LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中美金刚的质量浓度

目的建立LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中美金刚的质量浓度,并将此方法应用于盐酸美金刚片在Beagle犬体内的药动学研究。方法采用蛋白沉淀法处理血浆样品,以金刚烷胺为内标物质(IS),采用Grace Altima HP C_(18)(50 mm×2.1 mm,5μm)色谱柱,流动相为体积分数0.1%甲酸水溶液-体积分数0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱,流速为0.35 m L·min~(-1)。离子源为电喷雾电离(ESI)源,采用正离子化方式测定,采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式检测,用于定量分析的离子反应为m/z 179.8→m/z 162.8(美金刚),m/z 152.6→m/z 135.7(金刚烷胺,内标物质)。4只健康雄性Beagle犬单次经口给予盐酸美金刚片25 mg,用Win Nonlin 6.1软件以非房室模型计算药动学参数。结果血浆中美金刚线性范围为0.001~0.2 mg·L~(-1),定量下限为1μg·L~(-1),日内和日间精密度在2.1%~10.8%内,准确度在-3.5%~2.9%内,提取回收率在94.9%~96.8%内。Beagle犬单次经口给予盐酸美金刚片后,主要的药动学参数t_(1/2)为(11.0±4.7)h,t_(max)为(9.0±2.0)h,ρ_(max)为(0.078±0.024)mg·L~(-1),AUC_(0-t)为(1.350±0.295)mg·h·L~(-1),AUC_(0-∞)为(1.396±0.306)mg·h·L~(-1)。结论所建立的定量分析方法符合生物样品分析方法指导原则要求,适用于盐酸美金刚片的药动学研究。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中曲札茋苷及其药动学研究

目的:建立LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中曲札茋苷的浓度,并用该方法研究其在Beagle犬体内的药动学特征.方法:以虎杖苷为内标,血浆样品采用甲醇沉淀的方式分离蛋白并离心取上清进样,色谱柱为Kromasil?C18柱(150 mm×2.1 mm).以10 mmol·L-1甲酸铵水溶液和乙腈为流动相,梯度洗脱,...     

LC-MS/MS法测定布洛芬颗粒剂的人体生物等效性研究

目的研究布洛芬颗粒在健康人体内的药动学及其生物利用度,以评价其与布洛芬混悬液的生物等效性。方法 23例健康男性志愿受试者,采用随机、开放、单剂量、双周期自身交叉试验设计。分别口服布洛芬颗粒(受试制剂)与布洛芬混悬液(参比制剂)后,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定血浆中布洛芬的药物浓度。结果受试制剂与参比制剂的Cmax分别为(17.438 6±5.304 0)、(18.557 7±4.641 7)mg/L,AUC0-24分别为(59.000 3±13.935 3)、(58.506 4±16.720 2)mg/(h·L),AUC0-∞分别为(59.718 0±14.020 0)、(59.227 8±16.815 8)mg/(h·L),Tmax分别为(1.478 3±0.922 9)、(1.021 7±0.822 0)h。结论空腹口服布洛芬颗粒受试制剂与参比制剂具有生物等效性。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中右旋酮洛芬的浓度

目的:建立LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中右旋酮洛芬的浓度。方法:血浆样品采用乙腈沉淀法处理,取上清液进样。以乙腈(每500 mL中加入甲酸10μL)-水(80∶20,v/v)为流动相;用Zorbax Eclipse SB-C18柱(5μm,150 mm×4.6 mm)色谱柱分离;以布洛芬为内标。流速0.5 mL·min-1;进样量25μL;柱温为室温。质谱检测采用ESI正离子模式,扫描方式为多反应监测,扫描离子对m/z右旋酮洛芬253.0/209.0,布洛芬204.8/160.8。结果:右旋酮洛芬的线性范围为1.0～1000 ng·mL-1,线性关系良好(r=0.9979),最低定量下限为1.0 ng·mL-1,绝对回收率在100.0%～104.3%之间,变异系数均小于6%。结论:该方法预处理快速简单,灵敏度高,所建立的LC-MS/MS法准确、可靠,可用于犬血浆中右旋酮洛芬的浓度测定及药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中妥洛特罗质量浓度及其在药动学研究中的应用

