鼠疫PCR技术的研究进展

多聚酶链式反应（ＰＣＲ），是近年发展起来的一种体外扩增特异ＤＮＡ片段的技术。借助ＰＣＲ，可在几个小时内，将ＤＮＡ序列扩增２×１０５～２×１０６倍［１］。需要扩增的ＤＮＡ样品可以是纯净的，也可以是多种生物物质的异常复杂的混合物的一小部分，这种ＤＮＡ可以...     

定量聚合酶链反应检测血清乙型肝炎病毒DNA及其意义

采用定量ＰＣＲ技术检测了１４０例病毒性肝炎患者及３１例ＨＢｓＡｇ携带者血清乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ基因含量。结果显示１２３例乙型肝炎患者及３１例ＨＢｓＡｇ携带者血清ＨＢＶＤＮＡ基因含量范围在１０１至１０９拷贝／微升，１７例其它类型肝炎及３０例健康正常人均未检出ＨＢＶＤＮＡ；与定性ＰＣＲ及分子斑点杂交检测比较，定量ＰＣＲ的灵敏度更高。该方法是一种快速、敏感、特异的定量ＰＣＲ技术，可用于乙型肝炎的临床诊断和实验研究。     

淡色库蚊和缺乏库蚊基因组多态性DNA的研究

本文应用随机引物扩增多态性ＤＮＡ聚合酶链反应技术（ＲＡＰＤ－ＰＣＲ）筛选出３种引物，对淡色库蚊，致乏库蚊的细胞基因组ＤＮＡ进行扩增，分别扩增出不同条带状数和分子大小的多态ＤＮＡ图谱，两种库蚊细胞的基因组ＤＮＡ扩增产物除了有相同分子大小的ＤＮＡ带外，还有一半条带为各自独特的条带，用淡色库蚊成蚊作ＲＡＰＤ－ＰＣＲ的扩增带与相应的细胞株产生的主要条带相符，实验结果表明，此技术方法简便，快速，精确，可用于     

PCR检测乙型肝炎患者血清HBV DNA

ＰＣＲ检测乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ湖南省儿童医院（４１０００７）李梨平湖南中医学院第一附属医院（４１０００７）王伟华本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术直接检测病毒性肝炎患者血清中的ＨＢＶＤＮＡ，以探讨ＰＣＲ技术在ＨＢＶ感染诊断中的应用以及ＨＢＶＤ...     

多聚酶链反应技术及其临床应用

多聚酶链反应技术及其临床应用江西省九江市传染病医院（江西３３２０００）魏孟贵，陈春晖１多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术原理分子探针技术相当敏感，可以测到Ｐｇ水平；但是，最近发展起来的ＰＣＲ更为敏感，可以使ＤＮＡ检测的灵敏度达到Ｆｇ水平。ＰＣＲ扩增ＤＮＡ的过...     

PCR技术在卫生微生物检测中的应用

ＰＣＲ技术在卫生微生物检测中的应用叶怀庄，吴丽丽浙江医科大学公卫学院卫生检测中心杭州多聚酶链式反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）［１］是近年来分子生物学领域中一项具有革命性的技术突破，是基于天然ＤＮＡ复制的规律而设计的一种...     

用巢式PCR技术从cDNA文库中快速分离人类新基因5’末端

为了快速获得人类新基因的全长ｃＤＮＡ序列，设计了基因特异性引物和载体特异性引物进行巢式ＰＣＲ扩增，成功地从人脑ｃＤＮＡ文库中快速分离出Ｍ６ｂ１基因５’末端而获得全长ｃＤＮＡ。推测该基因很可能是某种神经系统遗传病的致病基因。因此，巢式ＰＣＲ技术是一种快速灵敏、准确有效的从ｃＤＮＡ文库中分离新基因５’末端乃至全长基因的方法。     

土拉弗朗西斯氏菌PCR—EIA检测技术的研究

目的：建立操作简便、结果客观的微孔板杂交－酶联显色检测土拉弗朗西斯拉菌ＰＣＲ产物的技术。方法；将ＰＣＲ产物或产物的克隆作为捕获探针包被聚乙烯微孔板，ＰＣＲ引物５‘末端生物素标记，扩增后用作探针杂交，通过比较影响微孔板杂交的包被，杂交和显色等因素，建立ＰＣＲ－ＥＩＡ技术。结果：通过比较包被缓冲液发现镁离子及其离子强度是影响ＤＮＡ包被的重要；包被的ＤＮＡ以线型质粒较佳，每孔包被３００ｎｇ左右的ＤＮＡ包     

聚合酶链式反应技术在肺科中的应用

聚合酶链式反应技术在肺科中的应用山东省潍坊市人民医院（２６１０４１）王连云聚合酶链式反应（ＰＣＲ）是近年发展起来的一种特定ＤＮＡ片段体外定向扩增法，已渗透到生命科学的各个领域。这种方法需时短，操作简单，能在普通实验室中完成，结果可靠。因此，ＰＣＲ技术...     

