亚硒酸钠对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及hTERT表达的影响

目的探讨亚硒酸钠对人胃癌SGC-7901细胞株生长、凋亡和hTERT表达的作用及相关机制。方法用含不同浓度亚硒酸钠(0、0.5、2.5、5.0、8.0μmol/L)的培养液培养SGC-7901细胞24、48、72、96h,用相差显微镜观察亚硒酸钠对SGC-7901细胞形态的影响;MTT法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞增殖的影响;AnnexinV-FITC/PI双染法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞细胞的凋亡的影响;链霉亲和素-生物素-酶复合物(SABC)免疫细胞化学法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞hTERT蛋白表达的影响。结果 (1)MTT法结果显示:用亚硒酸钠培养SGC-7901细胞株24,48,72,96h后,随浓度增加,吸光度值逐渐降低,24h后当亚硒酸钠浓度大于2.5μmol/L时,与对照组比较其吸光度值均明显降低(P<0.01),48、96h后各浓度亚硒酸钠组与正常对照组比其吸光度值均明显降低(P<0.01)。随浓度的增加,亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长抑制率逐渐增加。(2)流式细胞仪检测结果显示:亚硒酸钠可促进SGC-7901细胞发生细胞凋亡。5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组比正常对照组凋亡率明显升高(P<0.01)。(3)免疫细胞化学法检测结果显示:亚硒酸钠可降低SGC-7901细胞中hTERT蛋白免疫细胞化学染色的平均光密度(MOD),24h时5、8μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),48h时0.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),72h时2.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),96h时实验组与对照组比较MOD均明显降低(P<0.01)。结论亚硒酸钠能抑制SGC-7901细胞生长,诱导其凋亡,其作用机制可能与下调hTERT表达有关。     

亚硒酸钠对人乳腺癌细胞MCF-7的作用研究

[目的]探讨不同浓度亚硒酸钠对人乳腺癌细胞MCF-7的作用.[方法]0、0.5、2、8、32μmol/LNa2SeO3处理人乳腺癌细胞24h后,用MTT比色法检测不同浓度亚硒酸钠对人乳腺癌细胞MCF-7的作用;DNA Ladder抽提试剂盒提取DNA后凝胶电泳法观察亚硒酸钠诱导人乳腺癌细胞凋亡的作用.[结果]随着亚硒酸钠浓度的增加,其对人乳腺癌细胞增殖的抑制作用增强.不同浓度的亚硒酸钠作用MCF-7人乳腺癌细胞24h后,各组均未出现典型的DNA梯状条带.[结论]亚硒酸钠对人乳腺癌细胞增殖具有抑制作用;尚未发现其诱导凋亡的作用.     

亚硒酸钠对神经皮质细胞氧化损伤作用

目的研究不同剂量亚硒酸钠对小鼠大脑皮层神经皮质细胞的损伤作用。方法选用24h龄ICR小鼠，培养大脑神经皮质细胞，48h后加入不同浓度的亚硒酸钠（0．004，0．020，0．100，0．500μmol／L），四甲基偶氮噻唑蓝试验检测细胞活性、激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位，慧星试验检测细胞DNA损伤。结果高剂量亚硒酸钠（0．1和0．5umol／L）明显抑制皮质神经细胞生长、降低线粒体膜电位、并严重损伤DNA，且呈现剂量效应关系（P〈0．05）。与对照组比较，低剂量亚硒酸钠（0．004和0．020μmol／L）虽然呈现一定毒性作用，但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论高浓度亚硒酸钠可引起细胞损伤，降低细胞活力，其机制可能与细胞线粒体结构和功能改变以及DNA结构榻伤有关．     

