五子衍宗丸对化疗性肠黏膜炎小鼠的保护作用及其机制研究

目的观察五子衍宗丸(WYP)对5-氟尿嘧啶(5-FU)引起的肠道炎的保护作用并探讨其作用机制。方法将小鼠随机分为正常组、对照组、雷莫司琼(RAM)组、五子衍宗丸高剂量(HWYP)组、五子衍宗丸中剂量(MWYP)组、五子衍宗丸低剂量(LWYP)组,对照组、WYP组和RAM组使用5-FU造模。观测小鼠腹泻和体质量情况;将小鼠处死后,取小鼠空肠组织,通过测量小肠绒毛高度和隐窝深度进行形态学评价,检测小肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,测定组织细胞凋亡率。结果给药第5天,WYP组、RAM组5-FU引起的体质量减轻、腹泻;缓解5-FU对小肠绒毛、隐窝的损伤;与RAM组相比,HWYP组、MWYP组小鼠空肠隐窝深度更小(P 0.05)。与对照组相比,WYP组、RAM组TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著更低(P 0.05或P 0.01)。给药后1 d(24 h)或第3天,与对照组比,MWYP组凋亡率均显著降低(P 0.01)。结论五子衍宗丸能显著改善5-FU引起的肠道黏膜炎症状,对空肠隐窝的保护作用优于雷莫司琼,其作用机制可能与其抑制TNF-α、IL-1β、IL-6水平和抗细胞凋亡的作用有关。     

五味子多糖对化疗性肠道黏膜炎小鼠的保护作用

目的:观察五味子多糖对5-氟尿嘧啶(5-FU)引起的肠道黏膜炎的治疗作用及探讨其作用机制。方法:使用5-FU造模,将小鼠随机分为正常组,模型组,多糖高、中、低剂量组(20,10,5 mg·kg-1)。观测小鼠腹泻和体重情况;将小鼠处死后,通过测量小肠绒毛高度、隐窝深度、以及计算绒毛高度/隐窝深度比值进行形态学评价;通过酶联免疫(ELISA)法测定小肠组织白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:给药第4天,与模型组相比,高、中剂量多糖组体重比率明显提高(P0.01);高、中剂量多糖组大便得分显著低于模型组(P0.05,P0.01)。五味子多糖显著抑制5-FU引起的小肠肠绒毛高度缩短、隐窝深度值更大、绒毛高度/隐窝深度比减少(P0.01);明显降低TNF-α,IL-1β,IL6水平(P0.01)。结论:五味子多糖能改善5-FU引起的肠道黏膜炎症状,其作用机制可能与通过抑制TNF-α,IL-1β,IL6等炎症因子的水平有关。     

党参多糖改善5-氟尿嘧啶诱导小肠黏膜炎的实验研究

目的:观察党参多糖对5-氟尿嘧啶(5-FU)引起的肠道炎症的治疗作用及探讨其作用机制。方法:将小鼠随机分为正常组、对照组、高、中、低剂量党参多糖组。对照组和多糖组用5-FU造模,多糖组给予口服党参多糖干预。观测小鼠每天的大便和体重情况;将小鼠处死后,取小鼠空肠,切片后测量其绒毛高度、隐窝深度、计算其绒毛高度/隐窝深度比值,测定小肠组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量水平。结果:3组多糖组第4天相比对照组体重百分比下降受抑制,且有显著差异(P0.05或P0.01)。高、中剂量组第4天相比对照组大便得分具有显著差异(P0.05)。与对照组相比,多糖组显著抑制5-FU引起的小肠肠绒毛缩短、隐窝深度加深、绒毛高度/隐窝深度比值减少(P0.01)。多糖组TNF-(IL-1β、IL-6水平显著低于对照组(P0.01)。结论:党参多糖对5-FU引起的肠道黏膜炎有显著的治疗作用,其作用机制可能是通过抑制TNF-(IL-1β、IL-6等炎症因子的水平产生抗炎作用有关。     

