健脾补土法组方对脑缺血/再灌注大鼠脑组织INTβ_3、ILK及FAK mRNA及蛋白表达的影响

目的 研究健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠测定整合素β3(INTβ_3)、ILK、FAK mRNA及蛋白的表达影响。方法 将36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、健脾补土方小剂量组、健脾补土方中剂量组、健脾补土方大剂量组6小组,每组6只。采用线栓法制备MCAO模型,7天后处死,应用RT-PCR法测定缺血再灌注后缺血区脑皮质内INTβ_3、ILK、FAK mRNA的表达的含量变化及运用健脾补土法组方对其含量的影响,Western blot法检测其蛋白含量变化。结果 模型组与假手术组相比,模型组INTβ_3、ILK、FAK蛋白以及mRNA含量显著减少(P0.01);与模型组比较,依达拉奉组、健脾补土小剂量、健脾补土中剂量组、健脾补土大剂量组整合素β3、ILK、FAK蛋白以及mRNA含量增加,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论 健脾补土法组方脑保护作用可能与促进INTβ_3、ILK、FAK表达有关。     

肺岩宁对整合素连接激酶沉默后人肺癌A549细胞生物学活性的影响

目的在建立整合素连接激酶(ILK)基因RNAi慢病毒表达载体的基础上,研究ILK基因沉默后对人肺腺癌细胞A549细胞生物学活性的影响及中药肺岩宁方对细胞活性的影响。方法构建载体转染人肺腺癌细胞A549后,分为阴性对照病毒感染细胞组(NC组)、RNAi靶点病毒感染细胞组(KD组)、10%肺岩宁血清干预的NC组(NC+10%中药血清组)、10%肺岩宁血清干预的KD组(KD+10%中药血清组)、20%肺岩宁血清干预的NC组(NC+20%中药血清组)、20%肺岩宁血清干预的KD组(KD+20%中药血清组)及10%(10 mg/L)DDP干预的KD组(KD+10%DDP组)。MTT检测不同浓度的药物敏感性,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化,Transwell实验和克隆形成检测细胞的迁移和成瘤能力。结果①KD组与NC组相比,KD组细胞凋亡率上升(P0.05),G2/M期细胞总数的百分比明显降低(P0.01),转移率明显降低(P0.05),克隆数目明显减少(P0.05)。②KD+10%中药含药血清组与NC+10%中药血清组相比,KD+10%中药血清组细胞凋亡率明显上升(P0.05),G2/M期细胞总数的百分比明显降低(P0.01),转移率无显著性差异(P0.05),克隆数目明显减少(P0.05)。③KD+20%中药血清组与NC+20%中药血清相比,KD+20%中药血清细胞凋亡率下降(P0.01),G2/M期细胞总数的百分比降低(P0.01),转移率无显著性差异(P0.05),克隆数目明显减少(P0.05)。④KD+10%DDP组与NC+20%中药血清组相比,KD+10%DDP组细胞凋亡率上升(P0.01),G2/M期细胞总数的百分比明显降低(P0.01),转移率明显降低(P0.01),克隆数目明显减少(P0.01)。结论 ILK基因沉默后可以明显促进人肺腺癌细胞A549的凋亡,降低细胞迁移和成瘤能力,对细胞周期无调控作用;10%中药肺岩宁方含药血清有促进细胞凋亡及抑制细胞克隆形成的能力;20%中药含药血清可以抑制细胞克隆形成能力;10%DDP有促进细胞凋亡、抑制细胞迁移和克隆形成的能力。     

