指纹图谱、模式识别结合一测多评法在广金钱草质量评价中的应用研究

采用Phenomenex PS C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%甲酸水溶液(30∶70),体积流量0.8 mL·min~(-1),柱温30℃,检测波长335 nm,进样量10μL,建立了不同产地广金钱草Desmodium styracifolium的HPLC指纹图谱,确定了10个共有峰,鉴定了其中5个共有峰:维采宁-1、夏佛塔苷、异荭草苷、异夏佛塔苷、异牡荆苷。通过相似度评价、聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析方法对21批广金钱草药材指纹图谱进行研究,进而建立了一测多评法同时测定广金钱草药材中上述5种黄酮苷成分,为广金钱草的质量控制和品质评价提供参考。     

基于HPLC-Q-TOF-MS和HPLC-DAD的广金钱草主要活性成分分析

目的通过高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法(HPLC-Q-TOF-MS)鉴定广金钱草中主要活性成分,通过高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法同时测定广金钱草中7种黄酮类成分(夏佛塔苷、异夏佛塔苷、维采宁-2、异荭草苷、异牡荆苷、木犀草素、芹菜素)的量。方法采用Phenomenex Kinetex C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇(A)-0.2%甲酸水(B)为流动相梯度洗脱进行色谱分离,体积流量为1.0 mL/min,柱温40℃;Q-TOF-MS在电喷雾负离子模式下采集数据,分流比为1:1;采用HPLC-DAD法定量,检测波长为272 nm。结果采用HPLC-Q-TOF-MS法鉴定了广金钱草中的41种主要活性成分,其中包括37个黄酮类成分,4个酚酸类成分。成功建立了同时测定广金钱草中7种黄酮类成分的HPLC-DAD法,各成分的线性关系良好(r0.9990),精密度、重复性和稳定性良好,回收率在96.7%~102.4%(n=6),RSD均小于4.94%。结论通过HPLC-Q-TOF-MS联用技术,为阐明广金钱草药效物质基础提供参考;建立的HPLC-DAD法同时测定广金钱草中7种黄酮类成分的定量分析方法简便、快捷、准确,为综合评价广金钱草的质量提供参考。     

不同来源和部位的广金钱草中化学成分研究

目的:研究不同市场、不同产地、不同部位的广金钱草中3种化学成分含量,为广金钱草临床应用提供科学依据。方法:采用HPLC法,对不同药材市场、不同产地广金钱草地上部分、茎及叶中夏佛塔苷、异夏佛塔苷和异牡荆苷的含量进行测定。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%甲酸溶液(32∶68),流速为1.0 mL/min,检测波长为272 nm。结果:叶中夏佛塔苷、异夏佛塔苷和异牡荆苷的含量均高于地上部分和茎;亳州、安国、玉林、樟树、禹州5个市场地上部分及五通、中庸、宛田3个产地样品叶中夏佛塔苷含量多数均≥0.13%;异夏佛塔苷存在于地上部分、茎、叶中,异牡荆苷仅存在于叶中;玉林市场药效成分含量要优于其他市场,五通产地的药材质量要优于中庸、宛田产地。结论:广金钱草药材质量评价时,建议增加异夏佛塔苷这一指标;贮存药材时,建议减少贮存时间、保持药材完整性;叶是广金钱草3种化学成分的主要富集部位。     

不同干燥方法对广金钱草鲜品黄酮成分的影响

目的:利用高效液相色谱法同时测定广金钱草鲜品、晒干品、阴干品和烘干品中夏佛塔苷、异夏佛塔苷、异荭草苷3种主要黄酮成分,并对他们进行含量比较。方法:采用Phenomenex Kinetex C_(18)色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),甲醇-0.1%甲酸溶液(pH 3.5)为流动相,等度洗脱,流速:1.0 mL/min,柱温:40℃,检测波长:272 nm。结果:所建立的方法可有效的分离并测定3种黄酮成分,符合方法学考察要求,实验结果显示广金钱草鲜品与不同干燥方式的样品在黄酮含量上具有较大的差异。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于考察不同干燥方法对广金钱草质量的影响,有利于药材的加工。     

