乙型肝炎病毒cccDNA与HBx蛋白在肝细胞性肝癌中表达的关系及意义

目的:探讨肝细胞性肝癌中乙型肝炎病毒(HBV)occDNA与HBx蛋白表达的关系及其意义.方法:取42例肝细胞性肝癌患者的癌和癌旁组织,采用SABC法检测组织中的HBx蛋白;采用RT-PCR法检测组织中的HBV CCCDNA水平.结果:HBx蛋白在癌及癌旁组织中的阳性例数分别为31例(73.8%)和35例(83.3%),无显著性差异;癌旁组织中cccDNA水平较癌组织中的高,但是统计学检验无显著性差异;癌组织和癌旁组织中HBx蛋白(+)者的cccDNA水平均明显高于HBx蛋白(-)者(P＜0.05).HBx蛋白表达与cccDNA水平呈正相关(r=0.778,P＜0.01).结论:HBx蛋白的表达与cccDNA水平明显相关,他们相互作用、相互影响并在肝癌的发生发展中起重要作用.     

HSF1与Beclin1在胰腺癌组织中相关性表达及其与患者预后的关系

目的 探讨热休克转录因子(HSF)1和Beclin1在胰腺癌组织中相关性表达及其与患者预后的关系。方法 观察新鲜及石蜡标本胰腺癌及癌旁组织HSF1和Beclin1 mRNA和蛋白表达情况，分析HSF1及Beclin1表达的相关性及两者对预测胰腺癌生存率的差异。结果 与癌旁组织和正常组织相比，癌组织中HSF1、Beclin1 mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.05)。磷酸化HSF1在胰腺癌中表达较多，在癌旁组织和正常组织中表达极少。石蜡标本胰腺癌组织中，总HSF1蛋白在癌组织中细胞质和细胞核均有表达，主要表达在细胞质，部分表达在细胞核，磷酸化HSF1部分表达在细胞质，有较多表达在细胞核。在石蜡标本癌旁组织和正常组织中，总HSF1主要表达在细胞质，而细胞核中表达较少，细胞质和细胞核中磷酸化HSF1表达极少。HSF1、Beclin1蛋白水平在不同分化程度的癌组织中表达趋势为高分化组<中分化组<低分化组，在不同TNM分期癌组织中表达趋势为Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期<Ⅳ期。HSF1与Beclin1蛋白水平与分化级别、TNM分期、是否远处转移及淋巴结转移明显相关(P&...     

Beclin1和NF-κB p65在肝癌中的表达及其临床意义

目的: 分析自噬基因Beclin1和核因子NF-kappaB(nuclear factor-kappaB, NF-kappaB)在原发性肝细胞性肝癌(primary human hepatocellular carcinoma, HCC)中的表达及其临床意义. 方法: 收集顺德第一人民医院2003-01/2007-12手术切除经病理学证实的HCC50例, 肝炎后肝硬化手术切除或活检标本30例, 肝炎患者肝脏穿刺组织30例和正常肝组织10例. 应用免疫组化S-P法检测肝脏组织中Beclin1和NF-kappaB p65蛋白的表达. 结果: 原发性肝细胞性肝癌、肝硬化、肝炎和正常肝组织的Beclin1蛋白阳性表达率分别是78.00%(39/50)、26.67%(8/30)、53.33%(16/30)、10.00%(1/10), 四者之间的差异有统计学意义(chi2 = 28.31, P<0.05), 且Beclin1在原发性肝细胞性肝癌组织表达明显高于在肝硬化组织, 肝炎组织, 正常肝组织中的表达(chi2 = 20.39, 5.31, 14.41, P<0.05); 在肝炎组织表达明显高于在肝硬化组织, 正常肝组织中的表达(chi2 = 4.44, chi2 = 4.12, P<0.05). 原发性肝细胞性肝癌、肝硬化、肝炎和正常肝组织的NF-kappaB p65蛋白阳性表达率分别是74.00%(37/50)、36.67%(11/30)、30.00%(9/30)、20.00%(2/10), 四者之间的差异有统计学意义(chi2 = 22.00, P<0.05), 且NF-kappaB p65在原发性肝细胞性肝癌组织表达明显高于在肝硬化组织, 肝炎组织, 正常肝组织中的表达(chi2 = 10.89, chi2 = 14.85, chi2 = 8.44, P<0.05). 结论: Beclin1和NF-kappaB p65在HCC中的表达关系密切, 呈正相关; Beclin1和NF-kappaB p65异常表达与HCC的发展密切相关, 在HCC的发展过程中起重要的作用.     

