PGE_2,mPGES-1和HBx在肝细胞癌的表达及相关性

目的研究肝细胞癌（HCC）患者的前列腺素E2（PGE2）、微粒体型前列腺素E2合成酶-1（mPGES-1）与乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）的表达情况、相关性和临床意义。方法采用酶联免疫法检测65例HCC患者外周血和癌组织的PGE2水平,用免疫组织化学法检测癌组织及癌旁肝组织mPGES-1和HBx的表达,并分析这些指标与患者的临床病理特征的关系。结果肝癌组织PGE2含量明显高于癌旁肝组织,分别为（9.10±2.03）ng/g和（2.78±0.19）ng/g;肝癌患者外周血中PGE2含量为（128.74±14.44）pg/ml,与肝癌组织中PGE2含量呈正相关（r=0.862）;HCC组织中HBx和mPGES-1的阳性表达率分别为86.2%和78.5%,而癌旁肝组织的HBx和mPGES-1阳性表达率分别为81.5%和46.2%,其中mPGES-1蛋白在肝癌组织及癌旁肝组织的阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.05）。HBx和mPGES-1的表达升高与肝癌分化程度和肝外是否转移相关（P〈0.05）;HBx的表达与mPGES-1的表达呈正相关（r=0.389）;外周血PGE2水平和组织mPGES-1的表达呈正相关（r=0.526）。结论肝细胞癌与PGE2、HBx、mPGES-1表达相关;可以通过检测肝细胞癌患者外周血的PGE2水平来辅助评估肝癌的复发转移;HBx和mPGES-1可作为肝癌的治疗靶点进行更深入的研究。     

原发性肝癌组织中CAIX蛋白的表达及其与微血管密度的关系

目的研究原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中CAIX的表达及其与微血管密度(MVD)、临床病理特征之间的关系。方法采用组织芯片和免疫组化方法检测HCC和癌旁组织中CAIX和CD34表达。结果共收集41例HCC、36例癌旁组织,其中37例HCC和27例癌旁组织有病例资料。CAIX的表达在HCC和癌旁组织间差异无统计学意义(P0.05),但HCC组织中CAIX包膜阳性表达率高于癌旁组织,而CAIX胞浆阳性表达率低于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)。HCC组织MVD明显高于癌旁组织(P0.05)。CAIX阳性的HCC和癌旁组织中MVD均高于CAIX阴性患者,但只有癌旁组织中CAIX阳性组和阴性组间MVD差异有统计学意义(P0.05)。结论 CAIX的包膜表达是HCC的特异特征;CAIX高表达HCC患者,血管再生活跃;CAIX可作为HCC治疗的潜在靶点。     

乙型肝炎病毒cccDNA与HBx蛋白在肝细胞性肝癌中表达的关系及意义

目的:探讨肝细胞性肝癌中乙型肝炎病毒(HBV)occDNA与HBx蛋白表达的关系及其意义.方法:取42例肝细胞性肝癌患者的癌和癌旁组织,采用SABC法检测组织中的HBx蛋白;采用RT-PCR法检测组织中的HBV CCCDNA水平.结果:HBx蛋白在癌及癌旁组织中的阳性例数分别为31例(73.8%)和35例(83.3%),无显著性差异;癌旁组织中cccDNA水平较癌组织中的高,但是统计学检验无显著性差异;癌组织和癌旁组织中HBx蛋白(+)者的cccDNA水平均明显高于HBx蛋白(-)者(P＜0.05).HBx蛋白表达与cccDNA水平呈正相关(r=0.778,P＜0.01).结论:HBx蛋白的表达与cccDNA水平明显相关,他们相互作用、相互影响并在肝癌的发生发展中起重要作用.     