艾灸通过调控NLRP3炎性小体缓解5-氟尿嘧啶诱导的大鼠化疗性肠黏膜炎的实验研究

目的:探讨艾灸通过调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)缓解5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的化疗性肠黏膜炎的作用机制。方法:将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和艾灸组,每组10只,造模前7 d对艾灸组行艾灸处理,模型组与艾灸组采用单次腹腔注射5-FU造模,造模完成后,艾灸组继续行艾灸处理,正常组与模型组常规饲养,观察各组大鼠一般情况,检测血清中IL-1β、TNF-α、NLRP3含量,观察结肠组织病理改变,检测结肠组织NLRP3 mRNA表达水平,以及NLRP3组成相关蛋白及IL-1β的表达。结果:腹腔注射5-FU后,模型组体质量和摄食量下降明显,肠黏膜形态不规则,损伤严重,肠绒毛变短融合,上皮细胞排列紊乱。与模型组比较,艾灸组体质量增长、血便、摄食量均有不同程度改善,疾病活动指数评分显著低于模型组。艾灸组血清中IL-1β、TNF-α、NLRP3含量均显著低于模型组(P0.05或P0.01);艾灸组结肠组织中NLRP3炎性小体组成部分NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白及IL-1β表达显著低于模型组(P0.05)。结论:艾灸可通过抑制NLRP3炎性小体改善5-FU诱导的大鼠化疗性肠黏膜炎症状。     

基于Raf/MEK/ERK 信号通路探讨黄芪建中汤治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡的作用机制

目的探讨黄芪建中汤通过Raf/MEK/ERK 信号通路治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡（DU）的作用机 制。方法将60 只SD 大鼠随机分为正常对照组、模型组、埃索美拉唑组（4.17 mg·kg-1）以及黄芪建中汤高、 低剂量组（18.54、9.27 g·kg-1）。采用“苦寒泻下+劳倦过度”法联合阿司匹林、无水乙醇构建脾胃虚寒型DU 大鼠模型。灌胃给药,每天1 次,连续4 d。观察大鼠十二指肠黏膜损伤情况并计算溃疡指数和治疗指数;采 用HE 染色法观察十二指肠黏膜组织病理形态学改变;采用酶联免疫吸附试验检测十二指肠组织中前列腺素 E2（PGE2）、白细胞介素10（IL-10）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平;免疫荧光法检测十二指肠黏膜磷酸化丝氨 酸/苏氨酸蛋白激酶（p-Raf）、磷酸化有丝分裂原活化蛋白激酶激酶1/2（p-MEK1/2）、磷酸化细胞外信号调节激 酶1（p-ERK1）蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠的十二指肠溃疡指数显著升高（P < 0.01）;小 肠绒毛脱落,隐窝脓肿,小肠绒毛长度和隐窝深度均显著降低（P < 0.01）;肠黏膜PGE2、IL-10 含量均明显降 低（P < 0.01）,TNF-α 含量显著增加（P < 0.01）;肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2 和p-ERK1 蛋白表达量均明显增 加（P < 0.01）。与模型组比较,黄芪建中汤各剂量组的大鼠十二指肠溃疡指数均明显降低（P < 0.01）;肠黏膜 损伤得到明显改善,黏膜形态趋于完整,小肠绒毛长度和隐窝深度均明显增加（P < 0.01）;肠黏膜PGE2 和 IL-10 含量均明显提高（P < 0.01）,TNF-α 含量显著降低（P < 0.01）;肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2 和p-ERK1 蛋 白表达均显著下调（P < 0.01）。结论黄芪建中汤对脾胃虚寒型DU 大鼠具有治疗作用,其机制可能与调控 PGE2、TNF-α、IL-10 等炎症介质水平,抑制Raf/MEK/ERK 信号通路活化有关。     

