中药单体调控PI3K/Akt信号通路干预糖尿病视网膜病变的研究进展

糖尿病视网膜病变（DR）是威胁成人视力健康的重要原因,西医抗血管内皮生长因子、激光光凝术等治法疗效确切,但面临眼内感染、视野损伤等诸多不良反应,中医药疗法安全有效,可与西医互为补充。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路参与调节糖代谢、细胞增殖、细胞转录及凋亡等过程,与DR的发生与发展关系密切。大量研究表明,中药单体通过调控PI3K/Akt通路,可从抑制氧化应激、减轻炎症反应等多方面参与维持血-视网膜屏障完整性、抑制视网膜新生血管生成及神经变性,从而延缓DR进程。因此,文章就PI3K/Akt通路及其与DR的关系,以及基于PI3K/Akt通路干预DR的中药单体进行综述,以期为DR的中西医结合防治提供一定思路。     

活血通络方调控PI3K/Akt信号通路改善大鼠糖尿病视网膜病变的作用机制研究

目的：探讨活血通络方调控磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B (PI3K/Akt)信号通路改善大鼠糖尿病视网膜病变的作用机制。方法：选取清洁级健康雄性SD大鼠72只,采用随机数字表法分为对照组、模型组及药物组,每组24只。建模成功后,药物组大鼠给予活血通络方10 mL/（kg·d）灌胃,对照组与模型组大鼠给予等剂量0.9%氯化钠注射液灌胃。3组均连续灌胃3个月。比较3组血糖、血脂、氧化应激指标、炎症因子水平及伊文思蓝渗透量;比较3组大鼠视网膜组织紧密连接蛋白-1 (ZO-1)、闭合蛋白（Occludin）、血管内皮钙黏蛋白（VE-Cadherin）、磷酸化磷酸肌醇3激酶（p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)表达水平;观察大鼠视网膜组织病理学改变。结果：与对照组比较,模型组空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、活性氧簇（ROS）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)水平均升高（P<0.05）,高密度...     

补肾活血方含药血清通过PI3K/Akt信号通路促进成骨细胞增殖分化研究

目的：观察补肾活血方含药血清对人成骨细胞增殖分化以及PI3K/Akt信号通路的影响,探讨补肾活血方防治骨质疏松症的作用机制。方法：通过新西兰大白兔制备补肾活血方含药血清,将人成骨细胞株分为空白组（Control组）、补肾活血方组（Z组）、补肾活血方含药血清＋10%μmol/L的抑制剂LY294002组（Z＋LY组）,采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测各组成骨细胞的增殖情况,生化方法检测成骨细胞的碱性磷酸酶（ALP）活性,Western blot法检测AKT的活化情况。结果：补肾活血方含药血清能促进成骨细胞的增殖,并使之分化增强,且较Control组差异有统计学意义（P〈0.01）;阻断PI3K/AKT信号通路后,Z＋LY组对成骨细胞增殖分化的抑制较Z组差异有统计学意义（P〈0.05）,且对成骨细胞的分化功能有显著抑制作用（P〈0.01）;Western blot结果显示,补肾活血方含药血清能促进磷酸化AKT（p-AKT）的表达,用LY294002阻断PI3K/Akt信号通路后,p-AKT表达含量明显减少（P〈0.01）。结论：补肾活血方可能通过PI3K/Akt信号通路促进成骨细胞的增殖,并促进成骨细胞分化功能,这可能是补肾活血方防治骨质疏松症的机制之一。     

