基于NF-κB信号通路研究荔枝核有效部位群对糖调节受损大鼠炎症反应的影响北大核心CSCD

目的观察荔枝核有效部位群(SLEC)对糖调节受损(IGR)大鼠炎症因子表达的作用,探讨其与核因子-κB(NF-κB)信号通路关系。方法长期喂养不同配比高糖高脂饲料构建糖调节受损大鼠模型,检测其空腹血糖(FBG)水平及口服葡萄糖耐量试验(OGTT),观察糖调节受损模型成模周期、计算造模成功率,筛选并优化高糖高脂饮食配方。采用优化后高糖高脂饮食配方复制糖调节受损大鼠模型,设模型组、SLEC高剂量组(12 g·kg^(-1))、SLEC中剂量组(6 g·kg^(-1))、SLEC低剂量组(3 g·kg^(-1))、二甲双胍组(0.2 g·kg^(-1))和正常对照组,连续给药6周。ELISA法检测大鼠血清中转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)含量,荧光定量PCR法检测大鼠胰腺组织TGF-β1、MCP-1、MIF m RNA表达,Western blot法检测大鼠胰腺组织NF-κB抑制蛋白(IκBα)和NF-κB p65表达。结果 3种不同配比高糖高脂饲料均能成功诱导糖调节受损大鼠模型,3者间不存在显著性差异(P>0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠血清中TGF-β1、MCP-1和MIF含量均明显升高,胰腺组织TGF-β1、MCP-1和MIF m RNA表达水平均明显上调,胞浆蛋白IκBα表达降低,核蛋白NF-κB p65表达升高(P<0.01);与模型组比较,SLEC中、高剂量组与二甲双胍组血清中TGF-β1、MCP-1和MIF含量均明显降低,胰腺组织TGF-β1、MCP-1和MIF m RNA表达水平均显著下调,胞浆蛋白IκBα表达升高,核蛋白NF-κB p65表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论 SLEC通过NF-κB信号通路下调糖调节受损大鼠中TGF-β1、MCP-1和MIF的表达,减轻大鼠炎症反应。     

乌梅丸对2型糖尿病模型大鼠NF-κB p65及GLP-1的影响

目的:研究乌梅丸对2型糖尿病模型大鼠血糖及其核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)蛋白表达的影响。方法:将60只大鼠随机选取10只为正常组,余50只以高糖高脂乳剂灌胃8周后联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导2型糖尿病模型,剔除造模未成功大鼠,纳入30只糖尿病模型大鼠,随机平均分成模型组、二甲双胍组、乌梅丸组。正常组和模型组分别灌胃(ig)生理盐水20 m L·kg~(-1)·d~(-1),二甲双胍组ig二甲双胍200 mg·kg~(-1)·d~(-1),乌梅丸组ig乌梅丸生药20 g·kg~(-1)·d~(-1),28 d后监测大鼠血糖,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织NF-κB p65,GLP-1蛋白表达,免疫组化法检测胰腺组织NF-κB p65,GLP-1蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖明显升高,结肠和胰腺组织NF-κB p65蛋白表达量明显上升(P0.01),GLP-1蛋白表达量下降(P0.05);与模型组比较,乌梅丸组空腹血糖均明显降低(P0.01),结肠和胰腺组织NF-κB p65蛋白表达量明显降低(P0.01),GLP-1蛋白表达量明显上升(P0.01)。结论:乌梅丸可以通过调节2型糖尿病模型大鼠空腹血糖,降低NF-κB的表达,上调GLP-1的表达,从而达到防治2型糖尿病的作用。     

