自体骨髓间充质干细胞移植治疗扩张型心肌病的临床观察

目的观察自体骨髓间充质干细胞经冠状动脉移植治疗扩张型心肌病的临床疗效。方法 38例NYHA心功能Ⅱ～Ⅳ级、心肌存在灌注缺损且左心室射血分数<40%的扩张型心肌病患者随机分为观察组18例和对照组20例,均通过冠脉动脉造影于冠状动脉内分别注入等量骨髓间充质干细胞和生理盐水。随访3个月并记录不同时期左心室射血分数、左心室舒张末期内径和心肌灌注缺损面积等指标,并通过24hHolter方法记录恶性心血管事件的发生。结果观察组术后1,3个月左心室射血分数均较术前及同期对照组明显增加(P<0.05),对照组术后3个月较术前明显增加(P<0.05);术后1个月观察组左心室舒张末期内径较术前减小(P<0.05),对照组较术前增加(P<0.05),2组差异有统计学意义(P<0.05);术后3个月时观察组左心室舒张末期内径较术前及术后1个月时均明显减少(P<0.05),对照组较术前增加(P<0.05),与1个月时比较差异无统计学意义(P>0.05),2组差异无统计学意义(P>0.05);术后3个月观察组灌注缺损面积百分比较术前及术后1个月时降低(P<0.05),对照组较术前降低(P<0.05);2组恶性临床事件差异无统计学意义(P>0.05)。结论自体骨髓间充质干细胞移植治疗扩张型心肌病安全、有效。     

骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠扩张型心肌病

背景：扩张型心肌病所致的心肌纤维化是心力衰竭的病理基础,目前药物治疗、介入治疗和外科手术均不能替代坏死心肌和彻底改善心脏功能。目的：观察异体骨髓间充质干细胞移植对大鼠扩张型心肌病心脏功能的作用和心肌纤维化的影响。方法：40只Wistar大鼠随机数字表法分为细胞移植组（n=15）、对照组（n=15）和空白组（n=10）,前2组建立大鼠扩张型心肌病模型。造模成功4周后细胞移植组注射骨髓间充质干细胞悬液150μL（含3×106个细胞）,对照组和空白组注射等量培养液。结果与结论：与空白组相比,细胞移植组和对照组移植前左室收缩末期内径增加,射血分数和缩短分数明显下降（P〈0.01）;移植后4周,细胞移植组超声心动图检查和移植前相比,左室收缩末期内径下降、射血分数和缩短分数明显升高（P〈0.01）。细胞移植组心脏胶原的表达低于对照组（P〈0.05）。与对照组相比,其他2组基质金属蛋白酶2及基质金属蛋白酶9表达明显下降（P〈0.05）。提示骨髓间充质干细胞移植后可改善心肌纤维化及扩张型心肌病鼠的心脏功能。     

人脐血间充质干细胞尾静脉移植治疗扩张型心肌病

背景：体外研究表明人脐血间充质干细胞可分化为自律性跳动的心肌细胞,而经静脉移植人脐血间充质干细胞治疗扩张型心肌病心力衰竭的报道较少。目的：探讨经尾静脉移植人脐血间充质干细胞对扩张型心肌病大鼠心肌结构、心功能的影响。方法：Wistar大鼠通过腹腔注射阿霉素诱导扩张型心肌病模型,扩张型心肌病实验组于造模后8周经尾静脉移植人脐血间充质干细胞,扩张型心肌病对照组注射等量DMEM培养基。健康对照组不造模,于相同时间点注射等体积的生理盐水。结果与结论：与健康对照组相比,扩张型心肌病组心功能明显受损,且扩张型心肌病实验组受损较扩张型心肌病对照组轻;移植的细胞有肌钙蛋白T的表达。结果提示人脐血间充质干细胞移植能促进扩张型心肌病大鼠心功能恢复,使心肌组织病变减轻。     