亚硒酸钠抑制EB病毒转化人B淋巴细胞的研究

应用显微荧光分光光度技术，研究试管内无细胞毒性浓度的亚硒酸钠对Ｒａｊｉ细胞株ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ）表达的影响，以及抑制ＥＢ病毒转化人脐血Ｂ淋巴细胞（ＢＬ）的作用。结果表明０．０１～０．１μｇ／ｍｌ亚硒酸钠使Ｒａｊｉ细胞的ＥＢＮＡ荧光分光光度值降低８．４％～２１．８％。０．１～１．０μｇ／ｍｌ亚硒酸钠预处理和共同作用均能明显抑制ＥＢ病毒转化人脐血ＢＬ，抑制率分别为７３．４％～９２．１％和６０．３％～７１．２％。结果提示，在ＥＢ病毒基因表达活跃的人群和鼻咽癌病人中，适量补硒可能有助于鼻咽癌和与ＥＢ病毒相关疾病的预防和治疗。     

亚硒酸钠对实验性矽肺作用的病理研究

目的研究亚硒酸钠对实验性矽肺的作用,探讨矽肺的发病机制及寻找防治矽肺较理想的药物。方法观察亚硒酸钠对各组大鼠实验性矽肺治疗后的病理形态改变。结果亚硒酸钠组的脂质过氧化物(LPO)含量明显低于石英组,喂养一个月的亚硒酸钠治疗组的体重增加(70±14)g明显高于矽肺组(59±10)g,肺重(2.3±0.4)g明显低于矽肺组(3.6±1.1)g,矽结节数量(66.67±3.44)个明显少于矽肺组(84.17±7.99)个,矽结节纤维化程度(1.33±0.52)明显轻于矽肺组(2.17±0.41);同样处理两个月的亚硒酸钠治疗组的体重增加(64±17)g明显高于矽肺组(28±18)g,肺重(2.5±0.6)g明显低于矽肺组(5.2±1.3)g,矽结节数量(73.20±2.39)个明显少于矽肺组(121.00±2.65)个,矽结节纤维化程度(1.60±0.55)明显轻于矽肺组(3.20±0.45)。结论亚硒酸钠能拮抗生物膜的脂质过氧化作用,能减轻矽肺病变,有望成为防治矽肺的理想药物。     

亚硒酸钠介导人结肠癌HCT116细胞死亡的机制研究

目的 探讨亚硒酸钠杀伤结肠癌肿瘤细胞的潜在机制.方法 应用MTS方法和DCFH-DA法分别检测亚硒酸钠对人结肠癌细胞系HCT116存活率和细胞内活性氧水平的影响,同时应用小分子干扰RNA片段研究JNK1和p53在亚硒酸钠介导的细胞死亡过程中的作用.结果 实验结果表明亚硒酸钠通过显著提高HCT116细胞内的活性氧水平,致使细胞发生氧化应激,激活应激相关蛋白JNK1和p53,从而达到杀伤肿瘤细胞的作用.结论 亚硒酸钠能有效杀伤结肠癌肿瘤细胞,同时JNK1和p53在亚硒酸钠介导的细胞死亡过程中发挥了重要作用.     

亚硒酸钠和硒蛋氨酸的毒性比较

目的　比较亚硒酸钠和硒蛋氨酸毒性差异以及探讨硒中毒的指标。方法　将断乳Wistar大鼠随机分为 7组 ,每组 14只 ,雌雄各半。其中一组为对照组 ,另外六组分别给予含硒 3、6、10mg kg的亚硒酸钠或硒蛋氨酸饲料 ,于第 12周将其处死。结果　当饲料硒水平达到 3mg kg时 ,动物肝脏出现病理变化 ,在Se6mg kg时 ,体重才出现下降。饲料硒水平为 6、10mg kg时 ,同一饲料硒水平的亚硒酸钠组大鼠体重小于硒蛋氨酸组。饲料硒水平为 3、6mg kg时 ,硒蛋氨酸组大鼠的肝脏病理改变轻于亚硒酸钠组 ,雄性大鼠轻于雌性。亚硒酸钠组较硒蛋氨酸组或雌性大鼠较雄性大鼠在肝脏体重比方面变化更为明显。除雌性大鼠肝脏谷胱甘肽过氧化物酶 (GPX)活性随硒水平升高而降低外 ,其它补硒各组肝、红细胞、血浆GPX活性具有随硒水平的升高而升高的趋势。结论　大鼠硒中毒的剂量为Se 3mg kg,硒蛋氨酸的毒性小于亚硒酸钠 ,雌性大鼠对硒毒性更为敏感     