Beclin1在大鼠糖尿病溃疡创面组织中表达变化

目的 观察自噬相关蛋白(Beclin)1在糖尿病大鼠溃疡创面愈合中的变化，初步探讨Beclin1与糖尿病慢性创面愈合的关系。方法 SPF级Wistar雄性大鼠18只，随机分为对照组、模型组各9只。对照组建立常规创面模型，模型组建立糖尿病创面模型。两组分别于模型建立后第1天、第11天、第18天观察创面愈合情况、组织苏木素-伊红(HE)染色病理改变、Beclin1蛋白及其磷酸化水平、Beclin1基因表达。结果 对照组创面愈合效率、组织病理改善均优于模型组(P<0.05);对照组Beclin1、p-Beclin1蛋白及Beclin1 mRNA在创面愈合早期的表达高于模型组，而在愈合晚期的表达低于模型组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Beclin1在糖尿病慢性创面组织中低表达，可能是糖尿病溃疡创面愈合不良的机制之一。     

结肠癌组织中Beclin1及Bcl-2表达变化及意义

目的观察结肠癌组织中Beclin1、Bcl-2表达变化,探讨其意义。方法手术治疗的结肠癌患者97例,术中分别取肿瘤组织、癌旁组织、距离肿瘤边缘6 cm以上的正常结肠组织;免疫组化法检测各组织中的Beclin1、Bcl-2,分析二者与结肠癌临床病理参数的关系。结果结肠癌组织中Beclin1、Bcl-2的阳性表达率分别为80.4%、75.3%,癌旁组织分别为60.8%、64.9%,正常结肠组织分别为36.1%、26.8%;结肠癌组织Beclin1、Bcl-2阳性表达率均高于癌旁组织及正常结肠组织(P均<0.01)。Beclin1表达与结肠癌肿瘤浸润深度、肿瘤直径、TNM分期有关(P均<0.01);Bcl-2表达与结肠癌肿瘤直径、TNM分期有关(P均<0.05)。结肠癌组织中Beclin1、Bcl-2表达呈正相关(r=0.324,P<0.01)。结论 Beclin1、Bcl-2高表达与结肠癌的发生及恶性生长行为相关,可作为预后不良的判断指标。     

Beclin1和NF-κB p65在肝癌中的表达及其临床意义

目的:分析自噬基因Beclin1和核因子NF-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)在原发性肝细胞性肝癌(primary human hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其临床意义.方法:收集顺德第一人民医院2003-01/2007-12手术切除经病理学证实的HCC50例,肝炎后肝硬化手术切除或活检标本30例,肝炎患者肝脏穿刺组织30例和正常肝组织10例.应用免疫组化S-P法检测肝脏组织中Beclin1和NF-κB p65蛋白的表达.结果:原发性肝细胞性肝癌、肝硬化、肝炎和正常肝组织的BeClin1蛋白阳性表达率分别是78.00%(39/501、26.67%(8/30)、53.33%(16/30)、10.00%(1/10),四者之间的差异有统计学意义(χ2=28.31,P<0.05),且Beclinl在原发性肝细胞性肝癌组织表达明显高于在肝硬化组织,肝炎组织,正常肝组织中的表达(χ2=20.39,5.31,14.41,P<0.05);在肝炎组织表达明显高于在肝硬化组织.正常肝组织中的表达(χ2=4.44,χ2=4.12,P<0.05).原发性肝细胞性肝癌、肝硬化、肝炎和正常肝组织的NF-κB p65蛋白阳性表达率分别是74.00%(37/50)、36.67%(11/30)、30.00%(9/30)、20.00%(2/10),四者之间的差异有统计学意义(χ2=22.00,P<0.05),且NF-κB p65在原发性肝细胞性肝癌组织表达明显高于在肝硬化组织,肝炎组织,正常肝组织中的表达(χ2=10.89,χ2=14.85,χ2=8.44.P<0.05).结论:Beelin1和NF-κB p65在HCC中的表达关系密切,呈正相关;Beclin1和NF-κB p65异常表达与HCC的发展密切相关,在HCC的发展过程中起重要的作用.     

HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的探讨HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin在肝细胞肝癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测72例HBsAg阳性的肝细胞肝癌组织及癌旁组织中HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin的表达,并与临床病理资料做对照分析。结果HCC组织中HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin的阳性表达率分别为84.7%、80.6%、52.8%和45.8%,而癌旁组织的阳性表达率分别为81.9%、51.4%、70.8%和27.8%。除HBx外,后三种蛋白在肝癌组织及癌旁组织的表达差异均有显著性（P〈0.05）。HBx、Twist和N-cadherin的表达升高及E-cadherin表达下降分别与有无门脉癌栓和肝外是否转移相关（P〈0.05）;HBx的表达分别与Twist和N-cadherin的表达呈正相关（P〈0.05）;HBx、Twist和N-cadherin的表达则分别与E-cadherin的表达呈负相关（P〈0.05）。结论HBx、Twist和N-cadherin的高表达以及E-cadherin的低表达与肝癌的侵袭和转移有密切关系,HBx可能通过上调Twist而促进肝癌细胞的上皮—间质转化（EMT）改变。     

XAF1在人肝癌组织中表达及机制研究

目的 XIAP相关因子1(XIAP-associated factor 1,XAF1)可与XIAP直接结合并拮抗其抗凋亡作用.本文研究了XAF1在人体肝癌组织表达,同时探讨了XAF1可能的作用机制.方法 通过免疫组化方法检测了XAF1在人体肝癌组织中表达水平;建立稳定高表达XAF1的肝癌细胞克隆,通过基因芯片技术探讨了XAF1可能的作用机制.结果 XAF1在人肝癌组织中表达免疫组化实验结果提示,XAF1在人肝癌组织中的表达阳性率为0.56%±0.03%,在癌旁组织中的表达阳性率为5.1±0.023%,两组均值间差异有统计学意义(P＜0.05);基因芯片结果提示,7.03%的基因发生的改变有统计学意义.其中1.72%基因与细胞凋亡和细胞周期相关.在细胞凋亡和细胞周期相关基因中,41.9%与线粒体凋亡相关途径相关,可见XAF1可能通过线粒体内源性途径促进凋亡.结论 XAF1在人体肝癌组织中表达水平低于癌旁组织;其抑制凋亡反应可能是通过内源性途径机制实现,XAF1有可能成为肝癌基因治疗的新靶点.     

肝癌组织中自噬相关蛋白Beclin1、LC3、mTOR的表达及意义

目的探讨自噬相关基因Beclin1、微管相关蛋白1轻链(LC)3、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在肝癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学技术检测49例肝癌组织、38例正常肝组织的Beclin1、LC3和mTOR表达,并分析相关性及与临床病理因素的关系。结果 Beclin1、LC3和mTOR在肝癌组织中的阳性率明显高于正常肝组织(P0.05),且Beclin1与LC3的表达呈正相关(r=0.578,P0.01),LC3与mTOR的表达呈负相关(r=-0.403,P0.05),而Beclin1与mTOR的表达无关(r=-0.113,P0.05)。Beclin1、LC3和mTOR的表达均仅与病理分级和有无胆管癌栓有关(P0.05),与患者性别、年龄、肿瘤直径、HBSAg、AFP、分化程度、TNM分期、转移情况等均无关(P0.05)。结论肝癌组织中Beclin1、LC3和mT OR表达阳性率均高于正常肝组织。细胞自噬机制的变化可能是导致肝癌发生发展的重要原因。检测肝癌组织上述蛋白表达变化有助于诊断肝癌及判断患者病情。     

TRA1 mRNA在肝硬化及肝癌组织中表达的研究

目的探讨肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织、肝硬化(liver cirrhosis,LC)组织及正常对照组织中肿瘤排斥抗原1(tumor rejection antigen 1,TRA1)mRNA的表达及关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应的方法检测34例肝癌患者肝癌组织、癌旁肝硬化组织、非肝癌的肝硬化患者活检组织、肝血管瘤及肝内胆管结石等对照组织中TRA1 mRNA的表达,用捷达801分析软件对结果进行相对定量分析。结果肝癌组织、肝硬化组织、对照组织TRA1 mRNA表达率分别为95.00%、84.21%、50.00%,肝癌组与对照组间表达率的比较,差异有统计学意义(P0.05),肝硬化组织、对照组织表达率之间差异无明显统计学意义(P0.05);肝癌组织、肝硬化组织、对照组织TRA1 mRNA表达量分别为1.67±0.96、1.49±0.53、0.57±0.27;扩增产物表现出表达量的不同,呈现渐变趋势,肝癌组织、肝硬化组织与对照组之间差异有统计学意义(P0.05),肝癌组织与肝硬化组织比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 TRA1参与了肝硬化、肝癌的发生、发展,TRA1可能是肝硬化和肝癌潜在诊断标志物和治疗靶点。     

