制半夏抑制基质金属蛋白酶活性及抗肿瘤机理的实验研究

目的 研究制半夏对基质金属蛋白酶-16(MMP-16)活性的抑制作用.方法 根据抑制MMPs活性后底物降解速率降低的原理,通过检测底物降解速率,测定中药制半夏对MMP-16的抑制作用.结果 与空白对照组及阳性对照组相比,制半夏具有较强的抑制MMP-16活性的作用,其抑制活性IC50=23μg/ml.结论 半夏水煎剂在体外具有抑制MMP-16活性的作用,其抑制活性较强,且存在剂量依赖关系.     

益气补肾方对SGC-7901细胞MMP-2和TIMP-2基因表达的影响

目的:探究益气补肾方抗胃癌转移作用的可能机理。方法:采用RT-PCR检测法测定益气补肾方水煎液对SGC-7901细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶抑制酶-2(TIMP-2)基因表达水平的变化。结果:益气补肾方能下调MMP-2 mRNA的表达。结论:益气补肾方抗胃癌转移作用的机制可能与下调MMP-2 mRNA表达有关。     

半夏水煎醇沉液增加离体心脏冠脉流量

半夏水煎醇沉液增加离体心脏冠脉流量刘守义李云兴辽宁中医学院药理教研室（沈阳１１００３２）半夏既往的研究报道了具有镇咳、祛痰、止吐、抑制胃酸分泌、抗溃疡等药理作用，本文报道其对离体心脏的作用。１方法及结果首先制备半夏水煎醇沉液，用生半夏煎煮３次，合并煎...     

参麦液对肿瘤细胞基质金属蛋白酶-2及其抑制剂表达的影响

目的:研究参麦注射液对肿瘤细胞增殖的抑制效应,检测参麦液对肿瘤细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)基因表达的影响,以及检测参麦液对MMP-2蛋白活性的影响,进而探讨参麦液抑制肿瘤微血管生成的分子机制。方法:采用RT-PCR方法从RNA水平水平检测参麦液对MMP-2和TIMP-1基因表达的影响,采用酶谱的方法检测参麦液对MMP-2蛋白表达的影响。结果:参麦液能抑制MMP-2的基因表达并显著抑制MMP-2蛋白以活性形式存在,增强TIMP-1的基因表达。结论:参麦液可能通过抑制MMP-2的基因表达和增强TIMP-1的基因表达而抑制肿瘤血管内皮细胞的迁移,使肿瘤组织内微血管的生成速度减慢,进而使肿瘤内的微血管密度降低,达到抑制肿瘤生长的目的。     

痹胶囊对实验性骨关节炎大鼠MMP-3和TIMP-1的影响

[目的]观察痹褀胶囊对实验性骨关节炎(OA)大鼠软骨、关节液及血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白抑制酶-1(TIMP-1)的影响,探讨痹褀胶囊保护关节软骨的作用机制。[方法]选Wistar大鼠,木瓜蛋白酶膝关节注射造模,痹祺胶囊灌胃治疗8周,酶联免疫吸附(ELISA)法检测软骨、关节液及血清MMP-3、TIMP-1的活性。[结果]痹祺胶囊能提高模鼠软骨TIMP-1的活性(P<0.01),降低关节液MMP-3的活性,使软骨、关节液MMP-3/TIMP-1的比值均降低(P<0.01);对血清MMP-3、TIMP-1及MMP-3/TIMP-1比值无明显影响(P>0.05)。[结论]痹褀胶囊保护关节软骨的作用可能是通过提高软骨TIMP-1的活性,降低关节液MMP-3的活性,使软骨、关节液MMP-3/TIMP-1的比值减小,从而抑制MMP-3对关节软骨基质蛋白多糖的裂解活性而起保护作用的。     

半夏抗溃疡作用的实验研究

半夏〔Pinellia ternata(Thunb)Breit〕水煎醇沉液对消炎痛型、幽门结扎型、慢性醋酸型胃溃疡有显著的预防或治疗作用,对水浸应激性溃疡也有一定的抑制作用,并有显著减少胃液量,降低游离酸和总酸酸度,抑制胃蛋白酶活性的作用。     

