鞘内预注CRH对甲醛炎性反应性大鼠脊髓痛觉敏化的影响

目的 研究鞘内预注促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone/factor,CRH/CRF)以及联合芬太尼对足底注射甲醛诱导的大鼠脊髓痛觉敏化的影响.方法 采用甲醛炎性反应性痛模型,大鼠随机分为5组,分别于甲醛刺激前10min鞘内预注:生理盐水20μL;CRH 0.5μg;芬太尼0.25μg;CRH 0.5μg 芬太尼0.25μg;提前1h腹腔内注射CP-154526(10mg/kg)后鞘内给予CRH 0.5μg.各组分别在15、30、60、120min共4个时相点检测热辐射刺激甩尾反射潜伏期即痛阈的变化,并于2h后检测脊髓后角原癌基因e-fos的表达产物Fos蛋白的表达情况.结果 鞘内预注CRH 0.5μg抑制痛阈的下降,同时可以抑制脊髓后角浅层Fos蛋白的表达效应,并显著增强芬太尼的作用.提前1h腹腔内注射CP-154526可抵消这种抑制效应.结论 在脊髓水平给予CRH可抑制脊髓痛觉敏化,并加强芬太尼的镇痛效应.     

鞘内注射氯胺酮对甲醛炎性疼痛大鼠脊髓背角nNOS表达的影响

目的：观察甲醛炎性疼痛大鼠脊髓背角神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的表达,以及鞘内注射氯胺酮对甲醛炎性痛大鼠脊髓背角nNOS表达的影响。方法：32只SD大鼠采用改良Yaksh法进行鞘内置管,随机分为4组（n=8）：对照组（C组）、鞘内注射生理盐水组（NS组）、氯胺酮50μg组（K1组）和氯胺酮100μg组（K2组）。NS,K1和K2组于置管5d后,复制甲醛炎性疼痛模型。采用疼痛加权评分法（PIS）评估大鼠甲醛致痛后1h内的疼痛行为,24h后用免疫组织化学法观察大鼠腰5节段水平脊髓背角nNOS的表达。结果：与NS组比较,K1组和K2组在甲醛炎性痛第2时相（15～60min）的PIS值明显降低（P〈0．01）;NS组大鼠脊髓背角nNOS免疫反应阳性细胞数量及免疫组织化学评分均较C组明显增加（P〈0．01）,而K1和K2组则明显低于Ns组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：鞘内注射氯胺酮对甲醛炎性痛大鼠具有明显的抗伤害作用;鞘内注射氯胺酮可明显抑制甲醛炎性痛引起的脊髓背角nNOS表达的增加,表明nNOS在脊髓水平伤害性信息的传递和调制中可能发挥重要作用。     

静脉或鞘内注射盐酸奈福泮对大鼠 甲醛炎性痛的影响及机制探讨

目的 评估盐酸奈福泮静脉或鞘内注射的镇痛效果及脊髓多巴胺能神经传递在其中的作用。方法 复制大鼠甲醛炎性痛模型，然后进行微透析研究，检测盐酸奈福泮注射后大鼠脊髓背角细胞外多巴胺浓度变 化。通过预先注射舒必利，多巴胺D2 受体拮抗剂，观察多巴胺水平变化与盐酸奈福泮镇痛的关系。结果 静 脉注射盐酸奈福泮，可抑制甲醛诱导的Ⅰ期退缩反应，但对Ⅱ期退缩反应无影响。鞘内注射盐酸奈福泮可减 少Ⅰ和Ⅱ期退缩反应，并呈剂量依赖性。微透析研究发现，鞘内注射盐酸奈福泮引起大鼠脊髓多巴胺水平增加。 预处理舒必利不影响静脉或鞘内注射盐酸奈福泮的镇痛作用。结论 无论是静脉和鞘内注射盐酸奈福泮均有 效缓解大鼠炎性痛。盐酸奈福泮镇痛机制可能不涉及脊髓水平多巴胺能神经传递。     

