iPSC-MSCs抑制ApoE(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成及其机制

目的探究诱导性多能干细胞源性间充质干细胞(iPSC-MSCs)对高脂饲养的ApoE(-/-)小鼠的动脉粥样硬化抑制作用及其相关机制。方法 40只8周的ApoE-/-小鼠随机分为4组,每组10只:普通饲料组:给予普通饲料喂养,高脂饲料组:给予高脂饲料喂养,干细胞组:给予高脂喂养同时尾静脉注射iPSC-MSCs,PBS组:给予高脂喂养同时尾静脉注射PBS。12周后观察小鼠主动脉粥样硬化斑块形成情况、血脂水平、炎症因子水平以及Nothc1蛋白的表达情况。结果高脂喂养后,高脂组ApoE(-/-)小鼠的斑块面积较普通饲料组明显增多,且小鼠总胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL)、TNF-α、IL-6分别为(32.02±2.32)mmol/L、(20.36±0.90)mmol/L、(534.30±89.51)pg/ml、(32.69±1.86)pg/ml均较普通饲料组明显升高,差异具有统计学意义(P0.01);注射iPSC-MSCs后斑块面积明显减小,小鼠的CHOL、LDL、TNF-α、IL-6水平分别为(24.98±1.18)mmol/L、(15.34±1.54)mmol/L、(230.6±13.31)pg/ml、(8.54±2.02)pg/ml,较高脂组明显下降,差异具有统计学意义(P0.05)。且高脂组中ApoE(-/-)小鼠的Notch1蛋白水平要明显高于普通饲料组(P0.01),iPSC-MSCs干预后Notch1蛋白表达水平要明显低于高脂组(P0.05),PBS对于ApoE(-/-)小鼠Notch1蛋白表达无影响(P0.05)。结论 iPSC-MSC可以抑制ApoE(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成,可能与iPSC-MSCs可以减轻ApoE(-/-)小鼠TNF-a、IL-6等炎症因子水平,降低胆固醇含量,下调Notch1的蛋白表达有关。     

黄秋葵多糖调节PEPCK和AMPK表达抑制高脂饮食小鼠肝糖异生

目的观察黄秋葵多糖对持续高脂饮食小鼠葡萄糖代谢、胰岛素敏感性及糖异生的影响及其机制。方法 2015年4—9月于上海中医药大学附属普陀医院中心实验室进行实验。CD47/BL雄性小鼠40只,随机分为高脂饮食组(H组)、西格列汀组(S组)、黄秋葵多糖低剂量组(OPL组)、黄秋葵多糖高剂量组(OPH组)。小鼠高脂饮食喂养8周后,S组予西格列汀10 mg·kg~(-1)·d~(-1),OPL组予黄秋葵多糖150 mg·kg~(-1)·d~(-1),OPH组予黄秋葵多糖300 mg·kg~(-1)·d~(-1)。干预10周后行葡萄糖耐量、胰岛素耐量、丙酮酸耐量实验,检测肝脏糖异生关键酶PEPCK、转录因子PGC-1α、KLF15等mRNA水平,以及肝脏AMPK表达。PAS染色观察肝糖原沉积。结果葡萄糖耐量实验:OPL组60 min血糖显著低于H组[(17.71±4.05)mmol/L vs.(21.79±2.59)mmol/L,q=3.561,P=0.029];OPH组30min、60 min血糖低于H组[(23.90±5.43)mmol/L vs.(29.07±3.38)mmol/L,(16.43±4.42)mmol/L vs.(21.79±2.59)mmol/L,q=3.204、3.792,P=0.036、0.015]。丙酮酸耐量实验:OPL组15 min、30 min血糖明显低于H组[(12.01±1.14)mmol/L vs.(14.69±1.68)mmol/L,(14.18±1.46)mmol/L vs.(16.82±2.74)mmol/L,q=5.668、3.623,P=0.002、0.02];OPH组15 min、30 min、60 min血糖均显著低于H组[(11.62±1.98)mmol/L vs.(14.69±1.68)mmol/L、(12.63±1.51)mmol/L vs.(16.82±2.74)mmol/L,(11.59±1.97)mmol/L vs.(15.42±2.01)mmol/L,q=5.281、5.978、5.930,P=0.002、0.001、0.004]。胰岛素耐量实验:OPH组90 min、120 min血糖显著低于H组[(4.35±1.28)mmol/L vs.(6.29±2.52)mmol/L,(5.83±1.03)mmol/L vs.(8.48±1.92)mmol/L,q=3.065、5.387,P=0.044、0.001]。肝糖异生相关因子及AMPK检测结果:OPH组肝脏PEPCK、PGC-1α、KLF15mRNA表达较H组明显下调[(0.705±0.172)vs.(1.013±0.249),(0.785±0.123)vs.(0.968毒0.280),(0.676±0.080)vs.(0.904±0.192),q=4.304、3.295、4.617,P=0.008、0.033、0.013];OPH组肝脏AMPK mRNA表达较H组显著增加[(1.078±0.185)vs.(0.535±0.155),q=3.175,P=0.039]。Western blot显示OPH组、OPL组肝脏PGC-1α、KLF15蛋白水平显著低于H组。肝脏糖原染色:OPH组肝糖原沉积明显高于H组[(14.06±2.98)%vs.(10.20±4.79)%,q=3.070、P=0.044]。结论黄秋葵多糖能改善高脂诱导的胰岛素抵抗小鼠葡萄糖代谢和外周胰岛素敏感性、抑制丙酮酸糖异生。黄秋葵多糖可能通过下调肝脏PGC-1α和KLF15表达,促进AMPK转录,抑制PEPCK基因转录。     

