血管内皮舒张因子是否一氧化氮的探讨

血管内皮舒张因子(Endothelium-derived relaxing factor, EDRF)是血管内皮细胞产生释放的活性物质,它介导和决定许多舒血管活性物产生的舒张效应。已知硝基类扩血管药硝普钠(Sodium Nitroprusside,SNP)是通过形成一氧化氮(Nitric oxide, NO)而导致血管平滑肌产生舒张。有报导认为EDRF等同于NO。本文采用供受者双标本微量生物测定法,以SNP作为NO的供给源,通过比较EDRF与SNP舒张大鼠主动脉平滑肌的效应及其相互作用,以研究EDRF是否NO。结果发现:大鼠主动脉的内皮细胞在无活性物刺激时也能持续产生释放一种EDRF,即基础释放的EDRF(basal EDRF)。它可抑制NO的舒张效应,而NO作用于血管平滑肌后则可增强Ach激发的EDRF的舒张效应。可见,basal EDRF与NO的性质不相同,而激发的EDRF与NO的性质相似,EDRF与NO不能等同。为目前国际上这一争议提出了新的见解。     

不同肺通气条件下一氧化氮对肺血管调控作用的仿真研究

目的研究通气量变化时动脉-毛细血管-静脉血管中一氧化氮(nitric oxide, NO)浓度的变化情况以及NO对血管的动态调控机理。方法应用多物理场耦合分析软件COMSOL Multiphysics建立肺血管网络模型,引入NO对血管的动态调控机制,开展流场-物质浓度场耦合仿真,探究氧气与血流对肺血管网络中NO浓度及其分布的影响,以及通气不足情况下NO对肺血管的动态调节功能。结果氧浓度及血流会共同影响NO在肺血管网络中的分布。当肺通气不足时,进入肺部毛细血管的氧气量降低。静态条件下,肺静脉血管壁NO浓度明显降低;动态条件下,NO浓度降低会导致血管收缩,血管半径下降,使得NO浓度降低得到动态补偿。血管紧张度调控系数α直接影响NO的调控作用,α在一定范围内起作用,其值越高血管半径的变化越大,NO浓度变化越小,且α的有效取值范围大于1。结论研究结果揭示了通气量变化时动脉-毛细血管-静脉血管中NO浓度的变化情况以及NO对血管的动态调控机理,并预测α的有效取值范围,为进一步研究通气不足情况下由于血管收缩而使血管阻力发生变化进而影响血流量、调控通气灌注比的机制提供理论依据。     

超声联合对比剂对内皮祖细胞一氧化氮生成的影响

背景：已有动物实验证实超声联合对比剂能够显著增强骨髓干细胞心肌内归巢治疗心肌梗死,改善心功能。 目的：体外观察超声联合对比剂对内皮祖细胞一氧化氮生成及产生途径的影响。 方法：体外提取、分离和培养猪骨髓内皮祖细胞,随机分为对照组、超声组、超声对比剂组,干预后分别收集内皮祖细胞和上清液。采用硝酸还原法检测上清液一氧化氮水平,分光光度计检测内皮祖细胞一氧化氮合酶的相对活力。 结果与结论：超声对比剂组内皮祖细胞上清液一氧化氮表达、内皮祖细胞诱导型一氧化氮合酶和结构型一氧化氮合酶活力均较对照组显著增加(P < 0.05);超声组一氧化氮水平无明显改变,各型一氧化氮合酶活力较对照组有下降趋势,但差异无显著性意义(P > 0.05);超声联合对比剂作用下,L-精氨酸和双氧水可反应生成一氧化氮,较对照组明显增加,而单纯超声无此促进作用。提示超声联合对比剂作用显著增强内皮祖细胞各亚型一氧化氮合酶活性,并可能同时促进内皮祖细胞一氧化氮非酶合成途径,是其增效骨髓干细胞治疗心肌梗死的机制之一。     