TRA1 mRNA在肝硬化及肝癌组织中表达的研究

目的探讨肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织、肝硬化(liver cirrhosis,LC)组织及正常对照组织中肿瘤排斥抗原1(tumor rejection antigen 1,TRA1)mRNA的表达及关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应的方法检测34例肝癌患者肝癌组织、癌旁肝硬化组织、非肝癌的肝硬化患者活检组织、肝血管瘤及肝内胆管结石等对照组织中TRA1 mRNA的表达,用捷达801分析软件对结果进行相对定量分析。结果肝癌组织、肝硬化组织、对照组织TRA1 mRNA表达率分别为95.00%、84.21%、50.00%,肝癌组与对照组间表达率的比较,差异有统计学意义(P0.05),肝硬化组织、对照组织表达率之间差异无明显统计学意义(P0.05);肝癌组织、肝硬化组织、对照组织TRA1 mRNA表达量分别为1.67±0.96、1.49±0.53、0.57±0.27;扩增产物表现出表达量的不同,呈现渐变趋势,肝癌组织、肝硬化组织与对照组之间差异有统计学意义(P0.05),肝癌组织与肝硬化组织比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 TRA1参与了肝硬化、肝癌的发生、发展,TRA1可能是肝硬化和肝癌潜在诊断标志物和治疗靶点。     

NHE1 mRNA在肝癌组织的表达及意义

目的 探讨钠氢交换蛋白1（NHE1）mRNA在原发性肝细胞肝癌组织及癌旁组织的表达及意义。方法采用RT—PCR检测诊断为HCC患者34例的肝癌及癌旁组织中NHE1mRNA的表达情况。结果所有肝癌组织和癌旁组织NHE1均有表达,相对表达量分别为2．892±0．882和0．802±0．206,两者存在显著性差异（P〈0．001）。作为对照的21例肝组织NHE1的相对表达量为0．872±0．186。肝癌组织与对照肝组织比较存在显著性差异（P〈0．001）;癌旁组织与对照肝组织比较差异无统计学意义（P〉0．10）。将从同一患者取材的肝癌组织和癌旁组织检测到的NHE1mRNA的表达量进行配对t检验,两者间存在显著性差异（P〈0．001）。结论NHE1mRNA在肝癌组织的表达增高,可能在肝癌的发生中起一定的作用。     

HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的探讨HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin在肝细胞肝癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测72例HBsAg阳性的肝细胞肝癌组织及癌旁组织中HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin的表达,并与临床病理资料做对照分析。结果HCC组织中HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin的阳性表达率分别为84.7%、80.6%、52.8%和45.8%,而癌旁组织的阳性表达率分别为81.9%、51.4%、70.8%和27.8%。除HBx外,后三种蛋白在肝癌组织及癌旁组织的表达差异均有显著性（P〈0.05）。HBx、Twist和N-cadherin的表达升高及E-cadherin表达下降分别与有无门脉癌栓和肝外是否转移相关（P〈0.05）;HBx的表达分别与Twist和N-cadherin的表达呈正相关（P〈0.05）;HBx、Twist和N-cadherin的表达则分别与E-cadherin的表达呈负相关（P〈0.05）。结论HBx、Twist和N-cadherin的高表达以及E-cadherin的低表达与肝癌的侵袭和转移有密切关系,HBx可能通过上调Twist而促进肝癌细胞的上皮—间质转化（EMT）改变。     