目的建立LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中妥洛特罗的质量浓度,研究Beagle犬给予妥洛特罗贴剂后的药动学特征。方法血浆经乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比4∶1)提取。色谱柱为Agilent TC-C18柱,流动相为甲醇-体积分数1%甲酸溶液(体积比67∶33),流速为0.5 m L·min-1,进样量为30μL。质谱采用多反应监测模式(multiple reaction monitoring,MRM),电喷雾离子源,分析时间4.5 min。采用DAS 2.0软件以非房室模型计算药动学参数。结果妥洛特罗质量浓度在0.1~10μg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系,定量下限为0.1μg·L-1。日内、日间精密度(RSD)均小于15%,准确度(RE)为-4.27%~-0.60%,方法回收率大于(82.0±6.35)%。健康Beagle犬给予妥洛特罗贴剂(规格为每贴2 mg)后主要药动学参数:tmax为(5.25±1.49)h,ρmax为(7.82±1.98)μg·L-1,t1/2为(5.59±2.37)h;采用梯形法计算,AUC0-t为(99.26±15.05)μg·h·L-1,AUC0-∞为(101.94±14.99)μg·h·L-1。结论该方法可用于妥洛特罗临床前药动学研究。     

UPLC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中S-奥拉西坦浓度

目的:建立灵敏、准确的Beagle犬血浆中S-奥拉西坦浓度的UPLC-MS/MS检测方法,并用于该药在Beagle犬体内的药动学研究.方法:血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以甲醇-水溶液(85∶15,V/V,内加10 mmoL乙酸铵和0.1％甲酸)为流动相,用HP Amide LC-MS/MS Column(100 mm×3 mm ID,5μm)分离,采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测,定量分析的离子反应分别为m/z 159.0/114.1(S-奥拉西坦)和m/z 143.0/126.1(内标,吡拉西坦).结果:S-奥拉西坦线性范围为0.05～50 μg/mL,定量下限为0.05μg/mL,日内、日间精密度(RSD)均小于15％.S-奥拉西坦大鼠血浆样品在储存、预处理、分析期间均显示良好的稳定性.应用此法研究了6只Beagle犬单剂量口服S-奥拉西坦50 mg/kg后的药动学特点.结论:该方法快速、专属、灵敏、适用性强,可应用于5-奥拉西坦的临床前药动学研究.     

LC-MS/MS法测定人血浆及唾液中伏立康唑浓度

目的:采用LC-MS/MS法测定人血浆及唾液中伏立康唑的浓度。方法:血浆样品及唾液样品经氢氧化钠碱化,萃取剂萃取后进行分析。使用Agilent C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1。结果:线性范围为10～4 000 ng·mL-1,最低定量限为10 ng·mL-1,萃取回收率为81.3%～94.4%,基质效应为-5.35%～1.25%,日内和日间RSD均<7.9%。结论:所用方法快速、简便、灵敏度高,适用于人血浆伏立康唑浓度测定及药代动力学和生物利用度的研究。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中乌头碱的浓度

目的:建立LC-MS/MS法检测大鼠血浆中乌头碱的浓度。方法:以维拉帕米作内标,血浆样品经MTBE液液萃取后,采用HyPURITYCyano(150mm×2.1mm,5μm)柱分离,流动相为乙腈:10mmol/L甲酸铵=(70∶30,V/V),流速为0.30mL/min。然后采用电喷雾离子源(ESI源)正离子多反应监测(MRM)扫描分析,乌头碱和维拉帕米的离子选择通道分别为:m/z646.4→586.4和455.2→164.9。结果:乌头碱的线性范围为9.3～2390pg/mL,最低检测浓度为9.3pg/mL,日内和日间变异均<15%。结论:本方法灵敏度高,适用于乌头碱在鼠内的药物代谢动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中的非洛地平浓度

目的:建立高效液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血浆中的非洛地平浓度.方法:以非洛地平-d3为内标,血浆样品采用乙腈进行蛋白质沉淀前处理后,采用Waters Xbridge-C18(2.1 mm×50 mm,3.5μm),以水/甲酸/1 mol·L-1醋酸铵(100/0.2/0.1,v/v/v)、乙腈/甲酸/...     

