LC-MS/MS法测定人血浆中伪麻黄碱、可待因和愈创木酚甘油醚的浓度

目的:建立同时测定人血浆中伪麻黄碱、可待因和愈创木酚甘油醚浓度的方法。方法:采用液-质联用(LC-MS/MS)法,取血浆样品0.5 ml经固相萃取后,以甲醇-2 mmol/L醋酸铵(0.5%甲酸溶液)(35∶65,V/V)为流动相,O-去甲基右美沙芬为内标,经C18柱分离;采用双质谱(MS/MS)检测器,电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z 166.4→m/z 115.2(伪麻黄碱)、m/z 300.5→m/z 215.2(可待因)、m/z 199.3→m/z 125.2(愈创木酚甘油醚)、m/z 258.2→m/z 157.1(内标)。结果:伪麻黄碱、可待因、愈创木酚甘油醚血药浓度分别在1.0~1 000.0 ng/m(lr=0.999 1)、0.5~500.0 ng/m(lr=0.999 6)、5.0~5 000.0 ng/m(lr=0.999 7)范围内线性关系良好;定量下限分别为1.0、0.5、5.0 ng/ml;提取回收率分别在64.6%~69.1%、68.3%~72.8%、72.5%~75.5%之间,日内、日间RSD均<8.0%。结论:本方法专属性强、灵敏、准确,适用于伪麻黄碱、可待因、愈创木酚甘油醚的临床药动学研究。     

HPLC法同时测定呼伦贝尔产赤芍防治心血管系统疾病有效物质群中3种成分的含量

目的:建立同时测定呼伦贝尔产赤芍防治心血管系统疾病有效物质群中芍药苷、羟基芍药苷、芍药内酯苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Inertsil ODS-SP(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水溶液(梯度洗脱),流速为1.0ml/min,检测波长为230 nm,进样量为20μl。结果:芍药苷、羟基芍药苷、芍药内酯苷的质量浓度分别在10.00¹00.00、1.00100.00、1.00²5.00、0.4025.00、0.40¹0.00μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.999 5、0.999 1、0.999 2);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;平均加样回收率分别为98.17%(RSD=1.14%,n=6)、98.08%(RSD=1.50%,n=6)、98.07%(RSD=1.03%,n=6)。结论:该方法操作简便、快速,结果准确,可用于控制呼伦贝尔产赤芍的质量。     

红景天苷在比格犬体内绝对生物利用度研究

目的建立比格犬血浆中的红景天苷的HPLC-MS/MS测定方法,研究红景天苷在比格犬体内的绝对生物利用度。方法以天麻素为内标,血浆样品经蛋白沉淀后,经Symmetry RP18(100 mm×4.6 mm,3.5μm)柱分离,使用体积分数0.1%甲酸溶液(A)-含0.1%甲酸和20%乙腈的甲醇溶液(B)作为流动相,进行等度洗脱(35%B),流速为0.4 ml/min,柱温40℃,进样量2μl;通过电喷雾电离源(ESI),以多反应监测(MRM)模式进行负离子检测,红景天苷、天麻素的MRM离子对分别为m/z 299.1→118.9、m/z 285.1→122.9。比格犬分别以口服和静注两种给药方式给予红景天苷原料药,在不同时间点取血,样品采用HPLC-MS/MS法测定,研究红景天苷的药动学及绝对生物利用度。结果红景天苷的质量浓度在10~10000 ng/ml内线性关系良好(r>0.9986),最低定量浓度为10.0 ng/ml。方法回收率为89.5%~91.8%,日内精密度(RSD)<9.7%,日间精密度(RSD)<7.3%。单剂量口服15 mg/kg或静注1.5 mg/kg红景天苷原料药后,cmax分别为(9680±3725)和(9310±1645)ng/ml;tmax分别为(1.25±0.67)和(0.011±0.017)h,AUC0?t分别为(20535.4±5200.0)和(4646.7±720.5)ng·h/ml,AUC0-∞分别为(20607.9±5266.2)和(4691.6±715.2)ng·h/ml;t1/2分别为(1.31±0.63)和(0.98±0.13)h。结论该方法简便快速、灵敏可靠,可用于红景天苷体内过程研究。红景天苷在比格犬体内的绝对生物利用度为(43.9±11.2)%。     

