淋巴组织增生性疾病组织中c—myc基因表达及其 …

目的：探讨ｃ－ｍｙｃ基因的表达与淋巴瘤发生及其与ＥＢ病毒ＬＭＰ基因的关系，方法：用免疫组织化学方法，对２１２例以前作过程ＥＢ病毒ＬＭＰ（潜伏感染膜蛋白）基因原位杂交检测的淋巴组织增生性疾病组织中，ｃ－ｍｙｃ基因的表达进行检测，结果：显示ｃ－ｍｙｃ阳性率霍奇金淋巴瘤（ＨＤ）为８３．６７％，非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）为８４．３４％，均显著高于淋巴组织良性增生病例ｃ－ｍｙｃ阳性率（５４．２８％）（Ｐ〈０．     

何杰金病中EB病毒感染和bcl—2蛋白的表达

目的探讨Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒与ｂｃｌ－２基因的关系。方法利用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测了６４例何杰金病ＥＢ病毒的潜在膜蛋白－１（ＬＭＰ－１）和ｂｃｌ－２蛋白的表达。用原位杂交方法检测了４１例何杰金病组织中的ＥＢＥＲ。又用双重染色的方法检测了７例ＥＢＥＲ和ｂｃｌ－２蛋白双阳性的何杰金病例。结果ＬＭＰ－１和ＥＢＥＲ的阳性率分别为３９％和４４％,所有ＥＢＥＲ阳性的病例ＬＭＰ－１均为阳性。ｂｃｌ－２蛋白的阳性率为２３％,其中仅有７例ＬＭＰ－１和ｂｃｌ－２蛋白同时阳性。双重染色结果为,在７例双阳性病例中ｂｃｌ－２阳性的细胞只有约５０％ＥＢＥＲ阳性,约４０％ＥＢＥＲ阳性的肿瘤细胞ｂｃｌ－２阳性。结论研究结果提示,在本组研究的病例中Ｒ－Ｓ细胞的ｂｃｌ－２蛋白的表达与ＥＢ病毒的存在与否无明显相关性。     

广东地区何杰金病EB病毒BNLF1基因片段及其表达产物的检测和意义

目的研究爱泼斯坦－巴尔病毒（ＥＢＶ）与恶性淋巴瘤的关系。方法对广东地区５１例何杰金病（ＨＤ）进行了ＥＢＶ的检测。结果ＥＢＶ－ＢＮＬＦ１基因片段ＰＣＲ扩增阳性率为８０．４％，明显高于淋巴结反应性增生组（Ｐ＜０．０１）。ＰＣＲ产物经克隆测序证实为ＢＮＬＦ１基因片段，但未发现突变。原位杂交检测结果为４１例ＰＣＲ阳性的ＨＤ中１５例阳性，阳性信号可见于肿瘤和非肿瘤细胞的核上。ＢＮＬＦ１基因的表达产物潜在膜蛋白（ＬＭＰ１）的表达局限在ＨＤ的肿瘤细胞上，５１例中２５例阳性（４９％）。１５例２０岁以下ＨＤ中ＥＢＶ－ＢＮＬＦ１片段及其表达产物的检出率明显高于２０岁以上ＨＤ组及同年龄段淋巴结反应性增生组（Ｐ＜０．０１）。结论结果表明广东地区半数以上ＨＤ肿瘤细胞中有ＥＢＶ感染并表达ＬＭＰ１，可能与肿瘤的发生发展有一定关系。还提示青少年何杰金病与ＥＢＶ潜伏感染的关系更为密切。     

系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞EBV-LMP1和ZEBRA的表达研究

目的：探讨ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ在系统性红斑狼疮患者（ＳＬＥ）的表达情况。方法：间接荧光免疫标记，流式细胞仪检测。结果：ＳＬＥ患者Ｂ淋巴细胞中ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。活动期患者ＣＤ２３＋细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达率均高于ＣＤ１９＋细胞（Ｐ＜０．０１）。非活动期患者ＣＤ２３＋细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１表达也高于ＣＤ１９＋细胞（Ｐ＜０．０１）。但ＥＢＶ－ＺＥＢＲＡ表达在两亚群间差异没有统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论：朋病毒参与了ＳＬＥ的发病机制，病毒主要以潜伏期状态存在于患者中，病毒复制促进病情发展，检测Ｂ淋巴细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达率，有助于病情活动指标的判断。     

