白露汤含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及周期的影响

目的:研究白露汤含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及生长周期的影响。方法:将人肺癌A549细胞培养至对数生长期,分别加入白露汤低、中、高剂量含药血清,空白对照组加入含10%胎牛血清的RPMI1640培养液,采用CCK-8法检测细胞活力;Western-blot法测定人肺腺癌A549凋亡细胞Bax、Bcl-2、C-caspase、HIF-1α及β-actin蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期。结果:与空白对照组比较,白露汤各给药组的A549细胞活力在24、48、72 h均明显降低(P0.05),且呈剂量依赖性。作用24、48、72 h后,白露汤各给药组均出现不同程度的细胞凋亡。流式细胞术检测显示,白露汤作用后,可使人肺腺癌A549细胞其发生早期凋亡(P0.05)。结论:白露汤可抑制人肺癌A549细胞活力、诱导细胞凋亡、延缓细胞周期进程,这可能与下调GLUT1、HK2、PKM2、LDH-A、HIF-1α和β-actin等表达有关。     

回药爱康方含药血清对肺癌A549细胞凋亡的影响

目的:探讨回药爱康方(HAKF)含药血清对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组、爱康方低、中、高剂量组、环磷酰胺(CTX)组、回药爱康方低、中、高剂量分别联合环磷酰胺化疗组,药物低、中、高剂量15.0,30.0,45.0 g·kg-1,连续灌胃15 d,麻醉后心脏取血,制备含药血清。培养细胞,将细胞分为实验组和对照组,实验组分别给予含5%,10%,20%3个体积分数的相应各组含药血清,对照组给予等体积分数的对照组大鼠血清,培养24,48,72 h后采用Annexin-VFITC/PI双染法测定各组含药血清对A549细胞凋亡的影响。结果:与对照组比较,各时段5%,10%,20%浓度含药血清可提高A549的凋亡率(P<0.05),72 h时,各浓度回药爱康方低、中、高剂量含药血清对细胞的凋亡率的提高程度小于CTX(P<0.05);72 h 10%体积分数回药爱康方低剂量联合环磷酰胺血清提高细胞的凋亡率大于单纯CTX(P<0.05);各浓度爱康方中剂量和高剂量血清组,72 h与24 h比较,两组A549细胞的凋亡率均升高(P<0.05);随着血清体积分数的提高,各组细胞的凋亡率和坏死率呈增大趋势。结论:回药爱康方可诱导人肺腺癌A549细胞的凋亡,且有一定的剂量和时间依赖性。     

棘豆生物碱部位含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖及细胞周期与凋亡的影响

目的 研究棘豆生物碱部位药物血清对人肝癌HepG2细胞凋亡的诱导作用.方法 采用血清药理学方法,选择10％不同剂量组药物血清作为实验组,10％空白血清为对照组,与HepG2细胞共同孵育不同时间,MTT检测细胞活力,Hoechst33342荧光染色观察细胞核变化,流式细胞仪检测细胞周期的分布,荧光比色法测定Caspase -3的活性表达.结果 棘豆生物碱部位药物血清能抑制细胞增殖,细胞增殖活性呈时间剂量依赖关系,以高剂量组药物血清作用最强,与阴性对照组比较有统计学意义(P＜0.05).荧光镜观察10％含药血清组细胞出现染色质凝集、核膜破裂等凋亡特征,流式细胞仪检测高剂量药物血清组作用48 h后G1期细胞比例增多,而其他实验组S期细胞比例增多,与阴性对照组比较有统计学意义(P＜0.05).荧光比色法测定显示Caspase -3活性随时间延长而升高,以48 h活性达到最高,与对照组比较有统计学意义(P＜0.05).结论 棘豆生物碱部位药物血清体外能通过抑制HepG2细胞增殖、阻滞细胞周期及上调caspase -3表达诱导人肝癌细胞HepG2凋亡.     

地鳖纤溶活性蛋白含药血清对人肺癌A549细胞凋亡及凋亡相关表达的影响

目的 研究地鳖纤溶活性蛋白(EFP)含药血清对人肺癌A549细胞凋亡的影响及凋亡相关基因的表达.方法 制备不同浓度EFP小鼠含药血清;采用MTT法检测EFP对A549细胞的增殖抑制效果;采用Annexin V-FITC/PI双荧光染色观察细胞凋亡情况;应用流式细胞术检测EFP对A549细胞周期的影响;采用免疫组化法检测凋亡相关基因Bax表达水平的改变.结果 EFP含药血清各组对A549细胞有明显抑制作用;EFP使A549细胞发生细胞凋亡,细胞周期发生改变;随着药物浓度的增加,Bax表达逐渐增强,Bcl-2表达逐渐减弱.结论 EFP有较强的体外抗肿瘤活性;EFP可能通过调控Bcl-2,Bax基因表达而诱导凋亡.     