亚硒酸钠预防实验性低硒脂质过氧化的机制初探

亚硒酸钠预防实验性低硒脂质过氧化的机制初探罗德生，化长林，王新广，董嘉喜，陈桂枝我们的实验研究发现，动物摄取高硫（Ｓ）后会弓愧血Ｓ增高而血Ｓｅ降低，低Ｓｅ又能导致血清过氧化脂质的分解产物──丙二醛（ＭＤＡ）水平增加。ＭＤＡ含量是反映机体内氧自由基产生...     

亚硒酸钠与顺铂对人体T细胞增殖动力学影响

目的 探讨顺铂与亚硒酸钠对人体T淋巴细胞增殖动力学的影响及亚硒酸钠对顺铂抑制T细胞增殖可能的拮抗作用。方法 人体外周血淋巴细胞培养24h时加入0．05，0．20和0．50mg／L顺铂单独或与亚硒酸钠联合处理48h，0．05mg／L剂量的亚硒酸钠分别在开始细胞培养时加入或与顺铂同时加入；用Brdu掺入新复制的DNA和染色单体，分化染色后检测细胞周期构成和细胞周期时间。结果 3个剂量的顺铂均显阻滞细胞周期进程。延长细胞周期时间；亚硒酸钠具有促进细胞增殖、缩短细胞周期时间的效应。顺铂与亚硒酸钠共同处理细胞，预加和与顺铂同时加入亚硒酸钠均可拮抗0．05mg／L顺铂阻滞细胞周期进程和延长细胞周期时间的作用；顺铂剂量为0．20mg／L时，预加亚硒酸钠可拮抗顺铂对细胞增殖动力学的影响，同时加入则不能；顺铂剂量为0．50mg／L时，亚硒酸钠丧失这些效应。结论 0．05mg/L亚硒酸钠可促进人体T淋巴细胞周期进程，缩短细胞周期时间，并可拮抗低剂量顺铂对细胞增殖动力学的影响。细胞培养开始时加入效果更佳。     

大豆苷原对体外培养人胃癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的:了解二羟异黄酮对胃癌细胞有无促增殖与诱导凋亡作用。方法:以不同浓度的二羟异黄酮处理人胃癌细胞系MGC-803细胞。然后分别用MTT法测定细胞增殖情况、流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳测定细胞周期和细胞凋亡等。结果:MTT 结果显示:二羟异黄酮对胃癌细胞具有促进和抑制增殖的双相作用-在低浓度(0.1-1 μmol/L)时促进细胞生长,在较高浓度(10-100 μmol/L)时对细胞生长则有抑制作用。流式细胞术结果显示:癌细胞群阻滞在G1期,没有明显凋亡峰的出现;凝胶电泳也末检测到明显的DNA阶梯状条带。结论:二羟异黄酮对体外培养的胃癌细胞的生长有双相作用,较高浓度可抑制胃癌细胞的生长并使细胞阻滞在G1期,而无诱导细胞凋亡的作用。     

萝卜硫烷对乳腺癌细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响及作用机制研究

目的:研究萝卜硫烷(sulforaphane,SUL)对不同类型乳腺癌细胞增殖和细胞周期细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法、流式细胞术和Western印迹法,研究不同浓度受试物对F3Ⅱ、MCF-7、MDA-MB-231和ZR-75-1细胞增殖抑制、细胞周期阻滞、F3Ⅱ细胞凋亡和p34cdc2及Cdc25C表达的影响。结果:(1)SUL对所选的四个细胞系均有很强的增殖抑制作用,其中雌激素正响应型(ERP)细胞对SUL的敏感性明显强于雌激素负响应型(ERN)细胞和扩散性较强的F3Ⅱ细胞;(2)SUL对F3Ⅱ细胞和两种ERP细胞均呈现G2/M期阻滞作用,而对ERN细胞周期则无影响;(3)SUL阻滞F3Ⅱ细胞从G2期向M期转化的作用机制是提高Cdc2的磷酸化水平,降低Cdc25C磷酸化酶的表达,从而抑制细胞周期素B1-Cdc2复合物激酶的去磷酸化作用;(4)在实验条件下,SUL不引起F3Ⅱ细胞凋亡。结论:SUL对四个乳腺癌细胞系细胞增殖抑制活性和细胞周期影响存在明显的差异,不引起F3Ⅱ细胞凋亡。对F3Ⅱ细胞周期G2/M阻滞作用的机制是提高Cdc2的磷酸化水平,降低Cdc25C磷酸化酶的表达。     