脂肪间充质干细胞移植治疗阿尔茨海默病

阿尔茨海默病是一种神经退行性疾病,其典型特征是进行性神经元缺失,迄今为止还没有一种药物和治疗方法对其彻底根治.随着干细胞技术与理论的发展和完善,阿尔茨海默病的治疗研究主要集中在神经干细胞移植方面.为避免免疫反应,最好用自体干细胞进行移植,而获取自体神经干细胞是非常困难的.与神经干细胞相比,间充质干细胞具有更广泛的来源,可以从肝脏、骨髓、脂肪等多种组织中获得,且具有多向分化潜能的特质,在一定诱导条件下可分化为骨、肌肉、脂肪等多种组织,其中脂肪间充质干细胞因其具有容易获得、对患者损伤小等特性而备受关注.新近研究显示,脂肪间充质干细胞具有神经分化潜能,预测其很可能在阿尔茨海默病治疗中发挥重要作用.     

同种异体骨髓间充质干细胞移植对扩张型心肌病模型兔心功能与结构及电生理的影响

背景：近年来通过细胞移植修复扩张型心肌病受损心肌、提高心功能已成为研究热点，但细胞移植后对心脏电生理的影响仍有待观察。目的：观察同种异体体内移植骨髓间充质干细胞移植后对扩张型心肌病模型兔心功能、结构及电生理的影响。设计，时间及地点：随机对照动物实验。于2004-01／2006—05在重庆医科大学附属儿科研究所电生理实验室完成。材料：选用43只新西兰白兔，体质量3．0～3．5kg，雌雄不拘。阿霉素为浙江海正医药公司产品，生产批号为050307。SSD-5000超声诊断仪为日本Aloka生产，RM6240多导电生理记录仪为成都仪器厂生产。方法：①摸球法将实验兔随机分为正常组（n=12），细胞移植组（n=13），模型组（n=13），后两组实验兔参考Amoda等的方法采用阿霉素诱导扩张型心肌病模型，每次1mg／kg，每周2次，连续8周，正常组不造模。获取剩余5只实验兔骨髓原液，用贴壁筛选法分离、扩增、纯化骨髓间充质干细胞。②细胞移植组及模型组模型建立成功后3周暴露心脏，将细胞分4点注射到左室前壁，模型组于相同条件下注射等体积DMEM／F12培养基。正常对照组在相同条件下不注射任何药品。主要观察指标：移植后4周，①采用超声诊断仪检测3组大鼠左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、左室射血分数、左室短轴缩短率等心功能指标。②应用多导电生理记录仪检测大鼠心肌单相动作电位振幅、0相上升的最大速率、单相动作电位时程从激动开始至复极完成50％及90％的时间，记为MAPD50及MAPD90。③取细胞移植组移植区心肌及模型组心肌标本，行透射电镜及光镜下组织学观察，同时进行植入细胞肌钙蛋白T和缝隙连接蛋白43的免疫荧光检测。结果：纳入实验兔43只，细胞移植组中各有9只因阿霉素急、慢性毒性作用以及手术后感染原因死亡，其余25只均进入结果分析。①心功能检测结果：细胞移植组实验兔左室收缩末期内径较模型组减小，左室射血分数、左室短轴缩短率均高于模型组，差异有统计学意义（P〈0．05）。②心电生理检测结果：细胞移植组实验兔MAPD50、MAPD90短于模型组，差异有统计学意义（P〈0．05）。③心肌组织学观察：模型组可见心肌细胞呈广泛的水肿和显著的空泡变性改变，电镜示心肌细胞线粒体肿胀，增生，肌节长短不一，出现异常收缩带，可见局部心肌溶解，细胞移植组移植区组织与之相比，各种受损表现较轻，且移植细胞有肌钙蛋白T和缝隙连接蛋白43的表达。结论：同种异体体内移植骨髓间充质干细胞后在一定程度上可改善扩张型心肌病模型兔心功能，减轻病理损害，并可能抑制心电紊乱的进一步发展。     