吸烟对血管内皮依赖性舒张功能的影响

目的观察吸烟对血管内应依赖性舒张功能的影响,探讨吸烟对心血管危害的机制。方法采用 Ｃｅｌｅｒｍａｊｅｒ的方法,对ｓｌ例吸烟者和３５例正常对照者,分别在静息时、反应性充血后、舌下含硝酸甘油后测定肽动脉口径。测定各组受试者试验前后血浆ＮＯ、ＥＴ、ＰＧＩ;、ＴｘＢ;浓度。结果肽动脉ＦＭＤ（ｎｏｗ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄｉｌａｔａｔｉｏｎ,内皮依赖性舒张）,正常组明显高于吸烟组,分别为（１０．１２％,８．２４％,７．１５％,６．１４％,４．０２％）,血浆ＮＯ、ＰＧＩ;正常组明显高于吸烟组,而血浆ＥＴ、ＴＸＢ;正常组明显低于吸烟组。结论香烟的毒性成分能直接损害血管内皮细胞,导致内皮功能失调。吸烟引起血管内皮舒张功能障碍可能与ＮＯ、ＰＧＩ;减少,内皮素、ＴＸＢ２增多致血管异常收缩有关。     

外源性一氧化氮对肺动脉血管平滑肌细胞血红素氧化酶—1／一氧化碳的影响

目的观察外源性一氧化氮(NO)供体-SIN-l(3-morpholinosydnonimine,SIN-1)对肺动脉血管平滑肌细胞(pulmonaryarterysmoothmusclecell,PASMC)血红素氧化酶1(hemeoxygenase-l,HO-1)/一氧化碳(CO)信号系统的影响.方法采用贴块法培养大鼠PASMC.分别以终浓度为0.1mmol、0.5mmol和1.0mmol的SIN-l与PASMC孵育4h,以1.0mmol的SIN-1分别孵育1h、2h、4h、8h和16h.应用RT-PCR检测HO-lmRNA表达,应用免疫组化法检测HO-l和AP-l两个亚单位c-fos和c-jun的表达,测定培养基中CO水平.结果0.1mmol、0.5mmol和1.0mmol的SIN-1孵育4h、1.0mmol的SIN-l孵育1h、2h、4h、8h和16h使PASMCHO-1mRNA和蛋白表达、培养基中CO水平呈时间和剂量依赖性增加,1.0mmol的SIN-l使PASMCAP-1蛋白表达在8h内显著增强.讨论目前,CO和NO之间的相互关系已成为新的研究热点,二者之间的协调关系对于维持机体正常的血管张力及充足的血液供应具有重要的生理及病理生理意义.本实验通过对不同浓度NO供体-SIN-1作用不同时间后PASMC的CO和HO-l变化的观察,发现NO可呈剂量及时间依赖方式使PASMC的HO-l表达及HO酶活性增强、CO产生增多,表明NO是PASMCHO-l表达的强诱生剂.通过对PASMCAP-l的两个亚单位c-fos和c-jun的免疫组化检测显示,给予NO供体后其阳性染色明显增强,提示AP-l可能参与了NO对HO-1基因调控的信号转导过程.结论外源性NO可使PASMCHO-1表达以及CO的产生增多,核因子AP-1可能参与了NO对HO-l调控的信号转导过程.     

血管外膜源性舒张因子的作用机制

目的： 验证血管外周脂肪组织释放血管外膜源性舒张因子(ADRF)，并对ADRF的作用机制做初步探讨。方法：检测WKY大鼠带完整血管外周脂肪组织的血管环和不带血管外周脂肪组织的裸血管环的收缩力；并用液体转移方法鉴证血管外周脂肪组织释放ADRF，使用工具药对ADRF作用途径进行观察。结果：与配对裸血管相比，带完整血管外周脂肪组织的胸主动脉在苯肾上腺素(PHE,10-6 mol/L)诱发的血管收缩力下降20.5%；把孵育带完整血管外周脂肪组织的胸主动脉的生理池液体转移到配对裸血管，引起裸血管舒张20.8%；在无钙液中，有无血管外周脂肪组织的血管之间PHE诱发的收缩力无区别；钙激活的钾通道 (K_Ca)阻断剂四乙胺和ATP敏感性钾通道（K_ATP）阻断剂格列苯脲均有效阻断ADRF的血管舒张作用。结论：血管外周脂肪组织释放一种引起血管舒张的ADRF，ADRF通过激活K_Ca、K_ATP发挥作用，且需钙离子参与。     