种植方式与密度及采收期对广金钱草质量的影响

目的:探讨广金钱草的种植方式、种植密度及采收期对其产量和有效成分含量的影响,确定广金钱草的种植方式、种植密度和最佳采收时期。方法:采用广金钱草种苗移栽和扦插移栽的定植方式种植,收集不同时期的广金钱草样品,种子苗不同种植密度的样品,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量,采用高效液相色谱法测定夏佛塔苷、异夏佛塔苷、维采宁-2、异牡荆苷、异红草苷含量,结合产量、生长形态,研究两种定植方式不同采收期有效成分动态变化,种子苗移栽及茎叶有效成分积累变化,考察不同密度种植的影响。结果:不同种植方式的广金钱草在生物形态及有效成分的积累存在显著的差异,通过茎叶有效成分的动态积累,可以确定其最佳采收期及最佳种植密度。结论:广金钱草在花蕾期前后采收,种植密度在株行距20 cm×30 cm的条件下,产量和质量综合比较得到最佳。     

橡胶林下间作广金钱草的产量及药材质量研究

目的:初步评价广金钱草在橡胶林下的间作发展潜力。方法:以广金钱草的露地栽培为对照,对不同橡胶林下间作广金钱草的产量及其主要药材质量指标进行了比较研究。结果:与露地栽培相比,橡胶林下各间作处理广金钱草的产量及其黄酮、多糖、浸出物含量均有降低,整体上均呈现光照条件相对好的处理含量高于光照条件差的处理的趋势,其中,产量的下降幅度较大;广金钱草的夏佛塔苷、浸出物含量在荫蔽度较高的传统成龄胶园及中幼林中明显低于露地栽培处理,但在全周期间作模式胶园间作区靠中间位点该两指标及多糖含量均接近于甚至稍优于露地栽培处理;除传统成龄胶园间作处理下的灰分含量偏高外,各处理的广金钱草地上部药材质量均符合2015版中国药典标准。结论:初步认为,光照不足会影响橡胶林下间作广金钱草的产量及药效成分含量,其在海南进行露地栽培较具潜力,但也可作为荫蔽度较低的胶园的备选间作物。     

外翻肠囊法研究小叶榕干浸膏肠吸收成分及其吸收特征

目的 比较大孔树脂法与醇沉法对小叶榕水提液中荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷4个黄酮类成分吸收特征的影响.方法 通过大鼠肠外翻模型,以累积吸收量(Q)与吸收速率常数(Ka)为指标,采用HPLC-PDA测定不同药物质量浓度(8、16、32 mg·mL-1)下肠吸收液样品中荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷4个黄酮类成分...     

星点设计-效应面法优选广金钱草提取工艺

目的优选广金钱草中夏佛塔苷和异牡荆苷的提取工艺。方法以乙醇体积分数、提取时间和加液量为自变量,以夏佛塔苷和异牡荆苷含有量的总评"归一值"为因变量,采用星点设计-效应面法优选广金钱草提取工艺。结果最佳提取工艺为12倍量65%乙醇提取2次,每次1.2 h。结论建立的数学模型预测精确度高。     

基于多成分含量测定结合化学计量学评价不同产地鸭跖草药材质量

该研究建立了同时测定鸭跖草中异荭草苷、荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷4种成分含量的HPLC定量分析方法,对不同产地共62批鸭跖草进行含量差异分析及质量评价。采用Dikma Platisil ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(14∶86),检测波长348 nm,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃;应用化学计量学的方法对62批鸭跖草药材产地差异及其药材质量进行研究。结果显示4种成分的测定在质量浓度范围内呈现良好的线性关系(r>0.999 9),平均加样回收率为96.17%～103.0%,精密度、稳定性、重复性RSD均小于2.0%。整体上4种成分含量由高到低依次为异荭草苷>异牡荆苷>荭草苷>牡荆苷,取产地明确的47批鸭跖草样品进行分析,化学计量学将其分为6类,不同产地鸭跖草质量差异大,综合而言西部、中部、南部产地的鸭跖草质量较优。该研究所建立的HPLC多成分含量测定方法专属性强,简便高效,为综合评价不同产地的鸭跖草药材质量提供参考;经化学计量学分析发现不同产地鸭跖草质量差异大,认为可将异荭草苷...     