白藜芦醇对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜细胞因子表达的影响

目的探讨白藜芦醇(Resveratro)l对溃疡性结肠炎(UC)治疗的可能机制。方法采用葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate Sodium,DSS)制作UC小鼠模型,小鼠随机分4成组:正常对照(NC)组、模型(MD)组、低剂量(RLD)、高剂量(RHD)白藜芦醇治疗组。造模7d同时给予干预治疗,停用造模药物并后续治疗7d。记录分析疾病活动指数(DAI),14d后处死小鼠,取结肠行HE染色;利用实时荧光定量RT-PCR法检测IL-10、TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA的表达,ELISA法测小鼠肠黏膜IL-10、TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白水平。结果低、高剂量白藜芦醇治疗组小鼠第5～14天DAI明显低于模型组(P0.05);模型组IL-10表达明显低于正常组(P0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白表达则高于正常组(P0.05);低、高剂量白藜芦醇治疗组结肠IL-10mR-NA表达和蛋白水平明显高于模型组(P0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白水平则低于模型组(P0.05);高剂量白藜芦醇治疗组IL-10mRNA表达和蛋白水平明显高于低剂量组(P0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白水平则低于低剂量组(P0.05)。结论白藜芦醇可以提高抗炎细胞因子IL-10的水平并降低致炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平,通过抗炎和降低肠道过度的免疫反应,对UC发挥治疗作用。     

参苓白术散对荷瘤小鼠血清IL-2、IFN-γ、TNF-α的影响

目的观察参苓白术散对荷瘤小鼠血清细胞因子的影响。方法选用昆明种小鼠60只,腋窝皮下接种肝癌H22细胞株复制肿瘤模型,接种24h后随机分为5组:空白组、模型组,5-氟脲嘧啶(5-FU)组(剂量为0.5mg·d-1,d1～5),参苓白术散(SLBZS)组(剂量为0.6g·d-1),参苓白术散组+5-FU(SLBZS+5-FU)组(剂量分别为0.6g·d-1、0.5mg·d-1),5-FU腹腔注射隔日1次,中药每日1次;给药14d后检测各组小鼠瘤体重量、抑瘤率、脾脏与胸腺指数、白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果 SLBZS组可减轻荷瘤小鼠瘤体质量,抑瘤率为20.66%,5-FU组和SLBZS+5-FU组抑瘤率分别为47.73%和48.12%;5-FU组与模型组比较脾脏与胸腺指数降低(P0.01),SLBZS组和SLBZS+5-FU组则无显著性差异(P0.05);SLBZS组和SLBZS+5-FU组可升高血清IL-2、IFN-γ、TNF-α含量,与模型组比较均有显著性差异(P0.01)。结论参苓白术散直接抑制肿瘤生长作用较弱,但能提高IL-2、IFN-γ、TNF-α细胞因子水平,其抗肿瘤作用与调节机体免疫功能有关,与化疗药物可能具有协同作用。     

藿朴夏苓汤对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠炎症性肠病的作用及机制

目的探讨藿朴夏苓汤(HPXL)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠炎症性肠病(IBD)的药效作用及机制。方法体外研究:采用荧光素酶报告基因测定HPXL对LS174T细胞中核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响;采用LPS刺激细胞,荧光定量PCR和ELISA法测定细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-ɑ表达与释放,研究HPXL对NF-κB炎症通路的调控作用。体内研究:采用饮用4%DSS的方法建立IBD小鼠模型。将C57BL/6小鼠随机分成6组(n=10):正常组,模型组,HPXL高、中、低剂量组和柳氮磺胺吡啶(SASP)组。除正常组外,其他组小鼠饮用水中加入4%DSS造模,各给药组于造模前2 d开始灌胃给药,共9 d,每天1次。于给药第9天处死小鼠,取结肠做HE染色并进行组织病理学研究;ELISA方法检测小鼠结肠黏膜髓过氧化物酶(MPO)活性以及IL-1β、IL-6、TNF-ɑ炎症因子的含量。采用Western Blot法检测结肠组织中NF-кB、磷酸化NF-кB(p-NF-кB)、核转录因子抑制蛋白(IкBα)和磷酸化IкBα(p-IкBα)的蛋白表达水平。结果 HPXL显著抑制TNF-ɑ诱导的NF-кB活性;抑制LPS诱导的炎症因子IL-1β、IL-6、i NOS和COX-2的m RNA表达水平(P0.01),并降低细胞中TNF-α和IL-1β含量的释放(P0.05)。与模型组比较,HPXL能显著对抗DSS诱导的模型小鼠体质量降低和便血。HPXL通过降低结肠组织中NF-кB和IкBα的磷酸化蛋白表达水平,降低结肠组织中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量以及MPO的活性,改善DSS诱导的IBD症状。结论 HPXL通过抑制NF-κB调节的炎症通路,改善DSS诱导的IBD症状。     