局部冷冻对血管及机体合成一氧化氮的影响

目的:本实验通过对在体家兔动脉及心脏局部冷冻,观察冷冻对血管合成一氧化氮功能的影响,以及机体对冷冻的全身性反应的有关征象。方法:以家兔作为实验对象,随机分成对照组和冷冻组,以Ignarro和Green法测定血管壁的NO_2~-含量,以Shechter法测定NO_2~-浓度,在实验中分别测定冷冻前后血管壁和血液中心NO_2~-浓度。结果:①主动脉及股动脉壁冷冻10秒复温后随时间的延长动脉管壁NO_2~-含量逐渐升高。②对主动脉管壁冷冻2分钟后可见主动脉管壁NO_2~-含量明显下降。③对主动脉壁冷冻10秒钟后,血液中的NO_2~-含量未见明显变化。①对心脏心外膜冷冻10秒钟后血液中NO_2~-含量未见明显变化。结论:血管壁的冷冻对血管合成一氧化氮(NO)的功能影响较大,当冷冻时间较短时,血管壁合成NO的量随时间延长而增多。但是,随首冷冻时间增加,血管壁合成NO的量减少,由此可造成不良的后果。     

一氧化氮治疗仪混合气体均匀性的有限元分析

目的 通过计算流体动力学(computational fluid dynamic, CFD)方法研究一氧化氮治疗仪中气体混合装置内压、预设的NO输出浓度以及输入气体流速对混合气体均匀性的影响,从而为一氧化氮治疗仪的使用安全性评估提供参考价值。方法 首先通过分析一氧化氮治疗仪的工作原理、工作参数和气体混合装置结构设置7组不同参数的算例,然后对气体混合装置模型进行网格划分、网格无关性验证、数值计算方法的选择以及控制方程的介绍,最后引出气体混合均匀度量化方法并利用FLUENT软件对各组算例进行有限元仿真。结果 根据FLUENT软件导出各组算例的气体浓度分布云图,通过气体混合均匀度量化公式计算出的第1～7组算例所对应的气体混合均匀度依次为91.62%、92.75%、93.09%、92.53%、94.21%、93.98%、97.75%。结论 在一氧化氮治疗仪中气体混合装置内压和预设的NO输出浓度对混合气体均匀性的影响较为微弱,而输入气体流速对一氧化氮治疗仪混合气体均匀性影响较为显著。该研究可为一氧化氮治疗仪的安全使用提供技术性参考。     

听源性惊厥易感性大鼠上丘一氧化氮合酶阳性神经成分的分布

用还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶，简称黄递酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组织化学的方法，在光镜下对ＮＡＤＰＨ－ｄ反应阳性细胞进行计数和计算机图像分析测定反应产物的光密度（ＯＤ）值，观察一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经元及纤维在惊厥鼠上丘分布的情况。实验动物为听源性惊厥易感性大鼠，简称惊厥鼠（Ｐ７７ＰＭＣ）和正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠，简称正常鼠。实验结果如下：（１）在大鼠上丘第Ⅱ层ＮＯＳ阳性神经元呈密集均匀分     

高血糖症对大鼠血管内皮舒张功能的影响

目的：复制高血糖症动物模型，研究高糖对大鼠血管内皮舒张功能的影响及其机制。方法：采用血管功能检测、组织培养及放射免疫分析方法。结果：①高血糖组血管乙酰胆硷依赖性血管舒张反应明显降低（Ｐ＜００１）；②高血糖组血浆ＮＯ－２含量、主动脉一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）活性及环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）含量明显低于对照组（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１）。结论：长期高血糖症可引起血管内皮源性血管舒张因子／一氧化氮（ＥＤＲＦ／ＮＯ）系统出现严重障碍，从而降低了血管舒张功能     

低氧诱导肺血管平滑肌细胞诱生型一氧化氮合酶基因表达

本研究采用原位杂交、免疫组织化学、酶组织化学染色方法从三个层次分别证明低氧诱导大鼠肺血管中膜平滑肌细胞一氧化氮合酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅＳｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）的基因和蛋白表达，并使中膜平滑肌细胞具有ＮＯＳ活性；离体培养的肺动脉平滑肌细胞实验也证明低氧使肺动脉平滑肌细胞ＮＯＳ活性增加，ＮＯ生成增多。提示诱生型ＮＯＳ基因可能是一种低氧诱导基因，低氧诱导ＮＯＳ表达可能是细胞感受低氧的一种重要机制。     

Elevated Nitric Oxide Concentration in the Seminal Plasma of Infertile Males: Nitric Oxide Inhibits Sperm Motility