半夏抗溃疡作用机理的实验研究

<正> 半夏[Pinellia ternata(Thunb)Breit]具有益脾气、燥胃湿、消肿散结之功效。我室研究结果证明半夏水煎醇沉液具有抗大鼠幽门结扎性溃疡、消炎痛性溃疡及应激性溃疡的作用。半夏水煎醇沉液可抑制大     

制半夏煎剂减少兔脑梗死再灌注出血转化的研究

目的研究制半夏煎剂对兔脑梗死再灌注出血转化的作用。方法新西兰兔106只,分为实验组和对照组,实验前2 h,实验组以制半夏水煎浓缩剂10 mL灌胃,对照组以生理盐水10 mL灌胃,然后制作兔大脑中动脉栓塞-再灌注模型。24 h后处死,制作大脑切片。TTC染色测量梗死面积,肉眼观察是否有再灌注出血。结果实验组发生出血5例,对照组发生出血19例。2组比较有显著性差异(P<0.05)。结论制半夏煎剂具有减少兔脑梗死再灌注出血转化的作用。     

矿物药青礞石对AECOPD痰热证大鼠肺组织NF-κB表达及血清中相关因子的干预作用

目的研究矿物药青礞石对慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)痰热证模型大鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)表达及血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)等因子的影响。方法采用烟熏复合细菌感染及风热刺激的方法制备AECOPD痰热证大鼠模型,分别给予青礞石药材、水煎液及水煎液药渣连续治疗15 d。苏木素-伊红(HE)染色病理切片评价大鼠肺部病理情况。免疫组化法检测肺组织中NF-κB蛋白表达,酶联免疫吸附法测定血清中白细胞三烯B4(LTB4)、MMP-9、TIMP-1的水平。结果青礞石药材高剂量、水煎液高剂量及药渣高剂量均能显著降低模型组大鼠血清中LTB4、MMP-9、TIMP-1水平及肺组织中NF-κB蛋白的表达,青礞石药材高剂量能显著降低血清中MMP-9/TIMP-1值。结论青礞石药材、水煎液、水煎药渣均能抑制AECOPD痰热证大鼠体内多种炎症因子的表达,促进气道修复,最终起到良好的干预作用。     

黄芪注射液体外对大鼠血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-2活性的抑制作用

目的：探讨黄芪对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）分泌的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)活性的抑制作用及其调节机制。方法：以黄芪注射液刺激体外培养的SD大鼠VSMC，Zymography法检测培养细胞上清液中MMP-2的活性，Western印迹法观察MMP-2蛋白水平变化。结果：黄芪在体外抑制大鼠VSMC分泌MMP-2的活性，且此作用呈浓度依赖性。结论：黄芪在体外抑制大鼠VSMC分泌MMP-2的活性，此作用为转录后调节。     

朱红膏对基质金属蛋白酶活性及成纤维细胞分泌的影响

目的:观察朱红膏是否通过对基质金属蛋白酶的影响来促进创面的愈合.方法:收集阳证疮疡创面渗液8例,检测朱红膏对渗出物中明胶酶MMP-2,MMP-9酶活性的影响;在蛋白水平观察朱红膏对MMP-1,-2活性的影响;检测朱红膏对HSF细胞的细胞毒性及IC50及用药前后HSF细胞MMP-1,-2,-9的蛋白表达.结果:朱红膏对创面渗出液中MMP-2活性有明显的抑制作用,与对照组相比P＜0.01;对创面渗出液中MMP-9活性在lg·L-1时与对照组比较无差异,但高于5g·L-1时有明显抑制作用,与对照组比较有差异.当汞质量浓度为320 mg· L-1时,朱红膏溶液能直接抑制MMP-1活性(P＜0.01)和MMP-2活性(P＜0.05);但当汞质量浓度为2.56～0.51 mg·L-1时,朱红膏溶液能增强MMP-1活性(P＜0.05);同时当汞在0.51 ～64 mg·L-1时,朱红膏溶液能够增强MMP-2活性(P＜0.01).朱红膏在DMEM的饱和浓度为39.6 mg·L-1,当汞质量浓度大于1.23 mg·L-1时有细胞毒性,HSF细胞IC50汞质量浓度为61.11 mg· L-1,在1.23,0.62,0.31 mg· L-1组均可促进HSF细胞MMP-1的蛋白表达(P＜0.01);朱红膏1.23,0.62 mg· L-1组对HSF细胞MMP-2蛋白表达有抑制作用,作用不明显,0.31 mg·L-1组对MMP-2蛋白表达有促进作用,作用不明显;在汞0.62 mg·L-1时,朱红膏可促进HSF细胞表达MMP-2(P＜0.01);但在这3个汞浓度条件下,朱红膏均可降低HSF细胞MMP-9的蛋白表达.结论:朱红膏在高浓度情况下对创面渗出液的MMP-2,MMP-9均有抑制作用,且抑制作用呈朱红膏含量依赖性增强;并直接抑制体外激活的MMP-1,MMP-2活性.但低浓度情况下却刺激正常成纤维细胞MMP-1,2蛋白的表达及体外酶活性;但对正常成纤维细胞MMP-9的表达表现出抑制效应.     