热毒宁注射液对甲型流感病毒感染小鼠肺组织炎症和相关炎症因子水平的影响

目的观察热毒宁注射液对甲型流感病毒感染小鼠肺组织炎症,以及血清和肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达水平的影响。方法采用滴鼻法建立甲型流感病毒感染小鼠模型。实验设正常对照组、模型组、热毒宁注射液组、利巴韦林注射液组。滴鼻法对小鼠进行流感病毒接种,造模24 h后开始给药5 d,分别于给药后第3、第5日进行取材,计算肺指数,HE染色观察小鼠肺组织病理,ELISA法检测小鼠血清和肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6的水平。结果流感病毒感染小鼠后,小鼠肺组织出现炎症改变,肺泡间隔明显增宽,肺指数升高,造模后第5日炎症最为严重。热毒宁注射液组和利巴韦林注射液组肺部炎症有不同程度减轻,热毒宁注射液组作用更明显。流感病毒感染小鼠后,血清和肺泡灌洗液TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显增高,在第3日达到高峰;热毒宁注射液和利巴韦林注射液组各时点血清和肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平均较模型组降低(P 0.05);热毒宁注射液组各时点血清和肺组织TNF-α水平较利巴韦林注射液组降低更明显(P 0.05);治疗第3日,热毒宁注射液组肺组织IL-1β、IL-6水平较利巴韦林注射液组降低更明显(P 0.05)。结论热毒宁注射液可减轻流感病毒感染后的肺部炎症,降低炎症因子的释放。     

疏风解毒胶囊肠吸收液对LPS诱导巨噬细胞释放细胞因子的影响

目的:研究疏风解毒胶囊肠吸收液对LPS诱导巨噬细胞释放细胞因子的影响。方法:采用外翻肠囊法制备不同浓度的疏风解毒胶囊肠吸收液,1μg·m L-1脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7制备炎症模型,液相蛋白芯片技术检测细胞因子在正常组、模型组、给药组表达的具体水平。结果:含疏风解毒胶囊肠吸收液能降低IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-10、IL-12(p70)、IL-13、IL-17、G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、KC、TNF-α13种细胞因子的表达水平,且与雷公藤内酯醇组效果相当。结论:疏风解毒胶囊抗炎作用的机制与抑制上述炎症因子的释放有关。     