PROBLEM: To evaluate the “effect of nitric oxide in the seminal plasma on sperm motility. METHOD: Seminal plasma concentrations of NO₂^—, a stable end product of nitric oxide, of 108 males of infertile couples and 15 proven fertile donors were measured and compared with spermatogram parameters. Motile sperm was incubated with a nitric oxide-generating drug, sodium nitroprusside, for 6 hr in the absence or presence of oxyhemoglobin, an inhibitor of nitric oxide. RESULTS: The NO₂^— concentration in the seminal plasma was 6.58±0.56 μM in 26 infertile males with leukocytospermia, 5.51±0.25 μM in 82 infertile males without leukocytospermia, and 3.91±0.16 μM in 15 controls. There was a significant correlation between the NO₂^— concentration and sperm motility. Sodium nitroprusside reduced the sperm motility in a dose- and time-dependent manner and its reduction was completely inhibited by the addition of oxyhemoglobin. CONCLUSION: These findings indicate that nitric oxide concentration in the seminal plasma of infertile males is elevated and that nitric oxide is an inhibitor of sperm motion.     

低剂量γ射线辐照对血清一氧化氮及一氧化氮合酶水平的影响

目的：观察低剂量γ射线照射人离体外周血对血清中一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）水平的影响。方法：采集10份健康献血员全血，肝素抗凝，然后采用γ射线照射，照射剂量率为17Gy／min，总吸收剂量为1Gy，分别于照射前及照射后1h，2h采用分光光度法检测血清中NO含量和NOS活性。结果：经γ射线照射1h后，血清中NO及NOS水平与照射前比较明显升高（P〈0.01）；照射后2h，血清中NOS水平与照射后1h比较无统计学差异（P〉0、05），但是还明显高于照射前的水平（P〈0．01）；在照射后2h，血清中NO含量与照射后1h比较明显降低（P〈0.01），但仍明显高于照射前水平（P〈0．01）。结论：采用剂量为1Gy的γ射线照射外周血，可引起血清中NO水平及NOS活性的显著升高．从而为低剂量辐照自体血回输对肿瘤的辅助治疗提供了理论支持。     

被动吸烟对大鼠脑组织iNOS表达的影响

目的　研究被动吸烟大鼠脑组织诱发型一氧化氮合酶 (iNOS)的变化 ,探讨iNOS在吸烟导致脑损伤中的作用机制。方法　制备被动吸烟大鼠模型 ,采用免疫组织化学ABC方法检测脑组织iNOS表达 ,应用光镜、透射电镜观察海马神经元的病理改变。结果　正常对照组大鼠大脑皮层、海马、纹状体均有少量iN OS表达 ,短期吸烟组与正常对照组比较有显著差异 (P <0 0 1) ,长期小量或大量吸烟组 (3个月 )各脑区iN OS表达显著高于正常对照组和短期吸烟组 (P<0 0 1)。长期大量吸烟组可见海马神经元变性改变。结论　吸烟可使脑组织iNOS活化表达增强生成过多的NO造成脑神经细胞毒性损伤 ,存在量效、时效关系。     

强迫游泳对小鼠脑内一氧化氮及一氧化氮合酶的影响研究

目的 :探讨应激对小鼠脑内一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (NOS)的影响及意义。方法 :将 6 0只雄性昆明品系小鼠随机分为 3组。其中对照组 2 0只 ,强迫游泳分 2组各 2 0只。分别于强迫游泳 (实验组 )后 1h (一组 )、 2h (二组 )取脑组织检测NO含量及NOS活性。结果 :对照组NO及NOS分别为 2 7 4 7± 15 16 μmol/gprot、 2 16± 0 5 3U/mgprot。实验一组为 17 83± 5 6 3μmpl/gprot、 2 76± 0 87U/mgprot ;实验二组为 11 38± 1 2 2 μmpl/gprot、 3 2 9± 0 4 1U/mgprot。急性应激后 1hNO水平降低并有统计学意义 (t =2 6 7,P <0 0 5 ) ;2h后进一步降低 (t=5 0 5 ,P <0 0 1)。急性应激后 1hNOS活性增高并有统计学意义 (t =-2 4 2 ,P<0 0 5 )。应激后NO与NOS变化呈显著性负相关 (r=-0 316 ,P <0 0 5 )。结论 :神经递质NO及NOS参与了中枢神经急性应激反应 ,且NO水平降低、NOS活性增高。     

病毒性肝炎中一氧化氮合酶调节的分子生物学机制

研究发现一氧化氮(NO)参与肝细胞的多项生理功能的调节,参与各种肝病的病理过程。一氧化氮具有潜在的抗病毒活性,一氧化氮合酶(NOs)作为产生一氧化氮的限速酶,不但参与一氧化氮的生成,还与一氧化氮的各种生理功能密切相关。了解与阐明肝细胞中一氧化氮合酶的分子生物学作用调节机制,有利于揭示病毒性肝炎的发病机理     