疏肝健脾颗粒对高脂血症大鼠肝脏MCP-1、NF-κB表达的影响

目的:研究疏肝健脾颗粒对高脂血症大鼠肝脏单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、核因子kappaB(NF-κB)表达的影响。方法:采用高脂饲料喂养2周复制Wistar雄性大鼠高脂血症大鼠模型,将模型分为疏肝健脾颗粒高、中、低剂量组、立普妥组、模型组,各组给予治疗4周,免疫组化染色方法测定肝脏组织MCP-1、NF-κB的表达。结果:与空白组比较,高脂血症大鼠各组肝组织MCP-1的表达显著增加(P0.01);与高脂血症大鼠模型比较,对照组、中剂量、高剂量、立普妥组的NF-κB的表达有显著降低(P0.01)。结论:高脂血症大鼠肝组织MCP-1和NF-κB的表达水平增高,疏肝健脾颗粒能抑制肝组织NF-κB的表达。     

复方龙脉宁对急性心肌梗死模型大鼠TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路的影响

目的:探讨复方龙脉宁汤对盐酸异丙肾上腺素诱导的心肌梗死大鼠模型的保护作用及其对Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:取雄性SD大鼠48只,随机分成6组:正常组,模型组,复方丹参滴丸组(0.072 9 g·kg~(-1)),复方龙脉宁低、中、高剂量组(0.36,0.71,1.43 g·kg~(-1))。采用背部皮下多点注射盐酸异丙肾上腺素的方法建立急性心肌梗死动物模型。采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理学变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),一氧化氮(NO)的含量;免疫组化法测定大鼠心肌组织中NF-κB激酶β抑制蛋白(IKKβ),NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心肌组织中TLR4,MyD88,NF-κB p65蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌损伤明显,血清中IL-1β,IL-6,TNF-α,MCP-1,NO含量明显升高(P0.05),心肌组织中IκBα蛋白表达水平明显降低(P0.05),心肌组织中IKKβ,TLR4,MyD88,NF-κB p65蛋白表达水平明显升高(P0.05);与模型组比较,复方龙脉宁低、中、高剂量组能明显改善大鼠心肌损伤,明显升高IκBα蛋白的表达(P0.05),明显降低血清中IL-1β,IL-6,TNF-α,MCP-1,NO的活性及心肌组织中IKKβ,TLR4,MyD88,NF-κB p65蛋白的表达(P0.05)。结论:复方龙脉宁对心肌梗死的保护作用,可能与调控TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路相关因子的表达有关。     

俞氏灌肠方对溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜β-arrestin1/2、δ阿片受体、Bcl-2及NF-κB表达的影响

目的:观察俞氏灌肠方对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜β-arrestin1/2相关信号通路的影响。方法:三硝基苯磺酸(TNBS)一次性灌肠制作大鼠UC模型,再分别以低、中、高3种剂量(20g·kg~(-1)·d~(-1)、40g·kg-1·d~(-1)、80g·kg~(-1)·d~(-1))的俞氏灌肠方灌肠治疗10天,同时以美沙拉嗪(0.3g·kg~(-1)·d~(-1))治疗做对照,治疗结束后剖取结肠,免疫组化检测肠黏膜δ阿片受体(DOR)、β-arrestin1/2、Bcl-2、NF-κB蛋白表达。结果:模型组大鼠结肠组织中DOR、β-arrestin1、Bcl-2、NF-κB蛋白表达较正常组明显升高,β-arrestin2蛋白表达则明显下降(P0.01);复方低、中、高剂量组及美沙拉嗪组DOR、β-arrestin1、Bcl-2、NF-κB蛋白表达较模型组明显下降(P0.01),复方中、高剂量组及美沙拉嗪组β-arrestin2蛋白表达则较模型组明显升高(P0.05,P0.01)。结论:俞氏灌肠方治疗UC的作用可能是通过影响DOR-β-arrestin1-Bcl-2信号通路促进CD4~+T细胞凋亡,同时通过上调β-arrestin2蛋白表达抑制NF-κB的表达和活化,从而减轻了肠道炎症反应对结肠的损伤。     