化瘀泄浊方对肾间质纤维化实验大鼠整合素连接激酶的影响

目的:观察化瘀泄浊方对肾间质纤维化实验大鼠整合素连接激酶(ILK)的影响。方法:选用健康、雌性SD大鼠50只,用单侧输尿管结扎方法复制大鼠肾间质纤维化模型,将其随机分为假手术组、化瘀泄浊方组[化瘀泄浊方5.7g/(kg.d)经口灌服]、阿魏酸哌嗪分散片组[给予阿魏酸哌嗪分散片6.7mg/(kg.d)]、缬沙坦组[给予缬沙坦5.3mg/(kg.d)经口灌服]及模型组[给予同等量生理盐水经口灌服],每组10只大鼠。全部大鼠于实验第21天全部杀检,免疫组化及RT--PCR检测肾组织ILK蛋白及mRNA的表达。结果:免疫组化及RT-PCR结果显示,与假手术组比较,模型组和各治疗组ILK的表达显著增强,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,化瘀泄浊方组、阿魏酸哌嗪分散片组、缬沙坦组ILK的表达减弱,差异有统计学意义(P<0.05),其中化瘀泄浊方组ILK的表达优于阿魏酸哌嗪分散片组,差异有统计学意义(P<0.05),其他各组间均无明显差异(P>0.05)。结论:化瘀泄浊方能通过抑制肾组织ILK蛋白及其mRNA的表达,使病变肾组织细胞外基质合成减少,发挥对肾间质纤维化的治疗作用。     

针刺血清调控内质网应激反应对无镁诱导培养大鼠海马神经元惊厥性损伤的保护作用

目的:观察针刺血清对无镁诱导惊厥样放电海马神经元凋亡数及内质网应激伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)和半胱氨酸蛋白酶蛋白-12(Caspase-12)表达的影响,探讨针刺血清对海马神经元惊厥性损伤的保护机制。方法:SD大鼠腹腔注射戊四唑诱发急性惊厥后分为针刺组及对照组。针刺组取"百会""大椎"针刺,每日1次,共7d。末次针刺后,针刺组大鼠取血清作为针刺血清,对照组取血清作为非针刺血清。以无镁诱导惊厥样放电的原代培养胎鼠海马神经元为模型,根据对培养10d海马神经元的不同处理分为正常细胞外液组(简称正常组)、无镁细胞外液组(简称无镁组)、针刺血清组和非针刺血清组。正常组将无血清培养液换成细胞外液培养3h后换液培养,其他各组用无镁细胞外液培养3h后换液培养。4组分别于换液培养2、12、48h3个时间点采用TUNEL法和Western blot法分别检测海马神经元凋亡情况及GRP 78、CHOP和Caspase-12蛋白表达情况。结果:正常组仅见少量凋亡海马神经元;无镁组3个时间点凋亡海马神经元数均较正常组明显增加(P0.01);针刺血清组3个时间点凋亡海马神经元数与无镁组比较明显减少(P0.05,P0.01),与非针刺血清组12、48h比较凋亡海马神经元数明显减少(P0.01)。与正常组比较,无镁组3个时间点海马神经元CHOP和Caspase-12蛋白表达均明显增强(P0.05,P0.01),2h时间点海马神经元GRP 78蛋白表达明显增强(P0.05);与无镁组比较,针刺血清组3个时间点神经元GRP 78蛋白表达均明显增强(P0.01,P0.05),12、48h时间点海马神经元CHOP蛋白表达明显减少(P0.05,P0.01),3个时间点神经元Caspase-12蛋白表达均显著减少(P0.05,P0.01);与非针刺血清组相比,针刺血清组2、12h时间点海马神经元GRP 78蛋白表达均明显增强(P0.01,P0.05),12、48h时间点海马神经元CHOP蛋白表达明显减少(P0.05),3个时间点海马神经元Caspase-12蛋白表达均明显减少(P0.01,P0.05)。结论:针刺血清能明显减少海马神经元凋亡数,上调GRP 78蛋白表达,下调CHOP和Caspase-12蛋白表达,发挥维持内质网稳定性的重要作用。     