养阴益气活血方药对干燥综合征NOD小鼠血清及颌下腺TNF-α,IL-1β表达的影响

目的:观察养阴益气活血方药对于燥综合征(Sjogren's syndrome,SS),non-obese diabetic (NOD)小鼠血清及颌下腺组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)表达的影响.方法:32只NOD小鼠随机分为模型组、中药组、羟氯喹组、中西药组,每组8只Balb/C小鼠作为正常对照(正常组).中药组每天按100 g·kg-1灌胃养阴益气活血煎剂0.4 mL,羟氯喹组每天按照60mg·kg-1剂量灌胃羟氯喹0.4 mL;中西药组每天灌胃中药养阴益气活血煎剂(50g·kg-1)+羟氯喹(60 mg·kg-1)0.4 mL.实验进行8周后股动脉取血,处死小鼠,解剖摘取颌下腺组织,酶联免疫法检测血清TNF-α,IL-1β水平,免疫组织化学法检测颌下腺组织TNF-α,IL-1β蛋白的表达.结果:模型组NOD小鼠血清和颌下腺组织TNF-α,IL-1β水平均明显高于其他各组(P＜0.05).正常组血清TNF-α水平均低于其他各组,但与中药组无统计学意义;中药组、中西药组血清IL-1β水平低于羟氯喹组(P＜0.05),与正常组无明显差异.中药组、中西药组TNF-α蛋白表达与正常组无明显差异,而中西药组明显低于羟氯喹组(P＜0.05).中西药组IL-1β表达与正常组无明显差异.结论:养阴益气活血煎剂能下调干燥综合征NOD小鼠血清和颌下腺TNF-α,IL-1β水平,养阴益气活血煎剂可能通过调节Th1/Th2细胞因子水平,来改善颌下腺病理损害,达到治疗SS的作用.     

补中益气丸对IEC-6细胞损伤模型NLRP3炎性体及相关细胞因子的影响

目的:探讨补中益气丸含药血清对炎症刺激引起的大鼠小肠隐窝上皮细胞(ICE-6)损伤模型中NOD样受体-3(NLRP3)炎性体复合物及相关细胞因子的影响。方法:根据中药复方血清药理学实验方法,以IEC-6细胞为研究对象,设立胎牛血清组、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、空白组、模型组,补中益气丸组、柳氮磺吡啶组。先用10%2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)大鼠模型血清或者TNF-α(质量浓度100μg·L~(-1))刺激IEC-6细胞24 h,然后加入10%药物血清继续培养24 h后,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)方法检测IEC-6细胞活率;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定NLRP3炎性体的相关蛋白表达量,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)的含量。结果:与空白组比较,TNF-α组及模型组均可引起IEC-6细胞增殖率显著下降(P0.01),细胞内NLRP3炎性体的相关蛋白表达显著增高(P0.01),细胞因子IL-1β,IL-18含量显著增高(P0.01);与模型组比较,各给药组细胞增殖率显著增加(P0.01),NLRP3炎性体复合物蛋白表达明显降低(P0.05,P0.01),IL-1β,IL-18分泌显著降低(P0.01)。结论:补中益气丸含药血清可通过调节肠上皮细胞NLRP3炎性体复合物蛋白及细胞因子分泌,减轻炎症刺激引起的肠上皮细胞损伤。     

刺五加多糖镇痛抗炎作用及其免疫调节机制的研究

目的探讨刺五加多糖的镇痛抗炎作用及其免疫调节机制。方法①将60只SPF级昆明种小鼠随机分为正常组、对照组、阳性对照组、刺五加多糖高剂量组(ASPS200)、刺五加多糖中剂量组(ASPS100)、刺五加多糖低剂量组(ASPS50)。除正常组(10只)外,其余50只小鼠采用热板法或醋酸扭体法建立镇痛模型,各组进行相应干预,测定各组小鼠镇痛率、扭体反应抑制率、脾脏指数、胸腺指数及血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平。②将60只SPF级昆明种小鼠随机分为正常组、对照组、阳性对照组、刺五加多糖高剂量组(ASPS200)、刺五加多糖中剂量组(ASPS100)、刺五加多糖低剂量组(ASPS50)。除正常组(10只)外,其余50只小鼠采用鸡蛋清致小鼠足趾肿胀或醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加建立炎症模型,各组进行相应干预,测定足趾肿胀抑制率、腹腔毛细血管通透性提高抑制率、脾脏指数、胸腺指数及血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平。结果①与对照组比较,阳性对照组和刺五加多糖高剂量组小鼠痛阈值延长(P0.05),扭体抑制率提高(P0.05),小鼠血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平不同程度下降(P0.05);刺五加多糖各剂量组小鼠脾脏指数和胸腺指数不同程度高于对照组(P0.05);刺五加多糖各剂量组小鼠脾脏指数、胸腺指数、血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平不同程度高于阳性对照组(P0.05)。②与对照组比较,阳性对照组和刺五加多糖高剂量组小鼠足趾肿胀抑制率和腹腔毛细血管通透性提高的抑制率升高(P0.05),小鼠血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平不同程度下降(P0.05);刺五加多糖各剂量组小鼠脾脏指数和胸腺指数不同程度高于对照组(P0.05)。刺五加多糖各剂量组小鼠脾脏指数、胸腺指数、血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平不同程度高于阳性对照组(P0.05)。结论刺五加多糖可改善小鼠镇痛抗炎模型状况,其作用机制可能是改善免疫器官指数,调节相关免疫细胞因子水平。     