鞘内依咪酯对大鼠足底皮下注入蜜蜂毒诱致持续性痛的抑制作用

目的：研究依咪酯在脊髓水平有无镇痛作用。方法：采用鞘内给药方法观察依咪酯对大鼠足底皮下注入蜜蜂毒诱致持续性痛反应的抑制效应。结果：（１）鞘内插管术末引起运动障碍及其它毒性反应，对大鼠皮下注入蜜蜂毒（ＢＶ）诱致的１ｈ内缩足反应总次数鞘内插管内「（６８６．１７±５５．０１）次／ｈ，ｎ＝０」与单纯ＢＶ注入组「（６０２．７１±４７．７３）次／ｈ，ｎ＝６」，比较无统计学差别；（２）鞘内注射３个剂量的依咪酯对     

鞘内注射利多卡因对脊髓水平的前列腺素E_2的影响

目的:探讨利多卡因神经毒性的可能机制及脊髓水平主要致痛物质前列腺素E2(PGE2)在术后痛觉超敏中的作用。方法:采用成年SD大鼠,鞘内注射1%、2%、5%浓度利多卡因或生理盐水20μl,应用ELISA的方法检测脊髓PGE2水平,并测定其甩尾反应潜伏期和大鼠机械缩足反射阈值。结果:与生理盐水组比较大鼠脊髓内PGE2的水平在鞘内注入不同浓度利多卡因20min后出现明显升高(P<0.05或P<0.01),大约持续100～160min。不同浓度利多卡因组鞘内注射40min后出现机械性痛觉过敏,表现为其MWT较鞘内注射前和生理盐水组明显降低,一直持续到120min(P<0.01),同时鞘内注射5%利多卡因MWT值明显低于1%和2%利多卡因组(P<0.05或P<0.01)。结论:大鼠鞘内注入利多卡因后脊髓内PGE2水平增加明显。     

鞘内注射氯胺酮对甲醛炎性疼痛大鼠脊髓背角蛋白激酶C表达的影响

目的观察甲醛炎性疼痛大鼠脊髓背角蛋白激酶C(PKC)的表达,以及鞘内注射氯胺酮对甲醛炎性痛大鼠脊髓背角PKC表达的影响。方法 32只SD大鼠采用改良Yaksh法进行鞘内置管,随机分为4组(每组8只):对照组(C组)、鞘内注射生理盐水组(NS组)、氯胺酮50μg组(K1组)和氯胺酮100μg组(K2组)。NS、K1、K2组于置管5 d后,复制甲醛炎性疼痛模型。采用疼痛加权评分法(PIS)评估大鼠甲醛致痛后1 h内的疼痛行为,24 h后测量致痛足厚度并用免疫组化法观察大鼠腰5节段水平脊髓背角PKC的表达。结果与NS组比较,K1组和K2组在甲醛炎性痛第二时相的PIS值明显降低(P<0.01);致痛24 h后,NS组大鼠致痛足厚度与对照组比较明显增加,而K1、K2组致痛足厚度与NS组比较则明显减少(P<0.05);NS组大鼠脊髓背角PKC免疫反应阳性细胞数量及免疫组化评分均较C组明显增加(P<0.01),而K1、K2组则明显低于NS组(P<0.05)。结论鞘内注射氯胺酮对甲醛炎性痛大鼠具有明显的抗伤害作用;鞘内注射氯胺酮可明显抑制甲醛炎性痛引起的脊髓背角PKC表达的增加,PKC在脊髓水平伤害性信息的传递和调节中可能发挥重要作用。     

