乙醇对大鼠大脑皮层突触体高亲和摄取谷氨酸的急性效应

目的:观察乙醇对于Na~+依赖高亲和摄取L-[~3H]谷氨酸(预孵育4main+孵育2min)的影响。方法:采用4个鼠龄段大鼠大脑皮层突触体。结果:大剂量(包括522mmol·L~(-1)及348mmol·L~(-1)乙醇对4个鼠龄段大鼠大脑皮层突触体摄取谷氨酸均呈显著抑制效应;中等剂量(174mmol·L~(-1))乙醇在新生、成年及老年大鼠也见一定抑制性效应,而对于青少年大鼠没有显著影响;低剂量(87mmol·L~(-1)以下)乙醇对于4个鼠龄段大鼠均没有明显效应。结论:乙醇特别在高浓度下对大鼠大脑皮层突触体高亲和摄取谷氨酸存在明显抑制效应,这会使细胞外谷氨酸水平增高,因而有可能在急性酒精中毒所致神经精神障碍的发生中起作用。     

糖皮质激素对大鼠大脑皮层突触体高亲和摄取L—谷氨酸的快速,非基因组效应

本研究采用大鼠大脑皮层突触体，观察糖皮质激素（ＧＣ）对于Ｎａ＋依赖高亲和摄取３Ｈ－Ｌ谷氨酸（孵育４ｍｉｎ）的影响。发现ＧＣ包括皮质酮硫酸盐（Ｂ－ＳＯ４）、氢化可的松琥珀酸盐（Ｆ－ｓｕｃ）、地塞米松磷酸盐（ＤＥＸ－ＰＯ４）及皮质酮（Ｂ）均促进突触体摄取谷氨酸，且呈一定浓度依赖性。Ｂ－ＳＯ４１０－５ｍｏｌ／Ｌ时，谷氨酸摄取较对照组增加２５．６％，Ｂ－ＳＯ４、Ｆ－Ｓｕｃ及Ｂ最低有效剂量均为１０－７ｍｏｌ／Ｌ，ＤＥＸ－ＰＯ４最低有效剂量为１０－６ｍｏｌ／Ｌ。孵育２ｍｉｎ后即见Ｂ－ＳＯ４（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）促进突触体摄取谷氨酸，孵育４ｍｉｎ后Ｂ－ＳＯ４的作用达高峰。１０－６ｍｏｌ／Ｌ睾酮及孕酮也有促进摄取谷氨酸的作用，而去氧皮质酮及１７β－雌二醇硫酸盐对突触体摄取谷氨酸没有显著影响，ＧＣ的作用有一定甾体特异性。ＧＣ胞内受体阻断剂ＲＵ４８６本身对谷氨酸摄取没有影响，但可部份阻断Ｂ的促进作用。由于已从神经元上离断下来的突触体不再受基因组机制影响，本实验中ＧＣ快速促进突触体摄取谷氨酸是非基因组机制介导的，其详细机制及潜在生理意义有待进一步探讨。     

不同浓度七氟醚预处理对tGCI大鼠模型海马组织神经细胞的影响

目的 探讨不同浓度七氟醚预处理对短暂性全脑缺血(tGCI)大鼠海马组织神经细胞的影响.方法 选取成年健康WKY大鼠48只,将所有WKY大鼠随机分为模型组、2％七氟醚预处理组、4％七氟醚预处理组和6％七氟醚预处理组,各组大鼠均建立tGCI大鼠模型,其中2％七氟醚预处理组、4％七氟醚预处理组和6％七氟醚预处理组分别给予浓度...     

Mg2+快速抑制谷氨酸诱导大鼠海马神经元内游离钙浓度升高的作用及特征

目的　采用钙离子特异性荧光指示剂Fura 2 /AM ,使用光电联合检测系统检测镁离子 (Mg2 + )对谷氨酸培养的海马神经元内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的影响和特征。方法　实验设计分三组 (n =2 6 ) ,向细胞吹药各 2 0秒 :①组 1× 10 -5mol/L谷氨酸 ;②组同时 1× 10 -5mol/L谷氨酸和 1× 10 -5mol/LMg2 + ;③组即在②组回到基线后给 1× 10 -5mol/L谷氨酸。结果　①组 [Ca2 + ]i 明显升高 ;②组 [Ca2 + ]I 的变化明显变小 ,其峰值明显下降 ,且Phase 1上升速度减慢 ,Phase 2的时间也有所缩短 ,二相之间的平台期相对延长 ;③组出现与①组中相似的钙震荡表现 ,但Phase 1和Phase 2的时间均缩短 ,△ [Ca2 + ]i 的变化稍低。结论　Mg2 + 可快速抑制谷氨酸诱导大鼠海马神经元内游离钙浓度升高。     