益肺饮含药血清对肺癌A549细胞增殖凋亡的影响

目的:研究中药复方益肺饮不同浓度含药血清对肺癌A549细胞增殖凋亡的影响。方法:将SD小鼠分为2组,分别灌胃益肺饮和0. 9%氯化钠注射液,获得5%、10%、15%、20%的益肺饮含药血清和10%无药血清。A549细胞进行培养后分为实验组、对照组和空白对照组,实验组加入不同浓度的含药血清,对照组加入10%无药血清,空白对照组加入10%胎牛血清。采用CCK-8法观察各组血清对A549细胞的增殖影响;采用流式细胞仪检测不同浓度含药血清对A549细胞凋亡的影响。结果:与空白对照组相比,各浓度益肺饮含药血清对A549细胞均有明显的增殖抑制作用(P 0. 05),其抑制率随药物浓度递增而增强,5%含药血清组与20%含药血清组相比,差异有统计学意义(P 0. 05)。流式细胞术检测结果表明,不同浓度下含药血清组凋亡率明显优于对照组及空白对照组(P 0. 05);不同浓度含药血清组组内比较,5%、10%、15%各浓度之间两两比较差异有统计学意义(P 0. 05),但15%与20%浓度组比较,差异无统计学意义(P 0. 05)。结论:益肺饮含药血清对肺癌A549细胞具有明显的增殖抑制、诱导凋亡的作用,并具有一定的浓度依赖性。     

二冬膏含药血清对人肺癌A549细胞的抑制效应初探

目的探讨二冬膏含药血清对人肺癌A549细胞的抑制效应。方法采用中药血清药理学方法,选择高、中、低剂量的二冬膏水溶液以灌胃方式给药,获取二冬膏含药血清,以空白血清为对照,干预A549细胞,应用MTT法、划痕实验法及Transwell侵袭实验法检测二冬膏含药血清对A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果二冬膏高、中、低剂量组干预A549细胞24 h后均可不同程度抑制肺腺癌A549细胞增殖,差异有统计学意义(P0.05),并呈时间、剂量依赖性,以二冬膏中剂量组抑制作用最明显;二冬膏高、中、低剂量组A549细胞的迁移距离较空白组缩短,差异有统计学意义(P0.05),中剂量组细胞迁移距离最短;二冬膏高、中、低剂量组均能降低A549细胞的侵袭能力,差异有统计学意义(P0.05),中剂量组侵袭过膜的细胞数最少。结论二冬膏含药血清能抑制肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力,中剂量抑制作用最明显。     

番茄红素对人肺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:探讨番茄红素对人非小细胞肺癌细胞A549凋亡及对细胞周期的影响。方法:体外培养并取处于对数生长期的A549细胞进行分组,分别给予培养液(空白对照组)、不同浓度番茄红素(20、10、5μg/mL)及顺铂(40μg/m L)进行干预,每组10个复孔。药物干预48小时后,噻唑蓝(MTT)比色法测定各组细胞增值抑制率;流式细胞术(FCM)检测各组细胞周期、观察细胞凋亡状况并计算凋亡率;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞凋亡相关基因Bcl-2 mRNA、Bax m RNA表达;蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测细胞周期蛋白(cyclin B1、cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶(CDK1、CDK2)表达。结果:与空白对照组比较,番茄红素各剂量组和顺铂组A549细胞增值抑制率提高,番茄红素(20、10μg/mL)组细胞处于G2-M期的比例提高、凋亡率显著升高,Bcl-2 mRNA表达下调且Bax mRNA表达上调,Bax/Bcl-2值显著提高,cyclin B1蛋白和CDK1蛋白表达上调,cyclin D1蛋白和CDK2蛋白表达下调,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:番茄红素具有促进人非小细胞肺癌A549细胞凋亡,阻滞其有丝分裂,从而抑制其增殖的作用,可能与番茄红素影响凋亡相关调控基因及细胞周期相关调控蛋白表达有关。     

当归补血口服液含药血清对人肺癌细胞株A549增殖的影响

目的：探讨当归补血口服液荷瘤鼠含药血清对人肺癌细胞A549增殖的影响。方法：应用当归补血口服液灌胃荷瘤WiStar大鼠,10日后采集含药血清体外培养A549,MTT测细胞活性,流式细胞法测细胞周期、凋亡。结果：当归补血口服液荷瘤鼠含药血清能够显著抑制A549细胞增殖,且呈剂量、时间依赖性,可阻滞A549细胞的细胞周期,使G2／M期细胞增多,S期细胞减少,同时诱导A549细胞的凋亡。结论：当归补血口服液含药血清体外具有抑制A549细胞生长,其抑制作用可能是通过使细胞周期抑制于G2／M期和诱导细胞凋亡而实现。     