左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症环境下模型大鼠海马神经元凋亡相关蛋白的影响

目的探讨左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境下海马神经元凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-8的调控作用。方法采用受孕18 d SD大鼠胎鼠进行海马神经元原代培养,葡萄糖联合皮质酮干预构建DD模拟环境。将培养的海马神经元随机分为正常组、空白血清组、模型组、阳性药(二甲双胍+氟西汀)药物血清组和待测药(左归降糖解郁方)药物血清组,正常组和模型组给予等量培养液,其余组给予相应体积分数10%药物血清或空白血清,造模干预18 h后,Hoechst荧光染色检测海马神经元凋亡;高内涵分析技术检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-8的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠海马神经元树突断裂或减少,神经网络连接降低,细胞存在明显的浓染、破碎、光点分布不均现象,Bcl-2蛋白表达显著下降(P0.05),Bax和Caspase-8蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,阳性药药物血清组和待测药药物血清组大鼠海马神经元网络连接显著恢复,Hoechst荧光染色可见细胞核明显均匀化,局部亮点明显减少,Bcl-2蛋白表达水平显著上调(P0.05,P0.01),Bax和Caspase-8蛋白表达水平显著下调(P0.05,P0.01)。结论左归降糖解郁方对模型大鼠海马神经元凋亡的保护作用可能与调控海马神经元Bcl-2,Bax和Caspase-8的表达有关。     

益气活血降浊复方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β1-smad-ILK信号传导通路的影响

目的:研究益气活血降浊复方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织转化生长因子β(TGF-β1),smad7,p-smad2/3,整合素连接激酶(ILK)蛋白表达,观察其对TGF-β1-smad-ILK信号传导通路的影响。方法:132只雄性SD大鼠以单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化动物模型,造模成功后大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,西药组,益气活血降浊复方高、中、低剂量组。根据大鼠体重确定具体给药剂量,益气活血降浊组高剂量组34.6 g.kg-1,中剂量组17.3 g.kg-1,低剂量组8.6 g.kg-1(分别为人服用量的20,10,5倍),ig给药,1次/d,模型组和假手术组、正常组灌入相应生理盐水。福辛普利钠10mg.kg-1(相当于成人用量的20倍)。考马斯亮蓝法测24 h尿蛋白定量;采用免疫组化方法检测肾组织中TGF-β1,smad7,p-smad2/3,ILK蛋白表达。结果:与正常组、假手术组相比,模型组大鼠第1,2,3周肾间质中TGF-β1,p-smad2/3以及ILK蛋白表达明显增多(P<0.01),正常组肾间质中均有较弱的表达,益气活血降浊复方高、中、低剂量组较正常组、假手术组在各个时间点TGF-β1,p-smad2/3以及ILK蛋白表达有所增加,但与模型组比较显著降低(P<0.01),西药福辛普利钠组较模型组表达也显著减少(P<0.01)。益气活血降浊高剂量组在各个时间点降低TGF-β1,p-smad2/3,ILK蛋白效果最好且与西药组相当,中、低剂量组虽然能降低TGF-β1,p-smad2/3,ILK蛋白,但和高剂量组和西药组存在差异。而模型组大鼠在第1,2,3周肾间质smad7蛋白表达较正常组、假手术组明显减少(P<0.01),正常组肾间质中均有较强的表达,益气活血降浊复方高、中、低剂量组较正常组、假手术组在各个时间点smad7蛋白表达有所减少,但与模型组比较显著增加(P<0.01)。结论:益气活血降浊复方通过抑制TGF-β1,p-smad2/3,ILK表达,上调smad7的表达,影响TGF-β1-smad-ILK信号传导通路,抑制肾间质纤维化的发展。     