高效液相色谱法同时测定四物合剂中4种活性成分的含量

目的:建立同时测定四物合剂中芍药苷、腺苷、川芎嗪和阿魏酸4种有效成分含量的高效液相色谱方法。方法:采用Symmetry C18色谱柱(150mm×3.9mm,5.0μm);流动相为0.05%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),线性梯度洗脱(0~5min,10%B;5~10min,10%B→20%B;10~45min,20%B→45%B),流速1.0mL.min-1;柱温35℃;检测波长分别为230nm(芍药苷),260nm(腺苷),282nm(川芎嗪),323nm(阿魏酸)。结果:芍药苷、腺苷、川芎嗪和阿魏酸的质量浓度分别在9.50~190,5.70~114,3.02~603,8.00~160mg.L-1范围内呈良好线性关系(R2≥0.992);日内、日间精密度良好,RSD均小于1.95%(n=6);各组分低、中、高浓度的平均加样回收率均在98.5%~101.2%之间,RSD均小于1.85%(n=6);四物合剂中芍药苷、腺苷、川芎嗪和阿魏酸的质量浓度分别为(1 758.0±2.1),(187.4±1.4),(78.7±0.5),(90.9±1.0)mg.L-1。结论:本方法简便可靠,重复性好,可全面反映四物合剂中各...     

犬血浆中氨氯地平和阿托伐他汀的LC-MS／MS测定

建立了LC-MS/MS法同时测定犬血浆中氨氯地平和阿托伐他汀的含量.用甲醇沉淀血样中的蛋白质.采用C18色谱柱,2 mmol/L醋酸胺溶液(含0.5%甲酸).甲醇(32:68)为流动相,以地西泮为内标,电喷雾离子化,正离子多反应监测,检测离子分别为m/z409.2→m/z 238.1(氨氯地平)、m/z 559.2→m/z 440.5(阿托伐他汀)和m/z285.1→m/z 193.1(地西泮).结果氨氯地平和阿托伐他汀在0.1～20ng/ml和0.2～50 ng/ml度范围内线性关系良好,定量限为0.1和0.2 ng/ml,方法回收率均大于94%,日内、日间RSD均小于9%.     

LC-MS/MS法测定人血浆中表柔比星浓度及其药动学研究

目的:建立测定人血浆中表柔比星浓度的方法并研究其药动学行为。方法:以液-液萃取法进行样品前处理,采用液-质联用法进样测定。色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18,流动相为甲醇-水(含0.1%甲酸)(55∶45),流速为0.3 ml/min。电喷雾离子化电离源(ESI),正离子方式检测,扫描方式为多反应监测(MRM),用于定量的离子分别为表柔比星m/z 544.2→397.1和柔红霉素(内标)m/z 528→321。结果:表柔比星血药浓度在0.506²02.4 ng/ml范围内线性关系良好,最低定量限(LLOQ)为0.506 ng/ml;提取回收率均>80%,方法回收率为95.09%202.4 ng/ml范围内线性关系良好,最低定量限(LLOQ)为0.506 ng/ml;提取回收率均>80%,方法回收率为95.09%¹12.93%,日内、日间精密度良好(RSD<4%)。4名患者应用表柔比星治疗后,药动学参数cmax、t1/2、tmax、AUC0-144 h分别为(37.54±21.13)μg/L、(38.02±7.63)h、(47.00±8.25)h、(1 132.81±414.92)μg·h/L。结论:本方法经考察符合生物样品的分析要求,可以应用于临床上血浆中表柔比星浓度的测定和药动学研究。     