桂枝加葛根汤对神经炎症小鼠海马空间记忆、细胞因子和小胶质细胞的影响

目的:探讨桂枝加葛根汤对脂多糖(LPS)诱导神经炎症小鼠海马空间记忆、炎性细胞因子和小胶质细胞激活的影响及可能的作用机制.方法:将63只雄性ICR小鼠随机分为5组:正常对照组(Control,n=13)、神经炎症模型组(Model,n=13)、桂枝加葛根汤低剂量组(GGD-low,n=10)、桂枝加葛根汤高剂量组(GGD-high,n=14)、二甲基四环素阳性对照组(Positive oontrol,n=13,0.05 g·kg-1,每日1次,连续3d).给予小鼠ip LPS(0.33 mg·kg-1)建立AD的神经炎症模型,桂枝加葛根汤低、高剂量(6,12 g·kg-1)治疗4周后分别采用Morris水迷宫、ELISA和免疫荧光法检测观察桂枝加葛根汤对神经炎症小鼠空间记忆、海马细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量以及小胶质细胞的激活现象的影响.结果:Morris水迷宫结果显示,LPS诱导后小鼠的逃避潜伏期明显比正常对照组延长(P＜0.05),桂枝加葛根汤低、高剂量治疗后小鼠逃避潜伏期均明显比模型组缩短(P＜ 0.05,P＜0.01);LPS导致小鼠海马TNF-α,IL-1β含量显著增高(P＜0.01),小胶质细胞则表现为数量增多且呈放射状等激活现象,桂枝加葛根汤治疗后TNF-α,IL-1β含量则不同程度地明显降低(P＜0.05),小胶质细胞激活状态改善.结论:桂枝加葛根汤对LPS诱导的神经炎症小鼠海马空间记忆障碍具有改善作用,其机制可能与调节海马小胶质细胞激活和炎性细胞因子TNF-α和IL-1β含量的作用有关.     

芍药苷减轻LPS致小鼠急性脑损伤的抗炎机制

目的:探讨芍药苷(Pae)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性炎性脑损伤的保护作用。方法:将雄性Balb/c小鼠随机分为正常对照组、模型组及芍药苷低、高剂量组,腹腔注射给药,1次/d,连续7 d。7 d后除正常对照组外,其余各组均腹腔注射LPS造模,6 h后取材。ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β含量;比色法检测脑组织中髓过氧化物酶(MPO)、一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合酶(i NOS)水平;RT-PCR法检测脑组织中TNF-α、IL-1β及i NOS的mRNA表达;Western blot法检测脑组织中IκB-α、NF-κB、P-IκB-α蛋白表达水平。结果:芍药苷可降低内毒素致急性脑损伤小鼠血清TNF-α和IL-1β含量,降低脑组织中MPO、i NOS活性及NO含量;降低脑组织中TNF-α、IL-1β和i NOS mRNA表达;可使脑组织中IκB磷酸化蛋白表达减少。结论:芍药苷能减轻LPS诱导的小鼠急性炎症脑损伤,其机制可能与抑制NF-κB的核转位,从而抑制炎症因子的表达有关。     

