正常喉粘膜、喉鳞癌的ＥＧＦＲ、ＰＣＮＡ和ＤＮＡ指数,结合临床资料进行分析。结果：喉鳞癌的ＥＧＦＲ的阳性表达率为５４．８％,与正常喉组织的差异有统计学意义,但ＥＧＦＲ的阳性表达与喉癌的病理分级和５年生丰率无显著相关,而ＰＣＮＡ阳性表达和ＤＩ则随     

VEGF、EGFR蛋白表达与鼻咽癌浸润和转移

目的：探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）在鼻咽癌组织中的蛋白表达及意义。方法：用免疫组化S P法检测了38例鼻咽癌和43例鼻咽炎症黏膜组织中VEGF、EGFR蛋白的表达。结果： VEGF、EGFR蛋白在鼻咽癌组织中的表达率明显高于鼻咽炎症黏膜组织中的阳性表达率（P＜0.05）。VEGF、EGFR蛋白表达与鼻咽癌临床分期有关,Ⅲ～Ⅳ期明显高于Ⅰ～Ⅱ期（P＜0.05)。VEGF、EGFR蛋白表达与肿瘤的浸润转移有关,即有颈淋巴结转移的鼻咽癌中VEGF、EGFR表达率明显高于无颈淋巴结转移者（P＜0.05)。结论：VEGF、EGFR蛋白表达与鼻咽癌浸润、转移有关,检测VEGF、EGFR蛋白可为了解鼻咽癌生物学特性及判断其预后提供有价值的指标。     

核转录因子-κB与喉癌相关性

喉癌是耳鼻咽喉头颈外科最常见的恶性肿瘤之一.核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)是具有多向性调节作用的核转录因子,可调控多种基因的转录表达,是一种重要的核转录因子.它作为信号传导途径的枢纽,与喉癌的发生、发展及细胞凋亡的调节等有着密切联系.本文就NF-κB与喉癌关系的研究进展进行...     

喉癌p53蛋白和EGFR的免疫组织化学检测及意义

应用ＬＳＡＢ免疫组织化学染色法，对３２例原发喉鳞状细胞和８例喉正常上皮组织中的ｐ５３蛋白和表皮生长因子受体做定位和定量研究。结果表明：ｐ５３蛋白在喉癌组织中的表达位于细胞核内，ＥＧＦＲ的表达位于胞浆和核膜；喉癌组织中这二种癌基因表达的蛋白阳性率，ｐ５３为５９．４％，ＥＧＦＲ为６８．８％，ＥＧＦＲ在喉癌组织中的阳性率和强度与病理分级和临床预后显著性相关，ｐ５３在喉癌早期病例中表达的阳怀率明显增高。