GHB失神癫痫大鼠递质GABA和谷氨酸的基础释放及受体拮抗剂对之影响

目的:研究GHB失神癫痫大鼠的皮层中GABA、谷氨酸的基础释放水平及在GABA和GHB受体拮抗剂作用下上述两种递质的改变情况。方法:应用微透析方法,对大鼠皮层进行GABA和谷氨酸水平的定量测定,并测定在GHB和GABA受体拮抗剂作用下的GABA和谷氨酸的改变。结果:提供了GHB大鼠的GABA和谷氨酸的基础释放浓度数据并发现在NCS284作用后大鼠谷氨酸水平的短暂升高,其他GHB和GABA受体拮抗剂改变不明显。结论:阻断GHB而导致的谷氨酸上升可能参与失神癫痫的发病机制。本实验的结果为以后进一步探讨失神癫痫的发病机理提供依据。     

maFGF对衰老大鼠脑组织SOD、MDA和羟自由基及神经细胞凋亡的影响

目的观察改构型酸性成纤维细胞生长因子(maFGF)对D-半乳糖致衰老大鼠脑组织SOD活力、MDA含量和羟自由基含量及神经细胞凋亡的影响,探讨maFGF对慢性衰老大鼠的抗衰老作用。方法选择成年Wistar大鼠48只,采用皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,衰老模型成功后随机分为衰老模型组、生理盐水(NS)对照组和maFGF治疗组。另16只不注射D-半乳糖作为正常对照组。各组大鼠到相对应的时间点取出脑组织,测定脑组织中SOD活力、MDA含量和抑制羟自由基能力;TUNEL法测定大鼠大脑皮质神经细胞凋亡数目。结果衰老模型组大鼠脑组织SOD活力显著降低,MDA含量和羟自由基含量升高,皮质神经细胞凋亡数明显增多;经过用maFGF治疗慢性衰老大鼠后脑组织SOD活力显著升高,MDA含量和羟自由基含量均显著降低,皮质神经细胞凋亡数明显减少。结论 maFGF起到降低自由基,提高脑组织的抗氧化能力,减少皮质神经细胞凋亡数量,具有抗衰老     

马桑内酯致痫大鼠大脑皮层,海马谷氨酸、门冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸含量的测定

为了探讨氨基酸类神经递质在癫痫发病中的作用,我们采用高效液相色谱仪（HPLC）结合紫外分光光度仪分析检测了马桑内脂（CL）致病大鼠大脑皮层、海马Glu、Asp、Gly、GABA的含量变化。结果显示：CL致痫组与正常对照组相比,Glu、Asp、Gly含量增加（P<0.01,P<0.05）;GABA含量减少,但差异无显著性（P＞0．05）。这些结果提示兴奋性和抑制性氨基酸在癫痫发病中具有重要作用,可能参与了惊厥的发生、发展和惊厥后神经元损伤。     

PAR1对蛛网膜下腔出血大鼠神经细胞自噬、神经肽及BDNF水平的影响

目的 探讨蛋白酶激活受体1(Protease-activated receptors 1,PAR1)对蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)大鼠神经细胞自噬、神经肽及脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)水平的影响。方法 Sham组(假手术组)、SAH组(SAH模型大鼠10只)、BDNF组(SAH模型大鼠给予BDNF干预)、PAR1抑制剂组(SAH模型大鼠给予PAR1抑制剂干预)和联合组(SAH模型大鼠给予BDNF联合PAR1抑制剂干预)均9只;采用放射免疫法检测血液及脑脊液中神经肽γ(Neuropeptide Y,NPY)水平,苏木精-伊红(Hematoxylin eosin,HE)染色检测脑皮质组织形态,免疫印迹检测自噬蛋白表达水平,缺口末端标记技术(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡率,免疫组化检测BDNF及酪氨酸激酶受体B(Tyrosine Kinase recept...     