HPLC法同时测定脑血栓丸中芍药苷和阿魏酸的含量

目的:建立同时测定脑血栓丸中芍药苷和阿魏酸含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Waters SunfireTM C18,流动相为乙腈-水-冰乙酸(17∶82∶1,V/V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为230 nm,柱温为35℃,进样量为20μl。结果:芍药苷、阿魏酸检测质量浓度线性范围分别为0.024~0.240、0.009 4~0.141 0 mg/ml(r均为0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;加样回收率分别为95.00%~97.90%、95.29%~98.24%,RSD分别为0.59%、0.54%(n=6)。结论:本方法操作简单、重复性好,可用于脑血栓丸的质量控制。     

LC-MS/MS法测定人血浆及尿液中缬沙坦的浓度及其药动学研究

目的:建立测定人血浆及尿液中缬沙坦浓度的方法。方法:血浆样品经酸化后用乙醚提取浓度后进行分析;尿液样品直接稀释进样,均采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定,色谱柱为Aglient ZORBAX SB-C18,流动相为0.1%甲酸-乙腈(梯度洗脱),流速0.2 ml/min。电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式测定,缬沙坦定量分析的离子对为m/z 436.4→253.2,定性分析离子对为m/z 436.4→291.3;内标氯沙坦定量分析的离子对为m/z 423.4→207.1,定性分析离子对为m/z 423.4→180.2。结果:血浆和尿液中缬沙坦的线性范围分别为4~5 000 ng/ml(r=0.998 5)、20~50 000 ng/ml(r=0.998 8);最低定量限分别为4、20 ng/ml;血浆萃取回收率为61.21%~70.30%;内标归一化基质效应因子的RSD分别为3.20%、11.21%;日内和日间RSD均≤8.34%。结论:所用方法快速、灵敏度高,适用于人血浆及尿液中缬沙坦的浓度测定及药动学研究。     

人全血中阿莫地喹的LC-MS/MS法测定及其药动学

建立了液相色谱-串联质谱法测定健康志愿者全血中的阿莫地喹(1),并考察其在健康志愿者体内的药动学。以羟化氯喹为内标,使用Agilent Zorbax SB C18柱,乙腈∶20 mmol/L乙酸铵溶液(23∶77)为流动相;采用大气压力化学电离源(APCI),多反应监测(MRM)模式,正离子检测,监测离子对为m/z 356.3→m/z 283.2(1)和m/z 336.0→m/z247.1(内标)。1在0.5~100 ng/ml浓度范围内线性关系良好,日内和日间RSD均小于10.0%,提取回收率大于70.4%。18名男性健康志愿者口服青蒿琥酯1盐酸盐片,主要药动学参数为cmax(25.9±4.7)ng/ml,tmax(1.1±0.3)h,t1/2(13.9±3.9)h,AUC0→t(294.5±42.8)ng·h·ml-1,AUC0→∞(310.3±45.0)ng·h·ml-1。     

双波长反相高效液相色谱法测定柴辛鼻敏康颗粒中芍药苷和阿魏酸含量

目的建立同时测定柴辛鼻敏康颗粒中芍药苷和阿魏酸含量的方法。方法采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Shiseido ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(20∶80),流速为1.0 mL/min,检测波长为芍药苷230 nm、阿魏酸320 nm,柱温30℃。结果芍药苷和阿魏酸进样量分别在0.512～15.36μg(r=0.999 8)和0.065～1.95μg(r=0.999 9)范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率分别为99.87%和100.32%,RSD分别为0.97%和1.17%(n=6)。结论该方法简单、准确度高、专属性强,可有效控制柴辛鼻敏康颗粒的质量。     

