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阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接的研究进展 总被引:5,自引:3,他引:2
阴茎海绵体平滑肌的收缩能力在人类阴茎勃起中起重要作用。了解引发、维持和调节阴茎海绵体平滑肌张力的机制是进一步认识、诊断和治疗阴茎勃起功能障碍的前提。尽管如此 ,在生理学上 ,想认识内源性和外源性血管调节剂如何作用于个体阴茎海绵体平滑肌细胞的确切机制 ,以及在成对的阴茎海绵体中 ,这些信号如何在各个实质细胞中传递的过程仍较困难。本文目的 :①综述目前所了解的阴茎海绵体平滑肌张力在细胞和分子水平的调节机制 ;②综述各种方法在间隙通道研究中的应用 相似文献
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应用RNA干扰技术抑制PDE5A3基因在人阴茎海绵体平滑肌细胞表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的应用RNA干扰(RNAi)技术抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5A3基因的表达,探讨应用该技术治疗勃起功能障碍(ED)的可行性.方法构建6个靶向人PDE5A3基因的短发夹RNA(shRNA)重组质粒,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞48 h后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测PDE5A3基因的表达抑制效果.结果抑制率最高的1、2、4号重组质粒使PDE5A3基因表达在mRNA水平分别抑制(66.26±4.02)%,(54.90±3.06)%,(23.83±3.61)%;在蛋白质水平分别抑制(64.14±3.32)%,(49.21±2.96)%,(29.85±4.91)%.结论RNAi能明显抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5A3基因的表达,且抑制率具有序列相关性,是潜在的ED基因治疗新方法. 相似文献
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阴茎海绵体平滑肌细胞是组成阴茎海绵体的主要功能成分,其表型转化是平滑肌细胞增殖和迁移的关键性起始步骤。因此,探讨平滑肌细胞表型转化的机制及其影响因子在阴茎勃起功能障碍的防治过程中具有重要意义。目前通常将平滑肌细胞分为收缩型(分化型)和合成型(未分化型、增殖型或去分化型)两种类型,并发现L转化生长因子(TGF-β)、转录因子E2F1、基本转录元件结合蛋白2(BTEB2)、胰岛素等因素可能影响平滑肌细胞表型转化。本文就近年来阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化及其影响因子的研究进展作一简要综述。 相似文献
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为评价西地那非对培养的阴茎海绵体平滑肌细胞(CVSMCs)中超氧化物的生成及gp47(phox)(NADPH氧化酶的活性亚基)表达的影响。Koupparis AJ等进行了一项体外试验。CVSMCs取自家兔阴茎,通过U46619(TXA2类似物)在37℃下培养1h或16h,并按是否加入西地那非分为两组。通过分光光度计测量到的高铁细胞色素C的减少可以反映超氧化物歧化酶受抑制所致超氧化物的生成增多,而gp47(phox)则可以通过Western印迹术检测分析。再利用NADPH氧化酶和cGMP各自的特异性抑制剂, 相似文献
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家兔阴茎海绵体平滑肌细胞体外培养方法对比研究 总被引:6,自引:2,他引:6
目的 探索更好、更方便的家兔阴茎海绵体平滑肌细胞体外培养方法。方法 分别采用组织块法、酶消化法、组织块 酶消化法对家兔阴茎海绵体平滑肌细胞进行培养 ,在倒置显微镜下对培养过程的细胞分别作了生长情况及形态学观察。用HE染色、MTT法分别描绘原代培养细胞的生长曲线、细胞分裂指数曲线 ;用倒置显微镜观察活细胞的贴壁过程 ,计数法测定细胞贴壁率。结果 组织块法及酶消化法培养的细胞其生长状况和形态学各有自己的特点。组织块法的细胞生长慢 ,培养时间相对较长 ,纯度相对较高 ,原代培养细胞生长速度快 ,但由于该法消化时间不易掌握 ,常影响其成功率 ,多数细胞呈梭形 ,细胞的密度高 ,原代培养时间为 7~ 10d。结论 每种培养方法都有各自的优缺点。我们可根据实验的需要而选择不同的方法或联合培养 相似文献