54例非霍奇金病Bcl-2、Bax、Fas和Fas-L蛋白表达及其意义

研究凋亡相关蛋白Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｆａｓ和Ｆａｓ－Ｌ在非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义。方法应用免疫组化Ｓ－Ｐ法对５４例ＮＨＬ进行检测。结果：（１）Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｆａｓ和Ｆａｓ－Ｌ阳性率分别为５０％、８３．８％、８８．９％和８８．７％。     

EB病毒潜在膜蛋白对鼻咽癌细胞系CNE1生长及HLA表达的影响

目的研究ＥＢＶ－ＬＭＰ对高分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１生长及ＨＬＡ表达的影响。方法以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象，采用电穿孔基因转染技术，将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒ｐＣＭＶａ－ＬＭＰ转染ＣＮＥ１细胞。用细胞体外增殖试验、免疫组化和流式细胞术等方法，观察细胞生长及ＨＬＡ表达的变化。结果ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞的增殖，增殖吸光度（Ａ）比值试验组与空白组及阴性对照组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；实验组细胞软琼脂克隆形成率显著高于空白及阴性对照组（Ｐ＜０．０１）；细胞ＤＮＡ含量明显增高（Ｐ＜０．０１／０．０５）；ＦＣＭ法测定细胞角蛋白表达，实验组比空白及阴性对照组阳性率显著降低（Ｐ＜０．０５）；ＨＬＡ免疫组化检测结果表明，ＬＭＰ表达细胞系ＨＬＡⅠ类及Ⅱ类抗原的表达都明显下降（Ｐ＜０．０１）。结论ＥＢＶ－ＬＭＰ对ＣＮＥ１细胞生长有明显的促进作用且可明显抑制细胞分化，ＬＭＰ可致鼻咽癌细胞ＨＬＡ抗原的表达改变。     

肺淋巴上皮瘤样癌与EB病毒的相关性

目的为阐明肺淋巴上皮瘤样癌（ｌｙｍｐｈｏｅｐｉｔｈｅｌｉｏｍａ－ｌｉｋｅｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＬＥＬＣ）与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）的关系。方法对３０例肺ＬＥＬＣ和１９例肺非ＬＥＬＣ的石蜡包埋组织，采用原位杂交、免疫组化技术检测ＥＢＶ的存在情况及其基因表达特征。结果肺ＬＥＬＣ中原位杂交ＥＢＶ小ＲＮＡ（ＥＢＥＲｓ）阳性率为９３．３％（２８／３０）；而免疫组化潜在膜蛋白（ｌａｔｅｎｔｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎ，ＬＭＰ１）阳性率分别为５３．３％（１６／３０）和２３．３％（７／３０）；１９例病毒衣壳抗原（ｖｉｒｕｓｃａｐｓｉｄａｎｔｉｇｅｎ，ＶＣＡ）阳性率为２３．３％（７／３０）；１９例非ＬＥＬＣ肺癌中原位杂交检测ＥＢＥＲｓ、免疫组化检测ＬＭＰ１均为阴性。结论肺ＬＥＬＣ与ＥＢＶ密切相关，ＥＢＶ可能在肺ＬＥＬＣ发生发展中起重要的作用；ＥＢＶ在肺ＬＥＬＣ中主要以潜伏状态存在，只有少量病毒进入溶解周期。     

EBV-LMP及二甲基亚砜对人鼻咽癌细胞生长分化的影响

目的：研究ＥＢＶ－ＬＭＰ及二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）对人鼻咽癌（ＮＰＣ）细胞体外生长分化的影响。方法：以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象，采用电穿孔基因转染技术，将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞，以载体质粒转染及ＣＮＥ１细胞为对照，用细胞体外增殖实验、流式细胞仪和免疫组化等方法，观察细胞生长分化的变化情况。结果：ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞的增殖，实验组与空白组及阴性对照组比较Ｐ＜０．０１，实验组Ｓ期细胞明显增多，细胞角蛋白表达显著下降（Ｐ＜０．０５），有向低分化鳞癌发展倾向；ＤＭＳＯ诱导后ＣＮＥ１细胞增殖力明显下降（Ｐ＜０．０１），细胞角蛋白表达显著增高（Ｐ＜０．０１）；ＬＭＰ可明显抑制ＤＭＳＯ对ＣＮＥ１细胞的诱导分化作用，转染细胞诱导后增殖力和角蛋白表达无显著改变（Ｐ＞０．０５）。结论：ＤＭＳＯ可在一定程度上诱导ＣＮＥ１细胞分化；ＥＢＶ－ＬＭＰ对ＣＮＥ１细胞生长有明显的促进作用，可抑制细胞分化及降低细胞对终末分化信号的反应，有助于深入研究ＮＰＣ的发生机理及防治     