HCV RNA检测技术的某些进展

本文就近年内ＨＣＶ ＲＮＡ检测技术的某些进展，包括半套式ＰＣＲ，单管单酶ＰＣＲ，竞争ＰＣＲ，分枝链ＤＮＡ信号增和原位ＰＣＲ等各种方法的原理和特点作了评述。     

前景广阔的基因治疗

１９７６年，美籍华裔科学家简悦威采用液相ＤＮＡ分子杂交技术来诊断α－地中海贫血，从而拉开了基因诊断的帷幕。基因诊断，是指用现代生物学技术，对人体内的基因进行检测，从而直接评估人体疾病及健康状况的方法。其具体方法经历了好几个阶段，简悦威采用的是最早的方法。现在临床广泛应用的是聚合酶链反应，又称体外基因扩增方法，英文缩写是ＰＣＲ。这种技术的建立和迅速发展将基因诊断水平提高到了一个崭新的阶段。ＰＣＲ其实是一种无细胞分子克隆，它模仿体内ＤＮＡ反复复制的过程，用ＤＮＡ聚合酶在体外合成ＤＮＡ。在实验室的一支…     

卡氏肺囊虫基因诊断方法的应用研究进展

卡氏肺囊虫是引起免疫抑制患者卡氏肺囊虫肺炎的重要条件致病菌。以ＰＣＲ为基础的基因诊断方法显示了广阔的应用前景。已用于Ｐｃ－ＰＣＲ的支基因有核５ＳｒＤＮＡ，１８ＳｒＤＮＡ，ＩＴＳ，ｍｔＬＳＵｒＤＮＳ，ＴＳ和ＤＨＦＲ等，其方法各具特色。就其敏感性和特异性而言，Ｐｃ－ＩＴＳ－ＰＣＲ法和Ｐｃ－ｍｔ ＬＳＵｒＤＮＡ－ＰＣＲ法较其他的ＰＣＲ法优越，值得推荐。     

聚合酶链反应技术诊断念球菌的进展

多聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测无菌源（血液、脑脊液、腹腔液）标本诊断念 球菌病方面局长迅速。本文阐述了念球功物引物设计、破和ＤＮＡ技术，ＰＣＲ及其产物检测方法，ＰＣＲ的注意事项等方面的研究进展。     

聚合酶链反应技术诊断念球菌的进展

多聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测无菌源（血液、脑脊液、腹腔液）标本诊断念球菌病方面发展迅速。本文简述了念球菌的引物设计、破壁和ＤＮＡ提取技术，ＰＣＲ及其产物检测方法，ＰＣＲ的注意事项等方面的研究进展。     

琼脂糖凝胶荧光环法在DNA定性及半定量中的应用

琼脂糖凝胶荧光环法在ＤＮＡ定性及半定量中的应用军事医学科学院放射医学研究所（北京１００８５０）刘耀清，杨景庚聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术在微生物诊断和生物制剂中应用的重要性和意义已被公认，但往往由于临床样品处理中是否提取到目的ＤＮＡ而使ＰＣＲ扩增带有盲...     

用Logistic回归模型预测血清中HBV—DNA的活动性

多聚酶链反应（简称ＰＣＲ）技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性具有很高的敏感性，但因自身的特点，应用受到限制。结合乙肝三系检测结果，用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型配合ＰＣＲ检测结果具有较好的配合适度，在没有条件开展ＰＣＲ检测项目的情况下根据乙肝三系检测结果用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型预测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性。     

应用PCR检测旋毛虫DNA的研究

应用ＰＣＲ检测旋毛虫ＤＮＡ的研究＊武汉冶金科技大学寄生虫学教研室（４３００８０）张国华胡昌仁同济医科大学寄生虫学教研室牛安欧多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术特异性强，敏感性高，广泛用于医学分子生物学的研究。旋毛虫是一种人兽共患的寄生性线虫，人群感染率较高。...     

用Logistic回归模型预测血清中HBV－DNA的活动性

多聚酶链反应（简称ＰＣＲ）技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性具有很高的敏感性，但因自身的特点，应用受到限制．结合乙肝三系检测结果，用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型配合ＰＣＲ检测结果具有较好的配合适度，在没有条件开展ＰＣＲ检测项目的情况下根据乙肝三系检测结果用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型预测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性。     

影响PCR技术检测HBV DNA结果的因素分析

ＰＣＲ技术 (聚合酶链反应 )检测ＨＢＶ　ＤＮＡ ,具有简便、快速、特异性强、灵敏度高等优点 ,自问世以来就得到临床的广泛重视。本文就其结果的影响因素进行分析如下。1　假阳性结果1.1　ＰＣＲ实验室设计未达到要求所致　由于ＰＣＲ是一种特异强、灵敏性高的体外基因扩增技术 ,只要有靶ＤＮＡ片段污染 ,就会造成假阳性 ,这是开展ＰＣＲ技术的一大困难 ,且不易克服。笔者认为应有四间ＰＣＲ实验室 :一间配制试剂、一间处理标本、一间扩增 ,一间检测扩增产物。这样就避免室间污染 ,增加结果的可信度。1.2　人为因素所致　操作人员素质低 ,…     

应用连接介导PCR法于线粒体DNA的测序

目的 简化ＤＮＡ测序方法，优化条件，以适用于线粒体ＤＮＡ的测序。方法 应用Ｍａｘａｍ Ｇｉｌｂｅｒｔ化学断反应和连接介导ＰＣＲ（Ｌｉｇａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉａｔｅｄ ＰＣＲ，ＬＭＰＣＲ）来测定线粒体ＤＮＡ的序列。结果 读取的１４０ｂｐ的核苷酸序列，输入基因库，确定为线粒体ＤＮＡ重链８０５１～８１９０片段的序列，符合率为７０．７％（９９／１４０）。结论 该方法改进的成功，对进一步进行线料体ＤＮＡ氧化损