自体骨髓干细胞冠状动脉内移植治疗扩张型心肌病

目的：探讨自体骨髓干细胞冠状动脉内移植治疗扩张型心肌病的安全性及近期临床疗效。方法：9例扩张型心肌病患者，局麻下选择髂后上棘为穿刺点多点穿刺抽取骨髓液，通过密度梯度离心法分离出骨髓单个核细胞并制备成细胞悬液。通过普通冠状动脉造影导管或微导管置于冠状动脉开口处，直接将备用的细胞悬液缓慢注入，左冠状动脉注入2／3的细胞悬液，右冠状动脉注入1／3的细胞悬液。同期住院常规药物治疗5例扩张型心肌病患者作为对照组。观察两组心脏射血分数（EF）、左室舒张末径（LVEDD）、左室收缩末径（LVESD）及左房（LA）的情况。治疗组术后行心脏核素（SPECT）检查。结果：治疗组术后3个月与术前比较，9例患者胸闷、气急、浮肿情况得到改善，NYHA分级提高Ⅰ～Ⅱ级。心脏射血分数（EF）提高12％（P〈0．05）。治疗组术后EF与对照组相比提高了4％（P〈0．05）。移植后^99MTc心肌灌注显像较移植前有不同程度的改善。结论：自体骨髓干细胞移植作为一种崭新的生物学疗法仍处于初步探索阶段，势必将为终末期心力衰竭的治疗提供一种新的途径。     

自体骨髓间充质干细胞移植修复无功能心肌的对比

背景:目前有关干细胞技术的临床试验多集中在心肌梗死方面,对原发性心肌病研究尚少,且尚未见到两者对比的相关报道。目的:比较自体骨髓间充质干细胞经冠状动脉内移植修复缺血及非缺血所致无功能心肌的有效性及安全性。方法:38例拟行择期经皮冠状动脉介入治疗的急性心肌梗死患者随机分为对照A组与试验A组,36例扩张型心肌病患者随机分为对照B组与试验B组。对照组与试验组在介入治疗后分别通过大腔导管于相应冠状动脉内注入等量生理盐水与骨髓间充质干细胞。结果与结论:移植后1个月试验组左室射血分数较移植前和对照组显著升高(P<0.05);移植后3个月试验组左室射血分数较移植前和对照组明显升高、心肌灌注缺损面积百分比较移植前和对照组明显降低(P<0.05),而试验组间仅左室射血分数差异有显著性意义(P<0.05);试验A组左室舒张末期内径较移植前、对照A组和试验B组均明显减小(P<0.05),而试验B组仅较移植前明显降低(P<0.05)。随访期间恶性心血管事件发生率在试验组和对照组间无显著性差异(P>0.05)。提示经冠状动脉途径行骨髓间充质干细胞移植对无功能心肌的修复是安全有效的,且对急性心肌梗死的疗效优于扩张型心肌病。     