rHuEPO对大鼠脑出血病理变化及神经细胞凋亡的影响

目的 观察重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对大鼠脑出血不同时期病理变化及神经细胞凋亡的影响,探讨rHuEPO对出血性脑损伤的脑保护作用及其作用机制.方法 Wistar雄性大鼠随机分为正常组(N)、假手术组(S)、模型组(M)、低剂量rHuEPO治疗组(LR)、高剂量rHuEPO治疗组(Ha).Ⅶ型胶原酶注射法制备脑出血模型,观察治疗前后脑组织含水量及脑出血量变化,采用免疫组织化学方法检测脑组织Bcl-2、Bax表达,TUNEL法检测凋亡细胞.结果与M组比较,LR组及HR组脑组织含水量降低,出血量及凋亡细胞数减少,Bcl-2蛋白表达升高,Bax蛋白表达下降,尤以HR组为著.结论 rHuEPO可通过介导Bcl-2表达上调及Bax表达下调抑制细胞凋亡,同时可减轻脑水肿,促进血肿吸收,其上述作用与剂量呈正相关.     

大鼠脑缺血再灌流后Bcl-2、Caspase-3 mRNA水平表达与大脑皮层及纹状体区炎性细胞浸润的影响

目的探讨大鼠脑缺血再灌流后Bcl-2蛋白、Caspase-3mRNA的表达及炎性细胞浸润与神经细胞凋亡的关系。方法将54只Wistar大鼠随机分为二组：假手术组，缺血再灌流组。采用原位末端标记(TUNEL)、免疫组化和原位杂交技术分别观察脑缺血再灌流后不同时间点神经细胞凋亡及损伤的变化与Bcl-2、Caspase-3mRNA表达。结果Bcl-2表达于缺血再灌流12～24h迭高峰，再灌流2～4d呈下降趋势，至16d略高于假手术组；Caspase-3mRNA于缺血再灌流12～24h迭高峰，2～4d呈降低趋势，至16d略高于假手术组。结论脑缺血再灌流后细胞凋亡介导神经细胞损伤、坏死是一个渐进的动态演变过程。Bcl-2蛋白、Caspase-3mRNA表达在押制细胞凋亡和介导神经细胞损伤等方面起非常重要的作用。     

NONLINEAR EFFECTS OF GLUTAMATE AND KCl ON GLUTAMATE TOXICITY IN CULTURED RAT CEREBELLAR NEURONS

Nonlinear responses to toxin exposure have been observed in multiple cell types and organisms across a wide array of phyla. High dose toxin exposures inhibit or kill biological systems, while low dose exposures can stimulate survival mechanisms. We examined the effects of low (10-3, 10-5, 10-7, and 10-9M) and ultra-low (10-25 and 10-61M) KCl and glutamate pretreatment (72 h) against glutamate toxicity in rat cerebellar neurons. Ultra-low dilutions (10-31, 10-61, and 10-401) of an Arnica montana mother tincture were also investigated for their neuroprotective potentials. Viability was significantly enhanced in neurons pretreated with either 10-3M glutamate (10.6%) or 10-9M KCl (6.3%). None of the toxins evaluated displayed significant toxicity at the concentrations indicated. The protective effect of glutamate is likely mediated through activation of N-methyl-D- aspartate receptors, whereas low dose KCl might confer neuroprotection through enhanced alteration of Na+/K+ receptor dynamics. This is the first time high dose glutamate tolerance has been shown along with low dose KCl, and is consistent with previous reports demonstrating tolerance induced by low dose toxin exposure.     

谷氨酸单钠对大鼠下丘脑生长抑素神经元性差别的影响

本实验用原位杂室组化方法研究了谷氨酸单钠对大鼠下丘脑室周核生长抑素神经元性差别的影响。结果证明对照组下丘脑室周核生长抑素神经元在基因转录水平表现出明显的性别差异，谷氨酸单钠损伤下丘脑弓状核神经元后这种性别差异不再存在。这些结果提示下丘脑室周核生长抑素神经元在基因转录水平所表现出的性别差异可能是通过下丘脑弓状核神经元间接地受性激素的调节。     

THE EVOLUTION OF INTRACELLULAR RESPONSES TO ACRYLAMIDE IN RAT SPINAL GANGLION NEURONS

Acrylamide (30 mg or 50 mg/kg/day, 5 days each week) was injected intraperitoneally into rats for up to 4 weeks. Lumbar spinal ganglia, spinal cord and lumbrical muscle spindles were examined by light and electron microscopy at various times during this period. The first abnormalities in spinal ganglion neurons were seen at 7 days when an apparent increase in numbers of mitochondria, some being hypertrophic, were found in a few large light cells. This was 10 days before any significant Wallerian degeneration was found in muscle spindle sensory fibres. Mitochondrial changes became more marked with time and were later associated with RER disruption, loss of neurofilaments and peripheral displacement of the nucleus thus mimicking chromatolysis of the axon reaction. All these changes began, however, before axon degeneration. Evidence of increased satellite cell activity was maximal at 21 days. These changes are discussed in the light of the possibility that calcium entry into the cell may be seriously increased early in the intoxication as a direct result of the presence of acrylamide and that many of these cellular features are secondary responses to such an event. Distal degeneration of axons seems likely to be secondary to the perikaryal changes.     