大蒜预防胃癌的细胞学机制研究

目的：探讨大蒜预防胃癌的细胞学机制,为大蒜预防胃癌提供理论依据。方法：以低分化胃癌细胞系ＭＧＣ－８０３为靶细胞,用ＭＴＴ法检测大蒜汁（ＧＪ）对肿瘤细胞活性的影响,透射电镜、ＤＮＡ凝胶糖电泳和原位缺口标记法（ＴＵＮＥＬ）分析细胞凋亡。结果：ＧＪ能有效抑制ＭＧＣ－８０３细胞的活性,并诱导其凋亡。形态学变化表现为细胞皱缩,染色质凝集、碎裂,沿核膜内缘分布,凋亡小体形成等;基因组ＤＮＡ沿核小体之间断裂,电     

茶氨酸体外对人胃癌细胞MGC803增殖的作用及与阿霉素的联合作用

目的研究茶氨酸(theanine)对人胃腺癌细胞株MGC803增殖的影响及其与阿霉素(doxorubicin,DOX)的联合作用。方法采用MTT法结合形态学观察,研究茶氨酸单独或与DOX联合作用对MGC803增殖活性的影响;采用荧光分光光度法检测茶氨酸对MGC803细胞内DOX药物浓度的影响,探讨茶氨酸对DOX化疗敏感性的影响。结果2.0、4.0μmol/L茶氨酸单独作用于MGC803后其吸光度值与空白对照组相比有统计学差异(P0.01);茶氨酸与DOX联合作用后对MGC803增殖的抑制率明显提高,并观察到典型的凋亡细胞形态学特征;DOX联合茶氨酸作用后,使MGC803细胞内DOX浓度升高1.35倍。结论茶氨酸可能有直接抑制MGC803细胞增殖的作用,并使肿瘤细胞内DOX滞留,提高了肿瘤细胞对DOX的化疗敏感性。     

新疆天然植物黑加仑对食管癌细胞增殖、凋亡的影响

目的:观察新疆天然植物黑加仑水提物对食管癌细胞的影响及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度(10-1、10-2、10-3g/ml)黑加仑水提物作用不同时间(12、24、36h)对人食管癌细胞株Eca109的细胞存活量的影响,以大鼠正常肝细胞(BRL)为正常对照细胞株;用Bradford法测定肿瘤细胞蛋白质合成的变化;采用流式细胞技术(FCM)观察黑加仑作用后肿瘤细胞周期变化及凋亡情况;通过倒置显微镜观察细胞的形态变化。结果:黑加仑水提物10-1g/ml组对人食管癌细胞株Eca109作用24h后,癌细胞的生长和蛋白合成均有明显抑制作用(P<0.05),对正常肝细胞的存活量及蛋白合成均无影响;流式细胞仪检测二倍体峰前出现凋亡峰,细胞凋亡率为49.6%;并且癌细胞呈现典型的凋亡细胞形态。结论:黑加仑水提物可通过诱导细胞凋亡而抑制人食管癌细胞株Eca109细胞的生长。     