中医药通过PI3K/Akt信号通路防治糖尿病周围神经病变的研究进展

糖尿病周围神经病变（DPN）起病隐匿,极易漏诊误诊,病变后期可演变成糖尿病足溃疡、坏疽、截肢等严重后果。DPN以轴突变性坏死、神经纤维节段性脱髓鞘、雪旺细胞凋亡等神经细胞损伤为主要病理特点。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(Akt)信号通路是一条沟通细胞内外信息传递的经典通路,能够调控细胞增殖、分化、凋亡、自噬、迁移等生物学活动,广泛影响着与DPN相关的多种细胞。近年来,大量研究发现,持续的高糖环境下PI3K/Akt信号通路异常,通过参与DPN的糖脂代谢、氧化应激、炎症反应、自噬、凋亡、血管生成等发病机制,从而加速DPN发生发展。因此,调控PI3K/Akt信号通路,对于DPN的治疗尤为关键。目前临床上尚缺乏有效来延缓或逆转DPN的措施。中医药在防治DPN的进程中以多靶点、多效应、多成分等独特优势取得了较好的临床效果,大量中医药治疗DPN的动物及临床研究均显示PI3K/Akt信号通路是中医药治疗DPN的重要靶点,调控PI3K/Akt信号通路可以促进髓鞘修复再生、延缓神经细胞死亡进程,起到防治DPN的作用。但目前国内外还未见该领域系统的回顾和总结,基于此,该文对PI3K/Akt信...     

基于PI3K/Akt通路的中药治疗糖尿病研究进展

糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病,发病率极高,并发症较多,目前已成为世界范围内日益严重的公共健康问题,严重影响人民的生活质量。磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路是胰岛素信号转导的主要途径,也是调控血糖的主要信号通道,其信号分子的异常可引起信号转导途径异常,从而影响相应组织器官细胞的增殖、凋亡、转移和侵袭,导致疾病的发生。研究PI3K/Akt信号通道对于考察中药是否具有明确而稳定的降血糖作用具有积极的意义。目前,治疗糖尿病的中药、西药相对较多,但多数药物尤其是西药对于并发症的控制相对较差,为了解中药在治疗糖尿病方面的进展,以期更好地研究中药在糖尿病方面的综合治疗作用及机制,进一步发挥中医药在糖尿病治疗方面的多靶点、多途径、多通道、标本兼治的优势与特色,本文就近年来基于PI3K/Akt信号通路的中药治疗糖尿病体内、外研究进行了较为系统的分析,包括基于该信号通道的对糖尿病产生直接原因的胰岛素分泌的影响、对胰岛素3个主要靶器官(肝、骨骼肌、脂肪)及对糖尿病4个主要并发症相应部位(脑、肾、心、睾丸)的影响,也为研究中药单味药及复方的降血糖机制研究提供一定的思路及指导。     

基于PI3K/Akt信号通路探讨白芷颗粒对糖尿病视网膜病变的影响

目的 研究白芷颗粒对早期糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）的保护作用。方法 采用ip链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）法制备糖尿病模型,设置对照组、模型组、白芷（1.25 g/kg）组及羟苯磺酸钙（135 mg/kg）组。连续给药12周后采用苏木素-伊红（HE）和高碘酸-席夫（PAS）染色观察大鼠视网膜病理学改变;采用TUNEL染色法检测视网膜细胞凋亡情况;采用Western blotting检测视网膜组织紧密连接蛋白及磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）通路相关蛋白表达。人视网膜上皮细胞（adult retinal pigment epithelial cell line-19,ARPE-19）分为对照组、高渗组、高糖组、白芷（150 μg/mL）组和羟苯磺酸钙（20 μmol/L）组,对照组在含5.5 mmol/L葡萄糖的培养基中培养;高渗组在含5.5 mmol/L葡萄糖和25 mmol/L甘露醇的培养基中培养;高糖组和各给药组在含30 mmol/L葡萄糖的培养基中培养,并给予相应药物。采用TUNEL染色、免疫荧光、Western blotting法观察细胞凋亡、紧密连接蛋白及PI3K/Akt通路相关蛋白表达。使用PI3K抑制剂LY294002后,观察其下游凋亡相关蛋白的变化。结果 HE染色结果显示,模型组大鼠视网膜组织排列紊乱,视网膜变薄,白芷干预后较模型组有所缓解。TUNEL染色显示视网膜组织中细胞凋亡率增加。Western blotting结果显示,与模型组比较,白芷组咬合蛋白（Occludin）、闭锁小带蛋白1（Zonula occluden-1,ZO-1）、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）,Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）/ B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cleaved cystein-asparate protease-3,cleaved Caspase-3）蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。体外实验结果显示,白芷干预后细胞凋亡率降低（P＜0.05）,Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）,Occludin、ZO-1蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）;免疫荧光结果显示白芷干预后Occludin、ZO-1表达升高;此外,白芷能够促进高糖环境下PI3K/Akt的磷酸化,在使用PI3K抑制剂干预后抑制了Akt的磷酸化,Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）。结论 白芷颗粒能够通过抑制细胞凋亡保护血-视网膜屏障损伤,从而延缓早期DR的发展,其作用机制可能与调节PI3K/Akt信号通路有关。     