SLE病人外周血Bcl—2／JH基因重排检测的意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测３１例ＳＬＥ病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）Ｂｃｌ－２／ＪＨ基因重排现象和流式细胞仪间接双标记法分析其Ｔ（ＣＤ３）、Ｂ（ＣＤ１９）细胞Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果显示，ＳＬＥ病人Ｔ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达明显高于正常人（４２．９５％±２８．４７％对比９．９４％±４．９６％，Ｐ＝０．０００４），尤其以活动期ＳＬＥ病人为明显，而Ｂ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达与正常人之间并无统计学差异（７９．２１％±１０．６９％对比８１．９６％±６．９７％；Ｐ＝０．４６０２）。７例ＳＬＥ病人具有典型的Ｂｃｌ－２／ＪＨ基因重排（占２２．５８％），且均为ＳＬＥ活动期病人，其Ｔ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达明显高于无基因重排的ＳＬＥ病人，其Ｂ细胞Ｂｃｌ－２表达并无差异（Ｐ＞０．３９０５）。说明Ｂｃｌ－２／ＪＨ基因重排现象可见于ＳＬＥ，并与Ｔ细胞Ｂｃｌ－２蛋白高表达有关，表明细胞凋亡抑制基因Ｂｃｌ－２在ＳＬＥ发病机制中具有重要作用。     

EB病毒潜伏感染在不同部位T细胞淋巴瘤中的表达

目的：探讨不同部位Ｔ细胞淋巴瘤（ＴＭＬ）与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）感染的关系。方法：对１００例不同部位的ＴＭＬ（结内４０例、结外６０例），采用原位杂交法检测肿瘤细胞ＥＢＶ编码的ＲＮＡ（ＥＢＥＲ１／２）。结果：（１）１００例中ＥＢＥＲ１／２检出率４８％（４８／１００），结内ＴＭＬ检出率３０％（１２／４０），结外ＴＭＬ检出率６０％（３６／６０），结内、结外ＥＢＶ检出率差异有非常显著意义（Ｐ＜０．０１）。（２）结外呼吸道ＴＭＬＥＢＥＲ１／２检出率鼻腔、鼻咽、口咽和肺分别是８８．９％（１６／１８）、７１．４％（５／７）、４７．６％（１０／２１）、３３．３％（１／３）。（３）胃肠道、软组织ＴＭＬＥＢＥＲ１／２检出率分别是１６．７％（１／６）、３３．３％（１／３）。结论：ＥＢＶ感染在不同部位ＴＭＬ中的表达具有明显部位限制性，特别是鼻腔、鼻咽的ＴＭＬ与ＥＢＶ关系最密切，其ＥＢＥＲ１／２检出率明显高于身体其它部位Ｔ细胞淋巴瘤     

腮腺淋巴上皮瘤样癌与EB病毒感染的关系

目的：研究ＥｐｓｔｅｉｎＢａｒｒ 病毒（ＥＢＶ）与腮腺淋巴上皮瘤样癌（ｌｙｍｐｈｏｅｐｉｔｈｅｌｉｏｍａｌｉｋｅｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＬＥＬＣ）的关系,并检测瘤细胞内ＥＢＶ 基因编码产物。方法：作者收集了中山医科大学所属病理科１９８６ 年１ 月至１９９５ 年１２ 月间３２ 例腮腺ＬＥＬＣｓ．。３２ 例ＬＥＬＣ石蜡包埋标本再次切片。采用免疫组化和原位核酸杂交法检测瘤细胞内ＥＢＶ 基因表达产物。结果：（１） 在１２５例腮腺癌中有３２ 例淋巴上皮瘤样癌,占总病例的２５－６％ （３２／１２５） 。（２）所有３２ 例腮腺ＬＥＬＣ组织中均有数量不等的ＥＢＮＡ１ 和ＥＢＥＲｓ 阳性瘤细胞。（３）２７ 例ＬＥＬＣ 组织中部分瘤细胞表达ＬＭＰ１ 。（４） 所有标本中均未见ＺＥＢＲＡ 阳性细胞。（５）３２例腮腺ＬＥＬＣ组织中ＥＡＤ、ＶＣＡ和ＭＡ的阳性表达率分别为７１－９ ％（２３／３２） 、６８－８ ％（２２／３２） 和１２－５％ （４／３２） 。结论：（１） 在鼻咽癌高发的广州地区,腮腺ＬＥＬＣ的发病率也较高。（２）腮腺ＬＥＬＣ 组织中均有ＥＢ病毒感染。（３）ＥＢ病毒在腮腺ＬＥＬＣ的感染主要为潜伏Ⅱ型,即表达ＥＢＮＡ１ 、ＥＢＥＲｓ 和ＬＭＰ１     