UPLC-MS／MS法测定大鼠血浆中决明子特有蒽醌类成分及其药动学研究

目的：建立大鼠血浆中决明子特有蒽醌类成分的超高效液相色谱．串联质谱（UPLC．MS／MS）分析方法,并对其在大鼠体内药动学进行研究。方法：大鼠ig决明子浸膏（5g／kg）后,分别于O、5、10、20、30、45min和1、2、3、4、6、8、12、24h取血样,以UPLC-MS／MS法测定血浆中橙黄决明素、黄决明素、决明素和1-去甲基决明素的质量浓度。色谱柱为AgilentPoroshell120EC．C18流动相为乙腈．30mmol／L乙酸铵水溶液（梯度洗脱）,流速为O．4ml／min,柱温为30℃;质谱采用多反应监测（MRM）,用于定量分析的离子对依次为：m／z343．0→298．1（橙黄决明素）、m／z359．0→286．O（黄决明素）、m／z329．0→271．1（决明素）、m／z343．0→242．0（1-去甲基决明素）和m／z239．0→211．0（1,8-二羟基蒽醌）。结果：橙黄决明素、黄决明素、决明素、1-去甲基决明素回归方程分别为1,=O．034x→0．019（r=0．9999）、y=0．034x＋0．139（r=0．9999）、y=0．009z＋0．136（r=0．9999）、y=0．066z＋0．380（r=0．9999）,橙黄决明素质量浓度在3．24～1296ng／ml、黄决明素质量浓度在0．77~618ng／ml、决明素质量浓度在34．55～1818ng／ml、1-去甲基决明素质量浓度在1．86～1485ng／ml范围内与其峰面积和内标峰面积比值呈良好线性关系。橙黄决明素、黄决明素、决明素、1．去甲基决明素的药动学参数t1/2分别为（9．28±O．12）、（8．69±0．57）、（8．28±0．51）、（7．01±O．62）h,C18分别为（210．28±4．16）、（46．18±1．91）、（119．30±9．74）、（109．28±3．09）μg／L,AUC（0叫分别为（1668．17±62．18）、（265．30±44．39）、（357．81±15．11）、（540．92±19．57）μg／（L·h）。结论：所建立的大鼠体内决明子蒽醌类成分的测定方法灵敏度高、专一性好,可用于决明子蒽醌类成分的体内药动学研究。     

LC-MS/MS法测定大鼠血清中尼洛替尼浓度及其药动学研究

摘 要 目的:建立快速、灵敏的高效液相色谱串联质谱电喷雾法测定大鼠血清中尼洛替尼的浓度,并进行大鼠尼洛替尼胶囊的药动学研究。方法: 以XDB C₁₈色谱柱分离,采用电喷雾离子源（ESI源）;以维拉帕米为内标,血清样品经乙腈沉淀蛋白后,以甲醇（含0.1%甲酸）∶水（含0.1%甲酸）= 50∶50为流动相,流速为0.35 ml·min^-1。以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测,监测离子对分别是m/z 530.2→289.1（尼洛替尼）和内标m/z 455.3→165（维拉帕米）。结果:血清中尼洛替尼的线性范围在5～2000 ng·ml^-1良好。尼洛替尼在大鼠体内的主要药动学参数AUC_0-24、C_max、t_max、t_1/2z、CLz/F分别为(10 055.37±1 405.49) ng·h·ml^-1、(1 273.56±329.49) ng·ml^-1、(6.17±3.37) h、(1.86±1.04) h、(2.01±0.27) L·h^-1·kg^-1。结论:本试验建立的分析方法专属性好,灵敏度高,准确快捷,适用于尼洛替尼大鼠血清生物样品的快速检测。     

当归芍药散提取液中芍药苷和阿魏酸在大鼠体内的血浓度测定

目的：建立HPLC法测定当归芍药散提取液中阿魏酸和芍药苷在大鼠体内血浓度的方法。方法：大鼠给药后30min取血,采用HPLC法对大鼠血样中阿魏酸和芍药苷进行含量测定,色谱柱：Agilent ZORBAXC18柱（150mm×4．6mm,5μm）,流动相：甲醇旬．5％冰醋酸溶液（20：80）,检测波长：230nm（芍药苷）、320nm（阿魏酸）,流速：1．0ml·min^-1,柱温：30℃。结果：芍药苷和阿魏酸的线性范围分别为20．2—404ng（r=0．9998）,6．2—124ng（r=0．9997）,方法回收率、精密度均符合要求,专属性疆一结诊．该方法可用干大鼠体内苜药苷、阿鞔酸的会号测定．     