治伤胶囊对软组织损伤小鼠炎症细胞因子的影响

目的：探讨治伤胶囊对软组织损伤模型小鼠炎症细胞因子的影响。方法：通过夹挤小鼠右后肢踝关节处30秒,制备小鼠软组织损伤动物模型。称量足趾重量,并采用夹心酶联免疫吸附法测定小鼠受损伤右后肢踝关节以下组织匀浆上清液中白介素-1β（IL-1β）、白介素-3（IL-3）、白介素-4（IL-4）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）和Rantes的含量。结果：与正常对照组相比,模型组小鼠的足趾重量明显增加（P〈0·01）,组织中IL-1β、IL-3、IL-4、TNF-α、VEGF和Rantes水平明显上升（P〈0·01）,组织中IL-10水平升高不显著（P〉0·05）。与模型组相比,治伤胶囊高剂量具有降低软组织损伤小鼠IL-1β、IL-3、IL-4、IL-10、TNF-α、VEGF和Rantes水平的作用;治伤胶囊低剂量具有降低软组织损伤小鼠IL-3、IL-4和TNF-α作用。结论：治伤胶囊具有防治夹挤法引起的软组织损伤作用,其机制与降低炎症细胞因子及其相关细胞因子有关。     

补肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病稳定期模型小鼠肺组织炎症反应的影响

目的:观察补肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期模型小鼠肺组织炎症反应的影响,从该角度初步阐释补肺颗粒治疗COPD稳定期的作用机制。方法:80只C57BL/6J小鼠随机分为两组,空白对照组20只和COPD造模组60只,后者采用香烟烟雾暴露制作COPD模型,造模后两组各随机抽取10只取材,而后将COPD造模组剩余50只小鼠随机分为5组,即空白治疗组、地塞米松组、补肺颗粒低剂量组、补肺颗粒中剂量组和补肺颗粒高剂量组,每组10只。空白对照组和空白治疗组给予蒸馏水灌胃,地塞米松组给予地塞米松水溶液灌服,补肺颗粒低、中、高剂量组分别给予含不同生药浓度的补肺颗粒水溶液灌胃,剂量均为10 mL/kg,1次/d,疗程4周。观察各组小鼠肺组织病理学变化(HE染色),肺组织炎症评分和肺泡平均内衬间隔,应用酶联免疫吸附法测定小鼠肺泡灌洗液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)表达水平。结果:造模后,与空白对照组比较,COPD造模组小鼠肺组织病理学切片光镜下观察可见明显炎症和肺气肿改变,肺组织炎症评分和肺泡平均内衬间隔明显增高(P 0. 05),肺泡灌洗液TNF-α和IL-1β表达水平显著增高(P 0. 05),而IL-4和IL-10表达水平明显降低(P 0. 05)。治疗后,与空白治疗组比较,地塞米松组、补肺颗粒中、高剂量组小鼠肺组织炎症和肺气肿病变程度减轻,肺组织炎症评分和肺泡平均内衬间隔降低(P 0. 05),肺泡灌洗液TNF-α和IL-1β表达水平显著下降(P 0. 05),IL-4和IL-10表达水平明显升高(P 0. 05)。补肺颗粒高剂量组效果与地塞米松组相似(P 0. 05),优于补肺颗粒中剂量组(P 0. 05)。结论:补肺颗粒通过下调肺泡灌洗液中促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β水平,上调抗炎性细胞因子IL-4和IL-10表达,进而抑制肺组织炎症反应,可能是其治疗COPD稳定期的作用机制之一。     