脂肪间充质干细胞的研究进展

脂肪来源的间充质干细胞具有和骨髓来源的间充质干细胞相似的表型和多向分化能力,脂肪组织来源丰富,取材方便,在细胞治疗和组织工程方面具有广泛的临床应用前景。     

自体外周血干细胞移植治疗扩张型心肌病:38例24个月随访

目的:评价动员后自体外周血干细胞经冠状动脉移植治疗扩张型心肌病的远期临床疗效和安全性.方法:选择2004-03/2006-10武警广东省总队医院心内科收治的扩张型心肌病患者38例,男26例,女12例,年龄42～72岁,平均56岁.随机分为移植组(n=20)和对照组(n=18),两组均予常规药物治疗,其中移植组患者予重组人粒细胞集落刺激因子300 μg皮下注射,1次/d,进行自体外周血干细胞动员,第6天用血细胞分离机分离自体外周血干细胞,进行经皮经腔冠状动脉内移植;对照组:仅行常规药物治疗,未进行细胞移植.两组患者于移植前和移植后6,12个月分别检测血常规及生化指标(肝功能、肾功能、血糖、血脂、血尿酸、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶和高敏C-反应蛋白)的变化;移植前和移植后12,24个月分别行超声心动图、动态心电图、6 min步行试验.比较两组生存率及心脏事件发生率,以患者死亡作为试验终点.结果:两组患者均获得随访,平均随访(18±6)个月,在随访12～24个月时移植组患者1例行二尖瓣置换,1例死亡,对照组2例死亡,均死于顽固性心衰.移植组患者移植后6,12个月血常规及生化各指标与移植前及对照组相比,差异均无显著性意义(P > 0.05).移植后12个月,移植组6 min步行路程较移植前明显增加,与对照组和自身移植前相比,差异均具有显著性意义(P < 0.05);超声检查显示左心室射血分数较移植前及对照组明显增加(P < 0.01).左心室舒张末内径也较移植前及对照组明显降低(P < 0.01).对照组的左心室射血分数及左心室舒张末内径虽然较12个月前有所改善,但差异无显著性意义(P > 0.05).随访至24个月,上述指标未见进一步改善,且有转差趋势.围移植期及移植后24个月随访中未见任何严重心律失常等不良反应发生.随访期间两组患者生存率无显著性意义.结论:采用动员后的自体外周血干细胞移植治疗扩张型心肌病安全、有效,近期可显著改善左心室收缩功能,但远期临床效果尚不肯定.     

自体骨髓干细胞移植治疗扩张型心肌病的护理10例

扩张型心肌病为原发性心肌病中最为常见的类型，其主要特征为左／右心室或双心室心腔扩大和收缩功能损害，产生心力衰竭，80％～90％扩张型心肌病患者均有各种心律失常发生，室性心动过速、室颤是本病患者常见猝死的主要原因。近年来，扩张型心肌病的药物治疗取得了一定的进展，如β-受体     

应用QTVI技术评价兔DCM模型干细胞移植前后左心室收缩功能

目的拟采用QTVI技术结合常规超声心动图评价骨髓间充质干细胞(MSCs)移植前后兔扩张型心肌病(DCM)模型左心室整体和局部收缩功能的变化。方法日本大耳白兔40只随机分为两组:模型组30只,注射盐酸阿霉素制备兔DCM模型;对照组10只,注射等量生理盐水。兔MSCs分离纯化和体外培养,DAPI标记后对模型组兔行心外膜下直接注射。超声检查并应用QTVI软件分析左室局部收缩功能,并取移植区心肌组织行病理学检查。结果 (1)与对照组比较,模型组左房收缩末期前后径(LAD)左室舒张末期及收缩末期前后径(LVDd、LVDs)增大,左室射血分数(LVEF)及短轴缩短率(LVFS)减低,差异有统计学意义(P0.05);病理示模型组兔心肌呈DCM样改变;(2)细胞移植后,LVEF,LVFS较术前升高,LAD、LVDd、LVDs无明显变化;左室前壁心肌运动速度及位移较移植前升高,差异有统计学意义(P0.05);移植区心肌内可找到DAPI标记的阳性细胞。结论 QTVI较常规超声心动图可更准确反映细胞移植前后左室收缩功能的变化。     

黄芪保心汤对扩张型心肌病并发慢性心力衰竭心功能影响

目的:探讨黄芪保心汤治疗扩张型心肌病并发慢性心力衰竭患者的临床效果。方法:将我院2016年1月～2018年8月收治的106例DCM并发CHF患者,按照随机数字表法分为观察组与对照组,每组53例。对照组给予常规西医治疗,同时积极控制诱因、限制水钠摄入、指导合理休息;观察组在对照组治疗基础上联合黄芪保心汤治疗。两组均治疗3个月。对比两组临床疗效、治疗前后心功能及治疗不良反应发生率。结果:观察组治疗总有效率94.34%(50/53),高于对照组81.13%(43/53)(P0.05);治疗后观察组LVEDd、LVESd优于对照组(P0.05);治疗期间观察组不良反应发生率16.98%(9/53),与对照组13.21%(7/53)比较无显著差异(P0.05)。结论:黄芪保心汤治疗DCM并发CHF效果显著,有利于改善患者心功能,且具有一定安全性。     