抗纤软肝颗粒药物血清对肝星状细胞整合素信号及凋亡的影响

目的:探讨抗纤软肝颗粒药物血清对肝星状细胞增殖、凋亡的影响及整合素信号通路的下游信号分子FAK在其中的作用。方法:将传代培养的大鼠肝星状细胞系(HSC-T6)与中药复方抗纤软肝颗粒药物血清(5%、10%、20%)共同培养48h后,应用MTT法测定细胞增殖;应用流式细胞仪测定细胞凋亡;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测FAK mRNA的表达。结果:抗纤软肝颗粒药物血清,均能显著抑制HSC-T6增殖,20%药物血清组作用最强(P<0.05);流式细胞仪测定结果显示抗纤软肝颗粒药物血清均可诱导HSC凋亡(P<0.05);抗纤软肝颗粒药物血清能够使HSC的FAK mRNA的表达下调。结论:抗纤软肝颗粒能够抑制HSC增殖及诱导凋亡HSC。其作用可能与其抑制整合素信号通路下游信号分子FAK mRNA的表达有关。     

抗纤软肝颗粒含药血清对肝星状细胞黏着斑激酶mRNA、蛋白表达的影响

目的:探讨抗纤软肝颗粒含药血清对肝星状细胞黏着斑激酶(FAK)mRNA、蛋白表达的影响。方法:运用细胞培养技术,以hsc-t6细胞系为研究对象,分为(1)空白包被+10%生理盐水血清组;(2)纤维连接蛋白(FN)+10%生理盐水血清组;(3)FN+5%抗纤软肝颗粒含药血清(kxr)组;(4)FN+10%kxr组;(5)FN+20%kxr组。按以上分组进行药物干预,干预后继续培养48h。应用免疫细胞组织化学方法检测FAK蛋白的表达,采用RT-PCR法测定FAKmRNA的表达。结果:kxr组肝星状细胞的FAKmRNA、蛋白表达均显著下调,分别减少了72.78%和27.88%,78.82%和44.85%,85.51%和57.58%,与对照组及FN组相比,5%kxr组(P<0.05),10%kxr组、20%kxr组(P<0.01)。结论:kxr能在转录及翻译水平抑制FAKmRNA、蛋白的表达,从而阻抑了整合素激活的FAK途径的信号转导。     

益气逐瘀方对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡及miR-24/Bim通路的影响

目的研究益气逐瘀方(参元丹)对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡及miR-24/Bim通路的影响。方法分离并培养乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞缺氧模型,Lipofectamine2000转染miR-24 mimic/inhibitor至心肌细胞,实验分为正常组、缺氧组、参元丹组、参元丹+miR-24 mimic组、参元丹+miR-24 inhibitor组,治疗组予参元丹含药血清干预。比色法检测心肌细胞培养基上清液LDH、CPK活性,MTT法检测心肌细胞存活率,Annexin V/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡,qRT-PCR检测心肌细胞miR-24、Bim mRNA表达。结果与低氧组相比,参元丹组、参元丹+miR-24 mimic组、参元丹+miR-24 inhibitor组均能显著降低细胞培养基上清液LDH、CPK活性(P<0.05),提高心肌细胞存活率(P<0.05),降低心肌细胞凋亡(P<0.05),升高心肌细胞miR-24 mRNA表达(P<0.05),降低Bim mRNA表达(P<0.05);治疗组之间比较,参元丹+miR-24 mimic组作用更显著(P<0.05)。结论益气逐瘀方参元丹能够减轻缺氧诱导乳鼠心肌细胞损伤及细胞凋亡,其作用机制可能与其上调miR-24表达,同时抑制其靶基因Bim mRNA表达有关。     

灯盏花素抑制缺氧/复氧大鼠心肌细胞JAK2的表达

目的 观察灯盏花素对缺氧/复氧大鼠心肌细胞凋亡相关基因Janus激酶(JA K2) mRNA及其蛋白表达的影响,试图在细胞水平上为临床应用灯盏花素减轻心肌缺血再灌注损伤提供理论依据.方法 取原代培养的乳鼠心肌细胞,随机分为4组:正常对照组,模型组,灯盏花素2个剂量组(25 mg/L,50 mg/L),其中模型组和灯盏花素2个剂量组进行缺氧2h,再复氧,并于复氧4h后,分别采用RT-PCR和Western blot检测大鼠心肌细胞JAK2基因mRNA及其蛋白的表达.结果 模型组大鼠心肌细胞JAK2基因mRNA和蛋白条带平均光密度值均较正常对照组增加(P＜0.01);与模型组相比,灯盏花素2个剂量组大鼠心肌细胞JAK2基因的mRNA和蛋白条带平均光密度值均降低(P ＜0.05,0.01).结论 灯盏花素可抑制缺氧/复氧大鼠心肌细胞凋亡相关基因JAK2 mRNA,进而抑制了JAK2蛋白表达,从而抑制缺氧/复氧引起的大鼠心肌细胞凋亡的作用.     