硒对大鼠胃癌时脑垂体ACTH阳性细胞的影响

目的　观察硒在预防大鼠实验性胃癌过程中垂体远侧部 ACTH细胞的免疫组织化学变化。方法　用断乳雄性 Wistar大鼠 30只 ,分为盐水对照组 N-甲基 - N -硝基 - N-亚硝基胍(MNNG)组和 Se+MNNG组 ,每组 1 0只。用免疫组织化学、图像分析和形态计量方法观察大鼠脑垂体 ACTH细胞。结果　补硒组大鼠 ACTH细胞的面数密度减小 ,免疫反应减弱 ,与 MNNG组相比有显著性差异 (P<0 .0 5) ,与对照组相比略有增加 ,但无统计学意义 (P>0 .0 5)。 MNNG组大鼠 ACTH细胞的面数密度增大 ,免疫反应增强 ,与对照组相比有显著性差异 (P<0 .0 5)。结论　硒在预防大鼠实验性胃癌过程中 ,可能参与了垂体远侧部 ACTH细胞功能的调节。     

丁酸钠对大肠癌HT-29细胞凋亡以及钙离子浓度的影响

目的研究丁酸钠(sodium butyrate,NaB)诱导大肠癌细胞HT-29凋亡的机制。方法 Hoechst 33342染色、Annexin V+PI和免疫印迹法检测NaB诱导大肠癌HT-29细胞的凋亡作用;激光共聚焦显微镜检测内质网(endoplasmic reticulum,ER)和细胞质中游离Ca2+浓度。结果 NaB可诱导大肠癌HT-29细胞凋亡,且具有剂量和时间反应关系;NaB浓度为2.5mmol/L,作用24h时凋亡标志分子(poly ADP-ribose polymerase,PARP)出现明显的切割片段;NaB可降低ER中游离Ca2+浓度以及升高细胞质内游离Ca2+浓度。结论 NaB可通过调节ER和细胞质中Ca2+浓度而诱导大肠癌HT-29细胞凋亡。     

β-胡萝卜素和亚硒酸钠体外抗肿瘤作用的实验研究

方法：采用细胞株体外培养技术，研究β－胡萝卜素和亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）单独／联合对人肝癌细胞株（Ｑ３）和人膀胱癌细胞株（Ｔ２４）生长的影响。以小鼠成纤维母细胞（３Ｔ３）为正常对照细胞株。实验分为：１．β－胡萝卜素组：剂量为３、３０、１００μｍｏｌ／Ｌ，溶剂对照为ＤＭＳＯ；２．亚硒酸钠组：剂量为０．１５、１．５、５．０μｍｏｌ／Ｌ，溶剂对照为生理盐水；３．β－胡萝卜素和亚硒酸钠联合组：剂量为１．５＋０．１５、１５＋１．５、５０＋５．０μｍｏｌ／Ｌ，溶剂对照为ＤＭＳＯ和生理盐水。各实验组均设空白组。分别在实验后２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ观察细胞成活率和活细胞蛋白质含量的变化。结果：１．β－胡萝卜素各剂量组对两株肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用；２．亚硒酸钠对两株肿瘤细胞的抑制作用较弱，但随作用时间延长和剂量的增加其抑制作用明显增强；３．β－胡萝卜素和亚硒酸钠对Ｑ３细胞株的抑制作用比Ｔ２４细胞株强；４．β－胡萝卜素和亚硒酸钠联合对Ｑ３和Ｔ２４细胞的抑制作用结果提示两者有相加效应。     

CTGF单克隆抗体对胃腺癌细胞BGC823生物学行为的影响

[目的]观察结缔组织生长因子(CTGF)单克隆抗体对人胃癌细胞BGC823生物学行为的影响。[方法]体外培养BGC823胃癌细胞,分别经不同浓度的CTGF单抗作用不同时间后,用MTT法测定细胞活力;通过黏附实验观察CTGF单抗对胃癌细胞黏附能力的影响;Boyden小室法观察BGC823细胞侵袭、迁移能力的改变。[结果]CTGF单抗抑制胃癌细胞的增殖,CTGF单抗处理组细胞的黏附、迁移和侵袭能力明显低于对照组(P﹤0.05)。[结论]抗体中和CTGF抑制胃癌细胞的增殖、明显减弱细胞的粘附、迁移和侵袭能力。