HBx基因与乙型肝炎病毒相关性肝癌的关系

正肝细胞癌(HCC)患者大多伴有乙型肝炎病毒(HBV)感染,且基本都经历了"乙型肝炎-肝硬化-HCC"的发展三部曲过程。研究显示,通过提高对HCC的监视和新治疗方案的发展,HCC患者3年、5年、10年累积生存率分别是62.1%,44.3%和20.5%[1]。HBV感染是引起HCC发生发展的重要生物因素。由HBV x基因(HBx)编码的乙肝病毒X蛋白(HBX)是一种多功能蛋白,与HCC的发生发展关系密切。研究HBx基因作用靶点和作用机制,对进一     

结肠癌组织中Beclin1、p62的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨结肠癌患者组织中Beclin1、p62的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法选取2013年1月至2015年12月中山大学附属第五医院病理科保存的78例手术切除结肠癌组织标本,并以癌旁正常黏膜组织(距离病灶组织>5 cm)标本作为对照,采用免疫组织化学法检测两组组织标本中Beclin1、p62的表达水平,分析其与临床病理特征的关系。结果结肠癌组织中Beclin1阳性表达率低于癌旁正常黏膜组织,p62阳性表达率高于癌旁正常黏膜组织(P<0.05)。肿瘤直径≥5 cm、低分化、Ⅲ+Ⅳ期、肠壁浸润深度T3~T4、有远处淋巴结转移结肠癌组织中Beclin1阳性表达率更低,p62阳性表达率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman秩相关分析显示结肠癌组织中Beclin1与p62呈负相关关系(r=-0.571,P=0.012)。结论 Beclin1在结肠癌组织中呈低表达水平,p62呈高表达水平,可能参与了结肠癌的发生、发展过程,联合检测可作为早期辅助诊断结肠癌及评估预后的重要指标。     

KAI 1基因在肝癌组织中表达的研究

肝癌是常见的恶性肿瘤之一，早期发生血行转移是其主要特点．ＫＡＩ１基因是１９９５年报道的抑制肿瘤转移的基因，位于人的第１１条染色体的ｐ１１２～１３区域，其ｃＤＮＡ长２４ｋｂ．ＫＡＩ１基因在前列腺癌组织的表达下降，已证实其具有抑制人前列腺癌转移的作用...     

肝癌组织中Glut1与HIF-1α表达的关系及临床意义

目的探讨肝细胞癌组织中葡萄糖转运蛋白1(Glut1)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达情况及其临床意义,并分析两者的相关性。方法用免疫组织化学Envision法检测45例肝细胞癌、11例正常肝组织中的Glut1和HIF-1α表达情况。结果Glut1和HIF-1α在肝癌组织中的阳性率明显高于正常肝组织(P<0.05)。在肝癌组织中,Glut1和HIF-1α表达均与肿瘤大小、临床分期、有无淋巴结转移、有无门静脉癌栓有关(P<0.05)。肝癌组织中Glut1与HIF-1α表达呈正相关(r=0.583,P<0.01)。结论Glut1和HIF-1α异常表达与肝癌的发生、发展有一定关系。HIF-1α可能通过上调Glut1表达促进肝细胞癌发生。     

乙型肝炎病毒HBx蛋白及其下游因子在肝癌细胞中的表达

乙型肝炎病毒HBx蛋白通过多条信号通路参与DNA修复和基因激活,并可调节细胞增殖、凋亡及诱导细胞迁移等,在HBV相关肝细胞癌(HCC)发生过程中发挥重要作用[1,2].核因子κ B(NF-κB)作为一个重要的转录因子,参与细胞调节的多个阶段和抗凋亡基因表达[3].我们回顾分析了HBx蛋白、NF-κB和凋亡增殖相关因子在HBV相关HCC中的作用.     