针刺对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的影响

目的观察阿尔茨海默病(AD)模型大鼠大脑皮质和海马神经细胞凋亡情况及针刺对细胞凋亡的影响。方法SD大鼠被随机分为空白组、模型组与针刺组;AD模型采用腹腔注射0.96%D半-乳糖与双侧M eynert基底核注射鹅膏蕈氨酸(IBO)损毁复合造模;在造模的同时,针刺组选用百会、大椎、风府针刺治疗;行为学检测采用Y型电迷宫法;细胞凋亡检测采用TUNEL法。结果(1)与空白组比较,模型组大鼠学习与记忆能力均明显降低(均P<0.01),针刺组大鼠学习与记忆能力均较模型组大鼠明显提高(均P<0.01)。(2)模型组大鼠脑组织皮质及海马中可见分布有大量的凋亡细胞,而针刺组皮质和海马中仅见少量凋亡细胞,模型组皮质中凋亡细胞数目(45.34±6.28)明显多于针刺组(20.39±5.48)与空白组(9.46±1.86)(均P<0.01);模型组海马中凋亡细胞数目(53.64±8.20)也明显多于针刺组(11.38±6.36)与空白组(3.62±0.89)(均P<0.01);针刺组皮质与海马凋亡细胞数明显高于空白组(均P<0.01)。结论针刺能一定程度减少复合型AD模型大鼠皮质和海马神经细胞凋亡,从而防止AD模型大鼠学习记忆能力下降。     

电针对震颤麻痹大鼠行为学和细胞凋亡的影响

目的:研究电针对帕金森病模型大鼠黑质神经细胞凋亡和行为学的影响。方法:利用大鼠PD模型,观察行为学和采用末端标记法检测电针治疗前后PD模型大鼠黑质细胞凋亡的影响。结果:电针治疗能明显抑制PD模型大鼠旋转次数和黑质神经细胞凋亡,其作用和美多巴近似。结论:电针治疗PD可通过抑制中脑黑质神经细胞凋亡而减少旋转次数。     

大鼠肢体IRI后脊髓神经元HSP70的表达及丹参注射液干预后的影响

目的 :探讨大鼠肢体缺血再灌注损伤后脊髓神经元热休克蛋白 70的表达改变及丹参注射液的影响。方法 :通过暂阻断一侧髂总动脉和股动脉 ,建立肢体缺血再灌注损伤 (IRI)模型。采用免疫细胞化学ABC法 ,观察大鼠脊髓神经元热休克蛋白 70 (HSP70 )阳性神经元的表达和分布特点 ,以及丹参注射液干预后阳性神经元改变情况。结果 :大鼠肢体缺血 4h ,脊髓相应节段神经元HSP70 表达增强 (P <0 0 1 ) ,再灌注 2h后 ,HSP70 表达进一步增强 (P <0 0 5 )。并且HSP70 阳性神经元较集中分布于脊髓相应节段同侧后角及中央管周围。而丹参注射液可进一步增强HSP70 表达(P <0 0 1 )。结论 :提示脊髓相应节段同侧神经元可能参与肢体IRI的发病过程 ,尤其是脊髓后角及中央管周围神经元可能具有更为重要的作用。丹参注射液可能对肢体IRI后脊髓神经元有保护作用 ,这种保护作用可能与其对HSP70 表达的增强作用有关。     

