胃癌端粒酶表达及预后的研究

目的:研究胃癌组织和癌旁组织端粒酶活性表达的意义及其与预后的关系。方法:应用RT-PCR技术检测80例胃癌和癌旁组织(距癌组织约5厘米,病理切片无癌组织残留)及20例经內镜及病理证实为浅表性胃炎的胃组织的端罜富钚?结果:在80例胃癌组织中端粒酶活性表达为82.5%(66例),癌旁组织端粒酶活性表达为12.5%(10例)。20例浅表性胃炎组织中未发现端粒酶阳性表达。癌组织端粒酶活性与胃癌TNM分期,病理分化程度、淋巴结转移及预后有显著相关性。癌旁组织端粒酶活性与肿瘤术后复发有。.结论:端粒酶活性与胃癌的发生,发展密切相关,检测端粒酶活性可为胃癌术后早期复发提供参考依据。     

抑癌基因DKK-1在胃癌组织中的表达水平及其临床意义

目的：探讨抑癌基因DKK-1在胃癌组织及癌旁粘膜中的表达水平及其临床意义。方法：采用Western检测26例胃癌组织及癌旁粘膜中DKK-1蛋白的表达,结合临床资料探讨其在胃癌辅助诊断中的价值。结果：胃癌组织和癌旁组织中抑癌基因DKK-1的表达水平都显著低于正常胃组织（P〈0．05）。结论：抑癌基因DKK-1在胃癌的发生发展上可能有重要意义,其可能成为的一种新的肿瘤标志物用于胃癌诊断。     

HSF2基因在肺癌中的表达意义

目的:检测肺癌组织中HSF2基因的表达和意义。方法:分别采用Western blot和RT-q PCR技术,检测50例肺癌组织及其对应癌旁组织中HSF2基因蛋白质和mRNA变化。结果:50例肺癌患者组织及其正常癌旁组织对比,38例的蛋白质水平明显升高(P0.05),而正常肺组织中HSF2基因的mRNA缺失率达80%,正常组织中HSF2基因表达明显低于肺癌组织(P0.05)。不同年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、组织类型中HSF2基因表达无显著差异。结论:肺癌中HSF2基因表达水平的升高,暗示HSF2基因在肺癌的发生发展中起一定作用。     

原发性肝癌间质胶原酶基因表达的研究

目的：了解原发性肝癌患者间质胶原酶基因表达的情况。方法：33例原发性肝细胞癌患者术中取癌组织及癌旁组织；提取组织总RNA；用逆转录共扩增定量PCR方法测定间质胶原酶(MMP1)基因表达水平。结果：肝癌组织间质胶原酶基因表达水平明显高于癌旁的肝硬化组织及正常肝组织。肝癌患者MMP1基因表达水平与血清AFP浓度、肿瘤大小无关。结论：问质胶原酶在原发性肝癌的进展中可能起重要作用。     

益肺方对人肺癌A549细胞肿瘤相关生物学通路基因表达的影响

目的:通过PCR基因芯片检测益肺方对人肺癌A549细胞在肿瘤相关生物学通路基因的差异表达,分析其诱发基因谱改变的特征生物学通路,探讨其抗肿瘤作用的分子机制。方法:分别于对照组及实验组A549细胞中提取RNA,反转录成cDNA,以此为模板,应用美国Super Array公司人癌通路发现者PCR基因芯片,进行实时定量PCR反应,检测2组基因表达水平的差异。结果:两组比较在检测的89个基因中发现有8条基因表达水平显著上调,22条基因表达水平显著下调。差异表达基因主要与血管生成、细胞凋亡和细胞衰老、侵袭转移、信号传导等有关。结论:益肺方通过调控血管生成、细胞凋亡和细胞衰老、侵袭转移、信号传导等肿瘤相关生物学通路的基因表达水平,从而抑制人肺癌细胞生长,可能是益肺方抗肺癌作用的主要分子机制。     

