来曲唑和脱氢表雄酮建立肾虚痰湿特征信息肥胖PCOS大鼠动物模型的对比研究

目的:对比来曲唑和脱氢表雄酮(Polycystic ovarian syndrome,DHEA)分别加高脂乳剂制作SD雌性大鼠肾虚痰湿特征信息肥胖PCOS动物模型的优缺点。方法:观察大鼠动情周期、体质量增加幅度,测定血清性激素、血脂、相关脏器指数水平和卵巢HE染色。结果:来曲唑联合高脂模型组大鼠体质量增加幅度、FSH、LH均极显著高于空白对照组和高脂模型组,LDL、TC、TG均显著高于余3组;DHEA联合高脂模型组大鼠E2、T均极显著高于空白对照组和高脂模型组,TC、TG、LDL均极显著高于其余3组;来曲唑模型组、来曲唑联合高脂模型组、DHEA模型组、DHEA联合高脂模型组大鼠卵巢HE染色均呈现多囊样改变。结论:来曲唑加高脂乳剂诱导是研究符合肾虚痰湿特征信息肥胖PCOS发病机制较理想的动物模型,DHEA加高脂乳剂诱导适用于血脂异常、雄激素和雌激素升高的不肥胖PCOS模型。     

调肾清肺法对多囊卵巢综合征模型大鼠高雄激素血症的影响

目的:通过建立脱氢表雄酮诱导的多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠高雄激素血症模型,采用调肾清肺法则指导下的中药加以干预,研究其对其高雄激素血症的影响,为临床卵巢功能康复提供临床和实验理论依据。方法:用脱氢表雄酮(DHEA)于21日龄SD大鼠颈后皮下注射建立大鼠PCOS模型。设立药物组(n=9)、PCOS模型组(n=9)、空白对照组(n=10)。实验结束后测量大鼠体重、卵巢重量、计算卵巢器官指数;用酶联免疫法测定血清相关激素。结果:用药后总睾酮(T)、游离睾酮(FT)、游离睾酮指数(FAI)、脱氢表雄酮(DHEA)值药物组明显高于对照组,P均<0.05,差异均有显著性;性激素结合蛋白(SHBG)药物组高于模型组,P<0.05,差异有显著性。结论:调肾清肺治法可以降低多囊卵巢大鼠血清总睾酮、游离睾酮、脱氢表雄酮水平,增加性激素结合蛋白的含量,使睾酮活性降低,从而促使卵巢排卵,改善卵巢功能。     

中药多囊灵胶囊对多囊性SD幼年雌性大鼠的药效学研究

目的:以二甲双胍为对照药物考察中药多囊灵胶囊对多囊性SD幼年雌性大鼠的药效学作用。方法:采用给大鼠皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)的方法建立模型,采用放射免疫法测定PCOS大鼠血清激素水平,血糖测定采用GOD POD终点法,以此研究中药多囊灵胶囊的作用。结果:多囊灵胶囊对DHEA诱导的SD幼年雌性大鼠PCOS动物模型卵巢及卵泡的病理有显著的改变作用;对异常升高的性激素T、E2有明显的降低作用,对PCOS大鼠糖耐量异常和胰岛素拮抗都有十分明显的抑制作用。结论:提示中药多囊灵胶囊有促排卵作用,可用于高雄激素血征,可用于DHEA引起的PCOS大鼠的糖耐量异常和胰岛素拮抗。     

葛根素对多囊卵巢综合症大鼠糖代谢及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 观察葛根素对脱氢表雄酮(DHEA)诱导的多囊卵巢综合症(PCOS)大鼠糖代谢、炎性因子及TLR4/NF-κB信号通路的影响.方法 通过皮下注射DHEA建立PCOS大鼠模型,随机分为模型组、二甲双胍组、二甲双胍+葛根素组,每组20只.二甲双胍组灌胃给予二甲双胍粉末(270 mg/kg),二甲双胍+葛根素组灌胃给予二...     

中药多囊灵胶囊对多囊性SD幼年雌性大鼠的药效学研究

目的：以二甲双胍为对照药物考察中药多囊灵胶囊对多囊性SD幼年雌性大鼠的药效学作用。方法：采用给大鼠皮下注射脱氢表雄酮（DHEA）的方法建立模型，采用放射免疫法测定PCOS大鼠血清激素水平，血糖测定采用GODPOD终点法。以此研究中药多囊灵胶囊的作用。结果：多囊灵胶囊对DHEA诱导的SD幼年雌性大鼠PCOS动物模型卵巢及卵泡的病理有显著的改变作用；对异常升高的性激素T、E2有明显的降低作用。对PCOS大鼠糖耐量异常和胰岛素拮抗都有十分明显的抑制作用。结论：提示中药多囊灵胶囊有促排卵作用，可用于高雄激素血征，可用于DHEA引起的PCOS大鼠的糖耐量异常和胰岛素拮抗。     