镇肝熄风汤预处理对MCAO大鼠脑组织病理学变化和神经元凋亡的影响

目的:研究镇肝熄风汤对大脑中动脉梗死(MCAO)大鼠脑组织的病理学变化和神经元凋亡的影响.方法:MCAO术前给予高、低剂量镇肝熄风汤(15,30 g·kg-1)灌胃14 d,采用线栓法制备MCAO.术后6h称重法检测脑水肿程度,TTC染色观察脑梗死范围、HE染色观察缺血组织病理形态和海马神经元密度,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)及Western bolt检测凋亡效应蛋白半胱胺酸蛋白酶蛋白(Caspase 3)和聚ADP核糖聚合酶(PARP)表达情况.结果:与假手术组比较,模型组大鼠出现行为障碍,梗死面积及缺血侧脑组织含水量显著增加,海马CA1区神经元密度明显降低.与模型组比较,镇肝熄风汤高、低剂量均能有效改善大鼠行为学积分,可明显改善MCAO大鼠缺血侧脑组织含水量,减少梗死面积,改善局灶性脑缺血引起的海马CA1区神经元密度降低.镇肝熄风汤预处理后,明显减少MCAO大鼠缺血侧脑组织神经元细胞凋亡率,明显降低缺血侧脑组织活化Caspase-3和PARP蛋白表达量.结论:镇肝熄风汤可能通过影响神经细胞凋亡,发挥保护缺血大鼠脑组织的作用.     

激光穴位照射对新生鼠缺血缺氧性脑损伤的尼氏体与BDNF表达的影响

目的:探讨激光穴位照射对新生鼠缺血缺氧性脑损伤的作用机制.方法:38只7d的Wistar大鼠,随机分为3组:假手术对照组、缺血缺氧组、缺血缺氧后激光穴位照射组,饲养20d后,取出左侧脑组织进行常规石蜡包埋、切片、尼氏体染色和BDNF免疫组织的染色.结果:激光穴位照射可明显改善缺血缺氧后脑神经元内尼氏体的脱失现象,增加缺血缺氧后脑神经元内和BDNF的表达.结论:激光穴位照射对缺血缺氧后脑组织具有神经保护作用,其作用机制推剐与促进神经元对BDNF的表达有关.     

三七总皂苷对大鼠海马神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用

目的观察三七总皂苷对大鼠海马神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用.方法建立缺氧/缺糖再给氧模型,模拟缺血再灌注损伤.流式细胞术检测凋亡细胞百分率,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率,同时,测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)的漏出和一氧化氮(NO)的产生量.结果神经细胞缺氧/缺糖5h后再给氧可诱导神经细胞凋亡和细胞坏死,并显著增加LDH的漏出和NO的产生,并随再给氧时间的延长而增加.三七总皂苷能降低神经细胞凋亡及坏死的百分率,减少LDH的漏出和NO的过量产生,三七总皂苷的作用随剂量增加而增加.结论三七总皂苷具有拮抗海马神经细胞凋亡的作用,这种作用可能与降低或抑制一氧化氮合酶(NOS)活性,减少NO的过量产生有关.     

三七总皂苷对Alzheimer''''s病大鼠模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用

目的:观察三七总皂苷(PNS)对老年性痴呆(AD)大鼠模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用.方法:以d-半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸(IBA)损毁双侧大脑Meynert基底核建立AD大鼠动物模型,利用免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰基转移酶(ChAT)免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变.结果:PNS能明显减轻由d-半乳糖损害和鹅膏蕈氨酸损毁导致的大脑胆碱能神经元数量减少和ChAT水平降低.结论:PNS对AD大鼠模型大脑胆碱能神经的病理损害具有保护作用.     