HBV相关肝细胞癌患者血清N-糖组图谱改变与肝组织糖基转移酶表达变化的关系

目的本研究通过对HBV相关肝细胞癌(HCC)患者血清N-聚糖检测及肝癌组织与癌旁组织中糖基转移酶基因表达水平比较分析,探索HCC患者血清N-聚糖变化的可能机制。方法收集解放军总医院2018年—2019年HBV相关HCC手术患者(34例)的肝癌和癌旁组织及正常肝组织标本,同时采集血清标本。从34例HCC患者中随机选择8例HCC患者血清标本作为HCC试验组,20例健康成年人血清标本作为对照组。应用DSA-FACE法分析HCC试验组与对照组血清N-聚糖图谱。采用荧光定量PCR法检测34例HBV相关HCC患者癌组织和癌旁组织中8种糖基转移酶基因(FUT3、FUT4、FUT6、FUT7、FUT8、Gn-TⅢ、Gn-TⅣa和Gn-TⅤ) mRNA表达水平,并应用蛋白印迹法检测相应蛋白表达水平。计量资料两组间比较采用独立样本t检验。结果与对照相比,8例HCC患者血清中N-聚糖峰9 (peak9,NA3Fb)的丰度明显升高(t=-2.514,P 0.05)。糖基转移酶FUT8、Gn-TⅣa和Gn-TⅤ基因mRNA表达水平在癌组织和癌旁组织间有差异,其中癌组织中FUT8和Gn-TⅤ基因的mRNA与蛋白表达水平显著高于癌旁组织(mRNA:1.50±0.34 vs 0.65±0.11,t=-2.354,P=0.022; 3.57±0.64 vs 1.33±0.16,t=-3.384,P=0.001)(蛋白:0.70±0.11 vs 0.083±0.017,t=9.555,P=0.001; 1.33±0.19 vs 0.60±0.15,t=5.097,P=0.007);癌组织中GnTⅣa基因的mRNA表达水平显著高于癌旁组织(mRNA:2.90±0.47 vs 1.68±0.19,t=-2.403,P=0.019),蛋白表达水平与癌旁组织无显著差异(蛋白:0.52±0.24 vs 0.24±0.11,t=1.833,P=0.141)。癌组织中这些糖基转移酶表达改变与血清中N-聚糖丰度变化一致。结论 HBV相关HCC患者血清中一些N-聚糖水平变化可能与肝癌组织中糖基转移酶基因GnT-V、GnT-IVa和FUT8表达上调密切相关。     

MicroRNA-34a、Notch1在肝细胞肝癌组织中的表达及临床意义

目的:观察microRNA-34a、Notch1在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织的表达,探讨其与HCC发生、发展、临床病理特征的关系及可能的临床意义.方法:在132例HCC组织及癌旁组织、49例正常肝脏组织中应用实时荧光定量PCR法检测microRNA-34a的表达和免疫组织化学染色检测Notch 1表达.结果:HCC组织中microRNA-34a表达水平明显低于癌旁组织(2.57±0.71,P=0.003)及正常肝组织(8.65±0.21,P<0.001),在转移性癌组织中microRNA-34a表达水平明显低于非转移性癌组织(1.34±0.13,P=0.014),差异均有统计学意义.Notch1的免疫组织化学染色结果:HCC组织中Notch1表达水平明显高于癌旁组织(3.12±0.67,P=0.001)及正常肝组织(4.65±0.14,P<0.001),转移性癌组织高于非转移性癌组织(2.14±0.37,P=0.008),差异有统计学意义.MicroRNA-34a与Notch1在HCC及癌旁组织中均成负相关,相关系数分别为(r=-0.259,P=0.003)、(r=-0.274,P=0.002),两者在HCC组织中的表达与患者年龄、性别、肝功能、肿瘤部位、是否合并肝硬变、是否伴随肝炎病毒感染及甲胎蛋白(α-fetoprotein,αFP或AFP)含量无相关性(P>0.05),而与肿瘤恶性程度、肿瘤个数、肿瘤体积、淋巴结转移、浸润深度、TNM分期密切相关(P<0.05).Kaplan-Meier分析显示:microRNA-34a低表达、Notch1高表达组患者术后3年生存率(11.3%),明显低于microRNA-34a高表达、Notch1低表达组(34.7%),差异具有统计学意义(χ2=38.163,P=0.011).结论:MicroRNA-34a在HCC组织中较癌旁和正常肝脏组织明显减低,其通过逆向调节靶蛋白Notch1参与肿瘤肿瘤恶性行为;检测microRNA-34a及Notch1在HCC组织中的表达情况,对HCC的临床诊断、治疗及预后判断有潜在的重要意义.     