二参加芪口服液含药血清对人肺癌A549细胞的抑制作用及机制研究

目的:研究二参加芪口服液含药血清对人肺癌A549细胞的抑制作用及机制。方法:采用血清药理学方法制得二参加芪口服液三个剂量的含药血清,培养A549细胞,同时加入顺铂和含药血清,用MTT法测定吸光度值并计算各组肿瘤细胞生长抑制率,并用ELISA法测定加入含药血清后A549细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)的含量。结果:各给药物组能显著抑制肿瘤细胞的增殖,与空白对照组比较,差异极显著(P0.01),尤其以加入二参加芪口服液含药血清中、高剂量组联合顺铂对A549细胞的抑制作用更明显,含药血清亦能显著提高A549细胞上清液中TNF-α和IFN-γ的含量,与空白对照组比较,差异具有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:二参加芪口服液含药血清对人肺癌A549细胞具有抑制作用,提高肿瘤细胞上清液中IFN-γ和TNF-α含量可能是其作用机制。     

镰形棘豆诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及初步的机制研究

目的:观察镰形棘豆总黄酮对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响及初步的机制探讨.方法:不同剂量的镰形棘豆总黄酮处理SMMC-7721细胞24 h后,MTT法观察总黄酮对细胞增殖的抑制作用;应用光学和荧光显微镜观察总黄酮对SMMC-7721细胞形态的影响;应用流式细胞仪检测SMMC-7721细胞周期的变化;Annexin V-FITC/PI双染法检测总黄酮对SMMC-7721细胞凋亡的影响.结果:MTT实验结果表明,镰形棘豆总黄酮抑制SMMC-7721细胞的增殖,并呈现出一定的浓度依赖性.Hoechst33258染色结果显示,经镰形棘豆总黄酮处理的细胞出现了多种凋亡特征和超微结构的变化.镰形棘豆总黄酮作用SMMC-7721细胞后可观察到G1期细胞明显增多,凋亡细胞的比例升高,并且呈浓度依赖性.结论:镰形棘豆总黄酮抑制SMMC-7721细胞的增殖,与其诱导细胞周期阻滞和使细胞形态发生变化而引起细胞凋亡的活性有关.值得进一步深入研究和阐述镰形棘豆抗肿瘤的作用机制.     

芪连扶正胶囊含药血清对肺癌A549细胞生物学行为的影响

目的:观察芪连扶正胶囊含药血清对肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:体外培养肺癌A549细胞,按实验分组干预,采用MTT法检测细胞增殖、划痕试验观察细胞迁移,Transwell实验观察细胞侵袭情况。结果:芪连扶正胶囊含药血清对肺癌A549细胞的增殖抑制且呈时间、浓度依赖性,且与化疗联合有协同作用;各药组细胞迁移值均小于对照组,与之比较除芪连扶正胶囊低剂量组外均有显著性差异(P0.05);与顺铂组相比,芪连扶正胶囊各组迁移值均大于顺铂组(P0.01),而联合组迁移值小于顺铂组(P0.01);芪连扶正胶囊低、中、高剂量组、顺铂组及联合组的侵袭抑制率分别为8.87%、19.11%、24.57%、37.88%、47.10%。结论:芪连扶正胶囊含药血清可抑制肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭,具有抗肿瘤转移作用。     

肺癌平药物血清诱导A549人肺癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨肺癌平治疗肺癌的作用机制.方法:采用血清药理学方法孵育A549人肺癌细胞株,通过电镜、流式细胞术检测肺癌平药物血清作用后对细胞凋亡的影响.结果:肺癌平药物血清作用后电镜下可见凋亡小体形成,流式细胞仪检测可见亚二倍体核型峰的特征.结论:肺癌平治疗肺癌的作用机制是通过诱导肺癌细胞凋亡实现的.     

枸杞多糖对人肺癌A549细胞凋亡及Survivin表达的影响

目的 探讨枸杞多糖(LBP)诱导人肺癌A549细胞的凋亡的作用及其作用机制.方法 在体外培养的肺癌A549细胞株中加入不同浓度的LBP,应用流式细胞仪FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,RT - PCR及Western blot法分析加药前后凋亡抑制基因Survivin mRNA和蛋白表达情况.结果 流式细胞仪FITC/PI双染法检测结果显示LBP可诱导人肺癌A549细胞凋亡,并且随着LBP浓度增加,凋亡率逐渐增加;LBP可使Survivin mRNA和蛋白的表达明显降低,并成一定的量效关系.结论 LBP可显著诱导人肺癌A549细胞凋亡,其作用机制可能与LBP抑制A549细胞凋亡抑制基因Survivin表达有关.     