基于β2AR/β-arrestin2/NF-κB信号通路的清肠化湿颗粒防治溃疡性结肠炎的作用机制

目的:观察清肠化湿颗粒对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型大鼠及人结肠癌上皮细胞株HT-29炎症模型β_2肾上腺素受体(β_2AR)/β-抑制蛋白2(β-arrestin2)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的干预作用。方法:取8只大鼠作为空白组,其余大鼠采用三硝基苯磺酸(trinitro-benzene-sulfonic acid,TNBS)灌肠法复制UC大鼠模型;待模型建立成功后,随机分为模型组,柳氮磺胺吡啶(SASP,1.0 g·kg~(-1))组,清肠化湿颗粒低、中、高剂量(2.8,5.5,11.0 g·kg~(-1))组,每组8只,灌胃给药10 d,每日1次;酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定UC大鼠结肠组织中巨噬细胞移动抑制因子(MIF),基质金属蛋白酶-1(MMP-1),MMP-2,MMP-9,胰岛素样生长因子-1(IGF-1),超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),髓过氧化物酶(MPO),一氧化氮(NO),一氧化氮合成酶(iNOS),谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px);免疫组化法检测模型大鼠结肠黏膜β_2AR,β-arrestin2,NF-κB定位表达;采用肿瘤坏死因子与脂多糖诱导HT-29细胞炎症模型;噻唑蓝(MTT)比色法检测清肠化湿颗粒对细胞增殖的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中β_2AR,β-arrestin2,NF-κB蛋白表达量。结果:造模后,模型组大鼠较空白组大鼠结肠黏膜的结肠损伤分数明显升高;与模型组比较,3个剂量的清肠化湿颗粒给药组结肠黏膜损伤明显下降(P0.05,P0.01),大鼠结肠组织IGF-1,SOD,GSH-Px含量与β_2AR,β-arrestin2表达明显上升,MIF,MMP-2,MMP-9,MDA,MPO,NO,iNOS含量及NF-κB表达明显下降(P0.05,P0.01)。结论:清肠化湿颗粒可缓解UC氧化应激反应及肠道炎症,其作用与激活β_2AR/β-arrestin2/NF-κB信号通路有关。     

葛根芩连汤加减对糖尿病大鼠海马炎症因子的影响

目的:探讨葛根芩连汤加减对2型糖尿病(T2DM)大鼠认知功能及海马组织白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法:将62只大鼠随机选取12只作为空白组,其余50只以高脂高糖饮食及小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导2型糖尿病模型,随机分为模型组、沙格列汀组、葛根芩连汤加减组。空白组和模型组大鼠分别灌胃蒸馏水10 mL·kg~(-1)·d~(-1),沙格列汀组灌胃沙格列汀0.005 g·kg~(-1)·d~(-1),葛根芩连汤加减组灌胃葛根芩连汤加减0.435 g·kg~(-1)·d~(-1); 8周后,采用Morris水迷宫观察大鼠学习记忆能力;苏木素-伊红(HE)染色法观察海马组织病理变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织细胞浆和细胞核内NF-κB p65蛋白的表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠海马组织IL-1β,TNF-α的水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠第4天平均潜伏期显著延长(P0.01),逃逸平台进入次数、有效区域运动时间和运动距离均显著降低(P0.01),细胞核内NF-κB p65的蛋白表达显著上升(P0.01),大鼠海马中IL-1β,TNF-α表达水平明显升高(P0.05);与模型组比较,葛根芩连汤加减能明显缩短T2DM大鼠逃避潜伏期,增加穿越平台次数、有效区游泳路程及游泳时间(P0.05,P0.01),显著改善海马组织IL-1β,TNF-α和细胞核内NF-κB p65蛋白表达水平(P0.05,P0.01)。结论:葛根芩连汤加减可以显著改善高糖高脂饮食加小剂量STZ诱导的T2DM大鼠模型的学习记忆能力,其作用机制可能是通过抑制大鼠海马炎症反应来实现的。     