不同时长脱氢表雄酮诱导多囊卵巢综合征大鼠模型的比较

目的观察脱氢表雄酮(DHEA)诱导多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型21 d、49 d后血清性激素水平和卵巢形态学改变,比较不同时长DHEA诱导PCOS大鼠模型的差异,为选择合适的诱导时长提供实验依据。方法将28只SPF级SD雌性大鼠分为正常组(n=10)和造模组(n=18),正常组大鼠每日皮下注射0.2 m L的注射用大豆油剂48天,造模组大鼠每日皮下注射脱氢表雄酮20天。于第11天采集并观察各组大鼠阴道脱落细胞;第21天,尾静脉采血检测各组血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平,同时各组随机抽取2只大鼠进行卵巢组织HE染色观察,并将造模组再分为模型组Ⅰ(n=8)和模型组Ⅱ(n=8)。模型组Ⅰ每日皮下注射0.2 m L的注射用大豆油剂,模型组Ⅱ每日皮下注射脱氢表雄酮,均连续注射28 d。第49天,采集各组血清及卵巢标本,分别检测各组血清T、FSH及LH水平,HE染色法观察各组卵巢组织形态学变化。结果造模组大鼠动情周期失去规律;第21天,造模组血清T、LH水平高于正常组(P0.01),FSH水平与正常组比较差异无统计学意义;第49天,模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的T、LH水平高于正常组(P0.01);模型组Ⅱ的T水平高于模型组Ⅰ(P0.01);模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的FSH水平和黄体个数均低于正常组(P0.05,P0.01),同时模型组Ⅱ黄体个数少于模型组Ⅰ(P0.01);模型组Ⅰ卵巢指数高于正常组,模型组Ⅱ卵巢指数低于正常组,差异无统计学意义,模型组Ⅱ卵巢指数低于模型组Ⅰ(P0.05)。结论采用DHEA诱导20 d的PCOS大鼠模型,经历4周后,不存在自愈,与持续造模相比更为简便易行,同时其卵巢形态结构以及激素水平变化也更符合临床表现。     

补肾化瘀方对脱氢表雄酮诱导的多囊卵巢综合征大鼠模型的影响

目的 观察补肾化瘀方对脱氢表雄酮诱导的多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)大鼠模型的影响,探讨其作用机制。方法 通过颈背部皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone, DEHA)溶液构建PCOS大鼠模型,将成模大鼠随机分为中药组、阳性对照组、模型对照组,每组10只,另取10只正常大鼠作为空白对照组。造模成功后分别予以药物干预60天。采用苏木精—伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色法观察卵巢形态学变化;用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测卵泡刺激素(follicle stimulating hormone, FSH)、促黄体生成素(luteinizing hormone, LH)、孕酮(progesterone, P)、雌激素(estradiol, E₂)总睾酮(testosterone, T)等;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time, PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)分别检测卵巢组织...     

改良多囊卵巢综合征大鼠模型卵泡颗粒细胞中凋亡调控蛋白Bcl-2 Bax表达的研究

目的:探讨凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax在改良多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型卵巢的卵泡中颗粒细胞中的表达。方法:分别在来曲唑(Letrozole)和脱氢表雄酮(DHEA)造模基础上加用高脂乳剂,建立改良PCOS动物模型,结合阴道脱落细胞涂片、大鼠血清性激素水平、处死时体重增加幅度和卵巢形态学的改变进行模型验证,选用免疫组织化学法检测大鼠卵巢组织Bcl-2、Bax的表达。结果:模型建立成功。免疫组织化学结果显示高脂模型组、Letrozole模型组、Letrozole改良组、DHEA模型组和DHEA改良组Bax平均灰度均值均高于空白对照组,Bcl-2平均灰度均值均低于空白对照组,差异无统计学意义。结论:Bcl-2在卵巢的卵泡颗粒细胞中表达下调,Bax表达上调,推测两者表达改变可能是导致改良PCOS模型大鼠卵巢中颗粒细胞凋亡增多的关键因素。     

