补肾与活血复方调节老年鼠T细胞凋亡的对比研究

目的：研究老年肾虚Ｔ细胞功能减退的机理以及补肾延缓衰老的免疫学基础。方法：采用电镜，ＤＮＡ凝胶电泳及ＴＵＮＥＬ标记的流式细胞检测技术，对各组大鼠抗ＣＤ３单抗激活诱导的Ｔ细胞凋亡进行定性，定量分析。结果：老年组激活诱导的Ｔ细胞凋亡百分率为４７．０％，年轻组为２２．２％；补肾组为３１．２％，明显低于老年组。     

补肾,活血复方对老年大鼠T细胞凋亡相关基因Fas,FasL？…

目的：探讨补肾复方下调老年大鼠Ｔ细胞凋亡的分子机理。方法：采用ＲＮＡ酶保护技术,测定各组Ｆａｓ、ＦａｓＬ基因的ｍＲＮＡ水平,并以ＧＡＰＤＨ为内对照基因,对各组Ｆａｓ、ＦａｓＬ基因的转录进行半定量分析。结果：老年对照组Ｆａｓ／ＧＡＰＤＨ、ＦａｓＬ／ＧＡＰＤＨ的积分光密度值分别为０．８１±０．１７、０．８４±０．１２;年轻对照组分别为０．３６±０．１６、０．２６±０．１２。两组比较差异有显著性,活血复     

健脾补肾方对615小鼠前胃癌术后复发瘤细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

目的：研究健脾补肾方对小鼠前胃癌术后复发瘤细胞凋亡和线粒体膜电位的影响。方法：以615小鼠前胃癌术后模型为对象,应用健脾补肾方,观察抑制术后复发的作用,应用流式细胞仪检测复发瘤的细胞凋亡的水平和线粒体膜电位。结果：与模型组比较,健脾补肾组复发瘤瘤重显著降低,复发瘤抑制率为71.07%;复发瘤凋亡指数显著增高：复发瘤细胞线粒体膜电位（MMP）显著降低。以上各项指标均P〈0.01。结论：健脾补肾方对术后局部肿瘤复发有明显的抑制作用,导致复发瘤细胞线粒体膜电位降低,从而诱导肿瘤细胞凋亡。     

补肾、活血类复方对老年大鼠T细胞凋亡相关基因表达调控模式的比较研究

目的：探讨两个补肾复方（右归饮和补肾益寿胶囊）及活血复方下调老年大鼠T细胞凋亡的基因调控模式。方法：用TUNEL标记的流式细胞检测和荧光实时定量RT－PCR技术，研究老年大鼠和年轻大鼠T淋巴细胞抗凋亡和促凋亡基因（Fas、FasL、Bcl-2、Bax、TNFR1、TNFR2)的表达以及凋亡级联反应中半胱氨酸蛋白酶（如Caspase8和Caspase3)活性的差异，及比较两个补肾方和活血复方对老年大鼠T细胞抗凋亡和促凋亡基因表达的调控以及对Caspase活性的影响。结果：两个补肾复方均能够有效地降低老年大鼠T细胞的过度凋亡，下调FasL及TNFR1基因的转录和Caspase8及Caspase3的活性。而活血复方对于T细胞的过度凋亡无显著作用。结论：激活诱导的T细胞过量凋亡与肾虚密切相关，两个补肾复方均可下调促凋亡基因FasL和TNFR1的转录，从而抑制老年大鼠过度的T细胞凋亡，是补肾法所特有的对老年T细胞凋亡相关基因的调控模式。     

前健脾后补肾对力竭运动大鼠肾功能和肾细胞凋亡的影响

目的研究中药前健脾后补肾对力竭运动大鼠肾功能的影响及其作用机制。方法将24只雄性SD大鼠分为安静对照组、力竭运动组、力竭运动前健脾后补肾组,力竭运动后24小时取材,检测血清尿素氮、肌酐和尿蛋白含量,HE染色观察肾组织细胞,原位末端标记法(TUNEL)检测肾凋亡细胞。结果力竭运动前健脾后补肾组比力竭运动组的血清尿素氮、肌酐、尿蛋白及凋亡指数低(P<0.05),无类似于力竭运动组的肾组织坏死现象。结论力竭运动造成的肾功能降低可能与肾细胞凋亡、病理损害有关,前健脾后补肾能减轻这些变化,起到一定的保护肾功能作用。     