肥胖小鼠血清铁调素水平变化及其与瘦素的关系

目的:研究饮食诱导肥胖小鼠血清铁调素水平的变化及其与瘦素的相关性.方法:C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组和肥胖组,每组6只.对照组饲以普通饲料,肥胖组以高脂饲料喂养12周.建模成功后小鼠心脏取血分离血清,用ELISA试剂盒测定血清中瘦素、铁调素的含量.结果:肥胖小鼠血清瘦素、铁调素含量显著高于正常对照小鼠[(33.92±9.39)μg·L-1vs(15.32±5.48) μg·L-1,P＜0.01;(22.51±7.53)μg·L-1vs(14.03±1.08)μg·L-1,P＜0.05];相关分析表明,血清铁调素与瘦素水平间呈显著正相关关系(r =0.917,P＜0.05).结论:肥胖小鼠血清铁调素水平升高,并且铁调素水平与瘦素浓度正相关.     

高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠肥胖及减重手术模型的建立

 目的 建立饮食诱导的肥胖小鼠模型,研究建立肥胖小鼠胃袖状切除术模型的可行性及有效性。方法 将40只4周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分为普通饮食组（n=20）和高脂饮食组（n=20）,均喂养20周。20周后随机分为4个亚组：普通饮食假手术组,普通饮食手术组,高脂饮食假手术组,高脂饮食手术组。定期测量体重及空腹血糖,喂养20周后检测葡萄糖耐量、血脂水平及肝组织病理学。结果 高脂饮食喂养4周后,高脂饮食组小鼠体重即开始显著高于普通饮食小鼠（P < 0.05）。喂养20周后,与普通饮食小鼠相比,高脂饮食小鼠平均体重[（42.71±2.30）g vs.（32.23±1.73）g]、血糖[（8.82±0.51）mmol/L vs.（6.74±0.31）mmol/L]及血脂水平[血清总胆固醇：（4.40±0.57）mmol/L vs.（2.31±0.35）mmol/L;血清三酰甘油：（2.26±0.25）mmol/L vs.（1.11±0.24）mmol/L]均明显升高（P均 < 0.01）。高脂饮食及普通饮食假手术组小鼠存活率为100%,高脂饮食手术组存活率为70%（7/10）,普通饮食手术组存活率为80%（8/10）。术后第1周,各组小鼠体重均显著下降（P < 0.01）;术后第4周,高脂饮食及普通饮食手术组小鼠较术前体重下降约20%;术后第3周,高脂饮食及普通饮食假手术组小鼠体重恢复至术前水平。结论 高脂饮食喂养20周可诱导肥胖小鼠模型,进一步建立胃袖状切除术模型可行且有效。     