补肾化痰方对多囊卵巢综合征大鼠胰岛素抵抗的影响

目的探讨补肾化痰方对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠胰岛素抵抗的影响。方法采用皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)造模法建立PCOS大鼠模型,将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、二甲双胍组、中药(补肾化痰方)低剂量组、中药(补肾化痰方)高剂量组,给予相应药物连续灌胃28天。行阴道涂片、HE染色观察动情周期;用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清胰岛素(INS)水平;用电子精密天平测量脂肪湿重;用血糖仪测定大鼠血糖水平,计算葡萄糖曲线下面积(AUC)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素敏感指数(ISI)。结果与对照组相比,模型组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素、葡萄糖曲线下面积升高,HOMA指数增高,ISI降低,无规律的动情周期,无排卵,体内脂肪增加。二甲双胍和补肾化痰方两个剂量组可不同程度的改变PCOS大鼠上述病理改变,补肾化痰方用药剂量较高效果较好。结论补肾化痰方可改善多囊卵巢综合征大鼠高胰岛素血症、胰岛素抵抗状态,降低体脂水平,恢复大鼠动情周期及排卵。     

脱氢表雄酮诱导多囊卵巢大鼠高雄激素血症模型的实验研究

目的:通过对23d龄大鼠行颈背部皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)建立多囊卵巢(PCO)大鼠高雄激素血症模型,为相关实验提供模型参考依据和临床治疗提供诊治思路。方法:将40只23d龄大鼠随机分成两组,即空白组、模型组,每组20只,模型组大鼠每天定期行颈背部皮下注射DHEA 6mg/(100g体质量·d)+注射用大豆油0.2m L;空白组同时间行颈背部皮下注射注射用大豆油0.2m L,两组均连续注射30d。实验期间监测造模大鼠的动情周期;实验结束后测量大鼠体质量、卵巢重量及观察卵巢形态学改变;用酶联免疫法测定血清相关激素,比较两组总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、促卵泡生成激素(FSH)的水平值。结果:模型组大鼠阴道脱落细胞均为角质细胞,未见明显动情周期。模型组卵巢重量显著高于空白组,组间比较,差异有统计学意义(P0.05);形态学检查结果显示模型组卵巢卵泡明显多于空白组,成多囊样发育,见多个明显囊状扩张卵泡。模型组TT、FT、E_2、LH水平值明显高于空白组,组间比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:DHEA可升高大鼠TT、FT、E_2、LH水平值,并使卵巢呈多囊样改变,成功建立了多囊卵巢大鼠高雄激素血症模型。该方法简单易行,是较为理想的造模方法,值得推广应用。     

模拟肾虚痰湿特征信息PCOS大鼠模型中GDF-9、BMPR-2的表达研究

目的:探讨生长分化因子-9(GDF-9)及骨形态发生蛋白受体-2(BMPR-2)在有肾虚痰湿特征信息的肥胖多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型的卵巢颗粒细胞中的表达。方法:分别在来曲唑(Letrozole)和脱氢表雄酮(DHEA)造模基础上加用高脂乳剂,建立肥胖PCOS动物模型,结合阴道脱落细胞涂片、大鼠体质量增加幅度、血脂水平和卵巢形态学的改变进行模型验证,选用免疫组化法检测大鼠模型卵巢组织卵泡颗粒细胞中GDF-9、BMPR-2的表达。结果:模型建立成功,Letrozole模型组、Letrozole肥胖模型组GDP-9积分光密度总和均显著低于高脂模型组。此外,Letrozole肥胖模型组GDP-9平均灰度均值低于高脂模型组,DHEA模型组和DHEA肥胖模型组GDF-9积分光密度总和均显著高于空白对照组,Letrozole模型组BMPR-2积分光密度总和均显著高于高脂模型组,DHEA模型组BMPR-2积分光密度总和显著高于高脂模型组。结论:推测GDF-9、BMPR-2在肥胖PCOS大鼠模型卵巢的卵泡颗粒细胞中表达降低可能是肥胖PCOS发生发展的重要原因。     

针刺对多囊卵巢综合征大鼠卵巢转化生长因子β1及其mRNA表达的影响

目的：研究针刺对多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠卵巢转化生长因子β1（TGF—β1）及其mRNA表达的影响,探讨针刺促排卵的作用机制。方法：24日龄雌性大鼠颈背部皮下注射脱氢表雄酮（DHEA）制作PCOS大鼠模型,对照组同期皮下注射油剂。PCOS大鼠随机分为模型组、针刺组。模型组不作任何处理,针刺组于80日龄起进行针刺干预,每日1次,连续6周。治疗结束后各组大鼠处死,检测血清性激素水平,取卵巢称重,用免疫组化和RT—PCR方法检测TGF—β1及其mRNA表达水平。结果：与模型组相比,对照组和针刺组卵巢湿重、卵巢TGF—β1及其mRNA表达水平、血清T、E2水平均显著降低。结论：针刺能显著降低PCOS大鼠卵巢TGF-β1及其mRNA的表达,抑制TGF—β1对卵巢和激素合成的作用,改善PCOS大鼠多囊样变和高雄激素血症,促进排卵。     