371植物多酚对基质金属蛋白酶的抑制活性

曾对各种药用植物含有的多酚类抑制与癌细胞浸润转移有关的基质金属蛋白酶(MMP)-2／-9的活性进行探讨，发现芍药中的丁香英(eugeniin)等具有显著的抑制MMP-2／-9的活性。此次对其类似物(19种)抑制MMP-2／-9活性(用明胶酶谱法检测对HT1080细胞在培养上清中分泌的MMP-2／-9活性的影响)及抑制细胞运动活性(对HGF刺激应答的MDCK细胞的细胞分散运动及HT1080细胞浸润能力的影响)进行测定，探讨其构效相关性。     

生半夏、姜半夏对水貂呕吐作用的影响研究

目的:研究半夏对水貂的致呕及止呕作用。方法:ig生半夏2 g·kg^-1,观察对水貂的致呕作用;制备姜半夏醇提物、姜半夏水提物及姜半夏水煎剂,观察在 ip顺铂(7.5 mg·kg^-1)、sc阿朴吗啡 (1.6 mg·kg^-1)水貂呕吐模型的止呕作用;观察姜半夏水煎剂对水貂运动呕吐模型(100 r·min^-1,1 h)的影响。结果:生半夏有致呕作用(P<0.01);姜半夏、胃复安、恩丹西酮对顺铂、阿朴吗啡致水貂呕吐均有抑制作用 (P<0.05)。结论:姜半夏在水貉呕吐模型中具有止呕作用,其机制与中枢抑制有关。     

半夏、醇制半夏和清半夏的刺激性毒性及液相指纹图谱研究

目的 比较半夏、醇制半夏和清半夏的刺激性毒性和三者的液相指纹图谱,考察半夏醇制方法的合理性.方法 通过比较半夏、醇制半夏和清半夏对家兔眼结膜的刺激性和对大鼠腹腔渗出液中PGE2含有量的影响,考察醇制对半夏刺激性毒性的影响.Megres C18色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm),乙腈-0.1％甲酸水溶液梯度洗脱,检测波长为254 nm,体积流量0.6 mL/min,柱温30℃,鸟苷为对照峰,建立并比较3种半夏的HPLC指纹图谱,考察醇制对半夏化学成分的影响.结果 醇制半夏能够降低对家兔眼结膜的刺激性,使大鼠腹腔渗出液PGE2量降低,该作用与清半夏相当.半夏醇制后指纹图谱变化不大,而清半夏特征指纹峰数目及峰面积显著降低.结论 醇制能够达到降低半夏刺激性毒性的作用,且对半夏中核苷等水溶性成分无显著影响,醇制法可作为半夏减毒存效新方法的研究方向.     