健脾清肠补肾方药物血清对破骨细胞凋亡途径的影响

目的 观察健脾清肠补肾方药物血清对成熟破骨细胞凋亡的影响,探讨其可能作用机制.方法 通过100 ng/mL核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)和10 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)共同诱导小鼠单核细胞RAW264.7细胞株分化为破骨细胞,采用TRAP特异性染色进行鉴定.制备低、中、高剂量健脾清肠补肾...     

补肾、活血复方对老年大鼠T细胞凋亡相关基因Fas、FasL转录的影响

目的 :探讨补肾复方下调老年大鼠T细胞凋亡的分子机理。方法 :采用RNA酶保护技术 ,测定各组Fas、FasL基因的mRNA水平 ,并以GAPDH为内对照基因 ,对各组Fas、FasL基因的转录进行半定量分析。结果 :老年对照组Fas/GAPDH、FasL/GAPDH的积分光密度值分别为 0 81± 0 17、0 84± 0 12 ;年轻对照组分别为 0 36± 0 16、0 2 6± 0 12。两组比较差异有显著性。活血复方组Fas/GAPDH、FasL/GAPDH的积分光密度值分别为 0 99± 0 36、0 94± 0 33,与老年对照组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5) ;两个补肾组Fas/GAPDH为 0 78± 0 11和 0 78± 0 2 0 ,与老年对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5) ;而两个补肾组FasL/GAPDH的积分光密度值为 0 71± 0 2 1和 0 68± 0 15,低于老年对照组 (P <0 0 1)。结论 :补肾复方对T细胞FasL基因的转录具有一定的负调控作用 ,这是补肾复方下调老年大鼠T细胞过度凋亡的分子机理之一     

补肾复方调控更年期大鼠卵巢功能的实验研究

目的　通过对更年期大鼠卵巢血管生成、颗粒细胞凋亡因子及抑制基因表达的观察 ,探讨补肾复方对更年期女性卵巢功能的调节作用。方法　采用 15～ 18个月龄的SD雌性大鼠 ,按体质量和阴道脱落细胞涂片随机分为更年组、补肾大剂量组、补肾小剂量组 ,另设青年对照组。采用免疫组化等方法研究各组大鼠卵巢形态学、VEGF、Caspase - 3和Bcl- 2蛋白表达的影响。结果　补肾复方大小剂量组均可不同程度促进卵泡生长 ,增加VEGF ,促进卵巢血管生成 ,增强Bcl- 2表达 ,降低颗粒细胞Caspase- 3含量及分布。结论　补肾复方能促进更年期卵巢的血管生成 ,抑制生殖器官的细胞凋亡 ,对卵泡发育不良、颗粒细胞闭锁具有保护作用。     

青黄散联合健脾补肾中药对骨髓增生异常综合征患者活化T细胞的影响

目的 探讨青黄散联合健脾补肾中药对骨髓增生异常综合征（MDS）患者活化T细胞的影响。方法 24例MDS患者用青黄散联合健脾补肾中药治疗9个月前后,流式细胞仪检测外周血T细胞CD3+CD28+、CD3+CD28+CD4+CD8－、CD3+CD28+CD8+CD4－、CD3+CD25+、CD3+CD25+CD4+CD8－、CD3+CD25+CD8+CD4－、CD3+DR+、CD3+DR+CD4+CD8－、CD3+DR+CD8+CD4－的百分数与绝对值,分析有效组及无效组上述指标治疗前后的差异变化。结果 有效组（13例）治疗后CD3+CD28+、CD3+CD28+CD4+CD8－、CD3+CD28+CD8+CD4－绝对值较治疗前明显下降（P<0.05）,无效组（11例）此3项指标百分数也明显下降（P<0.05）。有效组治疗后CD3+CD25+、CD3+CD25+CD4+CD8－百分数与绝对值较治疗前明显下降（P<0.05）,无效组此2项指标治疗前后比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 青黄散联合健脾补肾中药可通过降低MDS患者体内共刺激分子的表达引起T细胞第二信号缺失使T细胞处于失能状态,减少T细胞（特别是Th）细胞的活化,使MDS亢进的免疫状态得以抑制,避免正常造血细胞受到免疫攻击而致凋亡。     