中药复方对糖尿病大鼠血管内皮核因子和单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达的影响

目的探讨中药复方糖脉平对2型糖尿病大鼠血管内皮核因子(NF-κB)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA表达的影响。方法将大剂量链脲佐菌素腹腔注射(STZ 60 mg/kg)造模成功的Wistar大鼠随机分为模型组、糖脉平组、二甲双胍组、玉泉丸组,每2周称1次体质量并剪尾测血糖,第6周处死取主动脉标本,采用免疫组化SAB法测定NF-κB及半定量RT-PCR法检测MCP-1 mRNA表达情况。结果造模后,大鼠血糖及NF-κB和MCP-1 mRNA的表达明显增高,经治疗后,糖脉平组及二甲双胍组NF-κB和MCP-1 mRNA的表达明显降低,与模型组比较有显著性差异(P均<0.01)。结论糖脉平能减少糖尿病大鼠NF-κB和MCP-1 mRNA的表达,减轻血管内皮局部炎症反应,阻断和降低动脉硬化的形成。     

三味龙胆花片对克雷伯菌急性肺炎大鼠中NF-κB信号通路的影响

目的观察三味龙胆花片对克雷伯菌急性肺炎大鼠的保护作用,并探讨其通过NF-κB信号通路对克雷伯菌急性肺炎大鼠的作用机制。方法将60只健康雄性SD大鼠随机分成空白对照组、模型组、阳性对照组(阿奇霉素组0.045 g·kg~(-1))、三味龙胆花片低、中、高剂量组(0.86,1.72,3.44 g·kg~(-1))。将克雷伯菌滴入大鼠气管致急性肺炎模型,三味龙胆花片低、中、高剂量组造模前开始灌胃预给药4 d,模型完成后,继续给药3 d。称质量并计算肺组织系数;检测血液中白细胞和中性粒细胞计数;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)水平;HE染色观察支气管和肺组织病理形态;Western Blot法检测肺组织中核因子-κB(NF-κB)p65和抑制蛋白(IκBα)蛋白表达。结果与模型组比较,三味龙胆花片可降低模型大鼠肺组织系数,减少白细胞和中性粒细胞数量,抑制血清中TNF-α、IL-1β、IFN-γ的水平(P 0.05),抑制NF-κB p65的磷酸化表达和IκBα蛋白表达,高剂量能减轻支气管损伤(P 0.05),中、高剂量能减轻肺组织损伤(P 0.01)。结论三味龙胆花片对克雷伯菌急性肺炎大鼠有保护作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。     

华夏小葱制剂对脂肪肝大鼠抗脂质过氧化损伤及细胞因子损伤的影响

目的研究华夏小葱制剂对脂肪肝大鼠的防治作用及其机制。方法将60只SD大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,华夏小葱制剂低、中、高剂量组以及东宝肝泰片组。用高脂饮食、酒精水并结合皮下注射小剂量四氯化碳的方法建立脂肪肝模型。结果模型对照组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、核因子-κB(NF-κB)、转化生长因子-β(TGF-β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1) mRNA值显著高于空白对照组(P<0.05或P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)活力显著低于空白对照组(P<0.01);华夏小葱制剂低、中、高剂量组及东宝肝泰片组TC、TG、MDA、NF-κB、TGF-β、MCP-1 mRNA值显著低于模型对照组(P<0.05或P<0.01),SOD活力显著高于模型对照组(P<0.01)。结论华夏小葱制剂对脂肪肝大鼠具有防治作用,其机制可能与降低大鼠体内血脂、减少脂质过氧化损伤及细胞因子的损伤有关。     

益气化痰解毒中药对脂肪肝大鼠肝组织NF-κB活性的影响

目的:探讨益气化痰解毒中药治疗脂肪肝药效学机制。方法:采用高脂饮食加白酒灌胃建立大鼠脂肪性肝炎模型,以东宝肝泰作对照,观察益气化痰解毒中药对脂肪肝大鼠肝组织核因子-κB(NF-κB)活性变化、肿瘤坏死因子(TNFa)、转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。结果:大鼠第10周出现严重的内毒素血症;模型组大鼠比正常组NF-κB、TNFa、TGF-β1水平均明显升高(P<0.01);中药能抑制NF-κB活化,降低TNFa、TGF-β1的含量,均明显优于东宝肝泰(P<0.05)。结论:益气化痰解毒中药具有较强抗脂肪性肝炎效应,其作用机制与其抑制NF-κB过度活化有关。     

