姜黄素联合5-FU对人胃癌SGC-7901细胞作用及机制的研究

目的:探讨姜黄素联用5-氟尿嘧啶(5-FU)对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法:用姜黄素(20μmol/L)和5-FU(10、20、40μmol/L)单独或联合应用处理SGC-7901细胞后,MTT法检测生长、流式细胞术观察细胞周期与凋亡、酶标仪比色法检测Caspase-3/-8的活性和Western Blot法观察Bcl-2/Bax蛋白表达。结果:与对照组相比,各实验组均能显著抑制细胞增殖、促进细胞凋亡(P<0.05),姜黄素联合低/中剂量5-FU的增殖抑制率、凋亡率显著高于中/高剂量5-FU单用(P<0.05);各实验组将SGC-7901细胞的细胞周期阻滞在S期(P<0.05);各实验组Caspase-3/-8活性、Bax表达量显著增加,而Bcl-2的表达量显著降低(P<0.05),且姜黄素联合低/中剂量5-FU组的效果优于中/高剂量5-FU单用组(P<0.05)。结论:姜黄素能够增强5-FU对体外培养的胃癌SGC-7901细胞的抑制增殖和促凋亡作用,其机制与增强Caspase-3/-8活性、上调Bax表达和下调Bcl-2表达有关。     

培养基不同血清比例对人胃癌SGC-7901细胞生长的影响

目的:探讨细胞培养基中不同血清比例对人胃癌细胞SGC-7901生长状态的影响,为减少培养该细胞时血清的用量。方法:用分别含有3%、6%和9%小牛血清的1640培养液分别培养SGC-7901细胞12h、24h和48h,以无血清培养基作为空白对照;倒置显微镜观察细胞的生长状况,通过基于酶标仪的MTT方法检测细胞在不同比例血清中的生长与增殖的差异。结果:SGC-7901细胞在含3%和6%小牛血清的细胞培养基中生长状态与常用的含9%小牛血清的培养基中的生长情况相比,未见显著性的差异(P>0.05);也不呈时间依赖性,但与空白血清对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在体外培养RPMI-1640细胞时,可将培养基中小牛血清的比例降至3%～6%,从而降低在培养该细胞过程中的的实验成本,减少不必要的血清浪费。     

补中益气汤含药血清诱导SGC-7901人胃癌细胞凋亡的实验研究

目的：探讨补中益气汤含药血清对人胃癌细胞株的抑制与诱导凋亡作用。方法：以人胃腺癌细胞株SGC-7901为实验模型,用补中益气汤大鼠血清和顺铂大鼠血清对SGC-7901人胃癌细胞株处理48小时,在光、电镜下观察细胞凋亡的的形态学变化。结果：光镜下,药物组细胞由梭形细胞变为圆形或卵圆形,核染色质密集;电镜下细胞变圆,微绒毛及突起明显减少,伪足消失,线粒体空泡化,核染色质凝集,可见凋亡小体;凋亡细胞发生率与药物浓度呈正相关。结论：补中益气汤具有诱导SGC-7901人胃癌细胞株凋亡作用。     

南方红豆杉水提物对肿瘤细胞增殖抑制作用的研究

目的研究南方红豆杉水提物对人胃腺癌细胞株SGC-7901和人乳腺癌株MCF-7增殖的抑制作用和机制。方法采用二苯基四氮唑溴盐比色法（MTT法）检测南方红豆杉水提物和紫杉醇对SGC-7901和MCF-7细胞增殖的抑制作用;光镜观察其对2种细胞形态的影响;流式细胞仪检测其对2种细胞凋亡的影响。结果南方红豆杉水提物对肿瘤细胞的增殖有抑制作用;其抑制作用机制为诱导细胞凋亡。结论南方红豆杉水提物对肿瘤细胞的增殖有抑制作用。     

没食子提取物、氟尿嘧啶诱导乳腺癌细胞凋亡的对照研究

目的观察没以子提取物(MSZ)诱导乳腺癌细胞凋亡的作用。方法人乳腺癌细胞Bcap-37经不同浓度MSZ、氟尿嘧啶(FU)作用24～48h后,通过倒置显微镜观察细胞形态的变化;经流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率。结果在倒置显微镜下可见大量有典型凋亡特征的细胞;流式细胞仪检测直方图上出现明显的凋亡峰,并呈剂量依赖性。与FU相比作用无明显差异(P>0.05)。结论MSZ具有抑制细胞Bcap-37生长、诱导细胞凋亡的作用。     