高脂饮食对子宫内膜异位症小鼠异位病灶生长及FABP4蛋白表达的影响

目的:探究高脂饮食对子宫内膜异位症发展的影响及作用机制。方法:取20只C57BL/6J小鼠建立子宫内膜异位症小鼠模型,将建模小鼠随机分为高脂饮食组和普食组,每组9只,高脂饮食组小鼠采用高脂饲料饲养,普食组小鼠采用普通饲料饲养,每周测量小鼠体重1次。饲养8周后取静脉血并处死小鼠,测量两组小鼠体重、观察子宫内膜异位病灶的大小及形态,计算Lee′s指数,免疫组化法检测子宫内膜异位病灶中脂肪酸结合蛋白4(FABP4)蛋白的表达,ELISA法测定两组小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,Western blot检测子宫内膜异位病灶中PPARγ和NF-κB蛋白的表达。结果:高脂饮食组小鼠饲养8周后体重增加量、Lee′s指数和子宫内膜异位病灶体积大于普食组小鼠(P<0.05)。高脂饮食组小鼠子宫内膜异位病灶中FABP4蛋白的阳性表达高于普食组小鼠(P<0.05)。高脂饮食组小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平高于普食组小鼠(P<0.05)。与普食组比较,高脂饮食组小鼠子宫内膜异位病灶中PPARγ蛋白表达降低,NF-κB蛋白表达升高(P<0.05)。结论:高脂饮...     

高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠胰腺组织Toll样受体4及炎性因子的表达

目的研究高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠胰腺组织Toll样受体4(TLR4)、核因子-kappa B(NF-κB)表达及其炎性因子水平变化。方法 2013年1月—2014年1月于湖北医药学院进行实验。选取C57BI/6型雄性小鼠160只,按照随机数字表法分为实验组和对照组,每组80只,对照组给予普通饮食,实验组给予高脂饮食,分别在喂养第0天、第3天、第7天、第11天、第14天、第21天、第42天、第84天测量小鼠体质量、宅腹血糖以及胰岛素水平,将小鼠处死后取胰腺组织,然后进行苏木精—伊红染色(HE),观察胰岛细胞的形态,应用Western Blot法检测胰腺组织中TLR4、NF-κB蛋白表达情况,应用免疫组化法检测胰腺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的表达水平。结果小鼠胰岛素抵抗模型成功被诱导,随着时间延长实验组小鼠体质量、空腹血糖呈增加趋势,分别于第14天和第21天与对照组比较差异具有统计学意义[(29.71±0.85)g vs.(27.08±0.56)g,t=23.19,P=0.00;(29.83±0.41)g vs.(26.09±0.58)g,t=9.3l,P=0.00;(10.37±0.63)mmol/L vs.(9.69±0.58)mmol/L.t=10.54,P=0.00:(10.62±0.72)mmol/L vs.(9.31±0.24)mmol/L,t=15.43,P=0.00],胰岛素水平从第3天开始增加,第7天达到高峰,第7天到第42天与对照组比较差异均有统计意义[(216.05±7.13)μmol/L vs.(31.62±10.42)μmol/L,t=130.65,P=0.00;(11 3.24±5.29)μmol/L vs.(50.12±9.64)μmol/L,t=51.34,P=0.00;(106.28±11.08)μmol/L vs.(44.23±2.53)μmol/L,t=48.83,P=0.00;(82.19±4.25)μmol/L vs.(42.58±3.08)μmol/L,t=67.50,P=0.00;(55.72±2.52)tμmol/L vs.(35.09±2.53)μmol/L,t=24.12,P<0.05,P=0.00];胰腺组织中TLR4、NF-κB蛋白从第7天开始出现高表达,第21天到达高峰,之后出现下降,同时胰岛细胞出现TNF-α和IL-6特异性的表达。结论高脂饮食诱导小鼠胰岛素抵抗时会出现TLR4/NF-κB通路激活,且出现TNF-α和TL-6高表达。     