青藤碱抑制Hela细胞增殖与诱导凋亡的PI3K/Akt信号转导通路研究

目的:探讨青藤碱诱导Hela细胞凋亡的可能机制。方法:MTT法检测细胞生长情况、流式细胞仪检测细胞凋亡情况、Western blot检测COX-2、p-AKT、caspase-3的表达情况。结果:与空白对照组比较,青藤碱可显著抑制Hela细胞生长、促进Hela细胞凋亡及影响COX-2、p-AKT、caspase-3的表达。结论:青藤碱可诱导Hela细胞凋亡,其机制与其对PI3K/Akt-Caspase-3信号转导通路的影响有关。     

PI3K/Akt信号通路与胰岛素抵抗的研究进展

胰岛素信号转导在胰岛素生理作用的发挥中起着至关重要的作用,其减弱或受阻,使得胰岛素生理作用减弱,导致IR形成。本文概述了PI3K/Akt通路成员及功能,与IR关系及临床药物应用等研究进展。     

七味白术散对糖尿病小鼠肝脏组织PI3K/Akt信号通路的调节作用

目的:研究七味白术散对高脂饮食与链脲佐菌素(STZ)导致的糖尿病小鼠肝脏组织中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法:采用网络药理与实验药理学的方法研究七味白术散的降糖作用。通过公共数据库筛选活性成分和疾病靶点,构建成分-靶点和疾病-靶点的PPI网络,进行基因本体(GO),京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析信号通路。以高糖高脂饲料联合腹腔注射80 mg·kg-1·d-1STZ建立糖尿病小鼠模型,分为正常组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、七味白术散祖(七味白术散煎剂18.7 g·kg-1·d-1),灌胃28 d后分析其降糖作用及对血清总胆固醇(T-CHO),空腹胰岛素(FINS)含量和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏组织的胰岛素受体(IR),胰岛素受体底物-1(IRS-1),PI3K和Akt蛋白和mRNA的表达。结果:网络药理学研究共筛选到36种活性成分,KEGG分析推测七味白术散可能是通过调节PI3K/Akt信号通路发挥降糖作用的。实验药理学实验表明,七味白术散组与模型小鼠相比,血糖含量、血清TNF-α和T-CHO显著降低(P0.01),FINS显著升高(P0.01)。肝脏组织的IR,IRS-1,PI3K和Akt蛋白和mRNA的表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论:七味白术散可下调高脂饮食和STZ导致FINS升高,其调节作用与PI3K/Akt信号通路与胰岛素的代谢效应有关。     

补肾活血方对复发性流产小鼠蜕膜组织VEGF/PI3K/Akt通路表达的影响

目的 观察补肾活血方对复发性流产小鼠蜕膜组织VEGFA、VEGFR2及对PI3k/Akt信号转导通路的影响,探讨其治疗复发性流产的可能作用机制.方法 建立BALB/cxCBA/J正常妊娠小鼠模型及DBA/2xCBA/J复发性流产小鼠模型,实验随机分为正常组、模型组、黄体酮组(3.33 mg/kg)、补肾活血方低剂量组(...     