PD-L1在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨程序性死亡分子配体1(PD-L1)在胃癌组织中的表达情况及其临床意义。方法选取2018年6月—2019年6月在河北医科大学第四医院住院实施胃癌根治术患者60例,手术过程中获取胃癌组织及癌旁组织,采用RT-qPCR及Western blot法检测结胃癌组织及癌旁组织中PD-L1 mRNA及蛋白表达水平,并分析PD-L1与患者临床病理特征之间的关系。结果胃癌组织中PD-L1 mRNA及蛋白表达水平均明显高于癌旁组织(P均0.05);PD-L1阳性表达与患者性别、年龄、血清癌胚抗原水平及肿瘤分化程度无明显关系(P均0.05);而与肿瘤TNM分期、浸润程度、有无淋巴结转移及有无脉管瘤栓有明显关系(P均0.05)。结论 PD-L1在胃癌组织中高表达,其高表达与肿瘤进展有较强的相关性。     

大黄素对人高转移卵巢癌细胞中癌相关基因表达的影响

目的探讨大黄素对人高转移卵巢癌抗肿瘤的可能作用机制。方法应用肿瘤基因芯片检测大黄素(40μmol/L)对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞中癌相关基因表达的影响,并且实时定量PCR和Western blotting进行验证。结果共筛选出表达差异基因69个,其中33个基因表达水平上调,36个基因表达水平下调,涉及细胞凋亡、细胞周期、细胞生长与分化、细胞运动、信号转导、基因转录和细胞代谢等7大类相关基因。结论基因芯片结果提示大黄素抗肿瘤作用可能与转化生长因子-β(TGF-β)信号转导通路密切相关。     

乳腺癌耐药蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及意义

目的:探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及其与患者临床病理学特征的关系。方法:选取78例乳腺浸润性导管癌手术患者作为观察组;选取78例癌旁(距癌组织边缘≥5cm)乳腺组织正常的乳腺癌患者作为对照组。观察组取癌细胞制成石蜡标本组织切片,对照组取癌旁正常乳腺组织制成石蜡标本组织切片,通过免疫组化(SP)法检测两组BCRP的表达情况,探讨BCRP阳性表达与临床病理学参数的关系,并分析影响乳腺浸润性导管癌患者生存时间的主要因素。结果:观察组BCRP阳性率为53.8%(42/78),明显高于对照组的11.5%(9/78);42例乳腺浸润性导管癌患者中,BCRP表达与肿瘤TNM分期、淋巴结转移、人类表皮生长因子受体2相关,差异均有统计学意义(P<0.05);与年龄、肿瘤大小、雌激素受体、孕激素受体无明显相关性,差异均无统计学意义(P>0.05)。乳腺浸润性导管癌患者生存时间与临床分期、肿物大小、淋巴结转移有关,且临床分期、肿物大小、淋巴结转移相比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。临床分期是影响患者生存时间的主要因素。结论:BCRP在乳腺浸润性导管癌中的表达均高于正常乳腺组织,提示BCRP可能是一种能预测乳腺癌侵袭性、生物学行为、判断化疗效果和预后的指标。     

血管内皮生长因子C和黏蛋白1的表达与胃癌侵袭转移的关系

目的探讨胃癌中血管内皮生长因子C(VEGF-C)和黏蛋白1(MUC1)的表达与胃癌侵袭和淋巴结转移的关系。方法采用SP免疫组化技术,分别检测207例胃癌组织、癌旁组织、区域淋巴结及40例正常胃黏膜组织中VEGF-C及MUC1的表达水平。同时应用间接免疫荧光法检测VEGF-C和MUC1在正常胃黏膜细胞系(GES-1)、胃高分化腺癌细胞系(N87)、胃低分化腺癌细胞系(BGC-823)的表达和定位。结果 VEGF-C和MUC1在胃癌组织中的阳性表达率明显高于正常胃黏膜及癌旁组织;在区域淋巴结癌转移组中的阳性表达率明显高于无癌转移组(P<0.01);伴有淋巴结转移的胃癌组织中VEGF-C,MUC1的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组织(P均<0.01);VEGF-C及MUC1表达与淋巴结转移、浸润深度、TNM分期及分化程度有密切关系(P均<0.01),而与患者年龄、性别、肿瘤大小无关(P均>0.05)。VEGF-C及MUC1在正常胃黏膜细胞系、高分化胃癌细胞系、低分化胃癌细胞系的表达有显著性差异(P均<0.01)。结论 VEGF-C和MUC1的表达可作为评估胃癌患者转移与复发的一个观测指标。     