miRNA-33在运动调节C57/BL6小鼠肥胖中的作用及机制探讨

目的通过运动干预高脂饮食诱导的肥胖C57/BL6小鼠,探讨运动对肥胖病理变化影响中的miRNA-33调控机制。方法 4周龄雄性C57/BL6小鼠分为3个组,对照组(6只)喂养普通饲料16周,肥胖组(8只)喂养高脂饲料16周,运动组(8只)在喂养高脂饲料8周后开始跑步8周。每周监测体重变化。三组动物处死后取血清和肝组织,用自动血生化分析仪检测血脂水平。qPCR检测肝组织miRNAs的表达情况,蛋白印记(Western-blot)检测肝组织ABCA1蛋白的表达。结果肥胖组总胆固醇为(2.26±0.28)mmol/L,高于对照组的(1.52±0.05)mmol/L和运动组的(1.87±0.21)mmol/L,差异均有统计学意义(P0.05);肥胖组甘油三酯为(5.38±1.07)mmol/L,高于对照组的(4.15±0.64)mmol/L和运动组的(4.38±0.45)mmol/L,差异均有统计学意义(P=0.028 6、0.028 8);与对照组和运动组相比,肥胖组肝组织miRNA-33的表达降低,差异有统计学意义(P=0.009 8、0.025 9),ABCAl蛋白表达升高。结论在运动调节高脂饮食诱导的肥胖中,miRNA-33可能在其中扮演着重要角色。     

血管回声跟踪技术诊断动脉粥样硬化价值的研究

目的:探讨血管回声跟踪技术诊断动脉粥样硬化的价值。方法:24只新西兰兔随机平均分成正常对照组和高脂喂养组,喂养12周后,采用超声血管回声跟踪技术检测兔腹主动脉血管结构及弹性,各参数测值与对照组进行比较;并于实验最后阶段检测兔血脂水平和观察兔腹主动脉粥样硬化情况。结果:高脂饮食组血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)高于正常对照组,血清高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)低于对照组。高脂饮食组中,60%兔主动脉壁可见大量黄色脂样斑块,压力应变弹性系数(Eρ)、僵硬度(β)值较对照组明显增高[(201.65±25.60)vs(95.72±14.46),P=0.000;(19.40±3.82)vs(9.50±1.59),P=0.000];脉搏波速度(PWV-β)较对照组明显增高[(9.96±1.23)vs(9.50±1.59),P=0.000],顺应性(AC)较对照组明显减低[(0.05±0.01)vs(0.08±0.02),P=0.004]。此外,在高脂饮食组中,腹主动脉的内中膜厚度与Eρ、β、PWV-β这3个血管弹性指标有明显的相关性(P<0.05)。结论:超声血管跟踪技术评价动脉弹性方面稳定、敏感,不仅可以评估动脉弹性,而且可以检测疾病进展。     

炎症应激加重CD36基因敲除小鼠胰岛素抵抗

目的研究炎症能否加重CD36基因敲除小鼠胰岛素抵抗。方法14周正常饮食喂养的野生型C57BL/6(n=7)和CD36基因敲除(CD36KO)小鼠(n=12),并将CD36KO小鼠按随机数字表法分为炎症刺激组和无炎症刺激组,分别进行糖耐量、胰岛素测定和甘油三酯(TG)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及肝脏组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖体蛋白S6激酶(S6K)、胰岛素受体底物1(IRS-1)、pIRS-1,2的基因和蛋白表达相关检测。结果与野生型小鼠相比,CD36KO无炎症刺激组存在胰岛素抵抗,胰岛素抵抗指数增加[(3.01±1.24)vs(0.81±0.12),P0.05],TG增高[(0.83±0.15)mmol/Lvs(0.21±0.06)mmol/L,P0.05],肝脏mTOR、S6K基因及蛋白水平增高,IRS-1基因及蛋白水平降低,pIRS-1,2蛋白水平增加。与CD36KO无炎症刺激组相比,炎症刺激组小鼠胰岛素抵抗加强,胰岛素抵抗指数增加[(4.65±1.54)vs(3.01±1.24),P0.05],TG[(2.66±0.17)mmol/Lvs(0.83±0.15)mmol/L,P0.05],SAA、IL-6、TNF-α水平增高[(13.62±5.05)ng/mlvs(5.74±1.54)ng/ml,P0.05;(43.81±1.23)pg/mlvs(35.24±4.13)pg/ml,P0.05;(235.1±32.6)pg/mlvs(169.2±36.1)pg/ml,P0.05],肝脏的mTOR和S6K基因及蛋白水平增高,IRS-1基因及蛋白水平降低,pIRS-1,2蛋白水平增加。结论炎症应激可以加重CD36基因敲除小鼠胰岛素抵抗。     