鞘内注射神经生长因子对大鼠痛阈、脊神经节脊髓后角CGRP免疫反应的影响

目的：研究鞘内注射神经生长因子（NGF）后，对大鼠痛阈、脊神经节及脊髓后角降钙素基因相关肽（CGRP）免疫反应的影响。方法：将36只大鼠分为实验组及对照组，分别进行鞘内注射NGF和生理盐水。测定大鼠痛阈，同时采用免疫组化方法，比较两组脊神经节及脊髓后角CGRP的反应强度。结果：实验组的痛阈低于对照组，CGRP免疫反应强度强于对照组。结论：鞘内注射神经生长因子后，可引起大鼠痛阈降低，脊神经节及脊髓后角CGRP免疫反应增强。     

大鼠鞘内促肾上腺素皮质激素释放激素抗伤害性效应的实验研究

目的探讨鞘内预注促肾上腺素皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)是否对甲醛疼痛模型具有抗伤害性效应.方法采用疼痛行为学观察和辐射热测痛评价CRH对甲醛疼痛模型的镇痛作用,采用免疫组化技术结合计算机图像处理系统观察对脊髓后角c-fos基因表达的影响.结果与NS对照组比较,鞘内预注CRH 0.5μg可明显降低甲醛致痛大鼠的Ⅱ相疼痛反应时间,同时可以抑制脊髓后角浅层c-fos基因表达增强的效应,提前1 h腹腔内注射CP-154526可抵消这种抑制效应.结论鞘内预注CRH能明显抑制甲醛致痛大鼠的痛反应和脊髓后角的c-fos基因的表达,具有抗伤害性效应.     

牵涉区皮下注射利多卡因对大鼠膀胱伤害性刺激引起的脊髓 …

目的 研究皮下注射利多卡因对大鼠膀胱伤害性刺激引起的脊髓Ｆｏｓ表达的影响。方法 采用甲醛膀胱痛刺激模型、结合ｃ－ｆｏｓ免疫组织化学技术进行研究。结果 膀胱内注入甲醛２ｈ后可观察到：在Ｌ５￣Ｓ２节段脊髓背角出现Ｆｏｓ阳性标记细胞,以Ｌ６￣Ｓ１节段脊髓背角的数目多而集中,且主要出现于背角Ｉ层内侧部、后连合核（ＤＣＮ）、中间带外侧核（ＩＭＬ）等部位。预先在牵涉区皮下注射利多卡因,可以明显减少膀胱伤害性刺     

鞘内注射米诺环素对甲醛诱导的大鼠炎性痛的作用

目的观察鞘内注射米诺环素对甲醛致痛大鼠的行为学和脊髓背角c-fos表达的影响。方法 24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、生理盐水组和米诺环素组,每组8只。对照组不做任何干预,生理盐水组和米诺环素组在右足底注射5%甲醛前30 min分别鞘内注射生理盐水20μl、米诺环素50μg。记录足底注射甲醛后1 h内每5 min的舔爪和缩腿时间,然后免疫组化观察脊髓背角c-fos的表达。结果米诺环素鞘内注射明显减少甲醛诱导的缩腿和舔爪时间,显著减少注射侧脊髓背角c-fos的表达（P〈0.05或〈0.01）。结论米诺环素鞘内注射能减少甲醛诱导的疼痛反应和脊髓背角c-fos的表达。     

右美托咪定对炎症性疼痛大鼠的超前镇痛作用

目的:观察鞘内注射右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对炎症性疼痛大鼠的镇痛作用以及对大鼠脊髓背角P物质(substance P,SP)表达的影响;明确DEX对炎症性疼痛大鼠具有超前镇痛效应。方法:建立福尔马林诱导的炎症性疼痛SD大鼠模型并给予鞘内注射DEX;观察大鼠疼痛行为学变化;免疫组织化学法和免疫印迹法检测大鼠脊髓背角(L4-6)SP阳性表达变化。结果:炎症性疼痛大鼠疼痛行为学评分增加,脊髓背角SP阳性表达上调;给予鞘内注射DEX可降低炎症性疼痛大鼠疼痛行为学评分以及脊髓背角SP阳性的表达(P均<0.001);鞘内预注射DEX大鼠的疼痛行为学评分和脊髓背角SP表达低于DEX后处理组(P均<0.001)。结论:鞘内注射DEX通过抑制炎症性疼痛大鼠脊髓背角SP表达产生镇痛作用,该作用具有超前镇痛效应。     