LC—MS／MS法测定犬血浆中左卡尼汀

目的:建立 Beagle 犬血浆中左卡尼汀浓度的 LC-MS/MS 测定方法。方法:待测血浆50 μL经甲醇沉淀除去蛋白,离心,取上清液10μL进样分析。流动相为甲醇-0.05%醋酸溶液(30:70),色谱柱为江苏汉邦氰基柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流速为1.0 mL·min~(-1),LC-MS/MS 多反应离子检测,正离予模式,用于定量分析的离子分别是左卡尼汀 m/z 162.2→84.7[M H]和茶碱 m/z 181.2→124.0[M H]。结果:血浆中杂质不干扰样品和内标的测定,样品分析时间小于5 min,左卡尼汀的线性范围为0.5～200μg·mL~(-1),方法的回收率人于80%,批内和批问的 RSD 均小于10%,稳定性符合生物样品测定要求。结论:该方法经考察符合血浆样品的测定要求,可以应用于血药浓度的测定和药代动力学研究     

液相色谱-质谱联用法测定犬血浆中青蒿素浓度

目的建立犬血浆中青蒿素(ART)浓度的液相色谱-质谱联用方法。方法以蒿甲醚(AMT)为内标,采用乙腈和10mmoL/L醋酸铵(含0.1%甲酸)溶液(85:15,V/V)为流动相,流速为0.3ml/min,Agilent-C18(50mm×4.6mm,1.8μm)色谱柱为分析柱,采用电喷雾电离源(ESI),多反应监测方式进行正离子检测。结果测定犬血浆中青蒿素浓度的线性范围为2～500ng/ml,定量下限为2ng/ml。日内、日间精密度(RSD)均<7.7%,提取回收率78%～90%。结论本方法适应于犬体内青蒿素药代动力学研究。     

UPLC-MS/MS法测定比格犬血浆中五味子醇甲的血药浓度

目的 建立UPLC-MS/MS测定比格犬血浆中的五味子醇甲血药浓度分析方法。方法 采用ACQUITY UPLC^® BEH C₁₈色谱柱（50 mm×2.1 mm,1.7 μm）,流动相为0.1%乙酸水-甲醇梯度洗脱,体积流量为0.4 mL/min。柱温40℃,进样量5 μL。采用电喷雾（ESI）正离子模式进行多反应（MRM）监测,五味子醇甲和利伐沙班（内标）的定量离子对分别为m/z 433.20→384.30、437.19→145.13。结果 五味子醇甲在0.2～100 ng/mL线性关系良好（r=0.999 6）,最低定量限为0.2 ng/mL,批内、批间精密度分别为2.04%～7.62%、3.72%～8.29%;基质效应及提取回收率分别为95.7%～103%、81.2%～106%;稳定性结果均符合生物样品检测指导原则。结论 建立的UPLC-MS/MS方法快速、简单、灵敏度高,能满足五味子醇甲血药浓度测定及其药动学研究。     