伯基特淋巴瘤与EB病毒的关系及其p53和bcl-2蛋白的表达

目的 了解柏基特淋巴瘤和ＥＢ病毒的关系及ｐ５３和ｂｃｌ－２蛋白的表达。方法 采用ＰＣＲ、原位ＰＣＲ及免疫组化ＬＳＡＢ方法,检测了２８例伯基特淋巴瘤石蜡包埋的组织块。结果 发现８例ＥＢ病毒ＤＮＡ阳性,阳性率为２８．５％,８例阳性病例做了原位杂交,其中３例为阳性。２７例做了ｐ５３和ｂｃｌ－２免疫组化检测,生病例各为１２例（４４．４％）和１３例（４８．１％）。Ⅰ￣Ⅱ期和Ⅲ￣Ⅳ期ｐ５３和ｂｃｌ－２阳性病例     

血小板衍生性生长因子对体外培养人肾小球系膜细胞生长的影响

目的观察血小板衍生性生长因子（ＰＤＧＦ）对体外培养的人肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）生长、基质合成和分泌以及ｃ┐ｍｙｃ癌基因表达的影响。方法体外培养的ＭｓＣ培养液中掺入５┐溴脱氧尿嘧啶（ＢｒｄＵ）,采用ＢｒｄＵ单克隆抗体免疫组化法检测ＭｓＣ的增殖情况;应用［３Ｈ］脯氨酸掺入酶消化法测定ＭｓＣ细胞内、外胶原蛋白总量;采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法检测纤维连接蛋白（ＦＮ）、Ⅳ型胶原、核癌基因ｃ┐ｍｙｃｍＲＮＡ表达结果。结果（１）ＢｒｄＵ掺入法的阳性细胞标记指数在对照组为１９．５％,ＰＤＧＦ组为３４．５％（Ｐ＜０．０１）;（２）ＭｓＣ经ＰＤＧＦ作用后,细胞内、外胶原蛋白量分别为２．６９±０．６０％和３．８７±０．６５％,较正常对照组１．２５±０．５０％和１．６１±０．５１％明显增加（Ｐ＜０．０１）;（３））Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法显示ＰＤＧＦ组细胞的ＦＮ、Ⅳ型胶原及ｃ┐ｍｙｃｍＲＮＡ的表达明显高于正常组。结论ＰＤＧＦ不仅可刺激肾小球ＭｓＣ的增殖和胶原蛋白合成,而且可从基因转录水平增加ＦＮ、Ⅳ型胶原及ｃ┐ｍｙｃ癌基因的表达。由此推断ＰＤＧＦ在肾小球疾病的发生、发展中可能起着重要作用     

Epstein-Bar病毒潜伏膜蛋白在喉癌组织中的表达

为了探讨Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒在喉鳞癌细胞中的表达情况，对９０例喉鳞癌组织进行了Ｅｐ－ｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒潜伏膜蛋白（ＥＢＶ－ＬＭＰ－１）的检测，结果显示，ＬＭＰ－１主要定位于细胞膜和细胞浆内，９０例喉鳞癌中ＬＭＰ－１阳性者４１例，阳性检出率为４５．５％，其中低分化鳞癌阳性率为４４％（１２／２７），中分化鳞癌为５２％（２５／４８），高分化鳞癌为２６．６％（４／１５）。提示，ＥＢ病毒不仅存在于低分化喉鳞癌中，也存在于高分化鳞癌中，喉癌的发生可能与ＥＢ病毒感染有关。     

4种癌基因mRNA在胃癌组织中的表达及意义

应用原位分子杂交（ＩＳＨ）技术，检测８８例胃癌组织中Ｋ－ｒａｓ、Ｈ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ和肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３（Ｈ１）ｍＲＮＡ．其阳性结果分别为７８．４％、７０％、５８％和３８．６％，胃癌癌旁移行区正常粘膜和正常胃粘膜上皮的阳性率分别为１８．２％、１７％、１９．３％、２１．６％和０、０、０、３／５，与肿瘤区相比较，除ｎｍ２３外差异均非常显著（Ｐ＜０．０１）。Ｋ－ｒａｓ、Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ表达在在细胞膜内侧，Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ主要表达在细胞核内，ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达在胞浆内。４种癌基因表达与组织学类型无关，ｎｍ２３－Ｈ１的表达与胃癌病人有无淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０１）。     