5-脂氧合酶通路在ApoE基因敲除小鼠动脉硬化中的作用

目的探讨5-脂氧合酶(arachidonate 5-Lipoxygenase,5-LO)通路在ApoE-/-小鼠动脉硬化中的作用。方法将8周龄ApoE-/-雄性小鼠24只[体质量(22.42±1.21)g]随机分为2组:对照组(n=12,普通饲料)、动脉硬化模型组(n=12,高脂饲料)。16周后,病理检测分析校正斑块面积(PA/LA);RT-PCR和Western blot法检测主动脉中5-LO的表达;酶联免疫法检测白三烯B4(leukotriene B4,LTB4)和白三烯D4(leukotriene D4,LTD4)的血清水平。结果建模成功,动脉硬化模型组粥样斑块形成。动脉硬化模型组较对照组小鼠主动脉中5-LO的mRNA的表达[(0.61±0.0)vs(0.18±0.03),P<0.01]及蛋白表达[(1.53±0.18)vs(0.52±0.40),P<0.01]明显升高,血清LTB4水平[(34.79±4.47)vs(12.07±2.35),P<0.01]及LTD4水平[(2 862.48±48.77)vs(2 357.10±53.57),P<0.01]显著升高。动脉硬化模型组血清LTB4(r=0.954,P<0.01)、LTD4(r=0.946,P<0.01)水平与校正斑块面积成正相关。结论 5-脂氧合酶通路在动脉粥样硬化发病机制中起着重要作用。     

不同干预治疗对C57BL/6J雄性肥胖小鼠肿瘤坏死因子-α的影响

目的 探讨不同干预治疗对高脂饮食诱导的C57BL/6J雄性肥胖小鼠脂肪组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.方法 4周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为普食组(以普通饲料喂养,脂肪占总热量的12%)、高脂组(以高脂饲料喂养,脂肪占总热量的12%)喂养,再将40只高脂饮食诱导的c57BL/6J雄性肥胖小鼠随机分为饮食控制组、高脂饮食组(高脂饮食)、二甲双胍组(高脂饮食+二甲双胍)及罗格列酮组(高脂饮食+罗格列酮).干预治疗4周后,分别测定体重、内脏脂肪重量、空腹血糖(FBG),空腹胰岛素水平(FIns).评价小鼠糖代谢和胰岛素抵抗情况,采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)方法及Western印迹法检测脂肪组织内TNF-α mRNA、TNF-α的表达.结果 ①高脂组小鼠的体重、内脏脂肪重量、FBG、FIns水平和脂肪组织TNF-α、TNF-α mRNA的表达均显著高于普食组(P值分N<0.05、0.01).②干预治疗1周后,饮食控制组、罗格列酮组的FBG、内脏脂肪重量和脂肪组织内TNF-α、TNF-α mRNA均显著低于高脂饮食组(P值分别均<0.05、0.01).结论 罗格列酮及饮食控制均能一定程度地降低肥胖小鼠的内脏脂肪重量、血糖,降低脂肪组织TNF-α的表达水平.     