经典名方半夏泻心汤水煎液的HPLC指纹图谱及黄芩、黄连量值传递研究

目的建立半夏泻心汤水煎液的HPLC指纹图谱,研究处方中黄芩、黄连药材-饮片-全方水煎液的量值传递关系。方法以《伤寒论》中记载的煎煮方法制备半夏泻心汤水煎液,建立半夏泻心汤HPLC指纹图谱,对特征峰进行归属;以转移率、出膏率、指纹图谱的相似度为指标,对处方中黄芩、黄连药材-饮片-全方水煎液的量值传递关系进行分析。结果黄芩中指标性成分黄芩苷从药材到饮片的转移率为81.08%～119.82%;饮片到全方水煎液的黄芩苷的转移率为44.55%～59.05%,黄连中指标性成分小檗碱从药材到饮片的转移为66.65%～97.51%;饮片到全方水煎液的小檗碱的转移率为7.83%～22.93%;全方的出膏率为12.99%～17.21%;15批全方指纹图谱的相似度为0.978～0.999。结论该指纹图谱所建立的质量评价方法适用于黄芩、黄连药材-饮片-全方水煎液质量控制,可为经典名方等质量评价办法的制定提出一定的参考。     

附子及附子、干姜配伍对H2O2导致心肌细胞损伤的抗氧化作用

目的 观察附子及附子、干姜配伍对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞抗氧化作用.方法 取1～3 d乳鼠的心肌细胞,常规培养,观察心肌细胞形态学,以免疫组化进行心肌细胞纯度鉴定.实验分为对照组、模型组、附子水煎液组20 mg/mL,附子干姜水煎液组20 mg/mL,预处理2h后,用1 mmol/LH2O2氧化损伤2h,检测培养液中心肌细胞跳动频率,丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）活性.结果 与模型组相比,用附子水煎液和附子干姜水煎液预处理后的心肌细胞跳动频率增加（P＜0.01）,附子干姜水煎液组SOD活性明显提高（P＜0.01）.结论 附子干姜水煎液对H2O2诱导的心肌细胞损伤具有一定的保护作用.     

黄芪及其提取物对矽肺模型大鼠支气管肺泡灌洗液MMP-2、MMP-9表达的影响

目的:观察黄芪及其提取物对矽肺模型大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchial alveolus fluid,BALF)MMP-2和MMP-9表达的影响,探讨黄芪抑制矽肺纤维化的作用机制。方法:SPF级Wistar雄性大鼠120只,随机分为正常组、模型组、乙酰半胱氨酸组、黄芪水煎液组、黄芪总苷组、黄芪多糖组,每组20只。大鼠水合氯醛麻醉后,采用经气管染Si O2粉尘法复制矽肺模型。干预组注入Si O2粉尘后1d开始用黄芪提取物及黄芪总苷灌胃,正常组及模型组给予等体积的生理盐水灌胃。观察各组肺组织病理改变,行支气管肺泡灌洗术,用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液MMP-2及MMP-9的表达。结果:各时段模型组MMP-2和MMP-9表达较正常组均降低(P0.05),而乙酰半胱胺酸组、黄芪各干预组各时段表达均低于模型组,在28天MMP-2和MMP-9表达均下降(P0.05)。结论:黄芪能降低矽肺模型大鼠支气管肺泡灌洗液MMP-2、MMP-9的表达,这可能是其抑制矽肺纤维化形成的机制之一。     

金天格胶囊对骨关节炎大鼠MMP-3和TIMP-1的影响

目的:观察金天格胶囊对骨关节炎大鼠血清、关节液、关节软骨中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制酶-1(TIMP-1)的影响.方法:选取成年雄性SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、阳性药组(仙灵骨葆组)、金天格胶囊大剂量组、金天格胶囊中剂量组、金天格胶囊小剂量组.除假手术组外大鼠双侧膝关节腔内注射木瓜蛋白酶20μL,而假手术组注射同等生理盐水.造模2周后连续灌胃给药4周;末次灌胃后次日处死动物,时关节软骨、关节液及血清中MMP-3、TIMP-1的含量进行检测.结果:金天格胶囊大剂量组、金天格胶囊中剂量组、金天格胶囊小剂量组均能明显降低关节液、关节软骨中MMP-3含量,升高关节软骨中TIMP-1含量,降低关节液、关节软骨中MMP-3/IMP-1的比值(P＜0.01或P＜0.05),对血清MMP-3、TIMP-1含量及MMP-3/TIMP-1比值无明显影响(P＞0.05).结论:金天格胶囊保护关节软骨的作用可能是通过提高关节软骨中TIMP-1的活性,降低关节液中MMP-3的活性,使关节软骨MMP-3/TIMP-1的比值减小,从而抑制MMP-3对关节软骨基质蛋白多糖的裂解活性,进而起到保护关节软骨的作用.     