microRNA-222在肝细胞癌组织中的表达及意义

目的检测microRNA-222(miRNA-222)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达,并探讨其临床意义。方法收集2012年1月-2014年12月于大连市中心医院、大连医科大学附属第一医院手术切除的HCC组织103例,采用实时定量PCR方法检测HCC、近癌旁肝硬化组织及远癌旁肝组织中miRNA-222的表达水平,分析miRNA-222表达与HCC临床病理特征之间的关系。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Dunnett's T3法;两组间比较采用t检验。结果 miRNA-222在HCC、近癌旁肝硬化组织及远癌旁肝组织中的表达差异有统计学意义(F=27.167,P0.001),其在HCC组织中的相对表达量(4.543±2.029)明显高于在近癌旁肝硬化组织(3.072±0.844)及远癌旁肝组织(1.559±0.695)中的相对表达量(P值均0.01);近癌旁肝硬化组织中miRNA-222的相对表达量显著高于远癌旁肝组织(P0.01)。miRNA-222的表达与HCC的大小、分化程度、门静脉瘤栓、侵袭转移均有关联(t值分别为7.256、9.900、2.345、4.225,P值均0.05);而与性别、年龄、合并病毒性肝炎及AFP升高无关(P值均0.05)。结论 miRNA-222在HCC组织中异常高表达,检测miRNA-222有助于HCC临床进展及预后的判断。     

转化生长因子β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体在肝细胞癌中的表达

运用免疫组化方法对 36例HCC和 4 2例癌旁肝组织的TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体表达情况进行研究。TGFβ1在 36例肝癌组织和 4 2例癌旁肝组织的阳性率分别为 6 9 4 %、81% ,两者差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,半定量分析TGFβ1在肝癌组织表达阳性面积百分比为 (17 2 3± 11 78) % ,癌旁肝组织为 (38 4 7± 15 34) % ,差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。TGFβRⅠ在HCC、癌旁肝组织的阳性率分别为 4 1 7%、73 8% ,TGFβRⅡ在HCC、癌旁肝组织阳性率分别为 4 7 2 %、85 7% ,差异均有非常显著性意义 (P <0 0 1)。肝癌细胞和癌旁肝细胞中均高度表达TGFβ1,两者阳性率无差异 ,但阳性面积百分比后者显著高于前者 ,提示TGFβ1表达降低可能与肝细胞的恶性转化和生长失控有关。TGFβ1过度表达而不能抑制癌细胞的恶性增殖 ,可能与肝癌细胞中TGFβRⅠ和TGFβRⅡ表达降低有关     

HCC病灶EphB4表达水平与超声造影灌注参数的相关性

背景 原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)作为一种富血供肿瘤,其血流灌注变化贯穿于肿瘤的整个病理学过程.超声造影(contrast-enhanced ultrasound,CEUS)通过分析肿瘤组织的血流灌注变化,能客观反映其血管生成状态,继而间接反映其病理生物学特征,有着重要临床意义.目的 探讨超声造影灌注参数与原发性肝细胞癌酪氨酸蛋白激酶受体B4(ephrin type-B receptor 4, EphB4)表达水平的相关性.方法 选取在我院行手术切除治疗的52例HCC患者作为研究对象.所有患者术前1周内行CEUS检查,测定肝癌组织以及癌旁组织的血流灌注参数:峰值强度(maximumintensity,IMAX)、达峰时间(timetopeak,TTP)、流出时间(washouttime, WT).术后将肝癌组织以及癌旁组织标本送病理检测,测定各组织EphB4表达水平及微血管密度(microvessel density, MVD).结果 肝癌组织IMAX明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05);肝癌组织TTP、WT明显短于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05);肝癌组织EphB4表达水平及MVD明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05);肝癌组织EphB4表达水平与IMAX呈正相关(r=0.862, P 0.05),与TTP、WT呈负相关(r=-0.765, r=-0.781,均P 0.05).结论 CEUS能定量评估HCC微循环血流状态,其灌注参数与EphB4表达水平有一定相关性,可为临床无创性评估EphB 4表达水平提供参考.     