液质联用法测定Beagle犬血浆中曲克芦丁的浓度

目的建立检测Beagle犬血浆中曲克芦丁的LC-MS/MS分析方法。方法 0.5 ml的Beagle犬血浆在80℃水浴下经酸水解后,用5 ml乙酸乙酯提取,40℃水浴氮气流吹干,0.1 ml流动相溶解,10μl上清液进样分析。色谱柱为VP-ODS(250 mm×2.0 mm,5μm),流动相为甲醇∶水(含0.02%氨水)=70∶30,流速为0.2 ml·min-1,柱温为30℃,离子化方式:电喷雾离子化,离子极性:负离子,选择性反应检测(SRM):曲克芦丁苷元:433.0→343.0,槲皮素:301.0→151.0。结果曲克芦丁苷元线性范围为1～100μg·L-1(r=0.999),检测限为1.0μg·L-1;批间和批内精密度均小于15%;提取回收率为70.51%～75.90%;相对回收率为96.55%～101.05%;含药血浆在室温放置24 h、反复冻融以及-16℃冷冻15 d条件下稳定性良好。结论该法专属性强,灵敏度高,稳定性好,符合生物样品分析要求,可适用于Beagle犬中曲克芦丁血药浓度的检测。     

液相色谱-串联质谱法测定Beagle犬血浆中升麻苷H-1的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱的方法测定Beagle犬血浆中升麻苷H-1的浓度。方法:采用20(S)-人参皂苷Rg3为内标,血浆样品经液-液萃取后,以甲醇和水为流动相,梯度洗脱进行分离。通过液相色谱-串联质谱法以多反应监测(MRM)方式检测。用于定量的离子反应分别为m/z615.5→369.6(升麻苷H-1)和783.5→161.1(内标人参皂苷Rg3)。结果:血浆中升麻苷H-1的线性范围为0.5～1000 ng·mL-1,定量下限为0.5 ng·mL-1。在升麻苷H-1浓度为2.0,50,500ng·mL-1时的提取回收率分别为90.4%,94.0%,89.0%。方法的日内和日间精密度(RSD)分别为5.9%,4.7%,3.8%和10.8%,6.3%,7.8%。结论:该方法灵敏、准确,重复性好,可用于Beagle犬血浆中升麻苷H-1的浓度测定。     

LC/MS/MS法测定比格犬血浆中埃克替尼及其在药动学研究中的应用

目的:建立灵敏、快速的液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)法测定比格犬血浆中埃克替尼,并用于药动学研究。方法:健康比格犬32只,随机分成4组后,静脉(10mg/kg)或灌胃(10,20和40mg/kg)给予埃克替尼。采用LC/MS/MS法测定血药浓度,并计算出药动学参数。结果:测定埃克替尼的线性范围是0.5～10000ng/mL,日内和日间精密度(RSD)均小于10。静脉给药后AUC0-t为(27.3±15.3)μg.mL-1.h。灌胃给药后AUC0-t分别为(7.47±3.30)、(23.5±11.5)、(54.5±24.9)μg.mL-1.h,埃克替尼在犬体内的绝对生物利用度是27.4。结论:该分析方法选择性好、灵敏度高、操作简便,并成功应用于埃克替尼的比格犬药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法快速测定人血浆中伊曲康唑

目的:建立灵敏、快速的液相色谱-串联质谱法测定人血浆中伊曲康唑,并用于药代动力学研究。方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,以乙腈-水-甲酸(80:20:0.2,v/v/v)为流动相,流速0.50 mL·min~(-1),Zorbax sB C_(18)柱分离,采用电喷雾电离源,以选择反应监测(SRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为 m/z 705→m/z(392 432)(伊曲康唑)和m/z 256→m/z 167(内标,苯海拉明)。结果:测定血浆中伊曲康唑的线性范围为1.00～1000 ng·mL~(-1),定量下限为1.00 ng·mL~(-1)。日内、日间精密度(RSD)均小于7.2%,准确度(RE)在±3.0%以内。应用本法测得20名健康受试者单剂量口服200mg 伊曲康唑胶囊后的主要药动学参数为:T_(max)(4.25±1.02)h,C_(max)(155.5±73.3)ng·mL~(-1),t_(1/2)(20.4±11.4)h;用梯形法计算,AUC_(0-84h)(2257±1168)ng·h·mL~(-1),AUC_(0-∞)(237.1±1207)ng·h·mL~(-1)。结论:该法选择性强、灵敏度高、操作简便,适用于伊曲康唑的临床药代动力学研究。