Beclin 1和PTEN蛋白在胃癌中的表达及预后价值

目的 探讨Beclin 1和PTEN蛋白在胃癌发生过程中的意义及其对预后的影响.方法 应用组织芯片和免疫组织化学法检测199例胃癌及相应癌旁正常组织中Beclin 1和PTEN蛋白的表达,分析其与胃癌的关系;用Western印迹方法检测15例新鲜胃癌及相应癌旁组织中Beclin1和PTEN蛋白的表达率.所有标本均来自上海长征医院.结果 免疫组织化学法检测提示癌组织中Beelin 1和PTEN蛋白阳性表达率分别为47.2％(94/199)和55.8％(111/199),均低于相应癌旁组织的表达率[94.5％(188/199)和92.5％(184/199),P＜0.01].胃癌组织中Beelin 1和PTEN蛋白的低表达均与性别、分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移以及疾病分期有关(P＜0.05).胃癌组织中Beclin 1和PTEN的表达呈正相关(r=0.680,P＜0.01).生存分析表明Beclin 1和PTEN均是判断胃癌患者预后的独立因素.Beclin 1阳性患者的5年生存率为67.0％(63/94),阴性者为33.3％ (35/105);PTEN阳性患者的5年生存率为71.2％ (79/111),阴性者为21.6％(19/88)(P值均＜0.01).Western印迹方法检测结果提示胃癌标本中Beclin 1和PTEN蛋白含量明显低于相应癌旁正常组织(P值均＜0.01).结论 Beclin 1和PTEN的异常表达可能和胃癌的发生发展相关.     

乙型肝炎病毒HBx蛋白与原发性肝癌的关系研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个世界性的健康问题.据估计,全世界目前大约有三亿五千万人感染HBV,而HBV感染与肝细胞性肝癌(HCC)的发生密切相关,尤其在HBV感染高度流行的区域如东南亚和南撒哈拉的非洲地区,HBV感染是HCC的主要病因[1].     

一种高效表达HBx的肝癌细胞模型的建立

目的构建稳定、高效表达HBx的转基因细胞模型BEL-7404／HBx。方法通过脂质体转染将亚克隆有HBVX基因的重组质粒pcDNA3．1（＋）-V5-HisB—HBx导人肝癌细胞系BEL-7404，并用G418筛选获取阳性克隆，分别用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹（Westernblot）检测不同生长时期阳性克隆中HBxmRNA和蛋白的表达情况。结果不同生长时期阳性克隆均能检测到HBxmRNA和蛋白的高效表达。结论成功构建稳定、高效表达HBx的转基因肝癌细胞模型BEL-7404／HBx。     

PGE_2,mPGES-1和HBx在肝细胞癌的表达及相关性

目的研究肝细胞癌（HCC）患者的前列腺素E2（PGE2）、微粒体型前列腺素E2合成酶-1（mPGES-1）与乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）的表达情况、相关性和临床意义。方法采用酶联免疫法检测65例HCC患者外周血和癌组织的PGE2水平,用免疫组织化学法检测癌组织及癌旁肝组织mPGES-1和HBx的表达,并分析这些指标与患者的临床病理特征的关系。结果肝癌组织PGE2含量明显高于癌旁肝组织,分别为（9.10±2.03）ng/g和（2.78±0.19）ng/g;肝癌患者外周血中PGE2含量为（128.74±14.44）pg/ml,与肝癌组织中PGE2含量呈正相关（r=0.862）;HCC组织中HBx和mPGES-1的阳性表达率分别为86.2%和78.5%,而癌旁肝组织的HBx和mPGES-1阳性表达率分别为81.5%和46.2%,其中mPGES-1蛋白在肝癌组织及癌旁肝组织的阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.05）。HBx和mPGES-1的表达升高与肝癌分化程度和肝外是否转移相关（P〈0.05）;HBx的表达与mPGES-1的表达呈正相关（r=0.389）;外周血PGE2水平和组织mPGES-1的表达呈正相关（r=0.526）。结论肝细胞癌与PGE2、HBx、mPGES-1表达相关;可以通过检测肝细胞癌患者外周血的PGE2水平来辅助评估肝癌的复发转移;HBx和mPGES-1可作为肝癌的治疗靶点进行更深入的研究。