中医药干预PI3K/Akt信号通路治疗前列腺癌研究进展

前列腺癌（PCa）是男性泌尿生殖系统中最常见的恶性肿瘤之一。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路是一种致癌途径,在多种癌症中负责迁移、增殖和耐药。近年来,随着对PCa发病机制的不断研究,PI3K/Akt信号通路在PCa发展中的关键作用已备受关注。中医药以其多成分、多靶点、多途径的综合调节作用,在治疗PCa方面展现出巨大潜力。该文通过综述中医药干预PI3K/Akt信号通路在治疗PCa中的研究进展,探讨了PI3K/Akt信号通路在PCa中的表达,包括抑制PCa细胞凋亡、促进PC细胞周期运行和侵袭转移、促进肿瘤组织血管形成及介导雄激素受体（AR）等。同时,总结了干预调控该通路的单味中药主要包括白花蛇舌草、南方红豆杉、牛黄、白术等;中药活性成分主要有黄酮类、生物碱类、萜类、多酚类、木脂素类及其他类化合物;中药复方主要包括温肾散结方、健脾利湿化瘀方、益肾通癃汤、芪蓝方、西黄丸及加味参芪地黄汤等。以期为深入理解PCa的发病机制和寻找潜在的治疗靶点提供重要科学依据,并为PCa的临床研究和药物研制提供新的思路。     

抑制PI3K/Akt信号转导通路逆转喉癌耐药的作用及其机制

目的探讨磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/Akt信号转导通路抑制剂LY294002对脂多糖(LPS)刺激喉癌细胞引发耐药反应的影响。方法实验分为空白组、LPS组和LPS+LY294002抑制剂组,收集对数生长期人喉癌Hep-2细胞,接种于6孔培养板中,待密度为5×105个/孔时,LPS+LY294002抑制剂组加入10 mmol/L LY294002抑制剂刺激1 h,随后LPS组和LPS+LY294002抑制剂组均加入1 mg/m L LPS刺激5 h。通过实时定量PCR检测各组中肿瘤细胞多药耐药性基因mRNA的表达情况,倒置荧光显微镜观察顺铂处理后各组细胞的形态,MTT法检测各组细胞生长抑制率,流式细胞仪技术检测各组细胞凋亡率。结果 LPS组BCRP及MRP3/5 mRNA表达量均明显高于空白组和LY294002抑制剂组(P均<0.05)。顺铂刺激24 h后,空白组中细胞数量明显减少,有较多漂浮的小圆形细胞和坏死的细胞碎片;LPS组细胞形态无明显改变,漂浮的小圆细胞和碎片较少;LPS+LY294002抑制剂组中漂浮的小圆细胞和碎片多于LPS组。LPS组细胞生长抑制率和细胞凋亡率均明显低于空白组(P均<0.05),LPS+LY294002组细胞生长抑制率和细胞凋亡率均明显高于LPS组(P均<0.05)。结论 PI3K/Akt信号转导通路抑制剂LY294002可逆转Hep-2细胞对顺铂的耐药性,可能与降低肿瘤细胞多药耐药基因mRNA的表达有关。     

芎归六君子汤对心肌梗死大鼠PI3K/Akt信号转导通路的影响

目的:探讨芎归六君子汤对心肌梗死大鼠左室微血管新生和心肌组织Akt蛋白、mRNA表达的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型对照组、消心痛组、复方丹参滴丸组和芎归六君子汤组。采用左冠状动脉前降支结扎法复制心肌梗死模型,假手术组只穿线不结扎。造模结束后,分别给予生理盐水及对应药物灌胃,每日1次,连续28天,检测心功能;取梗死边缘心肌,检测微血管新生数量、心肌组织Akt蛋白和mRNA的表达。结果:各给药组心功能明显改善,微血管数量显著增多,Akt蛋白和mRNA表达明显升高,与模型对照组相比差异显著,且芎归六君子汤组优于丹参滴丸和消心痛组(P0.05)。结论:芎归六君子汤能够提高心肌梗死大鼠Akt蛋白和mRNA表达,促进梗死心肌微血管再生,改善心功能,提示从脾胃论治心肌梗死具有重要应用价值。     