A Novel Endogenous Damage Signal,CSF-2, Activates Multiple Beneficial Functions of Adipose Tissue-Derived Mesenchymal Stem Cells

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三维彩色多普勒超声对扩张性心肌病心搏出量的研究

目的 :运用三维彩色多普勒超声计算扩张性心肌病患者心搏出量 ,探讨彩色三维超声在左室扩张变形时的应用价值。方法 :扩张性心肌病患者 9例 ,男 6例 ,女 3例 ,以二维 M-型超声心动图计算左室射血分数(EF)、短轴缩短率 (FS)及每搏量 (SV) ;运用三维彩色多普勒超声仪对患者主动脉瓣口血流进行三维重建 ,计算每搏量并与二维超声测值比较。结果 :二维超声测值 EF:2 8.2 %± 3.8% ,FS:1 3.7%± 1 .9% ,每搏量 :(56.1± 1 0 .4) ml;三维超声测值每搏量 :(47.5± 1 2 .8) ml。二维与三维超声的每搏量测值 t检验无显著性差异。结论 :彩色三维超声心动图可不受左室形变及二尖瓣返流的影响 ,能较准确地评价扩张性心肌病患者的每搏量及心功能状况     

组织多普勒Tei指数评价兔DCM模型左心功能的应用价值

目的探讨应用组织多普勒成像(TDI)方法测量Tei指数评价兔扩张型心肌病(DCM)模型左室整体功能变化的价值。方法取日本大耳白兔36只,随机分为A(10只)、B(26只)两组,分别经耳缘静脉注射生理盐水及阿霉素。于给药前及给药后3、6、9、12周进行常规超声心动图和TDI检查,获取心腔大小、EF、FS等常规参数,TDI模式下获取各时间间期,计算TDI-Tei指数。结果 (1)B组兔,在给药后9、12周检查时左室腔扩大,EF、FS显著下降,显著变化最早出现于给药后9周;在6、9、12周检查时IRT、ICT延长,ET缩短,Tei指数显著增大,显著变化最早出现于第6周;(2)A组兔,各时间点所有参数均无明显变化;(3)病理显示B组兔随着药物累积用量的增加,心肌损害程度逐渐加重,至实验终点呈典型的DCM样改变,A组兔无明显病理学改变。结论 TDI-Tei指数可准确评价兔DCM模型左室整体功能,较常规超声心动图指标更敏感,为DCM的临床观察、治疗提供实验依据;超声心动图表现与病理变化相一致。     

人血管内皮生长因子165基因联合间充质干细胞治疗对扩张型心肌病胶原重塑的影响

目的：探讨人血管内皮生长因子165基因（hVEGF165）联合间充质干细胞（mesenchyma1stemce11s,MSCs）治疗对扩张型心肌病胶原重塑的影响。方法：将40只扩张型心肌病（DCM）大鼠模型随机分为4组：PBS组、MSCs心肌移植联合基因治疗组（MSCs—GENE组）、MSCs心肌移植组（MSCs组）以及基因治疗组（GENE组）。心肌局部注射所构建MLC-2v／pIRES2-EG-FP-hVEGF165与MSCs,采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测I型、Ⅲ型胶原和转化生长因子-β（TGF-β）基因表达,蛋白免疫印迹（Westrenb1ot）检测hVEGF165蛋白表达。结果：PBS组、MSCs＋GENE组、MSCs组以及GENE组的I型胶原PCR产物灰度比分别为（0．359±0．010）、（0．240±0．012）、（0．313±0．058）、（0．230±0．011）;而Ⅲ型胶原分别为（0．831±0．011）、（0．842±0．015）、（0．917±0．058）、（0．688±0．015）;TGF-β1分别为（0．548±0．067）、（0．370±0．012）、（0．561±0．014）、（0．369±0．098）;MSCs＋GENE组TGF-81与GENE组比较差异无统计学意义,但两者显著低于PBS组和MSCs组,提示TGF-β1表达下调;I型／III型胶原灰度比分别为（0．436±0．072）、（0．290±0．023）、（0．337±0．021）、（0．333±0．011）,其中MSCs组与GENE组比较差异无统计学意义;MSCs组与GENE组的I型／III型胶原灰度比减低,2组比较差异无统计学意义,但MSCs—GENE组进-步使I型／III型胶原灰度比减低;TGF-β1表达分析结果显示,hVEGF165基因治疗较MSCs移植使TGF-β1表达下调的作用更显著。结论：MSCs移植与hVEGF165基因治疗有可能通过下调TGF－β1表达,降低I型／III胶原比值,增加心肌顺应性,减轻心肌胶原网络重塑而改善心功能。     