广金钱草适宜采收期研究

目的:考察不同采收时间广金钱草中总黄酮、异牡荆苷含量及产量变化趋势,以确定其最佳采收期。方法:采用柱色谱-UV法测定总黄酮含量;采用HPLC测定异牡荆苷含量,色谱条件:DiamonsilTM C18色谱柱(迪马公司,250mm×4.6mm,5μm);柱温25℃;甲醇-0.2%磷酸水溶液进行梯度洗脱;检测波长271nm;流速1mL/min。结果:总黄酮和异牡荆苷的含量在7月份达到最大,产量在8～9月份最高。结论:从产量和有效成分黄酮的含量变化上综合考虑,建议广金钱草最佳采收期在8月。     

反相高效液相色谱法同时测定蜀葵子中两种有效成分的含量

目的采用反相高效液相色谱法同时测定蜀葵子中两种成分含量。方法以从蜀葵子中首次提取分离得到的维采宁-1、夏佛塔苷为对照品;流动相为甲醇-体积分数为0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为272nm,柱温为30℃。结果维采宁-1在0.0195～0.234μg(r=0.9998)、夏佛塔苷在0.0653～1.632μg (r=0.9998)的线性关系良好;平均回收率分别为100.51%、100.55%;维采宁-1含量在0.072%～0.111%之间,夏佛塔苷含量在0.044%～0.068%之间。结论该方法具有简便,快速准确,重复性好的特点,可应用于蜀葵子含量测定,为更有效的控制蜀葵子质量以及合理开发利用蜀葵子提供了参考。     

不同采收时间广金钱草药材产量和质量研究

目的:考察不同采收时间对广金钱草产量和质量的影响。方法:在广金钱草不同采收时间收集药材样品,测定生长指标、产量和多糖、总黄酮、夏佛塔苷的含量。结果:广金钱草在不同采收时间各项生长指标、产量和多糖、总黄酮、夏佛塔苷含量差异显著。结论:广金钱草适宜在10月初采收。     

广金钱草不同变异类型产量和质量的研究

目的:对人工栽培群体不同变异类型广金钱草药材的农艺性状、总黄酮、多糖、夏佛塔苷含量进行分析,遴选优良变异类型,为广金钱草优良品种选育提供依据。方法:采用紫外分光光度法测定总黄酮、多糖含量,HPLC法测定夏佛塔苷含量。结果:药材产量、总黄酮、多糖、夏佛塔苷含量在不同变异类型间存在差异,紫红茎柔毛近贴生型产量、总黄酮、多糖、夏佛塔苷含量均最高。结论:紫红茎柔毛近贴生型广金钱草是具有高产优质潜力的变异类型。     

不同种源地广金钱草药材质量变异与遗传多样性分析

目的:研究不同种源地广金钱草药材质量变异及遗传多样性,为合理利用广金钱草种质资源及优良品种选育奠定基础.方法:采用AFLP分子标记技术,对18个种源地广金钱草进行遗传多样性分析,用NTSYSpc-2.11F软件计算并分析广金钱草种质间的相似度,构建遗传系统进化树;采用HPLC测定药材夏佛塔苷含量,并进行方差分析.结果:通过筛选得到8对AFLP引物组合,共扩增出844个DNA条带,多态性条带为717个,多态性位点平均为84.27％;通过聚类分析,将18个种源地的广金钱草种质分为3大类.种源间广金钱草药材夏佛塔苷含量差异显著,海南三亚种源夏佛塔苷含量显著高于其他种源地药材夏佛塔苷含量.结论:不同种源广金钱草药材质量差异显著,遗传多样性丰富,蕴藏着优质的种质资源,可以进行综合开发及优良品种选育.     