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目的:探讨红景天苷对H_2O_2所致大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)缝隙连接蛋白43(Cx43)表达下调的干预作用。方法:体外分离、培养SD大鼠CCSMC,并利用免疫细胞荧光技术进行细胞鉴定。MTT法检测H_2O_2对CCSMC存活率的影响,以确定最佳干预浓度。利用最佳浓度H_2O_2于体外对CCSMC进行干预,并设立干预时间梯度;利用H_2O_2处理CCSMC的同时,加入低(16μg/ml)、高浓度(64μg/ml)红景天苷进行干预,最终提取获得各组别蛋白,并通过Western印迹检测Cx43表达。结果:原代培养的CCSMC生长状态正常,细胞鉴定结果显示阳性率达90%以上。MTT试验确定用于体外实验的H_2O_2最佳浓度为200μmol/L。利用200μmol/LH_2O_2处理CCSMC 0、1、2、4 h,与空白组相比,1、2、4 h组CCSMC中Cx43蛋白水平显著下降(P0.01);与1 h和2 h组相比,4 h组CCSMC中Cx43蛋白水平显著下降(P0.01)。利用200μmol/LH_2O_2处理CCSMC的同时,分别加入低剂量和高剂量红景天苷进行干预,与正常对照组相比, H_2O_2处理组CCSMC中Cx43蛋白表达明显下降(P0.05),高剂量红景天苷处理后可抑制该现象(P0.01),且高剂量红景天苷组CCSMC中Cx43蛋白水平与正常对照组相比无统计学差异(P=0.322 2)。结论:红景天苷在体外具有调节H_2O_2所致大鼠CCSMC中Cx43蛋白表达下降的作用。 相似文献
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目的:探讨低氧和SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)凋亡的关系。方法:体外培养CCSMC,免疫组化鉴定细胞;低氧(1%O2浓度)干预12、24、48、72 h,常规氧浓度作为对照,流式细胞术测定细胞周期变化和凋亡情况。结果:体外培养的CCSMC生长良好,抗平滑肌α-肌动蛋白单克隆抗体免疫组化DAB法染色阳性。流式细胞术检测CCSMC G0/G1期在48 h内细胞比例逐渐增加,后下降;S期细胞比例与G0/G1期呈相反趋势;G2/M期细胞比例无明显规律。结论:CCSMC在低氧环境下,随时间的延长凋亡程度加重,48 h达到最大值,进一步延长时间细胞裂解,不能加重凋亡。 相似文献
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成人及家兔阴茎海绵体平滑肌细胞培养和鉴定 总被引:15,自引:3,他引:12
目的 :探索阴茎海绵体平滑肌细胞 (CCSM)体外培养及鉴定方法。 方法 :采用勃起功能正常的成年男子及新西兰家兔的新鲜阴茎标本 ,经处理后采用原代细胞培养法 ,对阴茎海绵体组织块进行培养 ,获得CCSM后用光镜、透射电镜和免疫组化等多种方法从细胞形态学及CCSM生长特性等不同侧面对培养的人及新西兰家兔的CCSM进行鉴定 ,并测定CCSM在体外培养时的细胞增殖情况。 结果 :经 2 4h潜伏期 ,体外培养的CCSM进入指数增长期 ,维持约 96h后进入平台期 ;从接种组织块至长成单层细胞约需 15~ 2 0d ,传代后约 4~ 7d后长成单层 ;传代后的细胞增殖旺盛 ,成束状生长 ,并呈现层叠排列及“峰 谷”现象 ;CCSM在体外可稳定传 7~ 12代 ,传代期间其形态及增殖活性变化不明显 ;各种检测鉴定均证实所获细胞为CCSM。 结论 :CCSM原代细胞培养法简便、稳定、可靠 ,对研究阴茎的勃起机制及勃起功能障碍的发生、发展、调控及其治疗药物筛选有重要理论及现实意义。 相似文献
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钙通道阻滞剂舒张阴茎海绵体平滑肌的研究进展 总被引:1,自引:1,他引:0
钙通道广泛存在于心肌、骨骼肌、平滑肌及神经元细胞膜上 ,钙通道阻滞剂因其舒张血管平滑肌而广泛应用于心血管疾病的治疗。本文综述了钙通道阻滞剂舒张阴茎海绵体平滑肌的实验研究的最新进展 ,能否应用于阴茎勃起功能障碍的诊断和治疗尚有待进一步研究和探讨 相似文献
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外伤性阴茎海绵体破裂的诊断与治疗(附12例报告) 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:总结外伤性阴茎海绵体破裂的诊断与治疗经验。方法:回顾性分析2001年1月~2010年1月收治的12例阴茎海绵体破裂患者的临床资料:12例患者年龄28~47岁,平均36.5岁。致伤原因为粗暴性交9例,硬物砸伤1例,骑跨伤1例,斗殴致伤1例。12例均急诊行阴茎折断修补手术,结果:术后随访2~26个月,发生1例阴茎勃起后疼痛,1例尿道狭窄,1例勃起功能障碍,均经恰当的治疗后在不同的时间内恢复。结论:急诊手术是外伤性阴茎海绵体破裂的恰当治疗方法。 相似文献