Tracking Long-Term Survival of Intramyocardially Delivered Human Adipose Tissue-Derived Stem Cells Using Bioluminescence Imaging

Purpose  

Transplantation of a regenerative cell population derived from human subcutaneous adipose tissue (hASCs) for cardiac regeneration represents a promising therapy due to the capacity of these cells for proliferation and differentiation. Understanding the fate of injected hASCs would help to understand how hASCs work in vivo. The aim of this study was to track the long-term fate, including survival, differentiation, proliferation, apoptosis, migration, and growth factor secretion of intramyocardially injected hASCs following experimental acute myocardial infarction in an immunodeficient mouse model.     

骨髓干细胞水凝胶复合物对兔心肌梗死模型局部心功能影响

目的 观察骨髓干细胞水凝胶复合物注射治疗兔心肌梗死模型疗效.方法 56只兔建立AMI模型后1周行梗死区心外膜注射:⑴处理组(A组);⑵阳性对照组(B组);⑶材料组 (C组);⑷空白组 (D组).AMI前、AMI后1周及心外膜注射后4周行超声检查.应变率成像分析收缩期径向峰值应变率SRS及舒张早期径向峰值应变率SRE.结果 与AMI造模前比较,AMI造模后1周4组兔梗死局部SRS、SRE均显著降低.与AMI造模后1周比较,心外膜注射后4周材料组与空白组梗死局部SRS、SRE无显著变化;处理组与阳性对照组梗死局部径向SRS、SRE显著增高,以处理组变化更显著.结论 骨髓干细胞水凝胶复合物可有效改善心梗后局部心肌收缩、舒张功能.     

应用生物发光成像技术示踪植入的骨髓间充质干细胞

以间充质干细胞（MSC）为基础的细胞治疗已进入临床试验阶段,用于多种组织修复,而移植细胞体内存活是影响疗效的重要因素。为了体内示踪MSC,构建了萤火虫荧光素酶基因（fluc）逆转录病毒表达载体pL（fluc）SN,并筛选出稳定表达fluc的GPE＋86细胞克隆。将逆转录病毒上清转染C57小鼠来源的MSC,经G418筛选后得到稳定表达fluc的MSC。将2×10^6个标记好的细胞注射正常骨骼肌,应用生物发光技术检测移植后不同时间细胞的存活情况。结果表明,随着时间的延长,细胞存活数目逐渐减少;移植后1天细胞死亡率高达（43．2±11．7）％,3天后细胞存活（8．6±2．5）％,6天后仅为（5．4±3．1）％,10天时未检测到荧光信号。结论：生物发光成像技术可用于移植的MSC体内示踪,但是即使将MSC植入正常的骨骼肌组织,大部分注入的MSC也将在短期内死亡。     

兔脂肪间充质干细胞与纳米骨生物相容性的体外实验研究

目的：将兔脂肪间充质干细胞（ADMSCs）与纳米相羟基磷灰石胶原骨（NHAC）共同体外培养,观察其在体外的生物相容性。方法将兔ADMSCs与纳米相羟基磷灰石胶原骨共同体外培养,行倒置显微镜、激光共聚焦显微镜观察。结果兔ADMSCs在纳米相羟基磷灰石胶原骨上良好地生长,增殖。结论纳米相羟基磷灰石胶原骨有良好的生物相容性,可以作为骨组织工程理想的载体材料。初步构建了细胞纳米相羟基磷灰石胶原组织工程骨。