消癌解毒方对H22荷瘤小鼠基因表达谱的影响

目的 通过对H22荷瘤小鼠肿瘤组织基因表达谱的检测,探讨消癌解毒方抗肿瘤的作用机制。方法 H22荷瘤小鼠随机分为空白对照组,消癌解毒方低、中、高剂量组和顺铂组。应用基因芯片技术,检测各组H22荷瘤小鼠肿瘤组织的差异表达基因;应用pathway分析,找出与消癌解毒方抗癌机制相关的信号通路和基因,并针对趋化因子信号通路进行分析。结果 消癌解毒方能显著影响多个与肿瘤生长、凋亡和免疫相关的信号通路,并能下调趋化因子信号通路中CCL3、CXCL2等基因的表达。结论 消癌解毒方可能通过影响趋化因子信号通路中的某些基因的表达来发挥抗肿瘤生长和侵袭的作用。     

基于基因芯片研究萝卜硫素对大鼠胃癌组织基因表达的影响

目的:研究萝卜硫素对大鼠胃癌组织中相关基因表达的影响。方法:对萝卜硫素组大鼠灌胃50 mg/kg萝卜硫素,胃癌组大鼠腹腔注射同体积生理盐水,采用基因芯片筛选出萝卜硫素诱导表达差异的基因,利用Real-time PCR方法检测胰岛素样生长因子结合蛋白3(insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP3)、神经纤维蛋白1(Neuropilin-1)、雄性性别决定基因相关高迁移率族盒基因(sex-determining regio of Y chromosome related high-mobility-group box 4,SOX4)、N-myc下游调节基因1(NDRG1)4个基因水平;Western Blot方法检测IGFBP3、NDRG1、SOX4和Neuropilin-1蛋白表达水平。结果:经萝卜硫素治疗后大鼠胃癌组织表达上升的基因为159个(差异倍数2.0),表达下降的基因有67个(差异倍数0.5)。这些基因主要参与免疫调节、抗氧化、抗炎、介导细胞增殖及凋亡等生物过程。Real-time PCR发现IGFBP3和NDRG1基因表达明显上调,SOX4和Neuropilin-1基因表达明显下调(P0.05),结果与基因芯片一致。Western Blot实验证实萝卜硫素治疗后仅IGFBP3蛋白表达升高(P0.05),其他3种蛋白表达没有显著差异(P0.05)。结论:基因芯片与Real-time PCR技术相结合可找出萝卜硫素处理后的差异表达基因,可为探讨萝卜硫素抑制胃癌的作用机制提供依据。     

胃癌组织EZH2与凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的关系及意义

目的探讨胃癌组织中果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)、Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达关系及其临床意义。方法收集62例胃癌手术患者的肿瘤及52例癌旁正常胃黏膜组织石蜡标本进行免疫组织化学(SP)染色,同时检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白的表达,相关分析探讨EZH2与这3种蛋白质之间的关系及意义。结果胃癌组织中EZH2、Bcl-2表达与癌旁正常组织比较明显增强(P均0.05),Caspase-3、Bax蛋白在胃癌组织中表达较癌旁组织明显降低(P均0.05);EZH2蛋白表达随肿瘤分化程度降低而升高、随分期的升高而升高;相关分析显示,EZH2与Caspase-3、Bcl-2与Bax表达存在负相关关系(P均0.05);其余蛋白之间表达无明显相关性(P0.05)。结论 EZH2蛋白在胃癌组织中表达增强,且与肿瘤分化程度及分期有关;EZH2蛋白参与胃癌的发病机制在于其可能通过抑制Caspase-3表达而增强胃癌细胞抗凋亡能力。     