LC-MS/MS法测定人血浆中的依地普仑及其药动学研究

目的:建立人血浆中依地普仑浓度的LC-MS/MS测定方法,并研究其在健康人体内的药动学特征.方法:以吲哒帕胺为内标,色谱柱:Inspire-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm,Dikma),流动相:甲醇-10 mmol·L-1的醋酸铵水溶液(含0.1%甲酸)(85:15),流速:0.6 ml·min-1;质谱检测依地普仑和内标吲哒帕胺离子对分别为m/z 325.2→109.1,366.1→132.1.20名健康受试者分成两组,分别进行低(10 mg)、高(20 mg)单次给药,其中低剂量单次给药结束后继续进行多次给药的药动学试验.结果:依地普仑的线性范围为0.102 1～102.1 ng·ml-1(r=0.999,n=5),定量下限为0.102 1 ng·ml-1,提取回收率>82.9%,日内和日间RSD≤4.2%.依地普仑单剂量给药后t1/2分别为(47.42±7.87)和(41.51±6.34)h;tmax分别为(5.70±1.64)和(5.50±2.37)h;Cmax分别为(15.35±2.71)和(34.39±2.16)ng·ml-1;AUC0-144分别为(723.61±191.77)和(1 683.37±242.29)ng·h·ml-1;呈线性动力学特征.多剂量给药后Cmax为(16.60±4.21)ng·ml-1;AUCss为(253.89±44.22) ng·h·ml-1;Cav为(10.58±1.84) ng·ml-1和DF(0.95±0.19).结论:该方法适用于依地普仑血药浓度测定及人体药动学研究.     

用HPLC-MS/MS法同时测定Caco-2细胞单层转运介质中吗替麦考酚酯和麦考酚酸的浓度

目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定Caco-2细胞单层转运介质中吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil,MMF)和麦考酚酸(mycophenolic acid,MPA)的浓度,用于药物转运实验研究。方法:采用Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(50mm×2.1mm,3.5μm);流动相A相:甲醇(含0.05%甲酸),B相:水(含0.05%甲酸);梯度洗脱:0～3.60min,40%A,流速:0.3ml/min,3.61～7.00min,65%A,流速:0.6ml/min,7.01～10.00min,40%A,流速:0.6ml/min;柱温:30℃,以吲哚美辛为内标。质谱检测方式:多种反应监测(MRM),选择监测的离子为:m/z433.8→194.8(MMF),m/z319.1→191.0(MPA)和m/z356.0→312.1(吲哚美辛)。结果:MMF和MPA检测的线性范围均为0.01～20μmol/L,线性回归方程分别为MMF:As/Ai=-0.035 2+0.394 5 c(r=0.999 1);MPA:As/Ai=0.005 5+0.050 8 c(r=0.999 5)。低、中、高浓度(0.1、1.5、15μmol/L)MMF的回收率分别为(103.2±7.5)%、(97.3±3.1)%和(96.0±3.4)%,日内、日间RSD<7.27%;低、中、高浓度(0.1、1.5、15μmol/L)MPA的回收率分别为(106.9±1.0)%、(106.0±5.7)%和(108.4±3.2)%,日内、日间RSD<9.25%(n=5)。结论:本研究建立的测定方法简便、准确、灵敏度高,适用于MMF和MPA体外转运实验研究。     

多波长HPLC法同时测定复方黄白胶囊中3种成分的含量

目的:建立同时测定复方黄白胶囊中绿原酸、栀子苷和芍药苷3种成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为ZORBAX Eclipse SB-C8(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-2‰磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,绿原酸、栀子苷和芍药苷的检测波长分别为327、240和232 nm。结果:绿原酸、栀子苷和芍药苷的进样量分别在0.02⁰.19、0.090.19、0.09⁰.84和0.110.84和0.11¹.01μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r分别为0.999 7、0.999 8、0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3%;平均加样回收率分别为99.6%、101.0%和100.2%,RSD分别为1.3%、0.7%和1.4%(n均为6)。结论:所建方法可用于复方黄白胶囊中3种成分的含量测定。     