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内源性一氧化碳对离体犬阴茎海绵体平滑肌的作用 总被引:3,自引:3,他引:0
目的:探讨内源性一氧化碳(CO)对离体犬阴茎海绵体平滑肌作用的影响。方法:利用水浴条件下阴茎海绵体肌条的张力测定技术,用CO合成的关键酶血红素氧合酶(HO)的诱导剂———氯高铁血红素诱导海绵体平滑肌生成内源性CO,观察CO对去氧肾上腺素(PE)诱导收缩的阴茎海绵体肌条作用的影响。结果:氯高铁血红素对10μmol/L PE诱导的肌条收缩具有浓度依赖性的松弛作用,10~100μmol/L氯高铁血红素对平滑肌肌条的松弛效应与空白对照相比明显升高(P<0.01)。用锌原卟啉-Ⅸ(ZnPP-Ⅸ)或亚甲蓝孵育处理后的肌条,氯高铁血红素的舒张作用明显减弱(P<0.01)。结论:内源性CO具有浓度依赖性松弛阴茎海绵体平滑肌的作用,其机制可能是通过CO环磷酸鸟苷途径作用所致。 相似文献
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目的:研究兰尼碱受体1(RyR1)和电压门控钙离子通道1.3(CaV1.3)在去势大鼠阴茎海绵体平滑肌的表达,探讨其在去势后勃起功能障碍发生中的作用。方法:40只8周龄雄性SD大鼠随机均分成:假手术2周组(A组),假手术4周组(B组),去势2周组(C组),去势4周组(D组)。术后实验各组检测血清睾酮(T)水平,免疫组化及RT-PCR技术检测RyR1和CaV1.3在大鼠阴茎海绵体平滑肌中的表达。结果:血清T水平C组[(15.97±5.67)nmol/L]和D组[(2.03±1.57)nmol/L]分别较A组[(90.54±20.13)nmol/L]和B组[(120.35±30.32)nmol/L]显著下降(P<0.05)。RyR1、CaV1.3在各组大鼠阴茎海绵体平滑肌中均有表达,RyR1 mRNA相对表达量灰度比值C组(0.51±0.24)和D组(0.33±0.15)分别较A组(1.53±0.25)和B组(1.37±0.23)显著降低(P<0.05);CaV1.3 mRNA相对表达量灰度比值C组(0.50±0.12)和D组(0.32±0.07)分别较A组(1.33±0.05)和B组(1.25±0.03)显著降低(P<0.05)。RyR1蛋白积分光密度值(IA)C组(120.36±25.78)和D组(67.39±30.54)分别较A组(300.96±135.12)和B组(330.38±128.59)显著降低(P<0.05);CaV1.3蛋白IA C组(103.37±39.52)和D组(67.56±20.15)分别较A组(298.68±126.35)和B组(327.35±117.37)显著降低(P<0.05)。雄激素水平与RyR1、CaV1.3在阴茎海绵体平滑肌中的表达水平具有正相关性。结论:雄激素可能通过RyR1、CaV1.3的表达调控阴茎勃起功能。 相似文献
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目的:观察腺病毒载体介导特异性短发夹RNA(shRNA)对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,为应用RNA干扰(RNAi)技术治疗阴茎勃起功能障碍(ED)提供实验依据。方法:成功构建携带3条针对人PDESA3基因位点特异性shRNA的重组腺病毒(rAd5-shRNA-PDE5A3),并设立阴性对照病毒组和空白对照组,分别转染人阴茎海绵体平滑肌细胞。以放射免疫法分别检测转染重组腺病毒24、48、72h后细胞内cGMP浓度变化,观察rAd5-shRNA-PDE5A3对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果:实验组rA(15-shRNA-PDE5A3转染人阴茎海绵体平滑肌细胞后胞内cGMP水平显著高于阴性对照组和空白对照组,在转染后72h最为显著。结论:3条特异性针对人PDE5A3mRNA靶位点的shRNA可有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,增强对PDE5基因的阻抑效果。 相似文献