穴位埋线对慢性应激复合衰老模型大鼠海马自噬的影响

目的:通过观察穴位埋线对慢性应激复合衰老大鼠神经元组织形态及海马自噬影响,探讨慢性应激的促衰老作用及穴位埋线的抗衰机制。方法:将3月龄雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型一组、模型二组、穴位埋线组、假埋线组,每组9只。模型一组予D-半乳糖[120 mg/(kg·d)]腹腔注射;模型二组、穴位埋线组、假埋线组予慢性应激复合D-半乳糖[120 mg/(kg·d)]腹腔注射;穴位埋线组每周埋线一次,假埋线组每周假埋线一次。实验结束后对海马进行HE及尼氏染色,观察海马的组织形态结构;q PCR检测海马ULK1、Beclin1、LC3-II、P62 mRNA的表达。结果:(1)与空白对照组相比,模型一组大鼠海马神经元组织结构疏松,排列紊乱,细胞层次减少,部分神经元萎缩,尼氏体减少,模型二组的大鼠海马神经元组织更加疏松,细胞间隙显著增大,大量神经元萎缩深染,神经元数量进一步减少,尼氏体减少甚至消失。穴位埋线组大鼠海马神经元排列较整齐致密,细胞间隙稍增大,尼氏体清晰;而假埋线组海马神经元结构较模型二组大鼠并无明显差异。(2)与空白对照组相比,模型一组大鼠海马神经元ULK1、Beclin1 mRNA的表达有升高趋势,LC3-II、P62 mRNA表达升高;与模型一组相比,模型二组的大鼠海马神经元LC3-II、P62 mRNA表达进一步升高,ULK1、Beclin1 mRNA表达有升高趋势;与模型二组相比,穴位埋线组大鼠海马神经元ULK1、Beclin1、LC3-II、P62 mRNA表达均降低,假埋线组大鼠海马神经元ULK1、Beclin1、LC3-II、P62 mRNA表达则无明显差异。结论:慢性应激确实会通过影响衰老大鼠海马神经元的自噬功能从而加速海马的老化,穴位埋线可以拮抗应激性衰老机体海马神经元的自噬流损伤,从而保护海马神经元,延缓衰老。     

还元注射液对实验性脑出血大鼠血肿周围区域LD、VL神经元细胞外自发放电的影响

为探讨还元注射液（黄芪、生地黄等组成）治疗急性脑出血的作用机理，采用玻璃微电极细胞外记录法，观察Ｓ．Ｄ磊鼠脑出血造模前、后血肿周围区域丘脑外侧背核（ＬＤ）和捕脑外侧腹核（ＶＬ）神经元细胞外自发放电频率与数目的变化以及还元注射液对其影响。结果；造模后４ｈ，模型组ＬＤ、ＶＬ神经元细胞外和电频率和数目均较造模前明显降低（Ｐ〈０．０１），还元组自发放电频率和数目与模型组比较均明显增加（Ｐ〈０．０１）。提示     

参麦注射液对外伤性脑损伤大鼠血清神经元烯醇化酶 一氧化氮 内皮素水平的影响

目的：观察参麦注射液对大鼠外伤性颅脑损伤（TBI）血清神经元烯醇化酶（NSE）、一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）含量的影响,探讨其在治疗外伤性颅脑损伤中的作用。方法：采用Freeny自由落体撞击方法制作外伤性颅脑损伤模型,致伤后1h单次腹腔注射参麦注射液15mL/kg为治疗组（C组）,腹腔注射等量生理盐水为模型组（B组）,单纯开骨窗未损伤脑组织为假手术组（A组）,脑损伤后6h、10h、24h及3天检测大鼠血清NSE、NO及ET-1的含量。结果：与A组比较,B组和C组NSE含量显著升高（P〈0.05）,3天基本恢复正常,ET-1含量显著升高（P〈0.05）,高水平持续3天,NO含量先下降24h后明显上升（P〈0.05）,高水平持续至3d;与B组比较,C组NSE、ET-1含量升高减轻（P〈0.05）,NO含量早期下降减轻,24h后上升缓慢（P〈0.05）。结论：参麦注射液可通过减少ET-1产生,调节血清NO含量达到减轻外伤性脑损伤作用。