温阳活血方对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏NF-κB和TGF-β1表达的影响

目的:探讨核转录因子-κB(NF-κB)、转化生长因子-β1(TGF-β1)在肾间质纤维化中的表达情况及温阳活血方的干预作用.方法:采用单侧输尿管结扎(UUO)肾间质纤维化模型.将大鼠随机分为6组,即:模型组、温阳活血治疗组、桃仁治疗组、肉苁蓉治疗组、蒙诺治疗组、假手术组,假手术组只分离但不结扎输尿管.术后2周处死大鼠,检测尿β2-MG,观察肾组织病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾组织NF-κB和TGF-β1的表达.结果:模型组肾组织表现为纤维化病理改变,正常组肾小管上皮细胞、肾间质细胞胞浆NF-κB和TGF-β1有较弱的表达;模型组呈强阳性表达;温阳活血治疗组病理改变较模型组纤维化程度减轻,且NF-κB和TGF-β1的阳性表达较模型组显著减弱,有统计学差异(P<0.05).结论:温阳活血方可能通过抑制NF-κB和TGF-β1的过度表达而减缓肾纤维化病程进展.     

基于和法探讨黄连汤治疗慢性非萎缩性胃炎的机制

目的:基于和法调节寒热,以慢性非萎缩性胃炎(CNAG)模型大鼠为研究对象,探讨黄连汤治疗CNAG的作用机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分成2组,正常组10只和CNAG造模组50只。造模组采用化学刺激结合饥饱失常诱导CNAG大鼠模型,造模成功后将其随机分为5个组,分别为模型组、荆花胃康丸治疗组、黄连汤高、中、低剂量组,每组8只。荆花胃康丸治疗组(0. 04 g·kg~(-1)),黄连汤高、中、低剂量组(11. 00,5. 48,2. 74 g·kg~(-1)),空白组及模型组给予同剂量生理盐水连续灌胃4周后收集样本。苏木素-伊红(HE)染色观察胃黏膜组织形态改变,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-8(IL-8)含量,免疫组化(IHC)检测核转录因子-κB(NF-κB)及其抑制蛋白受体(IκBα)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测IκBα,NF-κB mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠胃组织黏膜受损,可见大量炎细胞浸润,血清炎性因子显著升高,胃组织IκBαmRNA及蛋白表达降低,NF-κB mRNA,蛋白表达升高(P 0. 01);与模型组比较,各治疗组大鼠胃黏膜组织炎症均有不同程度的改善,血清炎性因子下降,胃组织IκBαmRNA表达上调,IκBα蛋白增高,NF-κB mRNA表达下调,NF-κB蛋白降低,其中以荆花胃康丸治疗组及黄连汤高剂量组改善最明显(P 0. 05,P 0. 01)。结论:基于和法调节寒热黄连汤能够有效改善CNAG大鼠胃黏膜损伤程度,降低血清炎性因子,其作用机制与上调IκBαmRNA,增加胃黏膜IκBα蛋白表达,下调NF-κB mRNA,降低NF-κB蛋白表达有关。     