探究动脉粥样硬化疾病进程中三个关键DNA甲基转移酶的表达变化

目的:通过构建体内外动脉粥样硬化(AS)模型探究动脉粥样硬化疾病进程中三个关键DNA甲基转移酶的表达变化。方法:14只6周龄的Apo E基因敲除(ApoE~(-/-))的C57BL/6J雄性小鼠,14只6周龄的野生型C57BL/6J雄性小鼠分别随机分两组进行高脂喂养或正常饮食喂养,构建AS体内模型观察主动脉组织病理形态学改变,全自动生物分析仪测定血脂水平,实时荧光定量PCR(qPCR)检测小鼠肝脏组织DNA甲基转移酶(DNMT1,DNMT3A,DNMT3B)的表达变化;利用THP-1构建泡沫细胞模型,qPCR检测DNMTs表达变化。结果:ApoE~(-/-)高脂饮食和ApoE~(-/-)正常饮食小鼠主动脉弓和无名动脉均出现粥样硬化斑块;ApoE~(-/-)高脂饮食和正常饮食小鼠外周血总胆固醇TC显著高于野生型小鼠对应饮食组(P<0.01),同一组内(ApoE~(-/-)小鼠组或野生型小鼠组)高脂饮食小鼠TC显著高于正常饮食小鼠;同普通饮食野生型小鼠组相比,野生型小鼠高脂饮食组和ApoE~(-/-)高脂饮食组DNMT3A表达水平降低(P=0.025,P=0.018),DNMT3B表达水平降低(P=0.006,P=0.013);THP-1细胞泡沫化过程中,DNMT1表达水平显著降低(P=0.022)。结论:肝脏组织及单核细胞DNA甲基转移酶DNMTs的表达改变,可能在动脉粥样硬化疾病发生中发挥重要作用。     

高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠肥胖及减重手术模型的建立

目的 建立饮食诱导的肥胖小鼠模型,研究建立肥胖小鼠胃袖状切除术模型的可行性及有效性.方法 将40只4周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分为普通饮食组(n=20)和高脂饮食组(n=20),均喂养20周.20周后随机分为4个亚组:普通饮食假手术组,普通饮食手术组,高脂饮食假手术组,高脂饮食手术组.定期测量体重及空腹血...     

加味二陈汤对ApoE~(-/-)小鼠炎症标志物IL-6和TNF-α的调节作用

目的研究加味二陈汤对Apo E-/-小鼠血清、主动脉壁及瓣膜的IL-6、TNF-α表达的影响。方法40只Apo E-/-小鼠中10只为空白对照组,30只以高脂饲喂养4周构建动脉粥样硬化(As)小鼠模型,均分成模型组、辛伐他汀组、加味二陈汤组,分别用生理盐水、辛伐他汀及加味二陈汤对小鼠灌胃给药,8周后处死小鼠,Elisa法检测血清中IL-6、TNF-α的含量;免疫组化法检测IL-6、TNF-α在主动脉壁及瓣膜的表达。结果辛伐他汀组血清IL-6和TNF-α分别为392.06±37.70 pg/m L、189.1±50.4 pg/m L,与模型组相比表达下降(P<0.05);加味二陈汤组血清IL-6、TNF-α分别为442.41±172.26 pg/m L、47.2±13.3 pg/m L,与模型组相比表达下降(P<0.05),与辛伐他汀组相比,表达下降(P<0.05);免疫组化结果显示加味二陈汤可降低IL-6、TNF-α在主动脉壁内的表达。结论加味二陈汤可降低血清和主动脉壁及瓣膜的IL-6、TNF-α的表达。     