胃癌康对SGC-7901人胃癌细胞株酶活性影响的研究

目的：通过胃癌康方对人胃癌细胞株酶活性影响，探讨该药作用机制。方法：以人胃腺癌细胞株SGC-7901为受试对象，利用血清药理学和酶细胞化学染色法，观察胃癌康对SGC-7901人胃腺癌细胞株Mg^2＋-ATP酶和G-6-P酶的活性影响。结果：（1）Mg^2＋-ATP酶与G-6-P酶在细胞株内定位准确。（2）中药组，Mg^2＋-ATP酶和G-6-P酶的酶反应颗粒变小，数量减少，活性下降，明显低于对照组（P（0.01）。结论：胃癌康降低胃癌细胞株Mg^2＋-ATP酶和G-6-P酶的活性可能是体现其抗肿瘤作用机理之一。     

胃癌康诱导SGC-7901人胃癌细胞株调亡的实验研究

目的：探讨胃癌康方对人胃癌细胞株的抑制与诱导凋亡的作用。方法：以人胃腺癌细胞株SGC-7901为实验模型，利用血清药理学的方法，刺备中药组大鼠血清PRMI1640培养液，浓度为10％。制备顺铂西药组大鼠血清PRMI1640培养液，浓度为10μL/mL。对SGC-7901人胃癌细胞株施加处理因素24h。在光、电镜下观察细胞凋亡的的形态学变化。结果：①光镜下，HE染色药物组细胞，由梭形细胞变为圆形或卵圆形，核染色质密集。②电镜下细胞变圆，微绒毛及突起明显减少，伪足消失，线粒体空泡化。核染色质凝集，可见调亡小体。凋亡细胞发生率与药物浓度呈正相关。结论：胃癌康方具有诱导SGC-7901人胃癌细胞株调亡作用。     

黄芩苷抑制胃癌细胞SGC-7901增殖及机制研究

目的:探讨黄芩苷对人胃癌细胞SGC-7901增殖抑制作用及机制研究。方法:MTT法检测黄芩苷对人胃癌细胞SGC-790活力的影响;细胞周期检测试剂盒检测黄芩苷对人胃癌细胞SGC-7901细胞周期的影响;Western blot分析细胞周期蛋白cyclin A1、cyclin D1含量变化,及AKT蛋白含量变化。结果:MTT法显示黄芩苷(50、100、200μmol·L-1)可显著抑制胃癌细胞SGC-7901的活力,在48 h抑制程度最高。黄芩苷使胃癌细胞SGC-7901细胞周期阻滞在G1期。Western blot结果显示黄芩苷能下调cyclin A1、cyclin D1表达;并且抑制AKT磷酸化。结论:黄芩苷可使胃癌细胞SGC-7901细胞周期阻滞在G1期,下调cyclin A1、cyclin D1表达,可能与AKT信号通路有关。     

巴豆生物碱对人胃癌细胞SGC-7901的诱导分化作用研究

以人胃癌细胞SGC-7901为研究材料,胃细胞分化标志酶碱性磷酸酶(ALP)和乳酸脱氢酶(LDH)为实验指标,观察人胃癌细胞SGC-7901在含有不同剂量巴豆生物碱培养液中的生长情况,结果发现经不同剂量巴豆生物碱处理的细胞,其碱性磷酸酶(ALP)和乳酸脱氢酶(LDH)的活力显著低于培养相同天数而未用巴豆生物碱处理的对照胃癌细胞,显示了巴豆生物碱对胃癌细胞具有诱导分化作用.     

隐丹参酮纳米混悬剂的制备及其抗肿瘤活性

目的 制备隐丹参酮纳米混悬剂,并评价其抗肿瘤活性.方法 高压均质法制备纳米混悬剂后,测定其平均粒径、Zeta电位、形态、稳定性、体外释药,MTT法检测它对人胃癌细胞SGC-7901的抑制作用.结果 所得纳米混悬剂呈球形,平均粒径为104.15 nm,PDI为0.014,Zeta电位为-36.3 mV;室温下30 d内粒...     