中药复方癌宁对人胃腺癌细胞凋亡基因表达的影响

目的:探索癌宁对体外人胃癌细胞基因表达的影响。方法:采用流式细胞术,检测了中药复方癌宁及顺铂诱导胃癌细胞凋亡基因的表达。结果:顺铂、癌宁组与空白对照比较,bcl-2、c-myc基因表达产物含量显著降低,p~(53)、bax基因表达产物含量显著增高(P<0.01),bax/bcl-2比值显著增高。结论:癌宁对人胃癌细胞的诱导凋亡作用与其对癌基因、抑癌基因表达的改变有关。     

化疗诱导胃癌上皮-间质转化的CAC1基因调控机制

目的:研究化疗诱导胃癌上皮-间质转化(EMT)的CAC1基因的相关调控机制,了解CAC1基因在胃癌细胞和组织中的表达情况。方法:选取来源于湛江市第一中医医院及广东医学院附属医院2016年8月至2017年2月选取的42例胃癌手术患者的癌组织、相关癌旁组织、正常组织为主要研究标本,对所有胃癌患者的标本进行测定,对测定结果进行回顾性分析。结果:胃癌细胞系和胃黏膜细胞系均检出CAC1表达,胃癌细胞系的CAC1表达水平明显高于胃黏膜细胞系,差异有统计学意义(P0.05);CAC1在胃癌组织中的表达水平高于周围正常组织,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:CAC1基因表达可对化疗诱导胃癌EMT产生影响,化疗诱导EMT过程中CAC1具有基础的调控性作用。     

寒热证候类风湿性关节炎患者外周血CD4+T淋巴细胞基因表达谱初步探索

目的:探讨类风湿性关节炎寒热证候的基因表达差异。方法:采集类风湿性关节炎寒热证候患者及正常人空腹静脉血,纯化得到CD4 T淋巴细胞,利用基因芯片检测和分析技术,探索类风湿性关节炎寒热证候患者及正常人CD4 T淋巴细胞基因表达差异点。结果:与正常人相比,类风湿性关节炎患者有149条基因异常表达,主要涉及免疫应答和信号传导;寒热证类风湿性关节炎患者之间有42条基因异常表达,只有2条与上述149条基因重复,主要涉及功能代谢、信号传导;寒热证类风湿性关节炎患者与正常人之间有49条基因异常表达,与上述42条之间有20条基因重复,也主要涉及功能代谢、信号传导;这些差异表达基因涉及多个生物学途径。结论:寒热证候类风湿性关节炎患者的基因表达谱存在差异,这种差异与类风湿性关节炎患者和正常人之间的差异有所不同,提示中医证候分类学具有基因表达谱依据。     

Tip30在肺腺癌患者中的表达及其与临床病理特征的关系

目的:探讨Tip30在肺腺癌患者中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法:选取2014年3月至2016年3月于中山市人民医院心胸外科住院的肺癌患者共66例,采用En Vision二步法免疫组化检测病理切片中Tip30的表达,观察Tip30在腺癌组及癌旁组表达差异,并比较Tip30的表达与患者临床病理特征的相关性。结果:对癌组织及癌旁组织进行染色后发现Tip30均可见表达,且其主要在细胞质中表达。癌旁组织的Tip30阳性率均高于癌组织,差异具有统计学意义(P0.05)。在肺癌组织中Tip30的表达与患者的性别、年龄、肿瘤的分化程度及是否吸烟均无明显相关,与患者是否合并淋巴结转移、远处转移有相关性,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:Tip30是一种抑癌基因,其表达下调与肿瘤的转移有相关性。     