复方丹皮酚纳米乳对人肺癌A549细胞增殖、周期及凋亡作用的研究

目的探讨复方丹皮酚纳米乳对A549细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法以A549细胞作为研究对象,给予不同浓度的药物处理。镜下观察细胞的形态变化,应用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果MTT结果显示,一定质量浓度的复方丹皮酚纳米乳可显著抑制A549细胞的增殖,且呈时间-剂量依赖性。与丹皮酚纳米乳、丹皮酚溶液相比,差异有统计学意义。流式结果显示复方丹皮酚纳米乳可诱导细胞周期停滞在G0/G1期,并诱导A549细胞凋亡,且G0/G1期细胞比例的增加和凋亡率均呈剂量依赖性。结论复方丹皮酚纳米乳可抑制A549细胞的增殖,诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。     

镰形棘豆总黄酮含药血清对TGF-β_1诱导的人肾小管上皮细胞VEGF mRNA表达的影响

目的:通过观察镰形棘豆总黄酮含药血清干预转化生长因子β1(TGF-β_1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化细胞因子——血管内皮生长因子(VEGF)m RNA的表达,进一步探讨其在防治肾间质纤维化方面的作用。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养;实验分为4组:空白对照组、TGF-β_1诱导组(TGF-β_110 ng/m L)、空白血清对照组(TGF-β_110 ng/m L+10%空白血清)、镰形棘豆总黄酮组(TGF-β_110 ng/m L+10%镰形棘豆总黄酮含药血清)。药物干预24小时后,荧光定量PCR检测VEGF m RNA的表达。结果:HK-2细胞经TGF-β_1诱导后,VEGF m RNA的表达显著上升,与空白对照组比较差异有统计学意义(P0.05),经镰形棘豆总黄酮药物血清干预后,VEGF m RNA的表达逐步下降,与单纯TGF-β_1诱导组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:镰形棘豆总黄酮在一定程度上能够抑制TGF-β_1诱导的人肾小管上皮细胞纤维化,其机制可能与调节纤维化细胞因子VEGF的m RNA表达有关。     

镰形棘豆提取物对人肾小管上皮细胞转分化的影响

目的:本实验通过观察镰形棘豆提取物含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的作用,探讨其在肾间质纤维化方面的作用及机制。方法:采用镰形棘豆提取物(300mg/kg)给大鼠灌胃,每天2次,连续3天。3天后大鼠股动脉采血,分离血清,即得镰形棘豆提取物含药血清。体外培养HK-2细胞,培养基为含10%胎牛血清的DMEM/F12(1:1);细胞分为4组:空白对照组、空白血清对照组(TGF-β1 10 ng/ml+10%空白血清)、镰形棘豆提取物组(TGF-β1 10 ng/ml+10%镰形棘豆提取物含药血清)、转化生长因子-β1诱导组(TGF-β1 10 ng/ml)。药物干预细胞后,采用免疫组化技术测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙粘蛋白(E-cadherin)的表达,ELISA技术测Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤连蛋白(FN)的含量,荧光定量PCR检测转化生长因子-β受体I(TβRI)、受体II(TβRII)的mRNA表达,Western blot检测Smad 2、smad 3的蛋白表达。结果:正常的HK-2细胞只表达E-cadherin,不表达α-SMA。但经TGF-β1诱导后细胞转分化,E-cadherin的表达开始减弱,α-SMA表达逐渐增强,药物干预后,α-SMA表达明显减弱,E-cadherin表达增强。与空白对照组相比,TGF-β1诱导组ColⅠ、ColⅢ、FN的含量显著增加,在24h时分别为(197.4±0.7)、(32.7±0.2)、(754.5±4.1),72h时分别为(216.4±0.8)、(38.3±0.1)(995.4±1.5),P﹤0.05;与TGF-β1诱导组相比,镰形棘豆提取物组ColⅠ、ColⅢ、FN的分泌显著下降,72h时作用更为显著,含量分别为(205.5±0.7)、(35.0±0.3)、(892.4±0.9),P﹤0.05。与空白对照组相比,TGF-β1诱导组TβRI(11.08±0.10)、TβRII(11.57±0.12)的mRNA表达和Smad 2(0.971±0.017)、smad 3(0.972±0.011)的蛋白表达显著上升,P﹤0.05;与TGF-β1诱导组相比,镰形棘豆提取物组TβRI(9.788±0.379)、TβRII(8.452±0.250)mRNA表达和Smad 2(0.536±0.013)、Smad3(0.530±0.035)蛋白表达也减少,P﹤0.05。空白血清则无此作用。结论:镰形棘豆提取物能够减少细胞外基质成分分泌,调控Smads信号通路,抑制肾小管上皮细胞转分化,在一定程度上具有防治肾间质纤维化的作用。