多囊卵巢综合征动物模型建立的研究现状与展望

对多囊卵巢综合征动物模型的多种造模法，如雄激素造模法(包括丙酸睾丸酮造模法、脱氢表雄酮造模法)戊酸雌二醇雌激素造模法、孕激素联合HCG造模法、胰岛素联合HCG造模法等进行了文献综述。因为多囊卵巢综合征是一种多病因，临床表现多态性的综合征，病理、生理复杂，因此动物造模的建立并不容易，相对来说，雄激素联合绒毛膜促性腺激素的病理模型是比较理想的。     

多囊卵巢综合征动物模型建立的研究现状与展望

对多囊卵巢综合征动物模型的多种造模法 ,如雄激素造模法 (包括丙酸睾丸酮造模法、脱氢表雄酮造模法 )戊酸雌二醇雌激素造模法、孕激素联合HCG造模法、胰岛素联合HCG造模法等进行了文献综述。因为多囊卵巢综合征是一种多病因 ,临床表现多态性的综合征 ,病理、生理复杂 ,因此动物造模的建立并不容易 ,相对来说 ,雄激素联合绒毛膜促性腺激素的病理模型是比较理想的     

体现中医病因病机的多囊卵巢综合征动物模型评价及筛选

目的：梳理不同多囊卵巢综合征（PCOS）动物模型的造模因素和评价指标,分析各种动物模型的优缺点和适用范围,筛选体现中医药病因病机的模型。方法：通过收集1979年以来公开发表的中文文献77篇,建立PCOS造模因素（动物种别及鼠龄、造模试剂及剂量等）和评价指标（卵巢形态学、激素水平）的数据库,并进行归纳和总结。结果：国内外建立的PCOS动物模型有雄激素造模法、雄激素联合HCG造模法、孕激素联合HCG造模法、雌激素造模法、芳香化酶抑制剂造模法、胰岛素联合HCG造模法、雄激素联合胰岛素造模法、胰岛素造模法等,常使用鼠龄在3-50天的SD、Wistar大鼠,应用脱氢表雄酮、丙酸睾丸酮、硫酸普拉睾酮钠、双氢睾酮、左旋18-甲基炔诺酮、戊酸雌二醇、来曲唑、胰岛素和HCG等化学试剂进行造模,评价指标为卵巢形态学、各级总卵泡数、性激素类（E2、P、T、FSH、LH）和胰岛素抵抗相关指标（FINS、FPG、HOMA）等。结论：目前PCOS动物模型各有优缺点,尚不能完全模拟临床上PCOS患者发病过程,应根据不同的目的选择适宜的造模试剂和评价指标。脱氢表雄酮、双氢睾酮缓释、孕激素联合HCG造模的动物模型更适宜于研究胰岛素抵抗（IR）在PCOS发病中的作用。肾虚痰湿是肥胖型PCOS根本病因病机,脱氢表雄酮造模、左旋18-甲基炔诺酮联合HCG造模、芳香化酶抑制剂造模比较符合肥胖型PCOS动物模型,评价指标有体质量、血清性激素水平、胰岛素抵抗以及卵巢形态学等,临床常采用补肾化痰法治疗肥胖型PCOS。     

补肾活血方对多囊卵巢综合征大鼠抗苗勒氏管激素作用

目的:研究抗苗勒氏管激素(AMH)对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型的表达情况,并探讨补肾活血方的干预作用。方法:应用补肾活血方作用于以脱氢表雄酮(DHEA)诱导的PCOS大鼠模型,观察血清性激素FSH、LH、T及AMH浓度变化。结果:PCOS大鼠模型血清LH、T及AMH浓度升高,补肾活血方干预后血清LH、T及AMH浓度降低。结论:AMH有可能通过某种机制参与PCOS的病理生理过程;补肾活血方能改善卵巢功能,促进卵泡发育,对PCOS的发病有一定的干预作用。     