基于MMP-2、MMP-9探讨胃肠安方及其拆方抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长及转移的部分配伍机制

目的通过体内研究探讨胃肠安方及其不同功效组成药物拆方对胃癌裸鼠原位移植瘤生长及转移作用效果及其配伍规律。方法将胃肠安方按其功效拆分为健脾理气、清热解毒、软坚散结三大组成部分,采用2×2×2析因实验设计方案,建立裸小鼠人胃癌原位移植模型。观察胃肠安方不同功效组成药物抑制胃癌生长及转移作用效果及其之间是否存在交互作用。结果①胃肠安方全方组及健脾理气组、软坚散结组、健脾清热组的抑瘤率分别为28.5%、24.6%、28.8%及30.2%,与模型组瘤重比较明显下降,差异有统计学意义(P0.05);软坚散结因素在抑制瘤重方面具有主效应,健脾理气及软坚散结因素存在交互作用。②胃肠安全方组、清热解毒组、健脾清热组的转移率分别为22.22%、10.00%、18.18%,与模型组75.00%比较,能明显降低裸鼠胃肿瘤的转移率(P0.05)。③胃肠安全方组及其不同治则拆方配伍各组中除软坚散结组外,均能抑制MMP-2蛋白表达,尤其以健脾理气组及全方组作用最为明显(P0.05);健脾组、健脾清热组及全方组对MMP-9蛋白表达抑制作用最为明显(P0.05)。析因分析结果显示,在软坚散结因素存在时,健脾理气因素与清热解毒因素在下调MMP-2蛋白表达方面具有协同作用。胃肠安方及其拆方对裸鼠胃肿瘤组织MMP-2基因表达具有不同程度的抑制作用,以全方组、健脾软坚组、清热软坚组作用最为明显(P0.01)。析因分析结果显示,健脾理气与清热解毒及清热解毒与软坚散结组之间对MMP-2的基因表达抑制具有相互交互作用。全方组、健脾软坚组对裸鼠胃肿瘤组织MMP-9 mRNA表达抑制作用明显(P0.01),健脾理气与清热解毒及健脾理气与软坚散结组对MMP-9 mRNA表达抑制具有相互交互作用。胃肠安方全方组及健脾理气组明显抑制裸鼠胃肿瘤组织MMP-2及MMP-9的活性(P0.01),析因分析结果显示,在清热解毒因素存在时,健脾理气与软坚散结因素在抑制MMP-2及MMP-9活性方面具有协同作用,而在缺乏清热解毒因素时,健脾理气与软坚散结因素在抑制MMP-2及MMP-9活性方面存在拮抗作用。结论胃肠安方全方组、清热解毒组、健脾清热组能明显抑制胃癌的生长和转移,清热解毒组抑制胃癌转移效果最为明显,健脾理气因素抑制瘤重主效应具有显著性,健脾理气及软坚散结因素在抑制瘤重方面存在交互作用;析因分析结果显示,在软坚散结因素存在的情况下,健脾理气和清热解毒因素对下调MMP-2蛋白表达具有协同作用,在软坚散结因素缺乏时,健脾理气和清热解毒因素对下调MMP-2蛋白表达具有拮抗作用。在清热解毒因素存在的情况下,健脾理气和软坚因素对抑制MMP-2和MMP-9活性具有协同作用,在清热解毒因素缺乏时,健脾理气和软坚因素对抑制MMP-2和MMP-9活性存在拮抗作用。     

半夏泻心汤水煎与免煎剂抗胃溃疡效果对比研究

以小鼠酒精型胃溃疡模型,对比观察半夏泻心汤水煎与免煎剂抗胃溃疡作用,结果表明水煎与免煎剂所组成的半夏泻心汤均具有抗胃溃疡作用,免煎剂具有进一步推广应用的前景。