鞘内新斯的明对福尔马林致痛大鼠的抗伤害作用机理的初步研究

目的 探讨新斯的明(Neo)对福尔马林致痛大鼠镇痛机理。方法 雄性SD大鼠40只，随机分为对照组和实验组，对照组又分为NS组和F组，实验组又细分为NeF组、LaNeF组和LnNeF组。NS组为正常对照组，F组给予5％福尔马林100μl，足底注射，NeF组、LaNeF组及LnNeF组在同F组处理前分别给予Neo、L-精氨酸(L-Arg) Neo鞘内注射(ith)、L-NG-硝基精氨酸甲酯(L-NAME，NOS抑制剂) Neoith，在福尔马林处理后分别检测大鼠脊髓Fos的表达及观察大鼠的行为学表现。结果 NeF组的缩腿舔爪时间显著短于F组，脊髓的Fos表达显著弱于F组，预先给予L-Arg或L-NAME分别能加强及抑制以上作用。结论 新斯的明能引起大鼠脊髓背角NO的释放。抑制Fos表达可能是其产生抗伤害作用的机制之一。     

飞机草镇痛作用部位及其机制研究

目的：明确飞机草镇痛作用部位及其可能的作用机制,为充分合理利用飞机草资源提供参考。方法将小鼠分成6组,采用脊髓化小鼠甩尾法,福尔马林致炎性疼痛法及纳洛酮阻断小鼠扭体法、热板法,分析飞机草镇痛作用部位;应用酶联免疫法检测血清和脑组织中NO和前列腺素E2（PGE2）含量,初步研究其镇痛作用机制。结果实验结果表明高剂量的飞机草能明显提高脊髓化小鼠热刺激甩尾反应痛阈值（P＜0．05）;高、中剂量的飞机草对福尔马林致痛早期相、晚期相均有显著镇痛作用（P＜0．05）,明显减少纳洛酮阻断后冰醋酸性腹膜炎症致痛小鼠扭体次数,并明显延长纳洛酮阻断后热板致痛小鼠舔后足时间（P＜0．05）,能显著降低福尔马林致炎疼痛小鼠脑组织和血清中NO和PGE2含量（P＜0．05）。结论飞机草既有中枢也有外周的镇痛作用,这可能与其降低中枢和外周NO和PGE2含量有关。     

一种新型N-型电压敏感性钙通道拮抗剂虎纹蜘蛛毒素-Ⅰ对大鼠内脏痛模型镇痛作用的研究

OBJECTIVE: To study the antinociceptive effect of intrathecally administered huwentoxin-I (HWTX-I or HWAP-I) on visceral pain in rats with acute colon inflammation. METHODS: Nociceptive behaviors was induced by formalin injected into the submucosa of the sigmoid colon in rats and the typical behavioral patterns induced served as the indexes for visceral nociception scoring. HWAP-I (0.1-1.0 microg/kg x b x w.), SNX-111 (0.2, 0.5 and 0.75 microg/kg.b.w.) and morphine hydrochloride (0.05, 0.1 and 0.2 microg/kg x b x w.) were administered subarachnoidally 30 min before formalin injection. RESULTS: Similar to SNX-111 and hydrochloride morphine, HWAP-I administered subarachnoidally significantly reduced nociceptive responses in a dose-dependent manner in the rat model of visceral pain (P<0.05). Both HWAP-I and SNX-111 produced pain suppression effect at the dosage of 0.2 microg/kg x b x w., and in spite of the stronger antinociceptive effect of SNX-111 than HWAP-I at the same doses, SNX-111 caused obvious motor dysfunction in the rats at the doses higher than 0.5 microg/kg x b x w., which was not observed with HWAP-1 at such doses. The antinociceptive effect of morphine hydrochloride was initiated faster but lasted for a shorter period of time than the effects of HWAP-I and SNX-111. CONCLUSION: As a potent blocker of neuronal N-type voltage-sensitive calcium channel, HWAP-I induces remarkably dose-dependent inhibitory effect similar to SNX-111 and morphine on visceral pain induced by sigmoid colon submucosal injection of formalin in conscious rats.     