HPLC-MS/MS测定人体血浆中克拉霉素浓度的方法及方法学确证

目的建立测定人体血浆中克拉霉素浓度的高效液相色谱-串联质谱联法（HPLC-MS/MS）法。方法血浆样本用甲醇沉淀蛋白后,选用色谱柱Agilent-XDB-C8柱（2.1mm×150mm,5μm）,以甲醇（A相）：水（含0.1%甲酸）=85：15（V：V）的比例为流动相,流速为0.2ml/min,选用岛津（SHIMADZU）高效液相色谱系统,串联API3200型三重四极杆质谱仪,采用多重反应监测（MRM）扫描方式进行监测,电喷雾离子化源（ESI源）,正离子方式,用于定量分析的离子反应对分别为质荷比m/z748.4→m/z158.2（克拉霉素）和m/z515.3→m/z276.2（替米沙坦,内标）。结果本方法血浆中克拉霉素的线性范围为10～3000ng/ml（r〉0.99）,定量下限为10ng/ml,批内和批间相对标准偏差均〈15%,准确度（相对回收率）相对标准偏差也均〈15%。稳定性试验中,血浆中克拉霉素在方法学要求的各种贮存条件下均较稳定。结论该方法快速、灵敏、专属性强、重现性好,适用于人体内克拉霉素的药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中替米沙坦的浓度及其人体生物等效性研究

目的:建立以高效液相色谱串联质谱电喷雾(LC-MS/MS)法测定人血浆中替米沙坦浓度的方法,并考察2种替米沙坦片的生物等效性。方法:人血浆样本以乙腈沉淀蛋白后,选用Zorbax SB-C_(18) Narrow Bore色谱柱,以甲醇-10mmol.L~(-1)乙酸铵(含0.5%甲酸)(80∶20)为流动相,流速为0.4mL.min~(-1);选用API3200型三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,电喷雾离子化源,正离子方式,选择监测离子反应分别为m/z515.2→276.2(替米沙坦)和m/z748.5→m/z158.2(克拉霉素,内标)。结果:替米沙坦和克拉霉素的保留时间分别为1.51、1.25min。替米沙坦血药浓度在1.00～1500ng·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=0.9985),定量下限为1.00ng·mL~(-1);日内、日间RSD均≤6%,相对偏差(RE)均在±7%的范围以内;平均提取回收率为(93.0±3.9)%。替米沙坦片受试制剂与参比制剂平均药动学参数分别为:t_(1/2)(25.5±12.5)、(26.5±11.8)h,t_(max)(1.50±0.78)、(1.59±1.16)h,c_(max)(358±212)、(389±298)ng·mL~(-1),AUC_(0～96h)(2383±1146)、(2411±1192)ng.h.mL~(-1)。替米沙坦片受试制剂的平均生物利用度为(101.3±22.6)%。结论:该方法高效、灵敏、专属性强;2种替米沙坦片等效。     

用液相色谱-串联质谱法测定人血清中加巴喷丁的含量

目的:建立测定人血清中加巴喷丁含量的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法。方法:以磺胺二甲异嘧啶为内标,血清用乙腈直接沉淀蛋白质后进样分析。色谱条件:XBridge Phenyl(150 mm×2.1 mm,5μm)为色谱柱,流动相:0.02%甲酸的乙腈溶液-0.02%甲酸的水溶液(15∶85)。电喷雾离子源,正离子MRM扫描分析。结果:加巴喷丁和内标磺胺二甲异嘧啶离子对分别为m/z172→154.1和m/z279→124。加巴喷丁在50~5 000 ng/ml范围内线性关系良好(r=0.999 6),检测限为50 ng/ml。批内、批间RSD均<10%,平均提取回收率为97.7%~108.5%。结论:本方法灵敏度高、专一性好,可用于人血清中加巴喷丁的检测。