CD90在肝细胞肝癌组织中的表达及其与病理相关性研究

目的探讨CD90在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达情况及其与临床病理参数的相关性。方法选择2015年10月至2016年4月期间,于我院行肝癌切除术治疗的HCC患者72例,采集患者癌旁组织和HCC各72份,分别作为癌旁组和HCC组,72例肝外伤患者的正常肝脏组织作为对照组。所有标本的CD90均采用免疫组化法进行检测,分析CD90的表达情况以及与HCC临床病理参数的关系。结果对照组、癌旁组以及HCC组的CD90阳性表达率分别为0%、47.22%、77.78%,3组两两比较差异均有统计学意义(均P0.05)。CD90的表达情况与HCC患者的性别、肿瘤包膜是否完整、病理分级、是否合并门静脉瘤栓以及TNM分期相关,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论癌旁组织和HCC组织可表达CD90,而正常肝组织不表达,在HCC组织中表达最高;对于HCC患者预后的判断可借助癌组织中是否表达CD90,从而为患者的诊疗提供临床参考意义。     

LINC00685和miR-139在肝癌组织中的表达及意义探讨

[目的]探讨LINC00685在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与患者预后的关系,并进一步研究LINC00685与微小RNA-139(miR-139)之间的相关性。[方法]购得包含66例HCC组织和21例癌旁组织的cDNA芯片,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测HCC组织中LINC00685和miR-139的表达,并分析其与HCC患者临床病理特征及预后之间的关系;分析LINC00685表达与miR-139之间的相关性。[结果]LINC00685在HCC组织中的相对表达水平(0.46±0.18)明显高于癌旁组织(0.09±0.05),差异有统计学意义(t=14.97,P0.05),HCC组织中LINC00685的表达与T分级、TNM分期及复发情况存在相关性(χ~2=13.579、10.421、17.515,P0.05),在肝癌细胞系中敲减LINC00685表达,肝癌细胞增殖、侵袭及迁移能力明显低于对照组(P0.05)。HCC组织中LINC00685与miR-139的表达呈负相关(r=—0.548,P0.05),在TNMⅠ～Ⅳ期(66例)、TNMⅠ期(43例)的HCC患者中,LINC00685高表达组患者的总体生存率均低于LINC00685低表达组患者,差异有统计学意义(χ~2=22.43,25.22,P0.05)。[结论]LINC00685的表达可能参与HCC的发生、发展,或将成为HCC临床诊断、治疗及预后评价的新指标。     

乙型肝炎病毒相关肝癌发生过程中生长抑素受体与环氧合酶-2表达规律研究

目的 探讨乙型肝炎病毒相关原发性肝细胞癌(HCC)患者、肝癌及癌旁组织中生长抑素受体(SSTR)与环氧合酶-2(COX-2)表达规律,为生长抑素类似物(SSTA)与选择性COX-2抑制剂的使用提供依据.方法 逆转录-聚合酶链反应及免疫绀化法检测40例HCC患者肝癌、癌旁及硬化组织中SSTR 1～5亚型mRNA及蛋白表达;Western印迹法检测3种组织中COX-2蛋白表达.结果 肝癌、癌旁及硬化组织中SSTR 1～5 mRNA表达阳性率分别为62.5%～87.5%、90.0%～97.5%和60.0%～92.5%,SSTR 1～5蛋白表达量(吸光度值)分别为5.93～10.13、23.57～32.56和1.93～5.15;COX-2蛋白表达量分别为0.138±0.014、0.199士0.032和0.256±0.038.从硬化组织到癌旁组织,SSTR1～5与COX-2表达量呈直线负相关(P＜0.05);从癌旁组织到肝癌组织,SSTR 1～5与COX-2表达量呈直线正相关(P＜0.05).结论 癌前病变期及HCC早期可能是接受SSTA及COX-2抑制剂协同治疗的最佳时机.     