Ki-67在肥胖PCOS大鼠模型卵巢颗粒细胞中的表达研究

目的:探讨子宫内膜生存素Ki-67在肥胖多囊卵巢综合(PCOS)大鼠模型卵巢颗粒细胞中的表达。方法:分别在来曲唑(Letrozole)和脱氢表雄酮(DHEA)造模基础上加用高脂乳剂,建立肥胖PCOS动物模型,结合血清性激素、大鼠处死时体重增加幅度及脏器指数改变进行模型验证,选用免疫组织化学法检测大鼠模型卵巢组织卵泡颗粒细胞中Ki-67的表达。结果:模型建立成功。Letrozole模型组和DHEA模型组Ki-67积分光密度总和、平均灰度均值显著低于空白对照组(P0.05),此外,Letrozole肥胖模型组和DHEA肥胖模型组Ki-67积分光密度总和、平均灰度均值极显著低于空白对照组和高脂模型组(P0.01);Letrozole肥胖模型组Ki-67平均灰度均值显著低于Letrozole模型组(P0.05),DHEA肥胖模型组Ki-67平均灰度均值显著低于DHEA模型组(P0.05),差异有统计学意义。结论:Ki-67在PCOS大鼠模型卵巢的卵泡颗粒细胞中表达降低可能是PCOS发生发展的重要原因,且Ki-67在肥胖PCOS大鼠模型卵巢卵泡颗粒细胞中表达降低更明显。     

二陈汤对多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织IRS-1/IRS-2的调节作用

目的观察二陈汤化痰法对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢组织中胰岛素受体底物-1(IRS-1)及胰岛素受体底物-2(IRS-2)mRNA和蛋白表达的影响,探讨化痰法对PCOS模型大鼠胰岛素抵抗(IR)的生物学机制作用。方法采用颈背部皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS模型大鼠,以正常组为对照,将PCOS模型大鼠随机分为模型组、二陈汤组、二甲双胍组,予相应药物灌胃,连续给药4周。采用ELISA法检测各组血清雄激素(T)和胰岛素(INS)水平,采用Real-time PCR和Western blot检测各组大鼠卵巢组织的IRS-1和IRS-2mRNA及蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠血清T水平明显升高(P0.05),卵巢组织中IRS-1、IRS-2的mRNA和蛋白表达水平明显下降(P0.01);与模型组比较,二陈汤组和二甲双胍组血清T水平明显下降(P0.05),卵巢组织中IRS-1、IRS-2 mRNA表达和IRS-2蛋白表达水平明显提高(P0.05,P0.01),二陈汤组IRS-1蛋白表达水平明显提高(P0.01)。结论二陈汤化痰法可以改善PCOS模型大鼠卵巢组织的IR状态,其机制可能与改善卵巢局部微环境、调节卵巢组织中IRS-1和IRS-2的mRNA和蛋白的表达水平有关。     

青春期与育龄期痰湿证多囊卵巢综合征患者的临床特征及代谢差异性研究

目的探究青春期与育龄期痰湿证多囊卵巢综合征(PCOS)患者的临床特征及代谢差异性。方法选择痰湿证PCOS患者434例进行研究,按照年龄将患者分为青春期组123例和育龄期组311例,分析并比较2组患者的临床特征及代谢指标的差异。结果青春期组患者年龄、初潮年龄及血清卵泡刺激素(FSH)、血清黄体生成素(LH)、空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白B(ApoB)/载脂蛋白A(ApoA)均明显低于育龄期组(P均0. 05),而多毛及溢脂发生率和血清睾酮(T)、硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)、雄烯二酮(AND)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、ApoA、ApoB均明显高于育龄期组(P均0. 05)。结论痰湿证PCOS在青春期与育龄期所表现出的临床特征、代谢特征不同,青春期患者初潮年龄较早,多毛及溢脂发生率较高,且以雄激素水平过高为主,育龄期患者以性激素及糖脂代谢障碍为主。     

艾塞那肽联合桂枝挥发油对多囊卵巢综合征大鼠炎性因子及糖脂代谢的影响

目的观察艾塞那肽联合桂枝挥发油对经脱氢表雄酮诱导的多囊卵巢综合征大鼠外周血清炎性因子及糖脂代谢的影响。方法将60只经脱氢表雄酮成功诱导的多囊卵巢综合征大鼠随机分为观察组和对照组各30只。对照组大鼠每天给予艾塞那肽10μg/(kg·d)皮下注射,观察组大鼠每天给予桂枝挥发油0.5 mL/(100 g·d)灌胃+艾塞那肽10μg/(kg·d)皮下注射,均连续用药28 d。测定2组大鼠干预前及干预结束后外周血炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、内脂素、C反应蛋白(CRP)]、血脂[三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)]、血糖[空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)]水平。结果干预结束后2组大鼠外周血IL-6、内脂素、CRP、TG、LDL-C、TC、FPG、2hPG水平均明显降低(P均<0.05),血HDL-C水平均明显升高(P均<0.05),且观察组上述各指标改善情况均明显优于对照组(P均<0.05)。结论艾塞那肽联合桂枝挥发油能明显降低多囊卵巢综合征大鼠外周血清炎性因子及血脂、血糖水平,为临床应用提供了一定的理论依据。