丹皮酚联合三七总皂苷对心梗后心室重构大鼠TNF-α,IL-1β mRNA表达的影响

目的:通过检测丹皮酚联合三七总皂苷用药后大鼠心肌中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA的变化,探讨丹皮酚联合三七总皂苷对大鼠急性心肌梗死(AMI)后引发心室重构的影响及机制。方法:80只雄性SD大鼠中随机选取的70只,结扎左冠状动脉的前降支制备AMI大鼠的动物模型。存活且成模大鼠依照干预不同随机的分成模型组、丹皮酚(Pae 8 mg·kg~(-1))组、三七总皂苷(NTS 40 mg·kg~(-1))组、联合低剂量组(Pae 4 mg·kg~(-1)+NTS 20 mg·kg~(-1))、联合高剂量组(Pae 8 mg·kg~(-1)+NTS 40 mg·kg~(-1)),卡托普利组(10 mg·kg~(-1))阳性药组,此外设立假手术组。各组分别给予相应药物腹腔注射,连续28 d。苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠心肌组织的病理学变化,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测NF-κBp65,p-IκB-α蛋白的表达水平,逆转录PCR(RT-PCR)检测TNF-α和IL-1βmRNA表达水平。结果:与假手术组比较,模型组心肌病理改变明显,NF-κBp65,p-IκB-α蛋白的表达和TNF-α,IL-1β的mRNA表达显著升高(P0.01);同模型组比较,各用药组心肌病理改变有不同程度改善,目的蛋白与目的基因的表达显著降低(P0.01);并且联合用药组中各指标的改善情况明显优于单味药组(P0.05,P0.01),联合用药高剂量组较低剂量组作用更显著(P0.05,P0.01)。结论:丹皮酚联合三七总皂苷能协同改善心梗后大鼠心室重构,其机制可能与阻断NF-κB/IκB信号通路,下调TNF-α和IL-1βmRNA的表达减少炎症反应有关。     

益气化湿通络方通过调节NF-κB信号通路改善慢性肾功能衰竭大鼠炎性纤维化的实验研究

目的观察益气化湿通络方对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠炎症及纤维化的改善作用,并探讨其可能的分子机制。方法用Platt法制备CRF大鼠模型,将造模成功的24只SD雄性大鼠分为模型组、益气化湿通络方组和贝那普利组,每组8只,同时设假手术组(8只)。观察大鼠血生化指标血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及通过HE和天狼星红染色观察残肾组织病理改变;通过实时荧光定量PCR检测FN mRNA表达水平;Western blotting技术观察大鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)蛋白表达情况;免疫组化法观察FN蛋白表达情况,免疫荧光法观察NF-κB蛋白的表达情况。结果模型组大鼠Scr、BUN水平升高,病理改变呈现明显的炎症浸润及胶原沉积,NF-κB、ICAM-1、TGF-β1、FN蛋白表达水平增高。经益气化湿通络方及贝那普利干预后Scr、BUN值降低,炎症减少,胶原沉积减少,NF-κB、ICAM-1、TGF-β1、FN蛋白表达减少。结论益气化湿通络方改善了CRF模型大鼠的肾功能,通过调节NF-κB通路和TGF-β1蛋白水平减缓残存肾脏炎症及纤维化的病理进程。     

抵当汤调控NF-κB通路干预DM大鼠心肌炎症反应的机制

目的:探讨抵当汤及其蕴含的泻热化瘀通络法对因核转录因子-кB(NF-κB)通路激活而导致的糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠心肌炎症反应的影响。方法:选取130只体重达到220~270 g清洁级SD健康雄性大鼠,分为正常组(10只)和造模组(120只),后者按55 mg·kg-1剂量一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)溶液建立DM模型。72 h后将造模成功的大鼠随机分为模型组,抵当汤高、中、低剂量组(1.08,0.72,0.54 g·kg~(-1)·d~(-1)),吡咯啉烷二甲基硫脲组(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC组,0.15 g·kg~(-1)·d~(-1))以及抵当-吡咯啉烷二甲基硫脲组(DP组1.08 g·kg~(-1)·d~(-1)抵当汤+0.15 g·kg~(-1)·d~(-1)PDTC),均采用相应药物1次/d进行灌胃干预。8周后,麻醉状态下腹主动脉取血处死动物,迅速摘取大鼠心脏,置于液氮中储存备用。以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织匀浆中转录NF-κB p65蛋白的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌组织匀浆肿瘤坏死因子-a(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)表达,免疫荧光检测心肌组织细胞黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1),巨噬细胞趋化性蛋白-1(macrophage chemotaxis protein-1,MCP-1)的表达。结果:与正常组比较,模型组NF-κB p65蛋白和TNF-α表达均明显升高;且模型组胞浆内观察到被染成绿色荧光的ICAM-1,MCP-1蛋白。与模型组比较,各治疗组NF-κB p65蛋白和TNF-α表达则明显降低;组间比较发现,DP组NF-κB p65蛋白表达与正常组最接近,抵当汤高剂量组TNF-α表达则较模型组降低更加显著;各治疗组胞浆内观察到被染成绿色荧光的ICAM-1,MCP-1蛋白不同程度减少,其中DP组被染成绿色的范围最少,与正常组最为接近。结论:泻热化瘀通络之抵当汤可通过抑制NF-κB通路的激活来减轻DM模型大鼠的心肌炎症反应。     