肝素结合表皮生长因子及其受体在肝细胞癌中的表达及意义

用免疫组化SP法检测肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)及其受体(EGFR)在46例肝细胞癌(HCC)组织、30例癌旁组织和10例正常肝组织中的表达.结果 HB-ECF在HCC组织、癌旁及正常肝组织中的平均积分光密度分别为77.77±8.45、66.95±4.53和60.86±6.02,HB-EGF在HCC中的表达与癌旁和正常肝组织比较均具有统计学差异(P均<0.05).EGFR在正常肝组织、癌旁肝组织和HCC中的平均积分光密度分别为78.83±8.13、75.77±7.14和66.83±5.09,HCC组织和癌旁组织ECFR的表达与正常肝组织相比具有有统计学差异(P均<0.05).HB-EGF与EGFR的表达呈正相关(r=0.861,P<0.01).认为HB-EGF可能通过EGFR在HCC发生、发展过程中发挥重要作用.     

Snail蛋白和细胞外基质蛋白1在原发性肝癌中的表达及与其临床特征和预后的相关性

目的探讨转录因子(Snail)蛋白和细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)在原发性肝癌(HCC)中的表达及与其临床特征和预后的相关性。方法选取2012年1月至2013年3月我院收治的71例HCC患者作为研究对象,患者均进行了根治性切除术,收集71例患者各项临床资料及随访资料,比较癌组织与癌旁组织中Snail、ECM1蛋白的表达情况及5年生存率,采用Logistic多因素回归分析影响HCC患者预后死亡的危险因素。结果 (1)癌组织Snail蛋白阳性表达率为66.19%,明显高于癌旁组织36.61%(P0.05);ECM1在癌组织阳性表达率为78.87%,明显高于癌旁组织16.90%(P0.05);(2)Snail蛋白在病理分期、微血管侵犯、肝硬化中其表达情况存在明显差异(P0.05);ECM1在病理分期、微血管侵犯中其表达情况存在明显差异(P0.05);(3)Snail蛋白表达阳性、表达阴性者5年总生存率分别为21.27%(10/47)、37.50%(9/24);ECM1表达阳性、表达阴性者5年总生存率分别为19.64%(11/56)、33.33%(5/15),不同Snail蛋白、ECM1表达水平HCC患者5年总生存率比较差异具有统计学意义(P0.001);(4)经非条件多因素Logistic回归模型结果显示病理分期(Ⅲ期)、肿瘤直径(5 cm)、微血管侵犯(有)、 Snail蛋白(阳性)、ECM1(阳性)均为影响HCC患者预后的独立危险因素(P0.001)。结论 Snail蛋白和ECM1在HCC中表达阳性率高于癌旁组织,Snail蛋白和ECM1表达阳性者预后较差。     

DC-SIGN在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨树突细胞特异性细胞间黏附分子3结合的非整合素(DC-SIGN)在原发性肝癌组织中的表达及意义。方法选择原发性肝癌患者手术切除的肝癌组织标本30例及对应的距离肝癌组织2 cm以上的癌旁肝组织标本30例。采用免疫组化法检测肝癌组织和癌旁组织DC-SIGN蛋白表达,采用RT-PCR检测肝癌组织和癌旁组织DC-SIGN mRNA表达。结果肝癌组织DC-SIGN光密度值高于明显癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)。肝癌组织DC-SIGN mRNA相对表达量明显高于癌旁组织(P0.05)。肝癌组织DC-SIGN蛋白表达与肝癌包膜、TNM分期、血清甲胎蛋白(AFP)水平有关(P0.05),与肝癌患者年龄、性别、组织分化、肿瘤大小、肝外转移、静脉侵犯无关(P0.05)。肝癌组织DC-SIGN mRNA水平与肝癌包膜、肝癌TNM分期、血清甲胎蛋白水平有关(P0.05),与肝癌患者的年龄、性别、组织分化、肿瘤大小、静脉侵犯无关(P0.05)。结论原发性肝癌组织中DCSIGN表达量升高,DC-SIGN表达量和肝癌的包膜是否完整及肝癌TNM分期有关。     