胞内乳酸对急性分离大鼠新皮层神经元KATP通道的影响

采用膜片钳技术内面向外式记录法,研究了胞内乳酸对急性分离大鼠皮层神经元上ＡＴＰ敏感钾通道（ＫＡＴＰ通道）的影响。结果显示：浴槽液中加入５～２０ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ乳酸,通道电流幅度增大,电导由（２０２±１１）ｐＳ增到大（２５３±１３）ｐＳ;乳酸浓度＞ ２０ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ时,部分通道出现多级开放。当膜超极化时,乳酸可增加通道平均开放时间及开放概率并随其浓度的增大而增加。浴槽液中乳酸浓度为２０ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ时,ＡＴＰ阻断通道电流活动的半数有效浓度（ＩＣ５０）为１ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ,较无乳酸时ＩＣ５０（０．０５ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ）明显增高,即通道对ＡＴＰ敏感性明显降低（Ｐ＜ ０．０１）。上述结果表明：胞内乳酸可通过增大电导、增加开放概率、诱导多通道开放及降低通道的ＡＴＰ敏感性参与调节皮层神经元上ＫＡＴＰ通道。提示：脑在缺氧情况下,胞内无氧代谢所产生的乳酸可先于ＡＴＰ耗竭激活ＫＡＴＰ通道,降低神经元兴奋性,从而起到保护作用。     

大鼠丘脑中央下核及其邻近结构神经元对皮肤伤害性刺激的反应

利用细胞个记录技术，在麻醉大鼠丘脑中央下核（Ｓｍ）及其邻近结构内，共记录到１９２个神经元７８％的神经元对皮肤伤害性刺激反应，其中，大多数（１１８）被兴奋，２８个被抑制，４个对某些部位的刺激兴奋，而对另一些部位的刺激抑制，发现某些神经元有很长的后发放效应，另一些则在兴奋之后跟随着较长的抑制期，少数的反应仅在刺激给与和撤除的瞬间发生，感受野大且呈双侧分部，８０％对机械刺激反应的神经元也对伤害性热刺激发     

糖皮质激素对大鼠肾上腺嗜铬细胞受激动所致儿茶酚胺分泌及细胞内钙的快速抑制作用(英文)

为研究糖皮质激素对原代培养大鼠肾上腺嗜铬细胞（AMCC）受激动所致儿茶酚胺的快速作用，用HPLC－ED方法检测了乙酰胆碱（10－5mol／L）、烟碱（10－5mol／L）、毒蕈碱（10－5mol／L）及55mmol／L的KCl在20min内所引起的儿茶酚胺量．地塞米松（Dex，10－4mol／L及10－5mol／L）及皮质酮（10－5mol／L）可以抑制AMCC的儿茶酚胺分泌；10－7mol／L的17β-雌二醇不能抑制，但10－5mol／L的可以抑制其分泌；醛固酮、雄烯二酮及胆固醇无抑制效应。为了揭示与分泌有关的细胞内变化，用SPex检测系统检测了细胞内钙（［Ca2 ］）的含量。发现地塞米松及皮质酮有抑制因乙酰胆碱、烟碱、毒蕈碱及高K 所引起的［Ca2 ］升高的作用，而17β－雌二醇、孕酮、醛固酮及雄烯二酮则无此作用。10－4mol／L的RU38486可部分阻断皮质酮的抑制效应，当细胞外无钙时毒蕈也能引起［Ca2 ］．升高，此效应也可被皮质酮所阻断。上述结果表明：糖度质激素抑制AMCC的激动性儿茶酚胺分泌是非基因组的，此作用经过抑制其细胞内钙升高而实现，并提示有膜受体的参与。     