白术茯苓汤及提取组分对脾气虚大鼠肠道局部免疫功能的影响

目的:比较研究白术茯苓汤及其分离组分与组分配伍对脾虚大鼠肠道局部免疫的调节作用。方法:以灌服大黄厚朴枳实水煎液加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型,再给模型组分别灌服不同成分,用时设模型组和空白组对照。七天后称脾和胸腺湿重并计算脾指数及胸腺指数;用ELISA法检测大鼠肠道分泌性免疫球蛋白A(sIgA)的分泌水平。结果:治疗组各组脾指数除了低剂量组,皆与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);治疗各组胸腺指数除了白术内酯Ⅲ中低剂量组、络合物各剂量组、组分配伍低剂量组,与模型组比较提高明显(P0.05);sIgA分泌水平治疗各组与模型组比较明显提高(P0.05)。结论:白术茯苓汤及各提取分离组分对脾气虚大鼠模型的肠道局部免疫功能有不同程度的促进作用,其中以白术茯苓汤及多糖组最明显;各组分配伍有协同增效作用。     

没食子有效部位抗溃疡性结肠炎的实验研究

目的研究没食子有效部位对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠的治疗作用。方法采用三硝基苯磺酸和乙醇复合方法制备大鼠UC模型,经病理切片证实造模成功后,随机分为没食子有效部位高、低剂量组和模型组、柳氮磺吡啶组。灌胃给药20 d后,评价大鼠结肠黏膜损伤程度(CMDI);检测体重、肠重指数和免疫器官重量指数的变化;检测大鼠结肠组织中超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)活性。结果没食子有效部位高剂量组溃疡均完全愈合,与模型组比较,没食子有效部位高、低剂量组结肠组织中SOD显著增高(P0.01),MPO显著降低(P0.01)。结论没食子有效部位对大鼠UC有明显的治疗作用。     

代料配方与传统松木栽培茯苓的质量分析比较研究

[目的]通过代料配方与传统松木栽培茯苓质量分析比对研究,考察代料栽培茯苓药材的质量。[方法]通过紫外可见分光光度法(UV-Vis)测定茯苓的总多糖和总三萜的含量,采用高效液相色谱法(HPLC)测定茯苓有效成分茯苓酸的含量,茯苓提取物的收率通过干膏恒重法测定。[结果]代料配方栽培茯苓各项含量测定指标普遍高于传统松木栽培茯苓,加权综合评分结果表明代料配方C和F的综合评分并列第一,而传统松木栽培茯苓的综合评分处于末位。[结论]代料配方与传统松木栽培茯苓各项含量指标测定的比对分析结果,为代料配方栽培茯苓的应用前景提供了参考依据,并为代料栽培茯苓的后期研究奠定了良好的基础。     

野生和栽培金铁锁镇痛功效及有效部位的比较

目的:比较野生和栽培金铁锁的镇痛效果及其具镇痛活性的有效部位.方法:提取分离获得野生和栽培金铁锁根部不同极性的化合物,运用醋酸扭体法和热板法研究其对小鼠疼痛的抑制效果.结果:无论是野生还是栽培的金铁锁,其浸膏的镇痛效果相似,均含有高活性的镇痛成分.从化学刺激致痛的抑制效果来看,栽培与野生金铁锁活性成分均存在于正丁醇(扭体抑制率分别为99.1％ ±3.0％和100.0％±0.0％)、乙酸乙酯(97.9％±6.3％和81.9％±11.7％)和石油醚部分(78.8％±17.7％和70.9％±10.3％),但栽培金铁锁乙酸乙酯部分的镇痛效果(97.9％±6.3％)明显优于野生金铁锁(81.9％±11.7％,P＜0.05).从热刺激致痛模型的镇痛作用来看,野生金铁锁的活性部位为正丁醇部分(30 min痛阈提高率为166.5％ ±71.6％,60min为186.9％±79.0％),栽培金铁锁的活性部位为正丁醇部分(30 min痛阈提高率为128.3％±53.1％,60 min为136.5±65.2％)和乙酸乙酯部分(30 min为53.7％±24.4％,60 min为186.9％±79.0％).结论:虽然人工栽培金铁锁的镇痛活性成分与野生药材有所不同,但其镇痛功效与野生药材无明显区别,可作为镇痛药物等效替代野生药材.     