L02细胞乙型肝炎病毒X蛋白和SOCS-1基因水平研究*

目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)影响细胞因子信号传导抑制因子-1(SOCS-1)基因水平的可能机制。方法 收集22例乙型肝炎相关肝细胞癌(HCC)手术后癌组织和癌旁肝组织,采用RT-PCR法检测组织HBx、DNMT3A、DNMT3B和SOCS-1 mRNA水平。通过脂质体法构建表达HBx的L02细胞和空质粒L02细胞,采用CCK8法检测5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-c)对L02细胞存活率的影响,采用RT-PCR法和Western blot法分别检测细胞HBx、DNA甲基转移酶(DNMT)3A、DNMT3B和SOCS-1 mRNA水平及其蛋白表达。结果 肝癌组织HBx和DNMT3A mRNA水平分别为(65.2±3.5)和(77.2 ± 3.8),显著高于癌旁肝组织【分别为(22.5±4.0)和(42.1± 2.9),P<0. 05】,而SOCS-1 mRNA水平为(33.1±3.0),显著低于癌旁肝组织【(75.6 ±2.6),P<0. 05】;与对照细胞比,表达HBx的L02细胞活力随5-Aza-c作用浓度增高而下降(P<0. 05);过表达HBx的L02细胞DNMT3A mRNA水平及其蛋白表达量显著高于空载质粒组(P<0.05),而SOCS-1 mRNA水平及其蛋白表达量显著低于空载质粒组(P<0. 05);在5-Aza-c干预表达HBx的L02细胞,DNMT3A mRNA水平及其蛋白表达量显著低于对照组(P<0. 05),而SOCS-1 mRNA水平及其蛋白表达量显著高于对照(P<0. 05)。结论 HBx通过上调DNMT3A表达使SOCS-1基因表达下调,表明HBx可能通过调控DNMT3A影响抑癌基因SOCS-1表达从而促进肝癌的发生。     

Piwil2基因在肝癌组织中mRNA及蛋白的表达

目的:检测肝癌组织中Piwil2基因mRNA和蛋白的表达,进而探讨Piwil2基因在临床诊断中的意义.方法:采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot印迹技术,检测了70例肝癌及其对应癌旁组织中PiWil2基因mRNA及其蛋白的表达并结合临床资料进行分析.结果:PiWil2 mRNA在肝癌中的表达量相对值高于癌旁的肝脏组织的表达量(0.91±0.04vs0.32±0.04,P<0.05).Piwil2基因mRNA的表达与患者的肝内转移、分化程度及癌栓等病理因素方面的差异有统计学意义(P<0.05).蛋白在肝癌中的表达均高于对应的癌旁组织.Piwil2的蛋白质表达与患者的肝内转移及癌栓等病理因素方面的差异有统计学意义(P<0.05).Piwil2基因mRNA的表达与Piwil2的蛋白质的表达有相关性(P<0.05).结论:Piwil2有可能成为肝癌的检测及治疗的一种分子标志物.     

Caspase-9和Survivin在肝癌组织中的表达及意义

目的探讨Caspase-9和Survivin在肝细胞癌(HCC)患者肝癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测92例肝癌患者肝癌组织及其对应癌旁正常肝组织中Caspase-9和Survivin的表达,并分析其表达与HCC临床恶性生物学行为的相关性。组间比较采用卡方检验,相关性分析采用Spearman等级相关法。结果 Caspase-9在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织,而Survivin在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织,差异均具有统计学意义(χ2=6.48、7.05,P0.05)。在TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、门静脉癌栓、淋巴结转移的肝癌组织中Survivin的阳性表达率明显增高(χ2=5.07、6.18、8.29,P0.05),而在其他分组中比较差异无统计学意义;在病理分级Ⅲ~Ⅳ级的肝癌组织中Caspase-9的阳性表达率明显降低(χ2=7.63,P0.05),而在其他分组中比较差异无统计学意义。结论 Caspase-9低表达和Survivin异常高表达均参与肝癌的发生过程,Caspase-9低表达可能与肝癌细胞恶性分化密切相关,而Survivin高表达与肝癌的浸润或远处转移等恶性发展密切相关。