胃癌组织中COX-2、NF-κB及VEGF的表达及与血管生成的关系

目的观察胃癌组织中环氧合酶-2(COX-2)、细胞核因子-κB(NF-κB)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况及与胃癌患者临床病理特征和胃癌组织中肿瘤血管新生的关系。方法采用免疫组织化学法检测69例胃癌患者癌组织及其中40患者癌旁组织中COX-2、NF-κB、VEGF表达情况,分析各指标与患者临床病理特征的关系;另以抗CD34抗体标记组织标本中的微血管内皮细胞,计算并比较COX-2、NF-κB、VEGF不同表达情况的胃癌患者微血管密度(MVD)。结果 COX-2及VEGF主要表达于细胞质及细胞膜中,而NF-κB主要表达于细胞核及细胞质中,且胃癌组织中COX-2、NF-κB、VEGF阳性着色更为明显;不同性别、年龄、肿瘤大小的胃癌患者胃癌组织中COX-2、NF-κB、VEGF阳性表达率比较差异均无统计学意义(P均0.05);淋巴结转移者COX-2、NF-κB阳性表达率显著高于淋巴结未转移者(P均0.05),而VEGF阳性表达率差异无统计学意义(P0.05);胃癌组织中COX-2、NF-κB、VEGF阳性表达者MVD均显著高于阴性表达者(P均0.05),且三者均阳性表达者MVD显著高于三者中任意一个阴性表达者(P0.05)。结论胃癌组织中COX-2、NF-κB、VEGF阳性表达率显著高于癌旁组织,三者均可明显促进胃癌组织中肿瘤血管新生。     

Galectin-9在食管鳞癌中的表达及与术后早期复发转移的关系

目的探讨半乳糖凝集素-9(Galectin-9)在食管鳞癌及癌旁组织中的表达情况及与食管鳞癌临床病理特征和术后早期(≤1年)复发转移的关系。方法采用RT-PCR和Western blotting方法检测89例食管鳞癌组织及15例癌旁组织中Galectin-9 mRNA和蛋白表达情况,并分析其与食管鳞癌患者的临床病理参数及术后早期复发转移之间的关系。结果食管鳞癌组织中Galectin-9 mRNA和蛋白表达水平均明显低于癌旁组织(P均<0.05);Galectin-9 mRNA和蛋白表达与肿瘤分化程度及淋巴转移密切相关(P均<0.05),而与性别、年龄、肿瘤长度、浸润深度、病理分期无关(P均>0.05),术后早期(≤1年)复发转移患者Galectin-9 mRNA和蛋白表达水平均明显低于未复发转移者(P均<0.05)。结论 Galectin-9表达缺失参与了食管癌的发生、发展,有可能成为判断食管鳞癌术后早期复发转移的参考指标。     

MiR-34a和CD44表达变化对胃癌干细胞生长及其转移的抑制作用

目的:研究胃癌形成过程中归巢细胞黏附分子(CD44)和MiR-34a的表达变化和两者的相互作用,探讨CD44和mir-34与胃癌的发展相关性。方法:通过实时定量聚合酶链式反应(PCR)和western blot检测胃癌细胞和组织中的CD44,利用基因芯片检测胃癌组织中的MiR-34a的表达,并进行实时时定量的PCR验证。结果:MiR-34a在胃癌组织中的表达量与正常癌旁组织相比有所下调(P0.01)。结论:MiR-34a能够抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭迁移,增加细胞凋亡率,可能起到抑癌作用,其表达水平与胃癌的发生发展密切相关。     

类风湿关节炎类风湿因子阴性和阳性寒热证候患者外周血CD4+T细胞基因差异表达研究

目的探讨类风湿因子阴性和阳性类风湿关节炎寒热证候患者外周血CD4^＋ T细胞的基因表达差异。方法采集类风湿关节炎寒热证候患者及健康人空腹静脉血,纯化得到CD^4＋T细胞,利用基因芯片检测和分析技术,探索类风湿因子阴性和阳性类风湿关节炎寒热证候患者CD^4＋T细胞基因表达差异点。结果类风湿因子阴性和阳性类风湿关节炎患者之间有55条基因表达存在显著性差异,主要涉及免疫应答和信号传导;类风湿因子阳性类风湿关节炎寒热证候患者之间有71条基因异常表达,主要涉及功能代谢和免疫应答;类风湿因子阴性类风湿关节炎寒热证候患者之间有70条基因异常表达,没有与上述类风湿因子阴性和阳性患者之间55条基因重复,与类风湿因子阳性寒热证候之间的71条基因只有2条基因重复,主要涉及功能代谢。结论类风湿关节炎患者类风湿因子阴性和阳性之间的基因表达谱差异与寒热证候之间的基因表达差异有所不同,提示中医证候分类学具有基因表达谱依据。