补肾解毒方与健脾解毒方对慢性乙肝患者不同阶段的T淋巴细胞功能影响的研究

目的:比较补肾解毒方和健脾解毒方对乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)慢性感染患者在不同免疫状态下外周血T淋巴细胞(Ts)功能影响。方法:选取本院感染科2013年9月至2014年5月门诊慢性HBV感染患者40例,据患者不同免疫状态分为清除组和耐受组,另选本院健康职工10例作为对照组。采用大鼠补肾解毒药物血浆和健脾解毒药物血浆进行干预。以T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD28+分子的表达及干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)的水平作为研究指标,判断干预对外周血T淋巴细胞(Ts)功能影响情况。结果:各组健脾组和补肾组血浆在干预后CD3+、CD4+、CD8+、CD28+的表达均显著升高,耐受组中P<0.05,补肾组血浆干预后CD28+及CD8+分子显著高于健脾组,P<0.05;两种药物血浆分别干预后,CD28+分子表达均显著高于清除组同期,P<0.05。结论:健脾解毒法和补肾解毒法均能促进慢性HBV感染患者T细胞功能的恢复,免疫耐受期可能是中医药治疗的一个重要时期,补肾解毒药物效果优于健脾毒药物,需要分子实验和临床实验提供更多循证依据。     

局部埋耳针治疗顽固性足跟痛123例

目的：探讨补肾药对免疫系统的作用方式。方法：用３类复方对皮质酮大鼠分别在７天与１４天实验里，进行对神经内分泌及免疫系统不同作用方式的研究。结果：无论７天或１４天，健脾组的免疫系统均得到保护，而神经内分泌系统却未有明显作用，说明健脾药是对免疫系统的直接作用；补肾组虽７天实验尚未见对各系统有何影响，至１４天实验才显示对神经内分泌免疫系统的全面作用。结论：补肾药是先作用于神经内分泌系统，而后才影响于免疫     

补肾法延缓免疫衰老的临床与实验研究

目的：观察补肾法延缓免疫衰老的临床疗效及相应的实验研究。方法：老年人22对（44名），采用随机分组，双盲给药（补方即补肾益寿胶囊和安慰剂）；实验研究则比较两个补肾方（右归饮和补肾益寿胶囊）和活血方（桃红四物汤）对老年大鼠T细胞凋亡及Fas、FasL基因表达的调控作用。结果：临床结果显示补肾组T细胞凋亡率比安慰剂组明显降低（P＜0．01），FasL基因表达亦明显降低（P＜0．05）。动物实验显示两个补肾方组老年大鼠T细胞凋亡均明显降低（P＜0．05），FasL基因表达亦明显降低（P＜0．01），而活血方组均无变化。结论：补肾法对老年人与老年大鼠T细胞FasL基因的转录具有负调控作用。这是补肾法下调老年人与老年大鼠T细胞过度凋亡的分子机理之一。     

运脾益肾、化瘀解毒法逆转CAG癌前病变的临床研究

目的:通过观察据运脾益肾、化瘀解毒法组方的芪莲舒痞方(QLSP)治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变的临床疗效,探讨CAG癌前病变的关键病机。方法:筛选72例CAG癌前病变患者,按数字表法随机分为芪莲舒痞组36例,胃复春对照组36例,观察综合疗效、HP根除率、胃镜及病理学疗效。结果:QLSP组总有效率88.9%,胃复春组总有效率63.9%,两组差异显著(P<0.05);QLSP组HP根除率72%,胃复春组43.5%,两组差异显著(P<0.05);QLSP组胃镜及病理学总有效率86.1%;胃复春组61.1%,两组比较有统计学差异(P<0.05);两组病理积分均有明显下降,QLSP组下降更为显著(P<0.05)。结论:芪莲舒痞方治疗CAG癌前病变疗效显著,提示脾滞肾虚,瘀毒内蕴是CAG癌前病变的关键病机,运脾益肾、化瘀解毒是治疗CAG癌前病变的有效方法。     