补肾活血法治疗糖尿病视网膜病变的临床研究

糖尿病视网膜病变是糖尿病最为常见和严重的微血管并发症,病情复杂而多变,预后视力差,随着病情加重,视力急剧下降,已成为四大主要致盲病因之一。1998—2003年,我们采用补肾活血法为主治疗糖尿病视网膜病变56例（110只眼）,现报告如下。     

PI3K/Akt信号通路在糖尿病肾病中的作用及中药干预的研究进展

糖尿病肾病是一类由糖尿病引起的慢性肾脏疾病,临床上主要以持续白蛋白尿和(或)肾小球滤过率进行性下降为特征,是糖尿病患者致残和致死的重要原因之一.磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidyl inositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)信号通路是人体内参与...     

补肾活血方通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路改善DOR大鼠卵巢储备功能

目的:观察补肾活血方调节磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关因子改善卵巢储备功能下降(DOR)大鼠卵巢储备功能的作用机制.方法:运用Ataya法腹腔注射环磷酰胺复制60只DOR模型大鼠,将其随机分为模型组、戊酸雌二醇组(0.0009 g·kg-1),补肾活血方高、中、...     

苦参碱对视网膜母细胞瘤细胞增殖与凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响

目的:研究苦参碱对视网膜母细胞瘤(Rb)细胞增殖与凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响。方法:将Rb细胞株Y79作传代培养,使用不同浓度(15、30、60、120mg/L)的苦参碱对细胞进行培养作为观察组,同时选择空白组作为对照组,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测生长抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,计算凋亡率,RT-PCR法检测PI3K、AktmRNA相对表达量,免疫组化法检测PI3K、Akt蛋白表达情况。结果:培养24小时、48小时、72小时后,观察组各组Y79细胞生长抑制率均高于对照组,并且随着时间与苦参碱浓度的增加,生长抑制率也在升高(P0.05);经过培养,观察组在G0/G1期的细胞比例高于对照组,处于S期和G2/M期细胞低于对照组(P0.05);相同时间内,随着苦参碱浓度的升高,细胞凋亡率明显升高,且高于对照组(P0.05)。相同浓度时,随着时间的增加,细胞凋亡率也升高,均高于同时期对照组(P0.05);观察组中各浓度条件下,PI3KmRNA、AktmRNA相对表达量均明显低于对照组(P0.05),并且随着浓度的升高,PI3KmRNA、AktmRNA相对表达量显著降低(P0.05);观察组中各浓度条件下,PI3K、Akt蛋白表达均低于对照组(P0.05),并且随着浓度的升高,PI3K、Akt蛋白表达也下降(P0.05)。结论:苦参碱能够明显抑制Rb细胞的增殖,促进细胞凋亡,可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路,使细胞停留在G0/G1期,诱导细胞凋亡。     

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨中医药治疗糖尿病肾病的研究进展

糖尿病肾病(DN)作为糖尿病(DM)最为危重的普遍并发症之一,现已逐渐成为终末期肾病(ESRD)的主要原因。DN发生发展的发病机制是复杂多样的,可能与遗传、自噬、氧化应激、炎症反应等诸多因素有关。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB,又称Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路作为细胞内一条至关重要的通路,与DN的发病机制密切相关。基于当下中医药治疗DN的研究现状,笔者结合近几年来国内外的相关研究综述了PI3K/Akt/mTOR信号通路在DN中的作用机制及通过使用中医药抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路起到激活自噬、减少炎症反应及减弱氧化应激等作用,为中医药治疗DN的进一步研究提供新思路和新靶点。     

中药单体靶向PI3K/Akt/mTOR信号通路防治糖尿病肾病的研究进展

综述中药单体靶向磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路防治糖尿病肾病（DN）的研究进展。研究表明,PI3K/Akt/mTOR信号通路可以抑制炎症反应、氧化应激、细胞凋亡和自噬,在DN发生发展中起着重要作用;中药单体（黄芩苷、石斛碱、姜黄素、三七皂苷R1、桔梗皂苷D、蛇床子素）可通过靶向调控该信号通路有效防治DN。