福尔马林诱导单核细胞趋化因子在脊髓星形胶质细胞中的表达

目的:研究小鼠足底注射福尔马林诱导的急性炎症性疼痛和单核细胞趋化因子(MCP-1)在脊髓中的表达。方法:将5%的福尔马林注射到小鼠左侧足底,观察注射后1 h内动物的自发性疼痛。采用ELISA方法检测不同时间点MCP-1在脊髓中的表达。运用免疫荧光双标观察MCP-1在脊髓中表达的细胞类型。结果:福尔马林外周注射引起了典型的双时相自发性疼痛。在注射后10 min,MCP-1在脊髓中的表达显著升高(P<0.05),1 h和3 h与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光双标结果显示,MCP-1与星形胶质细胞的标记物GFAP共存,与神经元的标记物NeuN不共存。结论:外周注射福尔马林引起MCP-1在脊髓星形胶质细胞中快速而短暂的表达升高。MCP-1可能参与福尔马林引起的第二时相的疼痛。     

丙帕他莫对福尔马林致痛大鼠行为学及脊髓c-fos蛋白表达的影响

目的通过观察比较福尔马林致痛大鼠行为学和脊髓背角c-Fos样免疫反应神经元（FLIN）数量的变化,探讨静脉注射丙帕他莫的镇痛效能与机制。方法雄性SD大鼠30只,随机均分为5组,生理盐水组（NS组）、福尔马林组（F组）、丙帕他莫组（B组）、丙帕他莫预处理组（BF组）和福尔马林丙帕他莫组（FB组）。前4组中NS组和B组在注射NS、丙帕他莫10 min后分别于右后足趾皮下注射NS 100μl,F组和BF组分别在注射NS、丙帕他莫10 min后均注射5%福尔马林100μl。FB组给予福尔马林痛刺激10 min后静脉注射丙帕他莫480 mg/kg。各组行清醒静脉穿刺,注入NS或不同剂量的丙帕他莫后,观察行为表现,注射后立即以5 min为一时间段连续记录1 h内的缩腿、舔咬时间。足底注射后2 h取一脊髓节段做c-Fos免疫组化染色,计算FLIN数量。结果①BF组第一期急性早反应时间短于F组（P〈0.0 5）;FB组第二期时间短于F组（P〈0.05）。Fos蛋白表达NS组和B组未见或偶见淡染FLIN。F组见大量FLIN主要分布在Ⅰ、Ⅱ层及Ⅴ、Ⅵ层。BF组各区FLIN均减少（P〈0.01）。FB组各区FLIN均少于F组相应区域（P〈0.01）。结论静脉注射丙帕他莫能有效抑制大鼠的伤害性行为和致痛侧脊髓背角c-fos蛋白的表达。     

尼氟灭酸对福尔马林致痛大鼠行为学的影响

目的：应用大鼠福尔马林致痛模型,通过观察大鼠的痛反应行为,探讨尼氟灭酸（niflumic acid,NFA）在痛觉传入过程中的作用及可能机制。方法：将24只SD大鼠随机分为3组：生理盐水（NS）组、福尔马林（F）组和NFA组,分别观察各组缩腿次数、舔爪时间。结果：NFA组第一相0-5min缩腿次数及舔爪时间较F组显著增高（P〈0.05）。NFA组与F组相比第二相缩腿次数20-25min、30-35min、35-40min、40-45min明显减少,舔爪时间20-25min、25-30min、30-35min、35-40min短于F组。结论：NFA对福尔马林大鼠致痛模型的行为学第一相急性痛反应有致痛作用,对第二相持续痛反应有镇痛作用。     