补肾健脾三方对哮喘大鼠糖皮质激素受体及皮质酮的影响

目的：探讨补肾健脾方龟芪散、补肾方补肾定喘汤、健脾方加味六君子汤等扶正三方对连续激发哮喘的大鼠肺组织糖皮质激素受体（ＧＣＲ）及血浆皮质酮水平的调节作用。方法：将给予扶正三方和必可酮的大鼠列为治疗组，哮喘模型大鼠列为对照组，采用放射配基结合分析和放射竞争性蛋白结合分析法，比较观察药物对连续激发哮喘的大鼠肺组织ＧＣＲ及血浆皮质酮水平的影响。结果：哮喘激发后肺组织胞浆ＧＣＲ的结合位点数（ＲＴ）值逐日下降，血浆皮质酮水平降低。激发第７天，扶正三方可显著上调ＧＣＲ的ＲＴ值（Ｐ＜００５），并使血浆皮质酮水平明显上升（均Ｐ＜００５）。结论：扶正三方能提高哮喘大鼠肺组织的ＧＣＲ的ＲＴ值，并提高其血浆皮质酮水平     

补肾健脾三方对哮喘大鼠糖皮质激素受体及皮质酮的和 …

目的：探讨补肾健脾方龟芪散、补肾方补肾定喘汤、健脾方加味六群子汤等扶正三方对连续激发哮喘的大鼠肺组织糖皮质激素受体（ＧＣＲ）及血浆皮质酮水平的调节作用．方法：将给予扶正三方和必可酮的大鼠列为治疗组,哮喘模型大鼠列为对照组,采用放射配基结合分析和放射竞争性蛋白结构分析法,比较观察药物对连续激发哮喘的大鼠肺组织ＧＣＲ及血浆皮质酮水平的影响。结果：哮喘发后肺组织胞浆ＧＣＲ的结合位点数（ＲＴ）值逐日下降,     

补肾健脾活血三类复方对下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴及CRF基因表达的影响

为从分子水平来阐明药物对肾阳虚证的主要调节点。采用逆转录多聚酶链反应化学发光定量法、放射免疫及细胞免疫技术，观察补肾，健脾，活血三类复方分别对下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺轴受抑制模型的下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子ｍＲＮＡ表达，神经内分泌和免疫功能的影响。     

补肾方对去卵巢大鼠学习记忆的调整作用

目的　探讨补肾方对去卵巢大鼠学习记忆的调整作用 ,为中医“肾”与“智”的关系及补肾治疗阿尔茨海默病 ( Alzheimer's disease,AD)提供实验基础。方法　将雌性 SD大鼠 4 0只 ,随机分成卵巢切除组、假手术组、卵巢切除 +补肾方治疗高、低剂量组。治疗 12周 ,测定各组动物血清雌二醇 ( E2 )、血清钙含量 ;Y -电迷宫检测学习记忆能力 ;测定海马组织乙酰胆碱 ( Ach)含量、乙酰胆碱酯酶 ( Ach E)活性 ;HE染色观察海马组织形态学变化。结果去卵巢 18周 ,大鼠学习记忆力明显下降 ;海马组织 Ach含量下降 ;海马锥体细胞层、分子层、多形细胞层细胞浓缩 ,出现大小不同空泡 ,锥体细胞顶树突消失 ,细胞排列紊乱 ,嗜银染色可见神经纤维增粗 ,大脑皮质颞叶出现老年斑。补肾方能提高血清 E2 、血清钙水平 ( P<0 .0 5 ) ,明显提高学习记忆成绩 ,并能提高海马组织 Ach含量及 Ach E活性 ( P<0 .0 5 ) ,对海马神经元的变性具有明显的改善作用。结论　补肾方对雌激素缺乏所致的学习记忆能力下降具有明显的改善作用 ,其机制可能是通过提高血清 E2 水平 ,调节 Ca,P代谢 ,从而提高中枢胆碱能神经系统功能实现的