益智健脑颗粒对阿尔茨海默病患者外周血清中IL-1β与TNF-α表达的影响

目的:探讨益智健脑颗粒对阿尔茨海默病(AD)患者外周血清中IL-1β与TNF-α表达的影响。方法:严格按照配对的原则选择AD患者及健康老人,应用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISE)检测IL-1β与TNF-α表达的水平。结果:血清IL-1β含量AD组与正常对照组比较,差异有显著性(P0.05);血清TNF-α含量AD组高于正常对照组,但差异无显著性(P0.05);中药组治疗前后IL-1β比较,P0.05,TNF-α治疗前后比较,P0.05;西药组治疗前后IL-1β比较,P0.05,TNF-α治疗前后比较,P0.05;中药组与西药组比较差异无显著性意义(P0.05)。结论:(1)AD患者血清IL-1β、TNF-α水平高于正常老年人,这可能与AD脑内炎症反应有关;(2)益智健脑颗粒可通过抑制细胞炎性因子而对AD患者发挥其治疗作用。     

甘草附子汤对佐剂性关节炎小鼠的治疗作用

目的:研究甘草附子汤对佐剂性关节炎(AA)小鼠的作用研究。方法:雄性Balb/c小鼠随机分为6组,为正常组、模型组、雷公藤多苷组、甘草附子汤高、中、低剂量组(3.9,7.8,15.6 g·kg-1),每组12只。除正常组外,采用AA小鼠模型,造模第12天,灌胃给予相应药物,1次/d,连续18 d,观察药物对AA小鼠足肿胀的影响;苏木素-伊红(HE)染色观察踝关节组织病理学改变;通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测AA小鼠血清中的细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测滑膜组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)蛋白表达。结果:与模型组比较,甘草附子汤可抑制AA小鼠足肿胀,改变炎细胞浸润,减轻滑膜增生和骨侵蚀,减少AA小鼠血清中炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-6水平(P0.05),降低AA小鼠滑膜中MMP-1和MMP-3蛋白表达(P0.05)。结论:甘草附子汤AA小鼠具有明显治疗作用,其机制可能与降低炎症因子的产生和降低滑膜组织的MMP-1及MMP-3表达有关。     

枳实总黄酮对5-氟尿嘧啶诱导的肠黏膜炎小鼠肠道菌群失调的影响

目的 研究枳实总黄酮对5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）诱导的肠黏膜炎和肠道菌群的影响及作用机制。方法 雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组及枳实总黄酮低、中、高剂量（50、100、200 mg/kg）组和洛哌丁胺（0.3 mg/kg组）,ip 5-FU（50 mg/kg）5 d诱导肠黏膜炎模型,第6天开始,各给药组ig相应药物,1次/d,连续7 d,观察小鼠体质量、饮食量、饮水量、腹泻评分、胸腺指数、脾脏指数、结肠形态、隐窝深度;采用苏木素-伊红（HE）染色考察小鼠结肠组织病理变化;采用ELISA法检测小鼠结肠组织中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、IL-1β和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平;检测小鼠结肠组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性和丙二醛（maleic dialdehyde,MDA）水平;采用细菌16S rRNA基因V3～4区高通量测序技术分析小鼠肠道菌群变化。结果 与模型组相比,枳实总黄酮组小鼠体质量和饮食量增加,饮水量减少,腹泻评分降低,胸腺指数和脾脏指数显著增加（P<0.05、0.01）,结肠组织损伤减轻,结肠长度和隐窝深度显著增加（P<0.05、0.01）,结肠组织中促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α水平显著降低（P<0.05、0.01）,SOD和GSH-Px活性显著升高（P<0.05、0.01）,MDA水平显著降低（P<0.01）。16S rRNA基因测序结果显示,模型组小鼠肠道菌群多样性和丰度降低,枳实总黄酮组小鼠肠道菌群多样性和丰度增加。门水平主要表现为厚壁菌门相对丰度升高;属水平上拟杆菌属Bacteroidetes、unidentified_Clostridiales、拟普雷沃菌属Alloprevotella、unidentified_Ruminococcaceae和乳酸杆菌属Lactobacillus 5个菌属相对丰度升高。结论 枳实总黄酮能够有效改善5-FU所致的小鼠肠黏膜炎,其机制可能与抗氧化、抗炎、调节肠道菌群有关。