鞘内泵入曲马多对甲醛炎性疼痛大鼠免疫功能的影响

目的:观察鞘内泵入不同剂量的曲马多对甲醛炎性疼痛大鼠免疫功能的影响.方法:将32只成年雄性SD大鼠随机分为生理盐水组(NS组)和曲马多组(T组),其中T组分为50 μg/h(T1),25 μg/h(T2)和12.5 μg/h(T3)3种剂量组,每组8只.采用改良Yaksh法进行鞘内置管,Alzet泵持续泵入曲马多或生理盐水.复制甲醛炎性疼痛模型,7 d后采用疼痛加权评分(PIS)评价曲马多的镇痛效应;分离脾脏单个核细胞进行原代培养,检测脾脏T淋巴细胞增殖水平、NK细胞活性;流式细胞仪检测脾脏T淋巴细胞亚群和NK细胞表型变化.结果:与NS组比较,T1,T2,T3组在甲醛炎性疼痛第一时相和第二时相的PIS差异有统计学意义 (P<0.01),且有量效关系,但3组间比较差异无统计学意义 (P>0.05).与NS组比较,T1组降低T淋巴细胞增殖水平(P<0.05),T2和T3组 T淋巴细胞增殖水平无统计学意义(P>0.05);T1,T2,T3组NK细胞活性均无统计学意义(P>0.05); T1组CD3 ,CD3 CD4 数量及百分率降低,CD4 / CD8 降低(P<0.01),而T2和T3组则没有变化(P>0.05).结论:鞘内泵入较大镇痛剂量的曲马多(50 μg/h )降低大鼠T淋巴细胞增殖转化水平,改变T淋巴细胞亚群表型,对NK细胞活性和表型没有影响;一般镇痛剂量曲马多(25 μg/h和12.5 μg/h)对机体免疫功能没有影响.     

Effect of pre-electroacupuncture on p38 and c-Fos expression in the spinal dorsal horn of rats suffering from visceral pain

Background Acupuncture is an effective way to relieve pain, but the mechanism by which electroacupuncture （EA） decreases the visceral pain state still remains unclear. This study aimed to evaluate the effects of pre-electroacupuncture on pain behaviors, p38 phosphorylation, and c-Fos protein and mRNA expression in both the colonic wall and spinal dorsal horn of rats suffering from visceral pain. This study also investigated the probable signaling regulatory mechanism of the analgesic effect induced by electroacupuncture. Methods All rats were randomized into the control （Con） group, the Con＋EA group, the visceral pain （VP） group, and VP＋EA group （n=8 for all groups）. The visceral pain model was established using 40 ul of 5% formalin solution injected into the colon of rats. EA was applied to the bilateral Jiaji acupoints for 20 minutes before application of visceral pain. Parameters for EA were set at a continuous wave （20 Hz） and intensity where the rats shook their whiskers but did not scrabble （≤1 mA）. The visceral pain score was recorded and the expressions of p38 and c-Fos protein were detected using Western blotting. Real-time quantitative PCR was also used to determine the expression of c-Fos mRNA. Results Rats in the VP group immediately presented with obvious visceral pain behaviors after being injected with formalin. p38 activity and c-Fos protein and mRNA expression in both the colonic wall and spinal dorsal horn were higher in the VP group than in the Con group （P 〈0.05）. By contrast, visceral pain behaviors were delayed in rats from the VP＋EA group. p38 activity and c-Fos protein and mRNA expression were lower in the VP＋EA group than that in the VP group （P〈0.01）. Conclusions Pre-electroacupuncture of the Jiaji acupoint has prophylactic analgesic effects on rats suffering from visceral pain. The p38 signal transduction pathway may be partly involved in the regulatory mechanism of this analgesic effect.