化痰通脉饮对多囊卵巢综合征大鼠IRS-1-PI3K/Akt及NF-κB信号串流的影响

目的:观察化痰通脉饮对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型胰岛素受体底-1-磷脂酰肌醇-3激酶(IRS-1-PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(Akt)及核转录因子-κB(NF-κB)信号串流的影响,为中药复方多靶点多通路作用起效模式的论证提供科学的依据,为治疗PCOS开辟新的思路。方法:将大鼠分为正常组、模型组、二甲双胍组(二甲双胍0. 16 g·kg~(-1)·d~(-1))和化痰通脉饮低、中、高剂量组(8,16,24 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组8只,利用"胰岛素(INS)联合绒毛膜促性腺激素(HCG)诱导大鼠PCOS模型"方案对非正常组大鼠进行造模,完成后采用蛋白免疫印迹法(Western blot)及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠肝脏中IRS-1,PI3K,Akt,NF-κB p65,NF-κB抑制蛋白(IκB)等蛋白表达和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL~(-1)β)的变化。结果:与正常组比较,模型组肝脏中IRS-1,Akt,PI3K,IκB蛋白表达明显降低(P 0. 05),NF-κB p65蛋白的表达明显升高(P 0. 05);与模型组比较,化痰通脉饮高剂量组大鼠的肝脏中IRS-1,Akt,PI3K,IκB蛋白表达明显升高(P 0. 05),NF-κB p65蛋白表达明显降低(P 0. 05)。模型组大鼠血清中TNF-α,IL~(-1)β水平较正常组明显升高(P 0. 05);化痰通脉饮低、中、高剂量组大鼠血清中TNF-α,IL~(-1)β水平较模型组明显降低(P 0. 05)。结论:PCOS发病过程中IRS-1-PI3K/Akt与NF-κB通路有交叉作用,化痰通脉饮对涉及的IRS-1-PI3K/Akt与NF-κB通路异常均有较好的回调作用。     

萆薢除痹汤对大鼠尿酸性肾病防治作用的影响

目的:研究萆薢除痹汤对尿酸性肾病大鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB),单核细胞趋化因子(MCP-1),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)的影响;研究萆薢除痹汤对细胞中以上炎症指标表达的调控作用;探讨萆薢除痹汤对尿酸性肾病防治的影响。方法:采用腺嘌呤(100 mg·kg-1)和盐酸乙胺丁醇(250 mg·kg~(-1))制作尿酸性肾病大鼠模型,设立空白组,模型组,西药别嘌醇组(5 mg·kg-1),萆薢除痹汤低、中、高剂量组(7.25,14.49,29.98 g·kg~(-1))6组,实验第21天处死,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法及免疫印迹法(Western bolt)检测各组大鼠肾脏组织中NF-κB,MCP-1,ICAM-1,VCAM-1的mRNA含量和蛋白表达水平。同时体外培养NR 8383巨噬细胞,各组加入不同浓度含药血清,将其分为空白组、模型组、中药低(2.5%),中(5%),高(10%)剂量组5组,培养24 h后提取NR8383细胞总蛋白,用Western bolt法检测以上各指标的表达。结果:体内实验发现,与正常组比较,萆薢除痹汤低、中、高剂量组NF-κB,MCP-1,ICAM-1,VCAM-1的蛋白及mRNA表达与模型组相比明显降低,萆薢除痹汤低、中、高剂量组与别嘌醇比较,组间比较无统计学差异。体外实验发现萆薢除痹汤低、中、高浓度组各指标蛋白的表达与模型组相比降低(P0.05),其中、高浓度组下调程度更明显(P0.01)。结论:体内及体外实验均证实萆薢除痹汤可通过抑制NF-κB,MCP-1,ICAM-1,VCAM-1所导致的炎症反应而保护肾功能,起到防治尿酸性肾病的作用,其机制可能与其能减轻尿酸盐的沉积的有关。     