Role of 5-lipoxygenase pathway in atherosclerosis in ApoE knockout mice

目的 探讨5-脂氧合酶(arachidonate 5-Lipoxygenase,5-LO)通路在ApoE-/-小鼠动脉硬化中的作用.方法将8周龄ApoE-/-雄性小鼠24只[体质量(22.42±1.21)g]随机分为2组:对照组(n=12,普通饲料)、动脉硬化模型组(n=12,高脂饲料).16周后,病理检测分析校正斑块面积(PA/LA);RT-PCR和Western blot法检测主动脉中5-LO的表达;酶联免疫法检测白三烯B4(leukotriene B4,LTB4)和白三烯D4( leukotriene D4,LTD4)的血清水平.结果 建模成功,动脉硬化模型组粥样斑块形成.动脉硬化模型组较对照组小鼠主动脉中5-LO的mRNA的表达[(0.61±0.0) vs (0.18±o.03),P＜0.01]及蛋白表达[(1.53±0.18) vs (0.52±0.40),P＜0.01]明显升高,血清LTB4水平[(34.79±4.47) vs(12.07±2.35),P＜0.01]及LTD4水平[(2 862.48±48.77)vs(2 357.10±53.57),P＜0.01]显著升高.动脉硬化模型组血清LTB4(r=0.954,P＜0.01)、LTD4(r =0.946,P＜0.01)水平与校正斑块面积成正相关.结论 5-脂氧合酶通路在动脉粥样硬化发病机制中起着重要作用.     

胰岛素抵抗大鼠的肝脏中丝氨酸/酪氨酸磷酸化异常与血清TNF-α相关

目的 探讨胰岛素抵抗大鼠胰岛素受体底物-1丝氨酸,酪氨酸磷酸化与肿瘤坏死因子α(TNF-α)的关系.方法 雄性Wistar大鼠30只(体质量80～120 g),随机分为普通饮食组(NC)及高脂饮食组(FH)2组,每组15只.喂养10周,以高胰岛素-正常血糖钳夹技术评估胰岛素抵抗大鼠模型.应用ELISA法检测大鼠血清TNF-α含量,Western Blot法检测肝脏组织中胰岛素受体底物-1丝氨酸磷酸化(IRS-ISer636)及酪氨酸磷酸化(IRS-ITyr456)表达.结果 FH组葡萄糖输注率(GIR)60-120水平明显低于NC组[(1.56±0.43 vs.5.15±0.66)mg/(kg·min),P<0.01];FH组大鼠TNF-α、IRS-ISer636均高于NC组[(15.43±2.16 vs.5.4±2.16)pg/mL,P<0.01;(109.45±13.75 vs.94.23±15.05),P<0.05],IRS-ITyr456水平低于NC组[(111.08±14.28 vs.125.77±14.51),P<0.05].TNF-α水平与IRS-ISer636呈正相关(r=0.503,P=0.024),与IBS-ITyr456呈负相关(r=-0.521,P=0.019).结论 胰岛素抵抗大鼠TNF-α水平与IRS-ITyr456负相关,与IBS-ISer636正相关,提示TNF-α引起胰岛素抵抗机制可能与IBS-1磷酸化异常有关.     

胰岛素抵抗大鼠血清脂联素与超敏C反应蛋白的关系

目的探讨胰岛素抵抗大鼠血清脂联素(APN)与超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的关系。方法采用高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型,并用正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术评估。应用ELISA方法检测大鼠血清脂联素(APN)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果高脂饲料喂养组(HF组)大鼠的葡萄糖输注率明显低于基础饲料喂养组(NF组)[GIR60～120,(0.76±0.28)vs(4.26±0.70)mg·kg-1·min-1,P<0.01]。与NF组相比,HF组大鼠血清APN水平明显降低[(11.32±0.52)vs(14.03±0.46)ng/ml,P<0.01],血清hs-CRP水平明显升高[(6.02±1.12)vs(2.60±0.54)ng/ml,P<0.01],胰岛素敏感性指数(ISI)明显降低[LnISI,-(2.19±0.22)vs-(1.54±0.38),P<0.01]。胰岛素抵抗大鼠血清hs-CRP与APN水平呈负相关(r=-0.85,P=0.000)。结论胰岛素抵抗大鼠血清APN水平降低,血清hs-CRP水平升高,二者之间存在负相关。     