养心通脉有效部位方对MSCs向心肌样细胞分化的影响

目的观察养心通脉有效部位方对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分化为心肌样细胞的诱导作用。方法体外培养大鼠MSCs,设养心通脉有效部位方(YTF)组、5-氮胞苷(5-aza)阳性对照组和低糖DMEM组,体外诱导分化心肌样细胞;用免疫细胞化学方法观测其心肌肌丝蛋白(Desmin)、肌球蛋白重链(MHC)的表达,用RT-PCR的方法检测心肌转录因子GATA-4 mRNA的表达。结果大鼠MSCs体外向心肌样细胞分化诱导后,在DMEM组中未发现Desmin和MHC阳性细胞;而YTF组和5-aza组的Desmin及MHC免疫组化染色均可见阳性免疫复合物,与DMEM组比较,YTF组和5-aza组Desmin、MHC、GATA-4 mRNA表达的相对光密度(IOD)值均明显提高(P<0.01,P<0.05),而且YTF组Desmin、MHC的IOD也明显高于5-aza组(P<0.05),但YTF组GATA-4 mRNA的IOD值与5-aza组比较无统计学差异。结论 YTF在体外可诱导MSCs向心肌样细胞分化。     

桂枝茯苓胶囊化学成分研究(Ⅱ)

目的对桂枝茯苓胶囊内容物正丁醇萃取部位化学成分进行研究。方法采用柱色谱技术进行分离纯化,利用理化性质及波谱方法鉴定化合物结构。结果共得到9个单体化合物,分别鉴定为5-羟甲基-糠醛(1)、芍药苷(2)、磺酸钠芍药苷(3)、芍药内酯苷(4)、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖(5)、野樱苷(6)、蔗糖(7)、麦芽糖(8)、去苯甲酰基芍药苷(9)。结论化合物1～9均为首次从该复方中得到。     

HPLC同时测定精制桂枝茯苓胶囊中3种活性成分

目的:建立同时测定精制桂枝茯苓胶囊中3个有效成分——丹皮酚、苦杏仁苷、芍药苷含量的HPLC分析方法。方法:C₁₈柱,流动相乙腈-水(含1‰磷酸),阶梯洗脱,流速1mL·min^-1;MWD检测器。结果:苦杏仁苷线性范围为12.87-102.94μg·mL^-1,r=0.9999;芍药苷线性范围为24.84-198.7μg·mL^-1,r=0.9999;丹皮酚线性范围12.57-100.56μg·mL^-1,r=0.9999。3个化合物的精密度与重复性RSD均<1.5%。结论:该法精密度高,重复性好,又可降低质量检验成本,可用于精制桂枝茯苓胶囊的质量控制。     

HPLC法测定芍药甘草汤总有效部位中4个活性成分的含量

目的:建立芍药甘草汤总有效部位(TPG)中芍药苷、甘草苷、甘草素、甘草酸单铵盐的含量测定方法。方法:通过高效液相色谱法(HPLC),测定TPG中4种有效成分的含量。色谱柱:LichrospherC18(250mm×4.6mm,5μm);流动相A为乙腈,B为0.1%磷酸,作梯度洗脱。0、18、30、40、50、55、60、65min时,A(%)为14、20、28、35、40、60、14、14;流速:1mL.min-1;测定波长:230nm;柱温:25℃。结果:测得TPG中芍药苷、甘草苷、甘草素、甘草酸单铵盐的含量。结论:本方法简便、快捷、重现性好,可用于同时测定TPG中4种有效成分的含量,全面控制TPG的质量,确保每批产品的均一性。     

羊栖菜多糖对SGC-7901人胃癌细胞内[Ca2+]i的影响

[目的]观察羊栖菜多糖对人胃癌细胞内Ca^2 含量的变化，揭示其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。[方法]采用Fluo-3／AM探针标记，激光共聚焦技术观测细胞内[Ca^2 ]i。[结果]SFPS可使SGC-7901细胞内[Ca^2 ]i先升高然后下降，给CaCl2后，[Ca^2 ]i又升高。[结论]SFPS诱导肿瘤细胞凋亡是通过升高SGC-7901细胞内[Ca^2 ]i而达到的，[Ca^2 ]i升高时Ca^2 来源于细胞内钙库释放。