糖皮质激素对单个大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞（Ca^2＋）i的快速作用

为探讨糖皮质激素（glucocorticoids,GC）快速地抑制肾上腺髓质嗜铬细胞（adrenalmedullarychromaffincells，AMCcells）受刺激时分泌儿茶酚胺的机制，用Fura-2作Ca(2 )指示剂．用Spex阳离子测定系统检测单个AMC细胞，观察了对AMC细胞的［Ca(2 )］．的影响。发现皮质酮（B．corticosterone）对AMC细胞静息［Ca(2 )］i无影响，但B可以抑制AMC细胞从无钙介质换到含钙介质时［Ca(2 )］i的升高，可以抑制ACh、Nico（nicotine）、Muse（muscarine）及高钾引起的[Ca(2 )]i升高，RU38486可以部分阻断B对ACh刺激引起的[Ca(2 )]i升高的抑制作用。B还可抑制在无钙介质中Musc引起的［Ca(2 )]i升高。Dex（dexamethasone）与B有相似的作用，而E2(17β-estradiol）、P（progesterone）、Ald（aldosterone）和Andro（androstenedion）无作用。     

KAINIC ACID SEIZURES AND THE REVERSIBILITY OF CALCIUM LOADING IN VULNERABLE NEURONS IN THE HIPPOCAMPUS

The threshold pathological changes in the rat hippocampus following systemic administration of kainic acid (12–15 mg/kg) have been studied in relation to i the duration of EEG seizure activity and ii calcium accumulation in post-synaptic neurons, using the oxalate-pyroantimonate method. The reversibility of the pathological changes and calcium loading has been studied from 40 min to 48 h after the termination of seizure activity. Little or no changes were visible 2–3 h after 12 mg kainic acid per kg, but changes were obvious in most hippocampi directly after 2–3.5 h of seizure activity induced by 15 mg kainic acid per kg. These consisted of generalized swelling of perineuronal and perivascular astrocytic processes, neuronal hyperchromasia and microvacuolation, and swelling of CA₁ basal dendrites. 'Ischaemic cell change' occurred in a small number of pyramidal neurons. Calcium accumulated in mitochondria of basal dendrites and in the soma of pyramidal neurons in CA₁ and CA₃. Astrocytic and dendritic swelling and mitochondrial calcium accumulation were rapidly reversed during 40 min of seizure suppression with diazepam. Calcium accumulation in astrocytic processes recovered more slowly (≥4h). After a recovery period of 24–48 h, ischaemic cell changes were seen only in very occasional pyramidal neurons. The pattern of pathological changes is very similar to that seen after L-allylglycine or bicuculline-induced seizures. If the dendritic and other changes are a direct consequence of agonist actions at excitatory amino acid receptors (pre- or post-synaptic) then similar actions must be occurring in seizures induced by agents acting primarily on GABAergic inhibition.     

腺苷对大鼠背根节神经元膜电位及动作电位的影响

在离体灌流的大鼠背根神经节（ＤＲＧ）－脊髓标本上，用微电极进行了胞内记录。在１５７个神经元中，依神经纤维的传导速度将神经元分为Ａ类和Ｃ类，其中Ａ类７５个，Ｃ类８２个。当浴槽中滴加０．５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ的２－氯腺苷（ＣＡＤＯ）后，６６．７％（１０／１５）的Ｃ类细胞发生了去极化；而只有３３．３％（４／１２）的Ａ类细胞发生了去极化，且其去极幅值及持续时间均小于Ｃ类细胞的效应。先加入２．５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ的８－苯茶碱（８—ＰＴ），再给予ＣＡＤＯ，８５．７％（６／７）的Ｃ类细胞的静息电位无变化，只有１４．３％（１／７）的Ｃ类细胞出现了暂短的去极化效应。另外，给予ＣＡＤＯ后，５８．３％（７／１２）的Ｃ类细胞动作电位幅值减少，有些细胞伴有膜的去极化；但Ａ类细胞的动作电位幅度末见明显变化。结果表明：腺苷主要引起ＤＲＧ中Ｃ类细胞去极化，并减小其动作电位。     

脑室注射吗啡对大鼠尾核神经元放电和甩尾反射的影响

浅麻醉Ｗｉｓｔａｒ大鼠４９只，用辐射热照尾部作为伤害性刺激，以痛兴奋神经元（ｐａｉｎｅｘｃｉｔａｔｉｏｎｎｅｕｏｎｓＰＥＮ）诱发放电频率减少，痛抑制神经抑（ｐａｉｎｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｎｅｕｒｏｎｓ，ＰＩＮ）诱发放电频率增加和甩尾反射潜伏期（ｔａｉｌｆｌｉｃｋｌａｔｅｎｃｙＴＦＬ）延长为镇痛效应，观察脑室注射不同剂量吗啡对尾核中ＰＥＮ，ＰＩＮ及ＴＦＬ的同时影响，表明，脑室注射５０μｇ／１０μｌ吗啡