胸腺肿瘤组织中EB病毒、细胞增殖和凋亡的检测

目的 研究胸腺肿瘤在广州５所医院的发病情况,与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）感染是否相关以及肿瘤细胞增殖和凋亡的等级,方法 以４３例胸腺肿瘤和７例胸腺增生组织主研究对象,采用原位分子杂交检测ＥＢ病毒编码的ＥＢＥＲｓ,免疫组化ＬＳＡＢ法检测ＥＢＮＡ－１,ＬＭＰ－１,ＰＣＮＡ,ｂｃｌ－２和ｐ５３原位细胞凋亡（ＴＵＮＥＬ）方法检测细胞凋亡,结果 （１）胸腺疾病在广州５所医院活检中仅占有０．０５７％,其中肿瘤占７４．     

鼻腔和鼻咽非霍奇金淋巴瘤EB病毒潜伏膜蛋白表达

目的；探讨鼻咽癌高发区人群鼻咽／鼻腔原发非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）感染的关系，方法：对４１例鼻咽和鼻腔ＮＨＬ进行免疫细胞学分型以及ＥＢＶ潜伏膜蛋白（ＬＭＰ１）检测。结果：发现（１）鼻咽／鼻腔ＮＨＬ的ＬＭＰ１检出率为４８．８％（２０／４１），（２）鼻咽ＮＨＬ的ＬＭＰ１检出率３７．９％（１１／２９），鼻腔７５％（９／１２），（３）Ｔ细胞性淋巴瘤ＬＭＰ１检出率６０％（１５／２５），Ｂ细     

82例小儿何杰金淋巴瘤与EB病毒相关的研究

采用免疫组化方法研究了８２例小儿何杰金淋巴瘤标本内ＥＢ病毒编码的潜在膜蛋白（ＬＭＰ），发现６７例ＬＭＰ阳性，其中混合细胞型阳性率为９０．９％，年龄在３－５岁患者阳性率达１００％，６－１０岁患者阳性率为７５％，而１１－１４岁的患者阳性率只有６２％。这提示ＥＢ病毒和何杰金淋巴瘤关系非常密切，年龄越小，阳性率越高。混合细胞型与ＥＢ病毒的关系比其它各型更加密切。     

EGR-1、c-erbB-2、ER、PR在乳腺癌中的表达及其相互关系

目的：探讨早期生长反应基因（ＥＧＲ－１）在乳腺癌的表达及其与癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２和ＥＲ、ＰＲ的关系。方法：应用免疫组织化学ＳＡＢＣ法,以ＥＧＲ－１、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＲ、ＰＲ抗体标记７５例不同病变的乳腺组织。结果：乳奶性病变可见相对高水平的ＥＧＲ－１表达而乳腺癌ＥＧＲ－１阳性仅１９例（４２．２％）,ＥＧＲ－１表达与乳腺癌淋巴结转移和ＥＲ、ＰＲ表达有关（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）,与ｃ－ｅｒｂ     

乳腺癌中凋亡与细胞增殖及Rb、bcl-2、c-myc蛋白表达的关系

目的：了解人乳腺癌中凋亡与细胞增殖的关系,以及与相关基因蛋白表达的关系及其预后意义。方法：用免疫组化ＬＳＡＢ法检测了９０例乳腺标本（包括１３例良性乳腺病变和７７例乳腺癌）中Ｒｂ、ｂｃｌ２和ｃｍｙｃ的蛋白表达;并计数了癌组织中的凋亡指数（ＡＩ,ＴＵＮＥＬ法）和有丝分裂指数（ＭＩ）。结果：ＡＩ与ＭＩ呈显著的正相关（ｒ＝０８１,Ｐ＜００１）;ＡＩ、ＭＩ和Ｒｂ蛋白表达与肿瘤大小和组织学分级有关,ＡＩ、ＭＩ低和ｂｃｌ２的高表达与５年生存率有关,ｃｍｙｃ的表达仅与组织学等级有关（Ｐ＜００５）;Ｒｂ表达与ＡＩ、ＭＩ均有关（Ｐ＜００１）,而ｂｃｌ２的表达仅与ＡＩ有关（Ｐ＜００５）。结论：乳腺癌中凋亡与细胞增殖和ｂｃｌ２表达有关,提示凋亡在具有不同生长潜能的亚群的克隆性选择中发挥重要作用。Ｒｂ与凋亡的关系提示细胞凋亡与细胞周期有关。