黄连解毒汤对糖尿病大鼠肝脏核因子-κB、肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:研究黄连解毒汤对糖尿病大鼠肝脏核转录因子-κB(NF-κB),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨黄连解毒汤治疗糖尿病的机制。方法:实验采用高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(STZ)复制大鼠糖尿病模型,连续给黄连解毒汤(11.5,5.7,2.85 g.kg-1)8周后测定空腹血糖(FGB)、总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)含量,同时计算肝脏和胰腺质量指数;采用免疫组织化学的方法检测大鼠肝脏中NF-κB,TNF-α含量。结果:黄连解毒汤高剂量组能显著降低大鼠血清中CHO,TG,LDLC含量,各剂量组均升高HDLC含量,明显降低胰腺的质量指数;大鼠肝脏NF-κB,TNF-α的表达明显低于模型组。结论:黄连解毒汤对高脂饮食加小剂量STZ所致糖尿病大鼠有一定的治疗作用,其机制可能是通过调节NF-κB,TNF-α蛋白的表达,从而抑制了炎症信号的通路。     

绞股蓝总皂苷调节NF-κB信号通路改善糖尿病大鼠胰岛素敏感性的实验研究

该文主要研究绞股蓝总皂苷(GPS)对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素敏感性及炎性因子的影响,并探讨其可能的分子机制。T2DM模型造模成功后,将大鼠随机分为模型组,GPS高、低剂量组(200、100 mg·kg~(-1)),盐酸二甲双胍组(100 mg·kg~(-1)),另设健康大鼠为对照组。各组大鼠灌胃给药6周,检测空腹血糖、口服糖耐量,ELISA法检测血清胰岛素、C-肽、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)的释放,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI)。Western blot法检测骨骼肌中磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和脂肪组织中磷酸化核因子-κB(NF-κB)抑制因子激酶β(p-IKKβ)、磷酸化NF-κB抑制因子α(p-IκBα)、磷酸化NF-κB p65(p-p65)的蛋白水平。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测骨骼肌中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和脂肪组织中NF-κB mRNA的相对表达量,并观察胰腺组织的病理学变化。结果显示,与模型组相比,GPS各剂量组大鼠血糖水平显著降低,口服糖耐量异常明显改善,ISI显著提高;GPS高剂量组明显降低HOMA-IR,减少炎性因子TNF-α、IL-1β和CRP的释放,升高p-IRS-1(Tyr)、p-Akt和GLUT4的相对表达,降低p-IRS-1(Ser)、p-IKKβ、p-IκBα、p-p65和NF-κB的相对表达;GPS低剂量组显著降低大鼠炎性因子CRP的释放及p-IRS-1(Ser)、p-IKKβ、p-IκBα和NF-κB的相对表达;然而,GPS各剂量组对血清胰岛素、C-肽、IL-6水平及胰岛细胞的损伤均无显著影响。结果表明GPS能降低糖尿病大鼠血糖,改善胰岛素敏感性,其机制可能是通过调控NF-κB信号通路,抑制炎症反应,进而调控胰岛素信号通路关键蛋白的表达。