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目的:观察腺病毒载体介导特异性短发夹RNA(shRNA)对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,为应用RNA干扰(RNAi)技术治疗阴茎勃起功能障碍(ED)提供实验依据。方法:成功构建携带3条针对人PDE5A3基因位点特异性shRNA的重组腺病毒(rAd5-shRNA-PDE5A3),并设立阴性对照病毒组和空白对照组,分别转染人阴茎海绵体平滑肌细胞。以放射免疫法分别检测转染重组腺病毒24、48、72h后细胞内cGMP浓度变化,观察rAd5-shRNA-PDE5A3对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果:实验组rAd5-shRNA-PDE5A3转染人阴茎海绵体平滑肌细胞后胞内cGMP水平显著高于阴性对照组和空白对照组,在转染后72h最为显著。结论:3条特异性针对人PDE5A3mRNA靶位点的shRNA可有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,增强对PDE5基因的阻抑效果。 相似文献
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Junichi Matsuzaka Hikaru Aoki Tomoaki Fujioka Takashi Kubo Naoki Yasuda 《International journal of urology》1996,3(1):47-53
Background : Physiological erection of the penis requires multiple mechanisms causing an increase in the arterial blood influx into, and decrease in the venous drainage out of the cavernous space. Methods : We investigated the extent and location of the venous occlusion that occurs with penile erection within (intrinsic mechanism) and outside (extrinsic mechanism) the corpus cavernosum penis, using 15 adult male mongrel dogs. Under controlled flows produced by a combination of aortic ligation and constant infusion of saline into the corpus cavernosum penis, or into the deep dorsal vein, pressures within the cavernous space or deep dorsal vein were measured before and after electrical stimulation of the pelvic splanchnic (pelvic nerve), the hypogastric, and pudendal nerve. An increase in pressure following nerve stimulations represented an increase in outflow resistance due to occlusion of the venous system. Pre- and post-stimulation radiologic evaluations were performed to determine the site(s) of venous occlusion. Results : Unilateral stimulation of the pelvic nerve caused leftward shift of the corporeal pressure-flow curve. Bilateral stimulation of the pudendal nerve caused a marked rise in deep dorsal vein pressure. Conclusions : Both intrinsic and extrinsic venous occlusion mechanisms exist and that the former is activated primarily by unilateral stimulation of the pelvic nerve and the latter by bilateral stimulation of the pudendal nerve. The occlusion site for the extrinsic mechanism was localized to where the dorsal vein penetrates the muscles at the base of the pelvis, whereas the precise site for the intrinsic mechanism could not be determined. 相似文献