坎地沙坦改善高脂饮食大鼠胰岛素抵抗的效应

目的 研究血管紧张索Ⅱ受体1拮抗剂(ARB)--坎地沙坦改善高脂饮食诱导大鼠胰岛素抵抗的效应及其可能机制.方法 45只雄性Wistar大鼠随机分为普通饲料组(NC组,15只),高脂饲料组(HF组,15只)和高脂饲料坎地沙坦药物组(HF+C组,15只).HF+C组每天灌胃坎地沙坦西酯8 mg/kg,其他两组分别给予等量生理盐水.治疗4周后测定血清生化、胰岛素,进行口服葡萄糖耐量和高胰岛素-正常葡萄糖钳夹实验,评估坎地沙坦对胰岛素敏感性的影响.并用免疫组化法检测肝脏和脂肪组织过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)的表达.结果 HF组大鼠体重、肝脏、附睾及肾周脂肪重量均明显高于NC和HF+C组(均P<0.01),空腹血糖差异无统计学意义(P>0.05),但HF+c组葡萄糖负荷后2 h血糖明显低于HF组[(6.3±0.5)mmol/L vs(7.3±1.2)mmol/L,P<0.01].钳夹结果显示HF+C组葡萄糖输入率明显高于HF组[(22±5)mmoL/L vs(14±4)mmol/L,P<0.01].HF+C组肝脏和脂肪PPAγ蛋白表达水平明显高于HF组.结论 坎地沙坦可明显改善高脂饮食大鼠的胰岛素抵抗,肝脏和脂肪组织PPARγ的高表达.     

α-硫辛酸对高脂饮食诱导肥胖大鼠肾脏功能和形态学的影响

目的观察α-硫辛酸(ALA)对高脂饮食诱导肥胖大鼠血清胱抑素C(Cys C)水平及肾脏病理的影响。方法 Wistar大鼠50只,随机分为普通饲料组(正常对照组,n=10)、高脂饮食组(n=40)。成功诱导的肥胖大鼠再随机分为HFD组(n=16)和HFD+ALA组(n=16),HFD+ALA组给予为期2周的ALA[30 mg/(kg.d)]腹腔注射。测定大鼠血清空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FIns)、Cys C、血脂等指标;HE、PAS染色观察各组大鼠肾脏的病理变化。结果高脂饮食成功建立肥胖大鼠模型32只;与正常对照组相比,HFD组FIns、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)等明显升高(P<0.05),Cys C浓度[(0.16±0.04)mg/L]亦高于正常对照组[(0.06±0.03)mg/L]。ALA干预使肥胖大鼠体重降低,不同程度地降低游离脂肪酸、FIns、胰岛素抵抗指数、TC、TG;血清Cys C水平下降[(0.04±0.03)mg/L]。结论高脂饮食诱导的肥胖大鼠Cys C水平升高,ALA明显改善肥胖大鼠的胰岛素抵抗状态,降低肥胖引起的肾损伤。     

Effects of alpha lipoic acid on kidney function and morphology in high-fat diet-induced obese rats.

目的 观察α-硫辛酸(ALA)对高脂饮食诱导肥胖大鼠血清胱抑素C(Cys C)水平及肾脏病理的影响.方法 Wistar大鼠50只,随机分为普通饲料组(正常对照组,n=10)、高脂饮食组(n=40).成功诱导的肥胖大鼠再随机分为HFD组(n=16)和HFD+ALA组(n=16),HFD+ALA组给予为期2周的ALA[30 mg/(kg·d)]腹腔注射.测定大鼠血清空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FIns)、Cys C、血脂等指标;HE、PAS染色观察各组大鼠肾脏的病理变化.结果 高脂饮食成功建立肥胖大鼠模型32只;与正常对照组相比,HFD组FIns、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)等明显升高(P＜0.05),Cys C浓度[(0.16±0.04)mg/L]亦高于正常对照组[(0.06±0.03)mg/L].ALA干预使肥胖大鼠体重降低,不同程度地降低游离脂肪酸、FIns、胰岛素抵抗指数、TC、TG;血清Cys C水平下降[(0.04±0.03)mg/L].结论 高脂饮食诱导的肥胖大鼠Cys C水平升高,ALA明显改善肥胖大鼠的胰岛素抵抗状态,降低肥胖引起的肾损伤.