呼出气一氧化氮浓度检测在儿童咳嗽变异性哮喘中的应用

目的 探讨FeNO检测在儿童咳嗽变异性哮喘中的临床价值。方法 选择2016年3月~2017年3月在我院确诊为CVA的患儿80例及健康儿童40例作为研究对象,比较两组儿童FeNO水平,比较FeNO正常的CVA患儿与FeNO升高患儿的皮肤点刺结果、肺功能,分析CVA患儿FeNO水平与肺功能的相关性。结果 CVA患儿FeNO水平高于健康儿童,差异有统计学意义（P＜0.05）。同FeNO正常的CVA患儿相比,FeNO升高的CVA患儿拥有更高的体重指数,皮肤点刺阳性率更高,强度更强,差异有统计学意义（P＜0.05）,但两组患儿肺功能无统计学差异,CVA患儿FeNO水平与肺功能无相关性（P＞0.05）。结论 FeNO可以辅助诊断CVA,但不能作为评估病情严重程度的指标。     

一氧化氮在脂多糖抑制血管平滑肌细胞增殖中的作用

本研究采用MTT 法,3 H-TdR 掺入实验、分光光度计测量和免疫组织化学的方法,观察了脂多糖对离体培养SD 大鼠血管平滑肌细胞殖增、DNA 合成、一氧化氮产量和一氧化氮合酶表达的影响。结果发现,脂多糖可明显抑制血管平滑肌细胞的增殖和DNA 合成,推测该效应可能是通过iNOS-NO-cGMP 通路实现的。     

重组促红细胞生成素对血透患者NO的影响研究

目的 :探讨基因重组促红细胞生成素 (rHuEpo)对维持性血透患者血管活性介质一氧化氮 (NO)的影响。方法 :将长期规律性血透尿毒症患者 80例分为血液透析应用rHuEpo者 (HDepo组n =4 3例 ) ,血液透析不应用rHuEpo者 (HD组n =37例 ) ,根据血压情况两组再分为HDepo高血压亚组 (HDepo - 1组 ,n =2 3)、HDe po血压正常亚组 (HDepo - 2组 ,n =2 0 )和HD高血压亚组 (HD - 1组 ,n =19)、HD血压正常亚组 (HD - 2组 ,n =18)。另选尿毒症未透析患者 2 0例 (NHD组 )、原发性高血压患者 2 0例、健康对照组 35例 (CON组 )。HDepo组患者均接受rHuEpo治疗 3个月以上 ,用比色法测定血NO水平。结果 :尿毒症未透析患者血清NO水平明显高于正常对照组 ,p <0 0 0 1;尿毒症透析患者血清NO浓度较正常对照组高 ,p <0 0 0 1,但经透析治疗的尿毒症患者与尿毒症未透析者比较 ,血清NO水平较未透析者低 ,p <0 0 5 ;HDepo组经rHuEpo治疗三月后血NO浓度下降 ,与用药前及对照组比较 ,p<0 0 0 1,p <0 0 5。且用rHuEpo治疗后 ,HDepo组收缩压、舒张压、平均动脉压均较HD组高 ,p <0 0 0 1,血压增高与NO浓度的降低有相关性。结论 :rHuEpo可使尿毒症透析患者血NO浓度降低 ,rHuEpo致高血压与血NO浓度降低有一定的关系     

原发性高血压患者血清NO、NOS及其亚型水平的分析

目的:测定原发性高血压患者外周血中血清一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及其亚型水平,探讨NO/NOS系统参与血压调节的可能机制.方法:原发性高血压患者135例,正常对照组35例.采用化学法检测所有病例外周血的一氧化氮(NO)、总NOS、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和结构型一氧化氮合酶(cNOS)水平并作统计学分析.结果:高血压组NO、NOS、iNOS和cNOS水平均低于正常对照组,且差异具有显著性意义(分别为:P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01);iNOS/cNOS比值与正常对照组相比无显著差异(P＞0.05);对照组和高血压组的NOS浓度与iNOS和cNOS浓度均呈显著正相关;高血压组的cNOS水平与iNOS水平呈显著负相关.结论:高血压患者NO、NOS及其亚型浓度值可以作为临床评估高血压的参考指标;iNOS在正常人体内有表达;在高血压情况下,机体有通过增加iNOS的表达来弥补cNOS水平的病理性降低、调控NOS总体水平从而调节和平衡血压的趋势.