RP-HPLC同时测定淡竹叶中4种黄酮苷的含量

目的：建立RP-HPLC同时测定不同产地、不同采收期淡竹叶中荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷的含量。方法：采用高效液相色谱法，Waters XBridge C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，以甲醇-0.05%冰醋酸(35∶65)为流动相洗脱，流速1.0 mL·min^-1，检测波长340 nm，柱温25 ℃。结果：4种成分均达到基线分离，线性关系良好。方法的平均回收率及RSD分别为荭草苷103.2%，2.1%；异荭草苷101.6%，2.7%；牡荆苷98.4%，2.3%；异牡荆苷99.2%，1.8%。结论：本研究所建立的HPLC方法操作简便、结果准确可靠，为该类药材的入药及资源利用提供了依据。     

荠菜中黄酮类成分的积累变化研究

目的:测定荠菜不同生长期及不同药用部位中主要黄酮类成分2″-O-α-L-阿拉伯糖异荭草苷的含量,确定该成分在生长过程中的变化规律及其在不同药用部位中的分布规律。方法:采用HPLC法,以2″-O-α-L-阿拉伯糖异荭草苷为对照,在270 nm测定2″-O-α-L-阿拉伯糖异荭草苷的含量。色谱柱Diamonsil C18(5μm,200×4.6 mm),流动相乙腈-0.05%磷酸溶液(20∶80);流速(0.8 mL.min-1);结果:2″-O-α-L-阿拉伯糖异荭草苷在21.0～210.0μg.ml-1线性关系良好;平均回收率99.8%,RSD 2.0%(n=9)。结论:该方法简单、灵敏、准确、可靠。可用于荠菜中主要黄酮成分2″-O-α-L-阿拉伯糖异荭草苷的含量测定,为荠菜的进一步开发利用提供依据。     

三叶青叶指纹图谱研究及8种酚类成分含量测定

采用超高效液相色谱建立三叶青叶指纹图谱,并同时测定8种酚类成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆苷、异牡荆苷)的含量,为三叶青叶质量评价提供依据。采用UHPLC法,Welch UHPLC Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,2.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸(含5%甲醇)水梯度洗脱,流速0.4 m L·min~(-1),柱温30℃,采用国家药典委员会"相似度评价软件2004AB"处理分析,建立41批不同产地三叶青叶的指纹图谱,共标定15个共有峰并对不同产地进行聚类分析,然后选择其中8个主要的酚类成分作为定量指标,建立UHPLC同时测定8种主要酚类成分含量的方法,经方法学验证该研究建立的三叶青叶指纹图谱和8种酚类成分含量测定方法简便有效、灵敏、准确,可为综合评价三叶青叶的质量提供参考。     

HPLC测定不同来源竹叶中荭草苷、异荭草苷和异牡荆苷的含量

目的:测定不同来源竹叶中荭草苷、异荭草苷和异牡荆苷的含量.方法:用HPLC法测定,以MeOH-H2O-HAc(35:65:1)为流动相,340nm为检测波长.结果:不同来源最高含量为0.89%,最低含量为0.07%.结论:该法简单、快速、准确.     

三金排石颗粒质量控制研究

目的:建立三金排石颗粒的定性和定量控制方法.方法:采用薄层色谱法对三金排石颗粒中所含的广金钱草、牛膝、益母草、甘草进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定方中君药广金钱草的特征性成分夏佛塔苷的含量.结果:实验研究建立的薄层色谱法可鉴别出广金钱草、牛膝、益母草、甘草,阴性对照无干扰;夏佛塔苷进样量在0.09082～0.908...     

高效液相色谱法测定金莲花制剂中3种黄酮苷的含量

金莲花制剂系采用毛茛科植物金莲花的干燥花及花蕾制成的单方制剂,金莲花制剂临床上主要用于治疗上呼吸道感染[1]。金莲花的主要药效成分是黄酮类化合物,荭草苷、牡荆苷和槲皮素是其主要的黄酮单体,含量最高[2]。现代药理研究表明,荭草苷、牡荆苷和槲皮素还具抗癌、抗氧化、降压和解痉作用[3-5]。本研究采用高效液相色谱法（HPLC）测定金莲花制剂中荭草苷、牡荆苷和槲皮素含量,